牦牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的分离及鉴定

一九八三年从四川某地区一牦牛分离到牛病毒性腹泻－粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）病毒，定名为牦牛Ⅰ号毒株。该病毒可在牛肾或牛睾丸原代细胞上繁殖继代，但均不产生可见病变（ＣＰＥ），用荧光抗体染色检查，可见到ＢＶＤ／ＭＤ特异性荧光，其滴度在１Ｏ￣（－３）－１０￣（－５）之间。用细胞培养第１５代病毒做系列试验表明，该病毒为ＲＮＡ病毒，对乙醚敏感，不耐酸，对胰蛋白酶有一定抗力；回归黄牛，血清中和抗体呈ＢＶＤ／ＭＤ阳性。     

从进境吉尔吉斯坦阿莱种羊检出BVD／MD

从进境吉尔吉斯坦阿莱种羊检出ＢＶＤ／ＭＤ邱杨孟莹张易祥帕夏（乌鲁木齐动植物检疫局８３００１１）格热堤邓秀芳（喀什动植物检疫局８４４０００）羊病毒性腹泻一粘膜病（简称ＢＶＤ／ＭＤ）是由病毒引起的，广泛传播的牛羊的一种传染病。早在５０年代，世界各国陆续报...     

用琼脂扩散试验检测牛血清BVD／MD抗体

用琼脂扩散试验检测牛血清ＢＶＤ／ＭＤ抗体陈茂盛，寇改霞（西安动植物检疫局，陕西７１００６８）牛病毒性腹泻一粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）是世界各养牛发达国家中危害养牛业的主要传染病。利用中和试验检测血清抗体是进行牛群ＢＶＤ／ＭＤ流行病学调查的公认手段。琼脂扩...     

犊牛睾丸细胞用于犊牛血清BVD/MD抗体检测的可行性探讨

用犊牛睾丸细胞和牛肾细胞，ＢＴ细胞，通过中和试验分别做犊牛血清牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）抗体的检测，检测了４１批犊牛血清样品，结果一致性较好，用犊牛睾丸细胞血清（ＢＶＤ／ＭＤ）抗体检测是可行的。     

多价荧光抗体监测外源病毒污染的研究

用猪瘟病毒（ＨＣＶ）、猪细小病毒（ＰＰＶ），牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ），伪狂犬病病毒（ＰｒＶ），兰舌病病毒（ＢｔＶ），羊口疮病毒（ＯＶ）等六种病毒，多次同时或先后强化免疫猪，制取六价高免血清；用狂犬病病毒（ＲＶ）免疫兔，制取ＲＶ单价高免血清，分别用异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记制成荧光抗体（ＦＡ），并按二者最佳染色价配制成七价（多价）ＦＡ。由于各病毒在其宿主细胞中复制部位和与宿主细     

牛病毒性腹泻病毒的分子生物学进展

牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）可引起临床感染和某些疾病，包括繁殖障碍、呼吸综合症、先天性缺陷、肠炎、持续感染（ＰＩ）和粘膜病（ＭＤ）〔１，２〕。本文阐述ＢＶＤＶ的生物学特征、基因组、编码蛋白及ＭＤ致病的分子机制。１ＢＶＤＶ生物学特征１．１ＢＶＤＶ分类位...     

牛病毒性腹泻/粘膜病病毒在不同细胞上生长增殖的比较

牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏｒｅｇｏｎ　Ｃ２４Ｖ弱毒株抗原的制备一直以在犊牛仔细胞上生长为主，为了使该病毒有更广泛的宿主细胞，对该病毒株在犊牛仔细胞上和睾丸细胞上生长增殖情况作了对比，结果证明，该病毒在两种细胞上的增殖情况无差异。     

免疫过氧化物酶法快速检测牛病毒性腹泻—粘膜病病毒抗原

用间接免疫过氧化物酶法（ＩＩＰ），对非细胞致病性牛病毒性腹泻－粘膜病（ＢＶＤ－ＭＤ）病毒持续感染的４２头牛血清经牛胎儿肌细胞培养检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，１００头外观健康牛的血清，经牛胎儿肌细胞培养未检出ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，该结果与用干扰法获得的结果一致。而且用ＩＩＰ在血沉标黄层涂片中也检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，用亲和系－生物素过氧化物酶复合物方法在福尔马林固定的组织切片中也检出了ＢＶＤ－Ｍ     

牦牛病毒性腹泻／粘膜病防制中间试验

从１９９１￣１９９３年，应用牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏ系弱毒冻干苗６０万头份对我省青南地区玉树、称多、泽库三个ＢＶＤ／ＭＤ发病严重的县进行了大面积的预防注射，调者被注射牛７６７９７头；同时在该地区应用猪瘟弱毒苗预防注射牛２０万头份，调查被注射牛４８０００头。试验结果：应用ＢＶＤ／ＭＤ Ｏ系弱毒冻干苗使牦牛ＢＶＤ／ＭＤ死亡率由６．６１％降至０．２４％，应用猪瘟弱毒苗亦对该病有较好的防制效     

BVD-MDV细胞毒的快速粗提

采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒。经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩前毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高。将其作为检测抗原及免疫抗原，应用到ＢＶＤ－ＭＤＶ单克隆抗体的研制中，效果均较理想。试验证明，该方法具有简便、省时、费用低，实用等优点，适合基层推广应用     

