Germ cells during gonadal sex differentiation in the teleost

We reported previously that two isoforms of vasa mRNA and protein are present in tilapia (Kobayashi et al. 2002). One (vas-s) lacks a part of the N-terminal region found in the other isoform (vas). Both isoforms are expressed in oocytes through the embryonic stages when PGCs localize in the lateral plate mesoderm. After PGCs localized in the gonadal anlagen, vas-s expression increased and vas expression became undetectable. Expression of both isoforms was observed again after morphological gonadal sex differentiation, irrespective of genotypic sexes. These changes are in accordance with sex differences in number of gonial germ cells during this period, suggesting that molecular sexual dimorphism occurs in germ cells between both sexes during this period.     

草鱼淋巴器官中的肥大细胞

通过组织化学与形态学研究首次在草鱼的胸腺和头肾等淋巴器官中证实了肥大细胞的存在。草鱼肥大细胞的染色性质在某些方面似乎类似于哺乳动物的粘膜肥大细胞。Carnoy氏液及阿尔新蓝分别是优良的固定剂及染料，而中性缓冲甲醛却完全阻断草鱼肥大细胞的着染。值得注意的是一些曾被用于鉴定硬骨鱼肥大细胞(或嗜酸性颗粒细胞)的组织化学技术在本研究中未能检出草鱼肥大细胞。电镜下证实，草鱼肥大细胞中含有大量特征性的胞浆颗粒，其中充满无定形颗粒状基质，基质电子密度有的较高，有的较低，但未见特殊的亚微结构。     

犬牙缰虾虎鱼外周血细胞的显微结构

采用Wright氏染色,对犬牙缰虾虎鱼外周血液进行观察,并进行各细胞测定,可鉴别出红细胞、血栓细胞、淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜碱性粒细胞,以及幼稚、正在分裂、分解和解体状态的红细胞,未发现嗜酸性粒细胞。红细胞数量多,椭圆形,具椭圆核;血栓细胞体积最小,成3~5个聚集分布,大淋巴细胞体积最大。淋巴细胞可分为大、中、小淋巴细胞。在数量上,血栓细胞最多,淋巴细胞次之,单核细胞,嗜碱性粒细胞和嗜中性粒细胞则较少。     

鱼类树突状细胞研究进展

树突状细胞(DCs)是目前已知的体内功能最强的抗原递呈细胞,是唯一能够激活初始T淋巴细胞反应的细胞,在先天性免疫、适应性免疫以及维持自身免疫耐受方面具有重要的作用,因此一直是免疫学研究的重要领域。本文简要综述了DCs的类型及其在动物体内的功能、各类DCs的细胞标记。总结了鱼类DCs的分离、纯化方法和形态学观察方法;现有研究表明,鱼类DCs具有吞噬细菌、刺激T细胞增殖、诱导CD4+T细胞的活化、表达DCs的标记基因、被Toll样受体的配体激活、迁移能力、引起混合淋巴细胞反应等生物学功能;不同鱼类DCs的分子标记并不完全一样;鱼类的头肾、肾、鳃、皮肤、胸腺、脾、肠等均有DCs的分布。目前,对鱼类DCs的研究虽然取得了一定进展,但仍有许多重要问题需要解决:①鱼类DCs目前缺乏明确的细胞标记,加强这方面的研究有助于提高鱼类DCs的分离、体内分布与功能的研究水平;②加强和完善鱼类DCs的分离、培养技术的研究,掌握各种鱼类DCs的分离培养方法;③加强鱼类DCs在抗原递呈中的功能研究,对深入分析鱼类免疫机理,合理设计和应用疫苗,具有重要的理论指导意义。     

文蛤消化道粘液细胞研究

运用组织学和组织化学染色方法,在光镜水平上研究了文蛤消化道粘液细胞的类型,分布与组化特性。H.E染色法显示,粘液细胞主要存在于消化道上皮组织中,仅唇瓣结缔组织中发现有少量的粘液细胞,ABPAS染色法显示;文蛤消化道粘液细胞主要分为4种类型：Ⅰ型,呈红色,AB阴性,PAS阳性,含有中性粘液物质,Ⅱ型：呈蓝色,AB阳性,PAS阴性,含有酸性粘液物质;Ⅲ型：AB和PAS均呈阳性,但PAS阳性较强,两种粘液物质均含有,但中性粘液物质含量多;Ⅳ型：AB和PAS均呈阳性,但AB阳性较强,两种粘液物质均含有,但酸性粘液物质含量多,不同部位粘液细胞的类型,数量不同,唇瓣粘液细胞的数量较少,食道含有大量的粘液细胞,胃,肠,直肠中粘液细胞的数量以胃中最少,肠次之,直肠最多,AB-PAS（AB pH1.0）染色法显示：粘液细胞所含酸性粘液物质包括硫酸性粘液物质和涎酸性粘液物质,且唇瓣和直肠中粘液细胞所含的涎液酸性粘液物质比硫酸性粘液物质多,酶组化研究结果显示,肠粘液细胞具有弱酸性磷酸酶,弱碱性磷酸酶活性。     

