‘粉玉1号’草莓茎尖组织培养与病毒检测

以‘粉玉1号’草莓匍匐茎芽为试料,通过外植体消毒、茎尖剥离、不定芽诱导、生根培养,建立了‘粉玉1号’草莓茎尖脱毒及快繁体系。结果表明,‘粉玉1号’草莓茎尖最佳的灭菌方法为75%乙醇处理30s,再用0.1%升汞溶液处理10 min;初代培养基以MS + 0.5 mg·L-1 6-BA为最佳;生根培养基为不加激素的1/2 MS为宜。同时利用RT-PCR技术对‘粉玉1号’茎尖培养苗进行了草莓皱缩病毒、草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒和草莓镶嵌病毒4种病毒的检测,未发现病毒感染。本研究建立的茎尖脱毒及快繁体系可为‘粉玉1号’草莓的进一步开发利用以及工厂化育苗提供有益参考。     

猕猴桃‘翠香’再生体系的建立

取‘翠香’猕猴桃的幼嫩枝条为材料,利用不同激素及浓度诱导茎段腋芽、增殖、生根,并进行驯化移栽。结果表明：‘翠香’猕猴桃茎段腋芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg.L-16-BA+0.3 mg.L-1NAA,诱导率达88.89%;增殖培养最佳培养基为MS+5 mg.L-1 6-BA+0.4 mg.L-1 NAA,增殖系数为6.20,三代内增殖效果稳定;生根培养的最佳培养基为1/2MS+0.9 mg.L-1IBA,生根率为94.44%,根数为11.40,根长为2.94;驯化后移栽成活率达88.33%。     

地被菊‘紫妍’和‘纽9722’的再生体系建立

本研究以地被菊(Chrysanthemum morifolium)两个品种‘紫妍’和‘纽9722’带腋芽的无菌茎段为外植体,在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA诱导叶片分化、茎段增殖以及继代生根,进行两个品种的再生体系建立。结果表明,利用2%NaClO对‘紫妍’和‘纽9722’适宜消毒时间分别为6、8min;诱导‘紫妍’叶片不定芽再生的最适培养基是MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 1.0mg·L-1,愈伤组织诱导率为100%,分化率为92.22%,出芽数为7.60;‘纽9722’叶片不定芽再生的最适培养基是MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1,愈伤组织诱导率为100%,但分化率仅为45.59%;‘纽9722’茎段增殖的最适培养基是MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1,增殖系数高达10.05;‘紫妍’生根的最适培养基是1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1,生根率为100%,生根系数为15.50;‘纽9722’生根的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.3mg·L-1,生根率为100%,生根系数为14.87,移栽成活率均为100%。     

‘白雪公主’草莓茎尖组培快繁体系研究

以草莓品种‘白雪公主’茎尖为外植体,以MS为基础培养基,对培养前暗处理、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁环节进行研究,并建立了其组织培养快速繁殖体系。结果表明：暗处理3 d能够促进茎尖萌发,提高萌发速度;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的诱导培养基,诱导率达82 %以上;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的增殖培养基,增殖系数为8.00;1/2 MS+蔗糖20 g/L作为生根培养基为适宜的生根培养基,培养5 d后生根率达100 %,平均生根数为10条,平均根长为5.00 cm。     

长白山单花橐吾茎尖离体培养研究

以单花橐吾(Ligularia jamesii)茎尖作为外植体进行幼芽诱导,探索单花橐吾的离体快繁途径。结果表明:在MS+6-BA(3.0 mg·L^-1)+NAA(0.3 mg·L^-1)+蔗糖(35 g·L^-1)培养基上的幼芽诱导效果最好,诱导率高达90.1%;增殖培养时在MS+6-BA(2.5 mg·L^-1)+IBA(0.1 mg·L^-1)培养基上的平均增殖系数4.9,幼芽生长健壮,可继代培养6次以上;生根培养采用1/2MS+NAA(0.5 mg·L^-1),生根率达95%,生根白色粗壮,且数量较多。     