BVD—MDV细胞毒的快速粗提

采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒，经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高，将其作为检测抗原及免疫抗原，应用以ＢＶＤ－ＭＤＶ单克隆抗体的研制中，效果均较理想，试验证明，该方法具有简便，省时，费用低，实用等优点，适合基层推广应用。     

抗牛病毒性腹泻/粘膜病病毒单克隆抗体的抗原结合位点分析

用ＥＬＩＳＡ测定了８株抗牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原结合位点，通过ＥＬＩＳＡ相加试验证实，８株单克隆抗体识别的抗原位点大多数比较接近，其中５Ａ５与５Ｃ２，５Ａ９与５Ｆ１１，以及５Ｄ７、５Ｃ９、２Ｇ３、４Ｅ６四株所识别的抗原位点相同或非常接近。     

抗牛病毒性腹泻／粘膜病病毒单克隆抗体的抗原结合位点分析

用ＥＬＩＳＡ测定了８株抗牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原结合位点，通过ＥＬＩＳＡ相加试验证实，８株单克隆抗体识别的抗原位点大多数比较接近，其中５Ａ５与５Ｃ２，５Ａ９与５Ｆ１１，以及５Ｄ７、５Ｃ９、２Ｇ３、４Ｅ６四株所识别的抗原位点相同或非常接近。     

检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒抗原试剂盒的研制及应用

本研究在双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）抗原的基础上，研制了检测ＢＶＤＭＤＶ抗原的试剂盒。经试验证明特异、敏感，４℃保存６个月检测结果稳定；与原方法比较，易于保存及运输，使用方便，为商品化推广应用提供了前提。     

牛病毒性腹泻病诊断的研究进展

牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤＶ）是黄病毒科瘟病毒属的成员。它主要引起牛的腹泻并呈现多种临床症状，该病给全世界各国的养牛业造成了很大危害。国内外对ＢＶＤＶ检测技术的研究不断深入，已从病毒原分离鉴定及免疫学检测发展到基因序列和结构测定的分子生物学水平。     

鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒的调查

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对吉林省某地区育成梅花鹿、育成马鹿及马鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）进行了调查．结果育成梅花鹿的带毒率为３４．１％（２８／８２）；育成马鹿的带毒率为１９，６％（１８／９２）；马鹿带毒率为４４．４％（８／１８）。应用电子显微镜对部分ＥＬＩＳＡ阳性及阴性样品进行负染观察、结果ＥＬＩＳＡ阳性样品中均见有ＢＶＤ－ＭＤＶ粒子．ＥＬＩＳＡ阴性样品中均未观察到ＳＶＤ－ＭＤＶ粒子．本试验结果表明，鹿也可感染ＢＶＤ－ＭＤＶ，其在流行病学中的意义有待于进一步研究。     

地高辛标记核酸探针检测牛粘膜病病毒

本课题建立了地高辛标记核酸探针检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤＶ）的诊断方法。根据ＢＶＤＶ基因序列的结构特点,在编码非结构蛋白ｐ１２５高度保守基因区内,设计合成一对特异性引物。以ＰＣＲ技术从ＢＶＤＶ基因重组质粒中扩增出了ＢＶＤＶ特异的、保守的４００ｂｐ核苷酸片段,经纯化后,地高辛标记,制备牛病毒性腹泻病毒的特异性核酸探针。通过检测ＢＶＤＶ细胞培养物、相关病毒及核酸载体和ＢＶＤＶ细胞培养物的总Ｒ     

安徽、江苏、广西部分地区水牛牛病毒性腹泻/粘膜病血清学监测

用微量细胞中和试验,对安徽、江苏和广西的１２个县部分水牛群血清样品（ｎ＝３４３）牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）中和抗体进行检测。结果从１０个县的血清中检出了ＢＶＤ／ＭＤ抗体,其中安徽水牛血清（ｎ＝１５０）ＢＶＤ／ＭＤ抗体平均阳性检出率为２４．２％（范围１０％～４６．７％）,江苏（ｎ＝１４３）ＢＶＤ／ＭＤ平均阳性检出率为８．４％（０％～１１．１％）,广西（ｎ＝５０）ＢＶＤ／ＭＤ平均阳性检出率为１０．０％（０％～１５．４％）。本调查说明我国水牛群中ＢＶＤ／ＭＤ流行在扩大。     

牛体外胚胎繁殖系统的病毒检测

牛体外胚胎繁殖系统的病毒检测ＡｖｅｒｙＢｅｔａｌ感染病毒性腹泻（ＢＶＤ）病毒的牛主要导致繁殖失能，其中持续感染牛是ＢＶＤＭ主要传染来源，因而，在体外胚胎繁殖过程中，防止偶发的ＢＶＤ病毒意外感染受体是很重要的。如果将ＢＶＤ病毒阳性的胚胎繁殖到ＢＶＤ特异...     

牛病毒性腹泻／粘膜病O系弱毒冻干苗的试验生产和检验报告

１９９２￣１９９４年共试生产牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏ系细胞培养弱毒冻干苗６０万头份，通过实验室内安全检验、效力检验、无菌检验、水份测定、真空度检验、物理性状检验及在玉树、称多和泽库三个疫病发生严重的县试用，证明《ＢＶＤ／ＭＤＯ系细胞培养弱毒冻干苗制造与检验试行办法》可行，并为制定该苗的制造与检验规程提供了依据。