H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白基因NS1的表达及其单克隆抗体的研制

利用RT-PCR技术扩增获得了H9N2亚型禽流感病毒的NS1基因,ORF长度为654bp。成功构建了重组表达载体pET-NS1,将其转化BL21,并诱导表达出了相对分子质量大约为28 000的NS1融合蛋白。NS1融合蛋白经His trap Hp Kit柱子纯化,采用缓慢稀释和透析相结合的方法复性H9N2-NS1蛋白,获得纯度较高的NS1蛋白,以纯化的NS1免疫BALB/c小鼠,间接接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗H9N2-NS1单克隆抗体（McAbs）进行特异性分析;建立了2株稳定分泌抗H9N2-NS1McAbs的杂交瘤细胞系6B9和6C2;腹水的特异性鉴定结果表明,2株McAbs能特异性的识别H9N2-NS1,而与H5N2亚型AIV、H9N2亚型AIV、NDV、IBV、IBDV、ILTV、EDS76均不发生反应。Western blotting鉴定表明,所获得的单抗只与NSl蛋白条带反应。亚类显示,6B9为IgG1,6C2为IgG2b。结果表明,2株抗H9N2-NS1McAbs的制备对H9N2亚型禽流感病毒检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义。另外,NSl蛋白单抗的成功研制为进一步研究NSl蛋白的结构、功能与细胞的相互作用机制及AI遗传变异规律奠定了一定的基础。     

禽流感(H9)和新城疫母源抗体消长规律及其免疫效果

畜禽母源抗体对保护后代,繁衍种群,起着极为重要的作用。初生动物,由于其本身的防御机能尚未成熟,主要靠母源抗体来保护其健康成长。禽类则通过卵黄将lgG传递给雏禽。     

中职学校园林绿地规划设计课程教学探讨

园林绿化事业需要大量面向城镇园林建设第一线,从事融园林艺术、园林环境改造为一体的园林设计、施工、养护管理的应用型专门人才。中等职业教育是为满足社会的需要,培养技能型人才。因此,如何教授中职学校园林绿地规划设计这门课,也是广大职业教育工作者长期以来孜孜不倦追求的目标。     

计算机辅助园林规划设计之软件比较

近年来,随着园林设计专用软件的不断出现和日益完善,给设计者提供了简单、实用、快捷、高效的设计软件。本文介绍了园林规划设计中CAD制图的特点、常用的制图软件、园林设计专用软件,以期为园林规划设计提供参考。     

H9亚型禽流感的流行特点及其疫苗市场分析

在禽类的一些重要传染病中，如新城疫、禽流感、传染性支气管炎、传染性法氏囊等，禽流感仍是危害养禽业发展的头号传染病。禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类感染和／或疾病综合征。自1878年在意大利的鸡群首次发现该病毒以来，世界各地均有禽流感的暴发和流行，造成了巨大的经济损失。     

猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备

本研究利用已构建的基因工程重组菌表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)ORF2编码的Cap蛋白,纯化后作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合。经间接免疫荧光试验(IFA)筛选及有限稀释法进行3次亚克隆后,本试验最终获得5株稳定分泌抗PCV2 Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3D12、4D5、4B9、4C9和4G10。其中4D5为IgG2b亚型,其余4株单克隆抗体均为IgG1亚型,轻链类型均为κ。Western blotting鉴定结果表明获得的5株单克隆抗体均不能特异性的识别47 ku重组PCV2 Cap蛋白;对病毒感染细胞进行IFA试验,结果显示5株单克隆抗体均特异性的识别病毒抗原,表明5株单克隆抗体识别的抗原表位均为构象表位。中和试验结果表明,5株单克隆抗体均有中和活性。本试验结果为进一步探索ORF2基因的结构、功能及建立快速准确的诊断方法奠定了基础。     

禽白血病病毒特性及其致病机理的研究进展

2009年6月份以来,在我国养殖密集的省市地区的鸡群中发生了一定比例的疑似禽白血病血管瘤,主要临床症状表现为,出现鸡爪、皮肤出血,并且流血不止直到死亡,剖检可见大肝大脾,每天死亡率在1‰～3‰。从30日龄到300日龄鸡均能见到该发病症状,多集中干120～180日龄。     

肉鸽新城疫及大肠杆菌混合感染的诊断

新城疫和大肠杆菌病是危害养禽业的常见病，近年来，关于鸟类感染新城疫的报道屡见不鲜。2003年12月，确山某肉鸽养殖户前来我所就诊，据养殖户介绍，发病率达50％以上，死亡率达10％左右，后来，我们根据临床症状、病理变化及实验室诊断结果确诊为肉鸽新城疫和大肠杆菌的混合感染，并采取有效措施，取得了满意的效果。     

氨对建鲤鱼苗生长的影响

非离子氨的毒性对鱼类和水生生物的毒害作用,早在多年前就已经进行了研究.Colt和Armstrong(1981)整理了氨化合物对水生生物的影响,指出非离子氨的主要效应为亚致死影响,而生长缓慢是一种最重要的亚致死影响.他们认为非离子氨在0.05-0.2 mg/L之间,可使许多水生动物的生长下降.Robinette(1976)认为,0.12 mg/L NH3-N已影响了斑点叉尾鱼回的生长,小于0.06 mg/L NH3-N可作为安全浓度,Westers(1981)认为0.0125 mg/L NH3-N作为鱼类养殖的最大允许浓度.雷衍之、金送笛(1976)对养殖鱼苗氨的半致死浓度也有报道.周永欣(1986)指出草鱼在不同发育阶段对非离子氨的半致死浓度也不同.