大麦虫蛋白质的提取分离及抗氧化性研究

以大麦虫幼虫脱脂粉为原料,根据溶解性的不同,从中分离出水溶蛋白、酸溶蛋白、醇溶蛋白及碱溶蛋白,并对各蛋白组分进行体外抗氧化性研究。结果表明:大麦虫幼虫脱脂粉中最主要的蛋白组分为水溶蛋白,占脱脂虫粉的30.24%;其次为碱溶蛋白19.45%;酸溶蛋白和醇溶蛋白分别占9.52%和4.43%。大麦虫各蛋白组分均有体外抗氧化作用,随着浓度的增大,各蛋白液的总还原能力、对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力也随之增强。水溶蛋白具有最强的还原力和清除超氧阴离子能力,酸溶蛋白清除羟基自由基能力最强。     

玉米胚芽分离蛋白提取率及氨基酸组分分析

利用水、氯化钠、乙醇、氢氧化钠,分别提取玉米胚芽中的水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白、碱溶蛋白,确定各种分离蛋白的最佳溶剂条件.样品过80目筛后,脱脂处理,取5 g脱脂样品进行试验.结果表明,水溶蛋白的最佳溶剂量为水80 mL,提取率为37.13％;盐溶蛋白的最佳溶剂浓度为质量分数为6％的氯化钠溶液,提取率为25.34％;...     

不同方法提取苦荞蛋白的体外抗氧化活性研究

[目的]研究不同方法提取苦荞蛋白的体外抗氧化活性。[方法]以贵州威宁种植的苦荞为材料,通过蛋白质含量测定、清除羟基自由基能力测定对碱溶酸沉法提取苦荞粗蛋白和Osborne法分级提取苦荞清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白进行了比较分析。[结果]通过碱溶酸沉法提取能获得大量的可溶性蛋白,Osborne法提取的蛋白虽然含量较低但获得的种类较多;各种蛋白均具有清除羟基自由基的能力,其清除羟基自由基能力从大到小依次为清蛋白、碱溶酸沉法提取的粗蛋白、谷蛋白、球蛋白、醇溶蛋白。[结论]碱溶酸沉法和Osborne法提取的苦荞蛋白均具有体外抗氧化能力。     

美藤果蛋白质功能性质的研究~

使用三亚市美藤果种植基地种植的美藤果种仁的脱脂粉,分别采用酶法除杂浓缩法和碱溶酸沉淀法进一步提取蛋白质,分别得到美藤果浓缩法蛋白(PPC)和碱提取的蛋白(PPI)。实验数据表明:其等电点近似为p H4.5;2种方法提取蛋白粉的溶解性都是随p H的升高呈先降低后升高的趋势;在吸水性、吸油性和起泡性方面,PPC比PPI略好;在溶解性和粘度方面,PPI优于PPC;在50℃左右PPC和PPI吸油性最大时,分别达到293%和165%。     

盐胁迫下番茄幼苗中不同性质蛋白表达差异的研究

[目的]分析不同盐浓度胁迫下番茄幼苗叶中不同性质蛋白表达的差异。[方法]以番茄种子为试材,置于附加不同盐浓度的1/2MS培养基上培养出番茄幼苗,然后分别提取其叶中的水溶蛋白、盐溶蛋白、酸溶蛋白、醇溶蛋白和总蛋白,并运用SDS-PAGE技术对其蛋白组成和表达量进行比较分析。[结果]不同盐浓度处理下,叶片蛋白质的组成和数量均发生变化,高盐浓度时多出了66.2 kD左右的蛋白质,说明在高盐浓度胁迫下植物产生了某些抗逆性蛋白;总蛋白条带比较相似,总蛋白含量和盐溶蛋白含量略微减少,水溶蛋白含量略微增加,并且在盐溶蛋白中增加了1条带,这些蛋白变化可能是盐胁迫下应激反应的相关蛋白。[结论]该研究为植物的抗病性选育提供一定的理论基础。     

南美蟛蜞菊叶蛋白提取方法筛选

[目的]筛选出适合南美蟛蜞菊叶蛋白的提取方法和条件,为其蛋白饲料资源化利用提供技术支持.[方法]通过正交试验分别优化酸加热法、碱加热法、盐析法和有机溶剂法提取南美蟛蜞菊叶蛋白的工艺条件,并对比4种方法的提取效果,确定最佳提取工艺.[结果]4种方法提取的南美蟛蜞菊叶片粗蛋白含量排序为:盐析法(15.18 mg/g)>酸加热法(9.97 mg/g)>碱加热法(9.79 mg/g)>有机溶剂法(7.21 mg/g).其中,盐析法的最适提取条件为氯化钠质量浓度30%、絮凝时间10 min;酸加热法的最适提取条件为絮凝温度60℃、pH 3、絮凝时间2 min;碱加热法的最适提取条件为絮凝温度25℃、pH 7、絮凝时间2 min;有机溶剂法的最适提取条件为乙醇体积分数20%、絮凝时间10 min.絮凝温度对酸加热法和碱加热法提取效率有显著影响(P<0.05),溶液浓度对盐析法和有机溶剂法提取效率有极显著影响(P<0.01).[结论]综合比较4种方法提取南美蟛蜞菊叶蛋白的效果,确定盐析法是提取南美蟛蜞菊叶蛋白的最适方法,其提取效率高、操作简便、蛋白质活性保持较好,适用于实验室提取和工业生产.     

