大熊猫血清犬腺病毒抗体调查

腺病毒 (Adenovirus,AV)可感染人和多种动物 ,在国内外有很多报道。已报道的动物感染宿主主要有牛、羊、犬、禽类以及狐狸、狼、貉、丛林狼、臭鼬、浣熊、水貂、雪貂、熊等野生动物 ,1996年 Woods等又发现腺病毒能引起鹿的出血性病变 [1] ,而且还怀疑与鹿表现为同样病变的叉角羚可能也是由于腺病毒感染引起的。犬腺病毒 (Canine adenovirus,CAV)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员 ,是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、感染动物最广的病毒 [2 ,3 ]。CAV分为犬腺病毒 型 (CAV- 1)和犬腺病毒 型(CAV- 2 ) ,其中 CAV- 1又名 :犬传染性肝炎病毒 ,罗巴斯病病毒 (Rubarth disease virus) ,狐狸脑炎病毒 ;CAV- 2又名犬喉气管炎病毒 ,幼犬咳嗽病毒 [2 ] 。CAV- 1是早在 192 5年由 Green等首次发现可导致狐狸脑炎 ,后来经 Rubarth的动物试验证明能引起犬的传染性肝炎的病原 [3 ,15] 。自那以后 ,有关该病毒引起犬和狐等动物的发病病例举不胜数 ,目前世界上大部分国家和地区都有该病的报道 ,198...     

犬腺病毒感染

犬腺病毒感染(Canine adenovirus infections)是犬的一种病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等.除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物.近年来,国内外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒:犬腺病毒Ⅰ型(Canine adenovirus type 1,CAV-1)是犬传染性肝炎(或称为"Rubarth"氏病)和狐狸脑炎的病原,且能导致眼睛损伤,而其Ⅱ型(CAV-2)则能引起犬的传染性喉气管炎和幼犬肺炎.     

犬传染性肝炎的诊断与防治

犬 传 染 性 肝 炎(Infectious canine hepatitis,ICH)是由犬1型腺病毒(Canine adenovirus type 1,CAV-1)感染犬引起的一种多发性传染病,该病具有传染性强、发病率高、致死率高的特点,是目前对养犬业危害较大的疾病之一.本文系统的对犬传染性肝炎的病原学、流行病学、...     

犬传染性肝炎的流行与防治

犬传染性肝炎(Infectious canine hepatitis,ICH)是由犬传染性肝炎病毒(ICHV)感染引起,是一种犬的急性、高度接触性败血性传染病,主要发生于犬和狐。犬传染性肝炎病毒又称犬腺病毒(canine adenovirus,CAV),属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员,是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、形态结构也研究得比较清楚的一种动物病毒。犬腺病毒广泛分布于全世界,是对我国养犬业、毛皮动物养     

应用Vk_1和激素治疗犬窝咳病的方法和体会

<正>犬窝咳是犬腺病毒2(Canine Adenovirus Vrius Typel2,CAV-2)引起的上呼吸道感染,临床表现主要是传染性咳嗽,也称犬窝咳,对幼犬的生长发育影响很大,也可能继发其它疾病并引起死亡。传统     

犬腺病毒感染

历史犬腺病毒引起的传染病包括传染性犬肝炎、传染性犬喉气管炎和狐脑炎等。1947年,Rubarth首次确认传染性犬肝炎。1959年,Kapsenberg获得分离病毒,并证明犬肝炎和狐脑炎是由同一种腺病毒引起,称为犬腺病毒Ⅰ型(CAV-1)。1962年,Pitchfield等在加拿大一次犬喉气管炎爆发中分离到一种犬腺病毒,即A-26毒株,称为犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)。两型可用血凝抑制试验和中和试验相区别。     

犬腺病毒感染

犬腺病毒感染是犬的一种病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国内外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒:犬腺病毒Ⅰ型(CAV-1)是犬传染性肝炎和狐狸脑炎的病原,且能导致眼睛损伤,而其Ⅱ型(CAV-2)则能引起犬的传染性喉气管炎和幼犬肺炎。     

犬上呼吸道感染综合症

犬上呼吸道感染综合症,是指由非犬瘟热引起的,伴有明显咳嗽症状的犬呼吸道感染性疾病,一般指的是犬传染性气管支气管炎或犬窝咳。 一、病因 1.病毒性因素包括犬腺病Ⅱ型(CAV-2),副流感病毒(CPI),腺病毒Ⅰ型(CAV-1)、呼肠孤病毒Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,以及犬疱疹病毒。CAV-2和CPI可以破坏呼吸道上皮,引起细菌和支原体的继发感染,造成严重的呼吸道损伤。     

