油桃下胚轴再生植株影响因素的研究

为了建立一个稳定的桃再生体系,以晚熟油桃秦光2号为试验材料,对影响其种胚萌发及下胚轴再生的不同激素质量浓度与组合、培养基、预培养时间、低温处理等因素进行了研究。结果表明,种皮对种胚萌发有抑制作用,在种胚培养中应剥去种皮培养;低温处理可以明显提高胚培养的萌发率,胚培养种胚以5℃低温处理70 d萌发率最高,达到93.33%,且经过7 d常温光培养所得下胚轴健壮、幼嫩,更适宜做下胚轴再生的外植体,诱导率达到34.38%,在蔗糖质量浓度为30 g/L时萌发率最高,达到75.66%,用1600 mg/L GA浸泡24 h,诱导率达到62.3%;下胚轴能够再生植株,形态学上部再生率为34.67%,下部为18.67%,二者差异显著,下胚轴再生以QL+TDZ 2.0mg/L+NAA 0.5 mg/L效果最好,再生率达到38.67%,平均再生不定芽数为2.50个,晚熟油桃秦光2号下胚轴可以直接从未产生愈伤组织的切口部位产生不定芽。     

桃胚培养及子叶再生的研究进展

以国内外桃胚培养和子叶再生研究的相关文献为基础,综述了桃胚培养和子叶再生的研究进展,分析并讨论了影响桃胚培养和子叶再生的相关因子,并总结了桃胚培养和子叶再生的最佳培养条件。     

甘草下胚轴离体再生体系的建立

以甘草下胚轴为外植体,对影响下胚轴离体再生不定芽的因素进行研究。结果表明:KT具有显著作用,与6-BAI、BA结合,可高效诱导下胚轴直接产生不定芽,优化的分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L KT 0.5 mg/L IBA 0.5 mg/L,芽苗分化率平均为41.5%。同时,进一步研究了不同基因型、预培养处理对甘草下胚轴再生的影响,结果发现:胀果甘草下胚轴离体再生频率最高,达44.7%;预培养4 d对甘草下胚轴再生不定芽具有促进作用。建立甘草下胚轴离体再生不定芽体系,为甘草基因工程品种改良及优良品种快速繁殖打下基础。     

甘蓝型黄籽油菜的再生能力研究

以甘蓝型油菜30个黄籽品系和50个黑籽品系为材料,对黄籽品系和黑籽品系的下胚轴芽再生频率以及黄籽油菜下胚轴和子叶的芽再生频率进行了比较。结果表明:黄籽和黑籽品系的下胚轴芽再生频率无明显差异。从总体上看,黄籽品系的下胚轴芽再生频率都较低,品系间差异显著,部分品系如SH 21,SH 167,SH 34表现较好。甘蓝型黄籽油菜子叶的芽再生频率(平均89.49%)极显著地高于下胚轴(平均15.95%),但其差异随品系而异,特别是品系DH33,部分处理子叶芽再生频率为100%,而下胚轴芽再生频率却为0。     

甘蓝型黄籽油菜的再生能力研究

以甘蓝型油菜30个黄籽品系和50个黑籽品系为材料,对黄籽品系和黑籽品系的下胚轴芽再生频率以及黄籽油菜下胚轴和子叶的芽再生频率进行了比较.结果表明:黄籽和黑籽品系的下胚轴芽再生频率无明显差异.从总体上看,黄籽品系的下胚轴芽再生频率都较低,品系间差异显著,部分品系如SH 21,SH 167,SH 34表现较好.甘蓝型黄籽油菜子叶的芽再生频率(平均89.49%)极显著地高于下胚轴(平均15.95%),但其差异随品系而异,特别是品系DH33,部分处理子叶芽再生频率为100%,而下胚轴芽再生频率却为0.     

农杆菌介导的几个甘蓝型油菜下胚轴转化体系研究

选择四川目前推广的中双9号等8个甘蓝型双低常规油菜品种,以5~6 d无菌苗下胚轴为外植体,MS培养基为基本培养基,设置了8组激素配比组合,探讨其对植株再生的影响,初步建立了不同油菜品种下胚轴的高效再生体系。选择其中再生频率较高的4个品种:中双9号、中双7号,中双6号,川油18号下胚轴作为农杆菌转化材料,对影响转化的相关因素进行研究,建立了4个品种下胚轴的遗传转化体系,并运用该转化体系将pta与sb401融合基因导入,成功获取了一批经PCR检测的转基因植株。     

