猪瘟疫苗研究现状及展望

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病，给养猪业带来了巨大损失，猪瘟疫苗的研发对控制和消灭猪瘟都具有极其重要的意义。作者综述了猪瘟疫苗的研究现状，并作了展望，为猪瘟疫苗的研究提供参考和借鉴。     

猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立

根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针，建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示，该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来，而不与其他猪源病毒发生非特异反应，分别可检测到初始模板中41．8和81．5个拷贝的病毒RNA，与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近，两种方法对152份样品检测的符合率达96．9％～100％。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测，证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性，可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。     

猪瘟的免疫程序及防治对策

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种高度接触性和致死性传染病。一直严重的威胁着养猪业，给养猪业造成了巨大的损失。世界各国都非常重视猪瘟的防治工作，投入了大量的人力、物力和财力，并取得了很好的成绩。欧美等发达国家通过疫苗免疫、扑杀等综合防制技术措施已消灭了猪瘟。20世纪50年代，方世杰等人选育了一株适应家兔后对猪基本无毒力，但却保持良好免疫原性的弱毒疫苗株一中国猪瘟兔化弱毒疫苗株-C株。因其具有免疫力强、保护率高且持久、遗传稳定、无残余毒力等优点，是国际上公认的效果最好的猪瘟弱毒疫苗，曾为我国乃至世界许多国家猪瘟的防制起到了关键的作用。     

猪瘟标记疫苗研究进展

猪瘟(classical swine fever,CSF)是一种致病性强、传染性高的烈性疾病,由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起并严重危害养猪业。已被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染病。过去数十年,防控猪瘟的方法主要是免疫猪瘟弱毒活疫苗,但由于无法区分自然感染与疫苗免疫,研发新型、安全、高效的能将感染和免疫动物区分的标记疫苗是当前及未来猪瘟防控的目标。本文在介绍猪瘟病毒分子特征的同时,总结了已有的猪瘟疫苗以及研发中的新型猪瘟标记疫苗,给猪瘟疫苗的研发和猪瘟的防控提供借鉴。     

猪瘟病毒野毒株与疫苗株酶切检测方法的建立、优化及应用

为有效鉴别猪瘟病毒强毒株(Shimen)与弱毒疫苗株(HCLV),根据GenBank上已发表的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因高度保守区设计一对特异性引物,在其跨越区内部有Shimen株独有的限制性内切酶Bgl Ⅱ酶切位点,采取酶切RT-PCR产物的方法鉴别Shimen株和疫苗株,同时对该方法的特异性和敏感性进行检测。结果表明,应用该方法从Shimen株和疫苗株中均能扩增出一条大小为750 bp的特异性片段,疫苗株的RT-PCR产物不能被Bgl Ⅱ酶切,Shimen株的RT-PCR产物则被酶切为大小分别为520和230 bp的两条带。此方法可扩增猪瘟病毒的E2基因保守片段,对病毒RNA的最小检出量为3.96×10^-4 μg/mL。采用此方法检查了30例临床疑似猪瘟病料,结果3例感染猪瘟病毒强毒,21例为猪瘟弱毒疫苗株,其他为猪瘟阴性。     

国外猪瘟病毒实验室诊断、流行病学以及标记疫苗研究进展

常用于检测猪瘟病毒的实验室诊断方法是免疫组化和病毒分离培养.随着分子生物学的发展,先后建立了一系列检测病毒蛋白的ELISA方法以及病毒基因组的RT-PCR方法.标记疫苗是目前猪瘟疫苗发展的趋势.目前已经完成E2亚单位标记疫苗及重组活疫苗效率的测定,均能显著减少疫苗免疫猪群中猪瘟病毒的水平及垂直传播,同时通过血清学方法能区分疫苗免疫猪与自然感染猪.标记疫苗的使用对于猪瘟的控制和消灭具有十分重要的意义.     

腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2最早提供完全攻毒保护时间的研究

本实验室前期构建了腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2,其免疫效力与商品化猪瘟C株疫苗相同,并具有鉴别检测特性.为进一步确定该嵌合载体猪瘟疫苗最早提供完全攻毒保护的时间,本研究将rAdV-SFV-E2免疫健康仔猪(n=5),免疫后于不同时间点采用猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株进行攻毒,并检测其抗体应答、临床症状、病毒血症、病理学及组织病理学变化等.结果显示,rAdV-SFV-E2免疫后1周和2周,分别能对致死性CSFV强毒的攻击提供部分保护(3/5存活)和不完全保护(全部存活,但出现了短暂的发热和低水平的病毒血症);免疫后3周和4周,能够完全抵抗致死性CSFV强毒的攻击,表现为无病毒血症,无临床症状,无病理变化和组织病理学变化.该研究进一步证实rAdV-SFV-E2能够作为一种新型猪瘟标记疫苗,在猪瘟的紧急防控中能够起到一定的作用.     