犬腺病毒感染

犬腺病毒感染(Canineadenovirusinfections)是犬的一种病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国内外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒:犬腺病毒Ⅰ型(Canineadenovirustype1,CAV-1)是犬传染性肝炎(或称为“Rubarth”氏病)和狐狸脑炎的病原,且能导致眼睛损伤,而其Ⅱ型(CAV-2)则能引起犬的传染性喉气管炎和幼犬肺炎。1984年,夏咸柱等在我国首次分离到犬传染性肝炎病毒,证实了我国犬中也有犬腺病毒Ⅰ型的感染。1989年,钟志宏等从患脑炎的狐狸中分离到了犬腺病毒Ⅰ…     

犬2型腺病毒纤突蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

犬2型腺病毒(canine adenovirus-2,CAV-2)主要引起犬科动物的传染性呼吸道疾病和消化道疾病，且其传染性极强，全球范围内感染率非常高，但现有的临床防治措施难以完全阻断病毒的传播和快速特异性治疗患病动物。为了获得可用于CAV-2基础病毒学研究和临床诊治所需的单克隆抗体，本研究将浓缩纯化的CAV-HN45株灭活后免疫BALB/c小鼠，采用细胞融合技术将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合，经免疫过氧化物酶单层细胞试验和间接免疫荧光试验筛选出2株能分泌CAV FIBER蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞系：1-A12-C6、8-A12-B10,抗体亚类分别为IgG2a和IgG2b。腹水纯化后质量浓度为1 g/L抗体的间接免疫荧光效价为1-A12-C6:1∶8 192; 8-A12-B10:1∶2 048,2株单克隆抗体均不能用于免疫印记试验检测。抗体具有体外中和病毒的活性，1-A12-C6和8-A12-B10抗体的CAV中和效价分别为1∶256和1∶64。本研究单克隆抗体的成功制备为建立快速、高效的CAV-2免疫学检测技术和CAV-2的防治提供了依据。     

犬瘟热病毒单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立

本研究利用原核表达、纯化的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)N 蛋白免疫BALB/C小鼠,成功筛选到两株分泌CDV N 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为D3、D6。2株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体敏感性、特异性良好,能识别不同来源的犬瘟热病毒株,单抗亚类均为IgG1。以D3作为金标抗体,D6作为检测抗体,兔抗鼠IgG作为质控线抗体,制备犬瘟热病毒胶体金检测试纸条,检测犬瘟热病毒敏感性为1000TCID50,能有效检测区分犬瘟热病毒、犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬腺病毒2型(Canine adenovirus type 2,CAV2)、狂犬病病毒(Rabies virus,RV)。综上,本研究建立的胶体金试纸条检测方法,灵敏度高、特异性强,适用于犬瘟热病毒临床快速诊断。     

犬传染性肝炎病原、诊断与实验免疫研究

首次应用原代和传代犬肾细胞从临床疑似犬传染性肝炎(ICH)和狐狸脑炎(FE)的犬、狐病料中分离获得4株腺病毒。经形态学、理化学、生物学等系统鉴定,证明为犬1型腺病毒(CAV-1),即犬传染性肝炎病毒ICHV)和狐狸脑炎病毒(FEV).以往对 ICH 犬肝测不出HA 效价的原因,是因为其中含有大量不耐热的非特异 HI 物和可与完整病毒竞争红细胞 HA 受体的单价游离血凝素.通过加热和加犬2型腺病毒(CAV-2)免疫血清的方法,可检出其中的 CAV-1血凝素而确定 ICH 诊断.用 ICH 犬肝中的游离血凝素免疫 ICH 易感犬,可使其产生抗 CAV-1HI抗体,获得 ICH 免疫.研究了用于检测 ICH 犬血清、腹水和肝脏样品的处理方法,首先建立了 ICH 微量补反诊断法;在对 ICH 犬肝 HA 特性研究的基础上,应用新鲜或醛化人0型红细胞和犬抗 CAV-1与 CAV-2血清,又研究成既可用于临床诊断又可用于抗体调查的微量血凝诊断法.进行了 CAV-1和 CAV-2弱毒苗的复制和实验免疫试验,证明 CAV-2弱毒复制苗对各类犬、狐均安全有效.而且对 CAV-1母源抗体有较强的抵抗力.通过回忆反应和特异淋转试验,汪明 CAV-2弱毒对 ICH 的免疫主要在于细胞免疫.     

5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立

为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型(canine adenovirus type 1,CAV-1)、犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)、犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)、犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、犬细小病毒(canine parvovirus,CPV) 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2～3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10～100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。     

犬传染性喉气管炎

犬传染性喉气管炎(ICL)是由犬2型腺病毒(CAV-2)引起犬和狐狸的一种慢性传染病,其特征为喉炎、气管炎、支气管炎和扁桃体炎。CAV-2最早由 Ditchfield 等分离自加拿大暴发的犬喉气管炎病例。目前已有许多国家和地区也分离到 CAV-2,它给养犬业和养狐业造成严重损失。通过病毒分离和血清学调查表明,该病已传入我国。现将有关资料简要介绍如下。     