不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响

[目的]研究不同提取方法对桦褐孔菌多糖抗氧化活性的影响。[方法]采用水煮醇沉法和碱液醇沉法提取粗多糖;采用三氯乙酸法纯化水溶和碱溶粗多糖;采用羟基自由基清除试验和超氧阴离子自由基清除试验进行抗氧化活性对比研究。[结果]水溶粗多糖、碱溶粗多糖、水溶纯多糖、碱溶纯多糖的多糖得率分别为14.0%、27.7%、7.0%、6.2%。对羟基自由基的清除,水溶粗多糖在0.9 mg/ml时有最大清除率,为54.3%,碱溶纯多糖在0.06 mg/ml时有最大清除率,为10.9%;对超氧阴离子自由基的清除,水溶粗多糖在0.1mg/ml时有最大清除率,为24.2%,水溶纯多糖在0.07 mg/ml时有最大清除率,为27.2%。[结论]水溶多糖比碱溶多糖抗氧化能力强,桦褐孔菌可成为一种新的高效天然抗氧化药用真菌。     

鬼针草叶蛋白最佳提取时期与方法的筛选

为了找到鬼针草叶蛋白提取最佳生长期和有效提取方法,研究了鬼针草不同生育期和不同方法对叶蛋白提取的影响。结果表明:在鬼针草4个不同生育期中采用直接加热法提取,叶蛋白提取率和沉淀物中粗蛋白含量依次降低,营养生长期(20.2 mg/g,61.36%)现蕾期(15.9 mg/g,61.25%)盛花期(14.7mg/g,60.97%)结果期(12.1mg/g,54.22%),均以营养生长期为最高。在鬼针草的营养生长期,采用多种方法提取叶蛋白,叶蛋白提取率:酸化加热+聚乙二醇沉淀法(29.4mg/g)酸化加热+乙醇沉淀法(27.9mg/g)酸化加热+氯化钠法(24.7mg/g)酸化加热法(23.1mg/g)直接加热法(20.2mg/g);沉淀物中粗蛋白含量:酸化加热+乙醇沉淀法(65.35%)酸化加热+氯化钠法(60.72%)酸化加热+聚乙二醇沉淀法(57.13%)。     

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为了找到鬼针草叶蛋白提取最佳生长期和有效提取方法,研究了鬼针草不同生育期和不同方法对叶蛋白提取的影响.结果表踢:在鬼针草4个不同生育期中采用直接加热法提取,叶蛋白提取率和沉淀物中粗蛋白含量依次降低,营养生长期(20.2 mg/g,61.36％)＞现蕾期(15.9 mg/g,61.25％)＞盛花期(14.7 mg/g,60.97％)＞结果期(12.1 mg/g,54.22％),均以营养生长期为最高.在鬼针草的营养生长期,采用多种方法提取叶蛋白,叶蛋白提取率∶酸化加热+聚乙二醇沉淀法(29.4mg/g)＞酸化加热+乙醇沉淀法(27.9mg/g)＞酸化加热+氯化钠法(24.7mg/g)＞酸化加热法(23.1 mg/g)＞直接加热法(20.2mg/g);沉淀物中粗蛋白含量∶酸化加热+乙醇沉淀法(65.35％)＞酸化加热+氯化钠法(60.72％)＞酸化加热+聚乙二醇沉淀法(57.13％).     

文冠果种子蛋白质提取及组分分析

探索文冠果种子蛋白质及其蛋白质组分的提取方法,采用凯氏定氮法及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)进行分析,为文冠果种子蛋白的高效提取与开发利用奠定基础。结果表明,文冠果种仁的蛋白质质量分数为26.29%,经脱脂后其脱脂粉中蛋白质量分数为62.04%。采用连续分级提取法得到文冠果种脱脂粉中球蛋白、清蛋白、谷蛋白及醇溶蛋白组分的质量分数分别为26.38%、21.50%、2.49%和1.99%,并采用一次直接提取法可得到水溶蛋白、盐溶蛋白、醇溶蛋白与碱溶蛋白的提取率分别为34.63%、75.57%、7.26%和80.09%。采用碱溶酸沉法对脱脂后的文冠果种进行蛋白提取,蛋白质提取率达84.06%,得率为36.40%,可得到纯度为83.92%的蛋白粉。SDS-PAGE分析图谱表明文冠果种子蛋白的主要亚基分子质量分布在20～60ku,并计算得出4种蛋白组分的主要亚基分子质量,为文冠果蛋白组分的进一步研究提供依据。     