日本沼虾中肠腺细胞的超微结构研究

应用电镜技术研究了日本沼虾中肠腺细胞的类型及超微结构。结果表明：日本沼虾中肠腺上皮细胞大多呈柱状，顶端具有微绒毛，依结构和功能不同可分为Ｒ细胞、Ｆ细胞、Ｂ细胞和Ｅ细胞４种类型。Ｒ细胞具有吸收、贮存营养物质的功能，细胞内含有脂滴、糖原和吞噬咆，内质网、线粒体等细胞器数量少；Ｆ细胞内蛋白酶原合成活动旺盛，粗面内质网极为发达，在数量上比Ｒ细胞多，几乎充满整个细胞；Ｂ细胞微绒毛较短，以胞饮方式吸收营养，在     

日本黄姑鱼血细胞发生的观察

用Wright’sGiemsa混合染料对日本黄姑鱼外周血涂片以及头肾、肾脏、肝脏和脾脏组织印片染色,观察其中各种血细胞的大小、形态特征,研究了日本黄姑鱼血细胞的发生发育模式。观察发现,在外周血涂片中,除红细胞外,还观察到多种白细胞,主要有单核细胞、嗜中性细胞、嗜酸性细胞和淋巴细胞,而嗜碱性细胞没有被发现。红细胞、淋巴细胞和单核细胞的发生主要在肾脏和头肾,其次是脾脏;粒细胞的发生主要在头肾和脾脏。红细胞的发育经历3个阶段:原红细胞、幼红细胞和成熟红细胞阶段。红细胞在成熟过程中,细胞核的体积逐渐变小,细胞与细胞核的体积比由大变小然后再变大。成熟红细胞除了由幼稚细胞发育而来以外,还可以进行一分为二的方式进行分裂;粒细胞的发育经历5个阶段:原粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞和成熟粒细胞;淋巴细胞经历了3个阶段:原淋巴细胞、幼淋巴细胞和成熟淋巴细胞;单核细胞的发育和淋巴细胞相似,也经历了3个阶段:原单核细胞、幼单核细胞和成熟单核细胞。     

高效氯氰菊酯原粉对鲤血细胞的影响

对鲤肌肉注射不同质量分数的高效氯氰菊酯原粉,研究该农药对鲤血细胞的影响。结果显示:随农药质量分数增大、时间延长,鲤血细胞异形率增大。低质量分数(0.6、6μg/kg)中毒鲤成熟红细胞大小不一,核稍有畸形,淋巴细胞、单核细胞增多,核浆界限不清,有空泡,伴有免疫母细胞增多;而高质量分数(60、600μg/kg)中毒鲤血细胞中除伴有低质量分数中毒症状外,还出现了染色质模糊,部分白细胞核浆界限不清,甚至溶解,退化更明显。红细胞渗透脆性亦随攻毒质量分数增大、作用时间延长而增大。     

几种鱼红细胞脆性的研究

在20℃下,对健康的草鱼、鳙鱼、乌鳢、鲫鱼、鲤鱼、梭鱼、鲢鱼、牙鲆、大菱鲆和感染了嗜水气单孢菌的鲫鱼、鲤鱼、乌鳢的红细胞脆性进行了测定。结果发现:海水鱼的红细胞的脆性明显高于淡水鱼,感染了嗜水气单孢菌的鲫鱼、鲤鱼、乌鳢的红细胞脆性比健康状况下升高,且感染8 d的鱼的红细胞脆性比感染4 d鱼的红细胞脆性升高的幅度大。     

中华绒螯蟹脑神经分泌细胞的研究

经光学显微镜和透射电镜观察,中华绒螯蟹的脑具有3种类型的神经分泌细胞。Ⅰ型细胞最大,胞质中存在许多大小不同的空泡,分泌颗粒数量很少;Ⅱ型细胞中等大小,细胞器发达,分泌颗粒数量较多,形态多样;Ⅲ型细胞最小,分泌颗粒数量最多,细胞器很少。     

几种鱼类血细胞的形态观察

采用尾椎采血制作血涂片,并用姬姆萨和瑞氏两种染液染色,最后对血细胞形态进行观察比较的方法,研究了草鱼(C tenopharyngodon idellus)、鲤鱼(Cyprinus carpio)、乌鳢(Channa argus)梭鱼(Liza haemato-cheila)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)共5种鱼的血细胞形态。结果表明:在红细胞大小比较上,草鱼>鲤鱼>梭鱼>乌鳢>牙鲆;在红细胞形态比较上,牙鲆红细胞最为狭长,梭鱼最圆,乌鳢的红细胞核最为细长;在白细胞形态大小比较上,生活在不同水域的各鱼的白细胞形态有所不同,牙鲆的淋巴细胞及单核细胞最小,草鱼最大,鲤鱼的血栓细胞最小;在红白细胞比上,草鱼>鲤鱼>乌鳢。     