犬腺病毒1型和2型的差异

犬腺病毒是腺病毒科典型的成员。根据其血凝抑制作用和中和作用的不同划分为两个血清型,即犬1型腺病毒(CAV-1)和犬2型腺病毒(CAV-2)。以前认为 CAV-1是狐狸脑炎和犬传染性肝炎的致病因子,而 CAV-2是犬喉气管炎的病因。事实上,犬腺病毒两个成员之间不但致病性不同,而且病毒的肜态结构、抗原特性、血凝特性、组织培养特性乃至基因组成上都存在着明显的区别。     

犬腺病毒感柒

犬腺病毒感染是一种犬的病毒性传染病,主要引起犬的肝炎、呼吸道病变及眼睛疾患等。除犬以外,尚可发生于狼、狐、熊等动物。近年来,国外已证实存在两株相互有关但各具特点的腺病毒,它们在结构,致病性等方面有所不同。目前比较一致的看法是:犬腺病毒Ⅰ型 (Canine adenovirus typeⅠ,     

犬传染性肝炎的诊断与防治

由犬传染性肝炎病毒(CAV-Ⅰ)引起的疾病在犬、狐、熊等动物中有很强的致病性。犬传染性肝炎病毒主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎。该病毒广泛分布于全世界,是对犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一。本文主要就CAV-Ⅰ的流行状况、诊断及免疫作一简介。     

腺病毒载体在基因治疗和疫苗研究中的应用

自从20世纪50年代开始认识腺病毒(Adenovirus)以来,对腺病毒的生物学和免疫学特征已经有比较多的认识.腺病毒科包括禽腺病毒属(Aviadenovius)和哺乳动物腺病毒(Mastadenov irus)两个属.除人腺病毒以外,一些哺乳动物的腺病毒和禽腺病毒也成为基因治疗和载体疫苗研究的热点,如猪腺病毒3型(PAV-3)[1～5]、牛腺病毒3型(BAV-3)[6、7]、绵羊腺病毒(Ovine adenovirus,OAV)[8]、禽腺病毒(Aviadenovirus)[9,10]、犬腺病毒(Canine adeno、virus,CAV)和黑猩猩腺病毒(Chimpanzee adeno-virus).     

表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒免疫原性测定

为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAXLPH和CAV-2/CDVLPH联合免疫组,CDV弱毒疫苗组和pVAX1空载体组分别作为阳性和阴性对照组。利用间接ELISA和CDV中和试验检测免疫犬的抗CDV体液免疫水平、CAV-2 HI试验检测免疫犬的抗CAV体液免疫水平、淋巴细胞转化试验检测免疫犬的抗CDV和抗CAV-2细胞免疫水平,分析CAV-2/CDVLPH的免疫性。结果,能够在各试验组免疫犬血清中检测到抗CDV ELISA抗体和抗CDV中和抗体,同时在第1组和第3组免疫犬的血清中检测到抗CAV-2的HI抗体,免疫犬的外周淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显增殖,第2组的免疫应答水平低于第3组,第1组又高于第3组,但低于CDV弱毒疫苗免疫组,试验表明CAV-2/CDVLPH可同时诱导免疫犬产生抗CDV和CAV特异性免疫,CAV-2/CDVLPH与pVAXLPH相比能诱导犬产生较高的特异性免疫应答,然而低于CDV弱毒疫苗。     

5种常见犬腹泻病毒基因芯片检测方法的建立

为建立一种简便、快速、高效的可同时区分犬腺病毒1型（canine adenovirus type 1,CAV-1）、犬腺病毒2型（canine adenovirus type 2,CAV-2）、犬冠状病毒（canine coronavirus,CCV）、犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）、犬细小病毒（canine parvovirus,CPV） 5种常见犬腹泻病毒的基因芯片诊断方法,本研究以CAV-1、CAV-2、CCV、CDV、CPV 5种犬腹泻病毒为靶病毒,根据NCBI上收录的病毒基因序列在其保守区域内设计引物,在此基础上根据变异区域设计针对每种病毒的探针2~3条,优化检测体系的各反应条件,确定该检测方法的特异性与敏感性,建立可同时区分5种病毒的基因芯片检测方法。结果显示,建立的基因芯片检测方法可同时检测以上述5种犬腹泻病毒,其中PCR的退火温度为55℃、延伸时间为1 min 15 s;探针与PCR产物的杂交温度40℃、杂交时间2.5 h时,该方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒标准品的检测限分别为0.2 fg/μL、2 fg/μL、2 fg/μL、20 pg/μL和0.02 fg/μL,具有较高的灵敏性;同时对犬副流感病毒进行特异性试验,发现无阳性信号出现,具有较强的特异性;对14份临床腹泻样品检测结果显示,基因芯片方法对CAV-1、CAV-2、CCV、CDV和CPV 5种病毒的阳性检出率分别为28.57%、50.00%、64.28%、14.28%和85.71%,并且基因芯片检测方法的敏感性较PCR要高10~100倍。以上结果表明,本研究建立的基因芯片检测方法具有特异、敏感等特点,对临床中犬类混合感染病毒检测具有一定的诊断意义。