非洲猪瘟疫苗研究进展

非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒感染引起的急性多器官出血性传染病,病毒感染猪的病死率可高达100%。2018年,我国首次出现非洲猪瘟疫情并很快在国内多个省市点状散发,疫情波及地区生猪大量死亡,国内生猪存栏数量急剧减少,猪肉产品供给出现严重短缺,给我国养猪业和猪肉食品供给安全造成强力冲击。防控非洲猪瘟疫情最理想的方式是疫苗免疫,但由于缺乏有效体外繁殖非洲猪瘟病毒的细胞系、灭活非洲猪瘟病毒疫苗免疫保护效果较差等因素的制约,目前仍未研制出有较高免疫保护效果的非洲猪瘟疫苗。本文对目前非洲猪瘟病毒疫苗的研究成果和存在的问题进行综述,以期为相关研究提供参考。     

猪瘟病毒基因工程疫苗研究进展

猪瘟是一种在世界范围引起世大经济损失的烈性传染病。在没有消灭猪瘟的国家，疫苗接种是控制其发生的主要手段。传统的猪瘟疫苗，组织苗、细胞苗发挥了重大作用．然而随着７０年代猪瘟流行病学发生变化，人们开始研制新型的猪瘟病毒基因工程疫苗。本文简要论述了以瘟苗病毒、伪狂犬病毒、杆状病毒作为载体的三种猪瘟病毒基因工程疫苗的研究现状，并比较了它们的优缺点。同时介绍了我们利用分子生物学技术，以基因剪和反义ＲＮＡ为手     

3种非猪瘟病毒单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响

将 2 0头 9月龄左右猪瘟、伪狂犬、猪繁殖与呼吸障碍综合征抗原、抗体阴性猪分成 6组 ,分别利用猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒 (PRV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (PRRSV)单独或混合感染。 7d后连同对照猪 4头 ,免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗 (HCL V) ,13d后连同 4头阴性对照猪一起攻击猪瘟石门强毒。整个试验期间分别每天测温 ,观察临床症状 ,每周采集扁桃体和血样做各种病毒抗原及抗体检测。结果表明 ,非猪瘟病毒感染 7d后 ,所有各组猪均从体内检测到了相应感染的病原 ,表明 3种非猪瘟病毒感染成功。在攻击猪瘟石门强毒后 2周 ,感染了非猪瘟病毒后接种 HCL V疫苗的 4个免疫组 12头猪除 1头外 ,11头全为猪瘟病毒 (HCV)抗原检测阳性 ,且多呈强阳性 ;而单一 HCL V疫苗免疫组在猪瘟强毒攻击后检测不到 HCV;所有 HCL V疫苗免疫猪均存活 ,而非免疫对照组 4头猪全部在攻毒 16 d内死亡。     

猪瘟疫苗中牛病毒性腹泻病毒2型的检测

为对上海某猪场送检的一份猪瘟疫苗进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测,本研究将猪瘟疫苗样品接种于MDBK细胞,盲传15代后仍无致细胞病变效应,但间接免疫荧光试验表明接种该疫苗后的MDBK细胞能够被单克隆抗体BZ-53(BVDV-2)识别。采用BVDV-1和BVDV-2的5’-UTR的通用检测引物和针对BVDV E2的引物,对样品RNA进行RT-PCR检测,结果显示,样品能够扩增出约288 bp的BVDV特异性片段;此外,5’-UTR和E2基因片段的测序分析结果表明分离株属于BVDV-2,并且其E2基因与牛源XJ-04株(BVDV-2)的E2基因同源性最高(92.3%),而与猪源ZM-95株(BVDV-1)的E2基因同源性较低(64.5%)。由此证明,该猪瘟疫苗中的确污染有一株BVDV-2株。     

猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立

本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322bp和503bp 2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.028 6μg.mL-1;8株流行野毒株都含GGGCCC序列(ApaⅠ酶切位点),2株疫苗株相应序列为GAGCCC,不能被ApaⅠ酶切;8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与HCLV遗传关系近,为基因1群。建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段。     

猪瘟标记疫苗研究现状

猪瘟是一种严重危害养猪业的烈性传染病,病死率很高,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染病.在我国,猪瘟弱毒疫苗的应用一定程度上控制了该病的暴发和流行,但是目前尚没有方法可以区别猪瘟疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,猪瘟病毒的隐性感染和散发仍然影响我国生猪产品质量及出口.因此,新型猪瘟标记疫苗的研制成为目前猪瘟防...     