红三叶新品系组织培养和植株再生

利用红三叶(Trifolium pratense L.)新品系无菌苗不同部位,通过愈伤组织诱导及分化途径获得再生植株。结果表明:子叶、下胚轴、叶柄、叶片及根段在MS+0.5mg·L^-1 6-BA+1～2mg·L^-1 2,4-D培养基上都极易诱导出愈伤组织。最佳继代培养基为MS+0.5mg·L^-1 6-BA+1.0mg·L^-1 2,4-D,添加2,4-D比NAA更利于愈伤的增长和保存;最佳分化培养基为MS+0.75mg·L^-1 6-BA+0.5mg·L^-1 NAA,最高分化率为16.67%,且分裂素6-BA优于KT,6-BA与NAA组合比与IBA组合更有利于红三叶愈伤组织的分化;茎芽增殖最佳培养基为MS+0.5mg·L^-1 6-BA+1.0mg·L^-1 IBA,再生苗的增殖效果IBA>NAA,2,4-D不利于茎芽生长;最佳生根条件为50mg·L^-1浓度的IBA中浸泡1h后植入含0.5mg·L^-1 IBA的MS中,生根率达80%,红三叶新品系IBA生根最大极限浓度为0.75mg·L^-1,浓度过高表现出对根系生长的毒害。     

‘徐香’猕猴桃实生组培苗快繁体系的建立

以‘徐香’猕猴桃种子为外植体,开展附加不同植物生长调节剂的培养基对种子萌发、增殖及生根培养的对比实验,筛选适合试管苗各阶段生长的最佳培养基配方,以期建立其实生苗快繁体系。结果表明,75%酒精消毒30 s,0.1% HgCl2消毒8 min为外植体最佳消毒方法,成活率达79.18%;种子最佳萌发诱导培养基为MS+100 mg.L-1肌醇;适宜的增殖培养基为MS+1.0 mg.L-1 6-BA+0.1 mg.L-1 NAA;生根培养基以1/2MS+0.4 mg.L-1 IBA最好;选用草炭土和珍珠岩（体积比4:1）移栽,植株根系包被苔藓,成活率达80%以上。     

野生甘蒙锦鸡儿的组织培养研究

本试验采用甘蒙锦鸡儿（Caragana opulens Kom.）成熟种子为材料,利用组织培养的方法进行成熟胚的诱导,当胚成苗后进行增殖和生根培养,建立了一套野生甘蒙锦鸡儿的组培体系,为保护甘蒙锦鸡儿野生资源及其引种到城市园林建设中提供一定的借鉴作用。结果表明：试验前将种子用蒸馏水浸泡一晚效果较好;当灭菌时间为15 min时污染率最小,为37.61%;MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1培养基为最适宜成熟胚离体诱导的培养基;MS+6-BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1培养基为最适宜增殖的培养基;再生苗移植到1/2 MS+IAA 0.1 mg·L^-1培养基上,植株健壮,生根率为63.16%;将生根培养的甘蒙锦鸡儿幼苗移栽到草炭土：珍珠岩：蛭石=6：3：1的混合基质中,成活率为90%。     

中华猕猴桃‘红阳’外植体不定芽诱导及生根培养基筛选

红阳’猕猴桃以其香甜味浓,口感佳,受到广大消费者的喜爱。传统种子繁殖技术存在生长周期长,性状分离且不易获得大批雌株群体等问题;而利用扦插、嫁接的方法具有成活率较低的缺点。采用组织培养技术能够保持猕猴桃的优良性状并提高其繁殖效率,是目前重要的研究方法。本文以‘红阳’猕猴桃茎段萌发的嫩芽为材料,经外植体消毒后进行离体培养,通过对培养基中的多种植物生长调节剂浓度进行调节测试,探索适合‘红阳’外植体不定芽诱导与生根培养的培养基配方。结果表明,‘红阳’叶片最适宜的不定芽诱导培养基为MS + 6-BA 3 mg/L + NAA 0.1 mg/L,‘红阳’叶柄最适宜的不定芽诱导培养基为MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0.2 mg/L,‘红阳’最适宜的生根培养基为1/2MS + IBA 0.7 mg/L。使用该配方组合进行组培,可缩短‘红阳’组培育苗周期且植株长势健康良好,为生产优质‘红阳’猕猴桃苗木奠定基础。     