供体细胞的不同处理及重组胚化学激活对体细胞克隆胚胎发育的影响综述

哺乳动物体细胞克隆经过几年的发展,已取得了很大进展。已有多种细胞被采用并得到了克隆后代。但动物克隆效率仍然很低,供体细胞的选择和重组胚激活是动物克隆中的重要步骤。供体细胞的细胞周期、细胞类型、冷冻处理和化学激活等方面都可能影响动物克隆的效率。     

Identification of cells of the central nervous system using cell-specific markers

Cell markers are membrane-associated components of the cellular wall or intracellular substances which are specific for the cell types of any tissue. Markers of the major cell types of the central nervous system (CNS) essentially are the components of the cytoskeleton (microtubules, intermediate filaments), several intracytoplasmic enzymes, and specific components of myelin (myelin proteins, myelin-associated glycoproteins, lipids). In this review the fundamental characteristics of specific CNS markers (astroglia, oligodendroglia, neurons) are discussed and examples of marker application in human and veterinary medical neurosciences are presented.     

白缘(鱼央)的血液指标测定与血细胞特点

应用常规血液指标测定方法和血细胞涂片法,测定野生白缘鱼央血液指标并分析血细胞形态。结果表明:野生白缘鱼央RBC=1.18×1012/L、WBC=70.2×109/L、PLT=41.5×109/L、MCH=56.5 pg、MCHC=395.3 g/L、HGB=66.3 g/L。白缘鱼央血细胞在细胞形态上更加趋于圆球形,而且细胞和细胞核均相对其它鱼央属鱼大,红细胞分裂相较多、不规则核较多。红细胞可见5种形态(即普通红细胞、原红细胞、幼红细胞、分裂中的红细胞和有丝分裂的红细胞),白细胞可见6种形态(即单核细胞、淋巴细胞、中性分叶核粒细胞、中性杆状核粒细胞、嗜酸分叶核粒细胞和嗜酸杆状核粒细胞),而血小板只有1种形态。     

海洋贝类提取物对血管平滑肌细胞增殖的影响

采用20％胎牛血清（FBS），碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)所诱导的大鼠VSMCs增殖模型，观察了海洋贝类提取物（ESs)对血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的影响。将培养的5－8代细胞接种于96孔板，除正常组加入含0．4％FBS的M199培养液外，其他组均加入含20％FBS培养液（或含50ng/ml bFGF的0．4％FBS培养液），同时给药组分别加入含有25，50，100μl/ml浓度的ESs，孵育48h后，以细胞计数，结晶紫染色及MTT比色法VSMCc生长情况。结果表明，与模型组比较，ESs各剂量组VSMCs的增殖受到明显抑制（P＜0．05，P＜0．01）。ESs对20％FBS和bFGF所致的VSMCs增殖具有明显抑制作用，并存在剂量依赖关系。     

细胞骨架蛋白actin参与石斑鱼虹彩病毒SGIV释放

在病毒感染宿主细胞过程中,病毒利用宿主细胞骨架如微丝、微管等完成进入、运输和释放等过程。为分离鉴定石斑鱼虹彩病毒SGIV囊膜蛋白,实验应用去污剂溶解病毒囊膜,然后结合1-D-SDS-PAGE切胶分离和LC-MS/MS质谱鉴定两种方法进行检测,除了病毒编码的囊膜蛋白外,还发现7种宿主细胞来源的蛋白,包括细胞骨架微丝肌动蛋白actin等,由此推测这些宿主蛋白是与病毒纯化过程中共纯化获得。鉴于actin在病毒感染中发挥着重要的作用,进一步通过蛋白印迹、免疫电镜实验验证了actin与病毒共纯化,揭示actin是一种来源于宿主细胞并包装到病毒颗粒表面的宿主蛋白,且由于特异性作用黏附于病毒粒子表面,在分离病毒囊膜时与囊膜蛋白共纯化。此外,荧光显微镜观察发现,在病毒感染晚期,细胞变圆,细胞微丝actin蛋白和SGIV病毒共定位于细胞膜,提示actin与病毒释放相关。同时电镜观察也表明,病毒在感染细胞中释放时获得由宿主细胞质膜衍生而来的囊膜,由此推测actin可能在病毒释放时特异性包裹于SGIV病毒表面。研究表明,actin参与石斑鱼虹彩病毒SGIV的释放过程。