首个以抗感染为评价标准的圆环病毒疫苗:诸元妥

<正>目前圆环病毒疫苗有全病毒灭活疫苗、亚单位疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗(核酸疫苗、重组疫苗、活载体疫苗)。主流产品是全病毒灭活疫苗和亚单位疫苗。截至2013年5月,我国共有5种猪圆环病毒灭活疫苗研制成功,分别为猪圆环病毒2型灭活疫苗(SH株)、猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)、猪圆环病毒2型灭活疫苗     

猪瘟疫苗研究进展

猪瘟是猪的一种高度接触性传染病 ,由于其造成巨大的经济损失 ,故而为清除本病作了很多工作。猪瘟疫苗的接种是控制猪瘟的重要手段。猪瘟疫苗包括灭活苗、弱毒苗及基因工程疫苗。猪瘟兔化弱毒苗因其优良的免疫原性是目前猪瘟防治应用最为广泛的疫苗之一。基因工程疫苗是目前猪瘟疫苗研究的热点领域 ,其包括亚单位疫苗、合成肽苗、活载体苗、核酸疫苗等。值得一提的是猪瘟病毒标记疫苗研究近年来发展迅速 ,目前已出现商品化的亚单位标记疫苗 ,可使猪瘟疫苗接种和自然感染区别更为简单、快捷。本文就猪瘟疫苗的发展及应用作了简要介绍     

基于便携式荧光定量PCR仪的猪瘟病毒现场检测方法的建立及应用

为建立猪瘟病毒疫苗株和强毒株一步法双重荧光RT-PCR鉴别检测方法。研究参照GenBank中猪瘟病毒疫苗株以及强毒株特异性基因序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测猪瘟病毒疫苗株和强毒株的双重荧光RT-PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。本试验建立的TaqMan-MGB一步法双重荧光定量RT-PCR检测方法可对猪瘟病毒疫苗株和野毒株进行快速鉴别诊断,为猪瘟的净化奠定了基础。     

牛病毒性腹泻病毒在猪瘟疫苗中的污染情况及其检测方法的研究进展

牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)同属黄病毒科瘟病毒属,猪瘟疫苗中污染BVDV可引起免疫失败。但由于两者在病毒粒子结构、基因组结构和抗原特性等方面均很接近,在血清学上存在交叉反应,因此难以检测猪瘟疫苗中污染的BVDV。文章对BVDV在猪瘟疫苗中的污染情况和检测方法进行了论述,旨在为猪瘟疫苗污染BVDV的检测提供理论基础。     

猪瘟疫苗研究进展

简要地追求了猪瘟疫苗研究的历史沿革，结合猪瘟病毒基因组图主要囊膜糖蛋白生物学特性，重点介绍了猪瘟新型疫苗的研究现状，并依据现行养猪业猪瘟检疫、防制中存在的种种问题，对猪瘟新型疫苗应用和发展趋势作了初步探讨和展望。     

细胞培养猪瘟活疫苗的免疫效果及其安全性

我国现行生产猪瘟疫苗使用的毒种———猪瘟兔化弱毒株（简称“Ｃ”株）是我国在５０年代培育出的１株免疫原性良好又安全的猪瘟弱毒株，也是目前国际上应用最广泛的猪瘟疫苗株。我国在１９５６年开始将“Ｃ”株用于制造疫苗，在全国推广应用，至今４０多年，对控制和消灭...     

猪瘟的防控措施

猪瘟是危害我国养猪业的最重要疾病之一。在猪瘟流行的国家,猪瘟弱毒C株疫苗仍是应用最广泛的猪瘟疫苗,许多国家在该疫苗的帮助下,成功清除了猪瘟C株,在国内疫苗的免疫效果是肯定的。文章仅就其国内流行毒株、C株疫苗的免疫机理、免疫程序、控制措施进行概述,为猪瘟防控提供参考。