无刺1号刺梨快繁体系的建立

通过对无刺1号刺梨在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同植物生长调节剂的筛选,建立高效茎段快繁体系。以无刺1号当年生茎段为材料,利用不同植物生长调节剂对茎段进行腋芽诱导、增殖及生根,并进行炼苗移栽。结果表明：无刺1号茎段组培的最佳时期是4-5月,最佳消毒方案是30 s 75%酒精+10 min 0.1% 升汞;适合无刺1号初代培养的培养基为MS+ 2.5 mg?L-1 6-BA+ 0.1 mg?L-1 NAA,萌芽率达90.63%;增殖培养基为MS+ 1.5 mg?L-1 6-BA+0.1 mg?L-1 NAA,增殖系数为3.94;在1/2MS+ 0.3 mg?L-1 IBA+ 20 g?L-1 蔗糖+ 0.5 g?L-1 活性炭的培养基上,无刺1号的生根率为87.30%,驯化移栽成活率达87.74%。     

‘紫金四季’草莓组培快繁技术研究

以‘紫金四季’的叶片为外植体,对愈伤组织诱导、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁关键环节进行了研究,建立了‘紫金四季’草莓组织培养快繁技术。结果表明：‘紫金四季’幼叶较叶柄更适宜作为组培外植体,培养时叶片正面朝上放置更有利于愈伤的产生;诱导不定芽培养基以 MS 2.0mg/L TDZ 0.1mg /L NAA为佳,诱导率为50%;继代增殖培养基为 MS 1.0mg /L 6-BA 0.2 mg /L NAA,其增殖系数为6.17;生根培养基为 1 /4MS,生根率达 100% ,平均生根数达 6.6条。     

红豆草组织培养及植株再生体系的优化

以红豆草（Onobrychis viciifolia Scop.）无菌苗的上胚轴、真叶和下胚轴为外植体,根据正交试验设计方法,研究不同植物激素对红豆草组织培养及植株再生体系的影响。结果表明：激素对愈伤诱导的影响程度为萘乙酸（Naphthylacetic acid,NAA）>玉米素（Zeatin,ZT）> 6-苄氨基嘌呤（6-Benzylaminopurine,6-BA）,诱导外植体产生愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 ZT,诱导率达94.5%;对不定芽分化率的影响程度为NAA > 6-BA > ZT,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.5 mg·L^-1 ZT,诱导率达88.9%;诱导不定芽生根的最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1吲哚丁酸钾（Indole-3-butyric acid potassium,IBA-K）,诱导率高达45%。     

‘玛瑙红’樱桃茎尖培养脱植原体快繁体系建立及优化

为了解决玛瑙红樱桃植原体病害问题,以玛瑙红樱桃休眠芽为外植体,优化了玛瑙红茎尖快繁体系并对该体系进行ISSR检测,同时采用茎尖培养法、热处理结合茎尖二次培养法对玛瑙红樱桃植原体进行脱除。结果如下：茎尖萌发培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.3 mg/L,萌发率为80.67 %;增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA3 1.5 mg/L,平均增殖系数为5.07;生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,生根率为79.17 %;ISSR检测未发生变异,表明该快繁体系稳定;最佳茎尖培养脱除方法为：取休眠芽茎尖0.3~0.6 mm进行培养,脱除率为66.67 %,成活率为52.22 %,最佳热处理结合茎尖培养脱除方法为：组培苗经38 ℃处理21天后剥取0.3~0.6 mm茎尖培养,脱除率为86.67 %,成活率为42.22 %。     

青绿苔草(Care breviculmis)愈伤组织诱导与再生体系的建立

为建立青绿苔草高效的再生体系,本研究以青绿苔草的种子为外植体,探究不同植物激素配比对愈伤组织诱导、愈伤分化和生根的影响。结果表明:MS+1.5 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-1 6-BA+2.0 mg·L^-1 2,4-D为诱导愈伤的最佳培养基,诱导率可以达到68.3%,愈伤表现为松散的黄色颗粒;MS+1.0 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA为最佳分化培养基,分化率为93.8%,不定芽数量达到40个,长势良好;不定芽在1/2 MS培养基中生根效果最好,其根长、株高和生根数量均显著高于其他处理。本研究建立了高效的青绿苔草再生体系,为研究青绿苔草的遗传转化及应用生物技术育种奠定了基础。     