碎米蛋白提取及高剪切辅助酶法改善其溶解性研究

[目的]研究碎米蛋白提取,并通过改性提高碎米蛋白溶解性的关键技术,为解决优质蛋白缺乏问题提供技术参考.[方法]以早籼碎米为原料,采用单因素试验与正交试验相结合的方法,分别以蛋白提取率和蛋白溶解度为考察指标,确定超声波辅助碱法提取碎米蛋白及高剪切辅助酶法改善其溶解性的最佳方案.[结果]提取碎米蛋白的最佳工艺:NaOH质量浓度0.4%、固液比1:8(g/mL)、提取时间2 h,碎米蛋白提取率为70.79%,各因素对碎米蛋白提取率的影响排序为NaOH质量浓度>提取时间>固液比;提高蛋白溶解性的最佳工艺:剪切转速3500 r/min、剪切时间30 min、剪切温度45℃、加酶量1.5%,碎米蛋白溶解度由0.53%提高至28.00%,各因素对碎米蛋白溶解性的影响排序为剪切转速>剪切时间>剪切温度>加酶量.[结论]超声波与碱法联用可提高碎米蛋白提取率,高剪切辅助酶法可提高碎米蛋白溶解性.     

利用超薄层等电聚焦电泳技术对燕麦种子进行蛋白多态性和品种鉴定方法的研究

本文探索研究了利用超薄层等电聚焦电泳进行燕麦品种鉴定所需的各种试验条件.结果显示:燕麦种子贮藏蛋白以醇溶蛋白为主,水溶蛋白次之,盐溶蛋白最少,因此应将醇溶蛋白作为燕麦品种鉴定的生化标记;一次性提取法与分步提取法相比,步骤较为简单,需时短,所得电泳谱带较多,更适用于燕麦种子蛋白提取;4种醇溶蛋白提取液中,以1%(V/V)巯基乙醇+1mol/L(W/V)尿素+乙二醇溶液所得电泳效果最佳,确定其为燕麦种子醇溶蛋白提取液以进一步研究.     

麦冬多糖提取工艺的比较

采用碱水、醇碱两种不同提取溶剂提取麦冬(Ophiopogon japonicus)多糖。通过单因素试验分别考察不同提取溶剂下提取时间、超声功率、料液比对麦冬多糖提取率的影响。结果表明,醇碱法多糖提取率高于碱水法,且均高于文献报道的水提法。醇碱提取的最佳工艺为时间15 min、功率700 W、料液比1∶60(g∶m L),麦冬多糖提取率为89%。     

凹叶厚朴不同溶剂提取物对几种植物病原菌的抑制活性

以不同的溶剂和提取方法分别对凹叶厚朴皮和茎进行提取,并对所得提取物进行了5种病原真菌的生长抑制活性测试.结果表明:在供试质量浓度为1 mg/ml的情况下,当采用相同的提取方法和提取溶剂时,凹叶厚朴皮的提取物对所有供试病菌抑菌效果比茎的提取物好;当采用相同的植物部位提取物和提取溶剂时,超声波提取物对所有供试病菌抑菌效果比浸提提取物效果好;而当提取方法和提取部位都一定而改变提取溶剂时,以95%乙醇提取物对所有供试病菌抑菌效果最好,石油醚提取物抑菌活性次之,而10%氢氧化钙提取物、水提取物对所有供试病菌抑制率均比较低.凹叶厚朴皮的提取物作为植物源杀菌剂值得进一步研究.     

玉米种子蛋白质电泳鉴定品种的研究：——醇溶蛋白…

用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对玉米种子醇溶蛋白和盐溶蛋白分别用于区分不同品种的效果作了比较。种子醇溶蛋白采用了７０％乙醇和５５％异丙醇两种溶剂分别提取。结果表明，两种溶剂提取的醇溶蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ带谱均较简单，品种间差异小，难以把各供试品种互相区分开来。而种子盐溶蛋白则显示出丰富的带谱，品种间在谱带数目，带的分布与强弱等特点均可见较明显的差异，据此可将各供试品种互相区     

不同形态钾肥在油菜上的施用效果

采用盆栽试验方法,研究了水溶态、枸溶态和矿物态3种不同形态钾肥的施用效果.结果表明,在等养分投入条件下,矿物态钾肥(钾长石)对油菜生物量和钾素吸收没有效果,而水溶态钾肥(硫酸钾)和枸溶态钾肥(钾硅肥)均显著提高油菜生物量、钾素含量和钾素积累量.与对照不施钾肥相比,水溶态钾肥和枸溶态钾肥分别提高油菜生物量37.7％和47.6％,分别增加地上部钾素累积量2.05倍和2.14倍,钾肥利用率分别为29.6％和31.2％.在缺钾条件下,水溶态钾肥和枸溶态钾肥均能有效为油菜提供钾素养分,其中枸溶态钾肥效果略好于水溶态钾肥,说明在试验条件下枸溶态钾肥可以替代水溶态钾肥.     