白三叶草高频率植株再生系统的研究

通过对白三叶草子叶和下胚轴植株再生系统的研究发现 ,白三叶草胚轴生长点的再生能力最强 ,子叶和下胚轴再生能力极低 ;胚轴生长点直接再生频率在 6 6 %以上 ,以 6BA 3mg/L时再生频率最高 ,达 95 % ;再生植株的快速繁殖以 6BA 1～ 2mg/L ,NAA0 .5～ 0 .8mg/L较适宜 ;生根培养以IBA0 .1～ 0 .3mg/L ,NAA0 .1～ 0 .2mg/L较适宜     

接种方式对大白菜下胚轴离体不定芽再生及生理指标的影响

以大白菜品种‘贵龙5号’的下胚轴为材料,以3种不同方式接种,观察不定芽分化情况,并比较不同接种方式的下胚轴不定芽再生过程中可溶性蛋白质含量、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明,以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的下胚轴在接种8~10 d时不定芽开始产生,不定芽分化率达87.8%,平均每外植体再生的不定芽数为15.1个,其不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的外植体;下胚轴在不定芽分化过程中各生理指标呈现规律性的变化,可溶性蛋白质含量、POD和SOD活性在芽原基形成以前表现出上升趋势而CAT活性下降,不定芽分化后呈相反变化趋势;不同接种方式的下胚轴在不定芽发生过程中各生理指标的变化有一定差异。以上结果表明大白菜下胚轴不定芽发生过程中形态学变化和生理变化紧密相关。     

TDZ诱导的黄芩 (Scatellaria baicalensis Georgi)外植体枝再生研究(英文)

研究了中药黄芩 (ScatellariabaicalensisGeorgi)的微繁技术。TDZ[N phenyl-N’ (1,2 ,3 thidiazol 5 ylurea) ]用于组培中能有效地诱导黄芩完整实生苗、白化下胚轴段和茎段再生新枝。下胚轴段和茎段外植体的组织学研究显示其再生是通过愈伤组织形成新枝。TDZ诱导黄芩 3种组培外植体枝再生的比较表明 ,理想的再生不一定要外植体脱离母体。黄芩完整实生苗的下胚轴上形成的枝明显多于下胚轴段上形成的枝 ,表明完整实生苗中产生的代谢产物提供枝再生所需的物质。 95 %以上的再生体形成根系 ,在无菌培养和温室中可形成完整植株。本研究所采用的再生程序可以用于这种药用植物的改良和大量繁殖     

小豆胚轴及胚尖再生和转化体系优化

选用缺铁敏感小豆突变体FMY009的无菌苗下胚轴和胚尖为外植体进行再生和转化,研究了小豆最适胚轴和胚尖再生体系的不定芽伸长培养基和抗生素最适宜的延迟筛选时间。结果表明:小豆胚轴再生不定芽伸长的最佳培养基是1/2 MS B5+1mg/L ZT+0.9mg/L GA3,胚尖再生不定芽伸长的最佳培养基是1/2 MS B5+0.5mg/L GA3,小豆胚轴和胚尖转化体系的抗生素最适延迟筛选时间为7d。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。     

南方型紫花苜蓿Millennium组织培养及其再生

以南方型紫花苜蓿Millennium种子发育5~7 d无菌苗的子叶、下胚轴为外植体,对紫花苜蓿愈伤组织诱导和植株再生进行了研究。结果表明,在愈伤组织诱导中,下胚轴为最佳外植体材料,出愈率随着2,4-D质量浓度的增加呈明显的升高趋势,最佳愈伤组织诱导培养基为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达到100%。紫花苜蓿诱导最佳愈伤组织的分化培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,下胚轴愈伤组织分化率达到58%,子叶愈伤组织分化率达到40%。将苗切下转接到1/2 MS+20 g/L蔗糖质量浓度时,培养6 d即可诱导生根,诱导生根率达到100%,完成植株再生仅需60~70 d。成功地建立了南方型Millenni-um紫花苜蓿子叶和下胚轴的离体培养再生途径,并获得了再生植株。     

大白菜子叶高频再生体系的建立

以大白菜(Brassica campestrisL ssp.pekinensis)为材料,MS为基本培养基,研究了不同基因型、不同外植体类型、不同激素组合及预培养处理条件对不定芽再生的影响。结果表明:基因型、外植体类型、激素组合和预培养条件对不定芽的形成均具有十分明显的影响。3个基因型间,‘85-1’的再生频率最高,‘天津青麻叶’次之,‘北京新三号’最低;2种外植体中,带柄子叶的再生频率显著高于下胚轴;22个激素组合中,TDZ 0.7 mg/L+NAA 0.5 mg/L组合的再生频率最高(72.5%,‘85-1’带柄子叶);7个预培养处理中,0.5 mg/L 2,4-D预培养1d的效果最好,不定芽再生频率达到87.7%,且芽数多、质量好。     

