南美蟛蜞菊WtActin1基因克隆及表达稳定性分析

[目的]克隆南美蟛蜞菊肌动蛋白基因(WtActin1),并进行生物信息学及表达稳定性分析,为南美蟛蜞菊耐热耐冷功能基因表达及调控研究提供可靠的内参基因.[方法]RACE克隆WtActin1基因,通过在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列进行分析,并利用实时荧光定量PCR检测该基因在不同组织及温度胁迫下的表达情况.[结果]克隆获得的WtActin1基因cDNA全长1682 bp(GenBank登录号MN485900),其中5'非编码区(5'-UTR)170 bp,3'非编码区(3'-UTR)378 bp,开放阅读框(ORF)1134 bp,编码377个氨基酸残基.WtActin1蛋白分子量为41725.81 Da,理论等电点(pI)为5.31,不稳定性指数(II)为37.48,亲水性的平均值(GRAVY)为-0.166,为稳定的亲水性蛋白,无跨膜结构域和无信号肽,主要存在于细胞质中,具有Actin蛋白家族的典型特征结构,其二级结构主要由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成,三级结构同源模型为嵌合肌动(3ci5.1.A),与莴苣、橡胶草和洋蓟的同源蛋白三级结构高度相似.WtActin1基因与其他植物Actin基因核苷酸序列相似性在86.4%以上,其推导氨基酸序列相似性在94.0%以上.从基于Actin氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树可看出,WtActin1与同为菊科的莴苣LsActin7亲缘关系最近,与传统分类学相吻合,其次是菊科的橡胶草TkActin1和锦葵科的棉花GhActin.WtActin1基因在南美蟛蜞菊根、茎、叶和花中的表达量均无显著差异(P>0.05,下同),且在高、低温胁迫下与正常温度处理的表达量也均无显著差异.[结论]WtAtin1基因属于Actin基因家族成员,在不同组织及温度胁迫下均能稳定表达,可作为内参基因用于南美蟛蜞菊耐热耐冷功能基因研究.     

模拟SO2污染对广东8种常见果树的胁迫效应

研究了模拟SO2污染对黄皮(Clausena lansium)、荔枝(Litchi chinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)、石榴(Psidium guajava)、芒果(Mangifera indical)、木瓜(Chaenomeles sinensis)、香蕉(Musa nana)、杨桃(Averrhoa carambola)等8种广东常见果树离体叶片的叶绿素含量、荧光参数、叶片总抗氧化能力以及亚硫酸根氧化酶(EC.1.8.3.1)活性的影响.结果表明,随着模拟SO2浓度的升高,8种果树叶绿素含量均有不同程度的降低且存在明显级差;高浓度SO2胁迫使荔枝、木瓜、石榴、杨桃的光系统Ⅱ受到严重破坏;随着模拟SO2浓度的升高,8种果树叶片的总抗氧化能力呈先升高后降低的趋势,其亚硫酸根氧化酶活性也有不同程度的增强.黄皮、龙眼、芒果和香蕉对SO2污染的抵抗能力要高于荔枝、木瓜、石榴和杨桃,在全球SO2污染日趋严重的背景下,选择抗性更高的果树品种具有更高的经济效益.     

南美蟛蜞菊叶蛋白提取方法筛选

[目的]筛选出适合南美蟛蜞菊叶蛋白的提取方法和条件,为其蛋白饲料资源化利用提供技术支持.[方法]通过正交试验分别优化酸加热法、碱加热法、盐析法和有机溶剂法提取南美蟛蜞菊叶蛋白的工艺条件,并对比4种方法的提取效果,确定最佳提取工艺.[结果]4种方法提取的南美蟛蜞菊叶片粗蛋白含量排序为:盐析法(15.18 mg/g)>酸加热法(9.97 mg/g)>碱加热法(9.79 mg/g)>有机溶剂法(7.21 mg/g).其中,盐析法的最适提取条件为氯化钠质量浓度30%、絮凝时间10 min;酸加热法的最适提取条件为絮凝温度60℃、pH 3、絮凝时间2 min;碱加热法的最适提取条件为絮凝温度25℃、pH 7、絮凝时间2 min;有机溶剂法的最适提取条件为乙醇体积分数20%、絮凝时间10 min.絮凝温度对酸加热法和碱加热法提取效率有显著影响(P<0.05),溶液浓度对盐析法和有机溶剂法提取效率有极显著影响(P<0.01).[结论]综合比较4种方法提取南美蟛蜞菊叶蛋白的效果,确定盐析法是提取南美蟛蜞菊叶蛋白的最适方法,其提取效率高、操作简便、蛋白质活性保持较好,适用于实验室提取和工业生产.     

珍奇的庭园树木——4种外来玉蕊科植物

玉蕊科植物是世界上比较珍奇的植物类群之一。本文介绍了4种极具园林开发利用价值的外来玉蕊科植物，对其形态特征、生活习性和园林用途等进行了描述。