超声波辅助提取桑叶蛋白加工工艺

采用超声波提取桑叶叶蛋白,通过单因素和正交试验,得出该方法提取桑叶蛋白的最佳优化工艺:以0.4%的NaCl溶液为提取溶剂,料液比为1∶30,超声波400 W超声处理20 min,40℃水浴浸提60 min;此工艺下,桑叶叶蛋白得率为9.93%,粗蛋白含量为56.8%。与常规的水提法相比,超声波辅助提取法大大提高了桑叶蛋白的得率。     

抗TMV的植物筛选及提取条件对抗病毒物质活性的影响

对26种植物样品进行了抗病毒(TMV)活性测定。结果表明,不同植物提取物对TMV侵染心叶烟的抑制效果不同,其中莲、榕树、柿子、杨梅、水蜈蚣、叶下珠、羊蹄甲和菊花对TMV的抑制率在90%以上;对高活性抗病毒植物莲叶而言,抗病毒物质的活性因提取溶剂和提取方法的不同而异,水作为溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率仅约为70%,而以甲醇和体积分数95%的乙醇作溶剂提取时,提取物对TMV的抑制率约在98%以上;用体积分数95%的乙醇为溶剂,采用索氏提取、回流提取和冷浸提取时,所得提取物对TMV的抑制率均为100%。冷浸提取的优化条件是:以体积分数95%的乙醇为提取溶剂,料液比20∶180(1∶9)提取12h。     

一枝蒿等6种植物提取液对水稻潜根线虫的抑杀作用

[目的]为找到更多防治水稻潜根线虫的植物源农药,测定了6种植物的提取液对水稻潜根线虫的抑杀活性,旨在为防治水稻潜根线虫提供一定的参考。[方法]将鸡蛋花（叶、花）、黄芩、杏仁、干姜、一枝蒿、辣椒6种植物晾晒,用微型破碎机粉碎、过筛后,分别称取6g植物粗粉,用0.05%盐酸、0.05%氢氧化钠、20%乙醇、2%丙酮和无菌水5种溶剂常温浸泡提取48h后,用滤纸过滤提取液,并用相应的溶剂定容至100ml。将获得的各种植物提取液10ml分别加入培养皿中,挑入40～50条线虫,置于室温下分别于24和48h后用清水复苏2h,检查线虫死亡数,每组处理4次重复,计算各处理的校正死亡率。[结果]用植物提取液处理水稻潜根线虫,杏仁和一枝蒿的杀线活性很强;黄芩、辣椒有较强的杀线虫活性;鸡蛋花（叶、花）、干姜杀线虫活性弱。同一种植物,由于所选用的提取溶剂不同,其提取液杀线虫活性不相同,其中变化较大的是黄芪,水稻潜根线虫48h的校正死亡率从无菌水提取液的13.25%到乙醇提取液中的88.56%。同一植物不同部位的提取液杀线虫活性也不同,鸡蛋花（花）和鸡蛋花（叶）用不同提取溶剂提取,其杀线虫活性鸡蛋花（花）均大于鸡蛋花（叶）。[结论]使用天然植物源农药防治水稻潜根线虫,可降解,对环境友好,其防治效果因提取溶剂及植物源农药的种类不同而差异较大。     

杜鹃叶片3种蛋白质提取方法的比较

以映山红(R.simsii)、马银花(R.ovatum)、满山红(R.mariesii)和云锦杜鹃(R.fortunei)4种杜鹃为实验材料,采用TCA-丙酮法、酚法和TCA-丙酮-酚法3种蛋白质提取方法提取杜鹃叶片蛋白质,并应用双向电泳技术(2-DE)比较分析不同方法的蛋白质提取率、溶解性、完整性等的差异,确立适用于2-DE分析的杜鹃叶片蛋白质提取方法。结果表明,TCA-丙酮法提取的蛋白溶解性差且粘稠,得到的蛋白质点少,不适合杜鹃叶片蛋白的提取;酚法提得的蛋白质溶解性好,蛋白质点多,但是杂质较多,且此法不适用于映山红叶片蛋白的提取;TCA-丙酮-酚法提取的杜鹃叶片蛋白质位点较多且清晰,重复性也好,且4种杜鹃叶片蛋白的提取效果都比较好。因此,TCA-丙酮-酚法被认为最适于杜鹃属植物叶片蛋白质的提取及分析。