甘蓝下胚轴离体培养直接分化成苗的研究

经正交试验Ｌ_（１６）（４~３）分析了ＢＡ、ＩＡＡ及营养物质ＬＨ对甘蓝下胚轴分化成苗的影响。结果表明：ＢＡ对甘蓝下胚轴分化的作用最显著，ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ，ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ和ＬＨ６００～８００ｍｇ时促进芽的分化，ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ以及ＬＨ８００ｍｇ／Ｌ时促进下胚轴长根。甘蓝叶片，下胚轴不宜诱导愈伤组织。     

新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、根的植株再生

随着植物抗逆性研究和植物转基因技术的发展,通过异源目的基因转化培育耐盐碱苜蓿品种的研究已引起人们的关注,植物受体高频再生体系的建立是异源转化高效的基础。选取新疆大叶紫花苜蓿种子萌发5～7d无菌苗的子叶、下胚轴及根为外植体,诱导愈伤培养基为MS 2,4-D0.1～3.0mg/L(8种不同水平)或MS 2,4-D2.0mg/L KT0.01～0.5mg/L(10种不同水平),诱导芽培养基为MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L,生根培养基为MS。结果表明,外植体在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.2mg/L培养基中能够产生状态较好可再分化的愈伤组织,子叶、下胚轴、根的平均出愈率分别为93.1%、100%、100%。愈伤组织在MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L培养基中培养40～80d中均可分化芽,子叶、下胚轴、根的芽平均分化率为50%、78%、50%,将2cm以上的芽转入MS培养基中诱导生根,14d后,生根的小植株炼苗移入花土中,成活率达90%以上。子叶、下胚轴、根在该体系中均能获得再生植株,根也是一种较好的植株再生材料,以根为外植体进行植株再生的研究报道还较少。     

青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶再生不定植株的研究

以青州蜜桃、冬桃成熟胚子叶为外植体 ,研究了利用子叶再生不定梢的适宜培养基。两个品种的子叶在 1 / 2MS附加BA 1 0mg/L和NAA 0 .2mg/L的培养基上获得了最高不定梢再生率。青州蜜桃和冬桃子叶的不定梢最高再生率分别是 6 6 .7%和 5 6 .2 %。不定梢在WPM +BA 2mg/L +IBA 0 .0 1mg/L +GA 0 .5mg/L培养基上增殖培养后 ,转移到 1 / 2MS +IBA 0 .5mg/L +蔗糖 2 0g/L诱导生根 ,两个品种的生根率都在 90 %以上     

激素TDZ对促进白菜下胚轴不定芽再生的效应分析

以华阳三号(HY)大白菜和苏州青(SZQ)小白菜下胚轴为外植体，MS为基本培养基，将TDZ与NAA配置不同激素浓度组合，观察TDZ对下胚轴不定芽再生的影响，并对各组合的培养效果进行了比较。结果表明，TDZ能较好地促进大白菜下胚轴不定芽再生，在MS 0．5mg／LTDZ 0．5mg／L NAA的培养条件下，HY的不定芽再生频率达到45％，且再生周期短，芽点多，再生芽正常，可以满足植物遗传转化需要。TDZ很难诱导SZQ小白菜下胚轴不定芽再生，只能诱导产生大量愈伤组织。     

罗汉果胚轴培养再生植株及其细胞学观察

以罗汉果胚轴为外植体,探讨了不同培养基对胚轴不定芽再生的影响,并进行了再生不定芽的细胞学观察.结果表明:胚轴在改良的MS+4 mg.L-16-BA+1 mg.L-1IAA的固体培养基中,不定芽分化平均每瓶高达7.6个;单芽段一步生根成苗.细胞学观察结果表明:不定芽和体细胞胚起源于胚轴形成的愈伤组织表层;不定根起源于愈伤组织内部.     

油桃子叶再生植株影响因子研究

以早熟油桃华光和曙光为材料,研究了培养基(MS,G,WPM)、细胞分裂素(BA,TDZ,ZT,KT)、生长素(NAA)、子叶发育的不同时期(花后30,40,50,60d和采收期)等因子对早熟油桃子叶再生植株的影响。结果表明,华光花后60d为最佳取材时期,其子叶在MS+TDZ2mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为75%;而曙光的最佳取样时间为采收期,其子叶在MS+BA8mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为66.7%。子叶暗培养28d后转入光下进行光暗交替培养,华光、曙光子叶再生率均达到最高。