白三叶×高加索三叶草F1代茎段离体培养器官发生的研究

以白三叶Trifoliumrepens×高加索三叶草T.ambiguum未成熟胚离体培养产生的F1代无菌苗的茎段为外植体,进行不定芽途径的直接器官发生培养。筛选适宜的诱导、分化及生根培养基,研究不同质量浓度激素组合对体细胞器官发生的影响,为建立扩繁体系及之后的回交试验奠定基础。结果表明:MS+2,4-D 0.1 mg/L、6-BA2 mg/L为适宜的诱导培养基,MS+NAA0.5 mg/L、6-BA1 mg/L、KT 1 mg/L为适宜的分化培养基,不添加任何激素的1/2 MS培养基为适宜的生根培养基。     

地被菊‘雪公主’的组织培养和快速繁殖

以地被菊‘雪公主’（Chrysanthemum grandiflorum cv.White Snow）带腋芽的茎段为外植体,通过消毒得到无菌材料。以MS为基本培养基,通过增加不同浓度的激素进行组织培养快速繁殖技术的研究。结果表明,诱导叶片不定芽的最适培养基为MS+1.0 mg·L-16 BA+0.7 mg·L-1NAA,诱导率达100％,分化率达63.3％;茎段增殖的最适培养基为MS+0.3 mg·L-16 BA+0.2 mg·L-1NAA,平均增殖系数为6.73;继代培养为MS培养基;生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L-1NAA培养基,生根率达100％,平均生根系数为15.80;移栽后生长良好,成活率达100％。     

扁穗牛鞭草组织培养体系建立

以扁穗牛鞭草茎段为外植体，进行组织培养体系研究，结果表明：初代培养最佳配方为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L，芽诱导率可达100％；继代增殖最佳增殖配方为MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L，增殖系数为5．4；生根阶段以1／2MS＋IBA0．2mg／L为最佳的生根培养基配方，生根效果最好，生根率最高；初代培养生根苗与增殖后生根培养苗移栽成活率都在97％以上。     

铁线莲‘Blekitny Aniol’组织培养及再生体系建立

对铁线莲(Clematis florida‘Blekitny Aniol’)的带芽茎段进行诱导产生无菌苗,并对其叶片和茎段进行愈伤组织诱导成苗的分化研究,成功建立了铁线莲组织培养再生体系。结果表明,带芽茎段诱导腋芽最佳培养基为MS+1mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,腋芽萌发率为100.0%;茎段诱导愈伤最适宜培养基为MS+2 mg·L~(-1)6-BA+0.01mg·L~(-1)NAA,诱导率为78.3%;叶片诱导愈伤组织最适宜的培养基为MS+1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,诱导率为81.7%;愈伤组织分化的最佳培养基为1/2MS+1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,分化率可达25.0%;最适宜不定芽的增殖培养基为1/2MS+3 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,增殖倍数为4.94;筛选出最优的生根培养基组合为1/2MS+0.05 mg·L~(-1)NAA,生根率为70.2%。本研究将为铁线莲的推广应用提供参考,也为其他铁线莲属植物引种和开发利用奠定了基础。     

多年生黑麦草高频丛生芽增殖培养体系的研究

选取多年生黑麦草(Lolium Perenne L.)的3个优良品种:里加(Regal)、贝尔勒(Belle)、马拉松(Marathon)作为植物材料,以无菌苗的茎尖为外植体,对多年生黑麦草丛生芽的诱导、增殖进行研究,以其建立多年生黑麦草丛生芽高频增殖体系,并在此基础上确定丛生芽离体培养的最适筛选剂及其浓度。结果表明:当2,4-D和6-BA浓度分别为0.5 mg·L^-1和2.0 mg·L^-1时有利于茎尖诱导产生丛生芽;丛生芽增殖的最适6-BA浓度为2.0 mg·L^-1;继代培养时间过长对丛生芽块的生长不利;基因型对丛生芽的诱导和增殖有很大影响;适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg·L^-1。此外,还确定了丛生芽的最适筛选剂为G418和Hyg,其浓度分别为150 mg·L^-1和75 mg·L^-1。从而,建立了一种诱导率和增殖率较高并且实验周期短的丛生芽高频增殖培养体系,并进一步探讨了建立多年生黑麦草遗传转化受体系统的必要条件。     

兰州百合鳞片组织培养研究

以兰州百合的内层鳞片为外殖体,以MS为基本培养基并添加不同配比生长调节剂,进行组织培养研究。结果表明,以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基对初代培养形成不定芽最佳,低温有助于外殖体分化;不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;1/2 MS+0.2 mg/L NAA+蔗糖60 g/L适宜苗的生根培养,生根率达100%,且结鳞茎率达73.4%。