灌服酒炙车前子活性组分的胎衣不下奶牛血清代谢产物LC-MS/MS法分析

早期研究过程中发现活性组分Ⅲ和Ⅵ为治疗奶牛胎衣不下的有效物质，并已阐明其化学成分，但尚未鉴定活性组分在体内的代谢产物，因此研究旨在利用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）对活性组分Ⅲ和Ⅵ的血清样品进行分析。以ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱条件，流动相以水（含0.05%甲酸）-乙腈进行梯度洗脱，采用ESI电喷雾离子源，正、负离子模式下收集活性组分Ⅲ和Ⅵ的血清样品的质谱数据，并根据碎片离子以及相对分子质量等信息与网络数据库以及相关参考文献进行比对。活性组分Ⅲ发现包括胺类、脂类在内的共24个化合物，活性组分Ⅵ包括酚类、烷类等共26个化合物，为研制高效、经济和便捷的防治奶牛胎衣不下的中药针剂提供了新方向。     

磁性石墨烯固相萃取-高分辨质谱法快速测定动物源性食品中磺胺类药物残留

采用高效液相色谱-静电场轨道肼高分辨质谱技术,建立了动物源性食品中13种磺胺类药物残留的磁性石墨烯固相萃取-高分辨质谱分析方法。样品采用0.1%的甲酸/乙腈提取,目标物通过磁性石墨烯粉吸附,除去杂质,然后再解析目标物的方法获得干净的样品基质。经Waters UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱分离,液相色谱-高分辨质谱仪进行检测。结果表明,13种目标物在2.050.0μg/L范围内线性关系良好(r20.99)。在动物源性食品基质中,目标化合物在2、5、10μg/kg 3个加标水平的平均回收率在77.8%98.4%,相对标准偏差(RSD)为4.1%10.1%。该方法净化速度快、效率高,可用于动物源性食品中磺胺类药物残留筛查检测。     

采用高分辨离子淌度液质联用技术鉴定紫苏的化学成分

采用高分辨离子淌度液质联用技术,分析鉴定中药紫苏茎叶中的主要化学成分,为紫苏资源的开发及临床应用提供依据.采用色谱柱为HSS T3 (2.1×100 mm,1.8μm),运用色谱梯度洗脱溶剂A:水(0.1%甲酸)和B:乙腈(0.1%甲酸),操作条件为:流速0.45 mL·min~(-1),柱温30℃,进样体积1μL;通过质谱仪(SYNAPT G2-Si HD英国,沃特世)的高能量质谱碎片信息,参照数据库和文献资料从紫苏茎叶中鉴定10种化合物,包括6种黄酮及其苷类成分(芹菜素6,8-二葡萄糖苷、木樨草素-7-氧-二葡萄糖醛酸苷、山奈酚3-葡萄糖醛酸-7-葡萄糖苷、芹菜素-7-氧-二葡萄糖醛酸、山奈酚-3-O-D-吡喃葡萄糖醛酸糖苷、芹菜素-7-氧-葡萄糖醛酸苷),以及4种有机酸类(咖啡酸、咖啡酸四聚体、迷迭香酸、葵二酸).     

长序三宝木抗氧化活性成分研究

[目的]长序三宝木(Trigonostemon howii)是我国特有的药用植物,作为中国热带药用植物中具有结构和生物学意义的天然产物研究的一部分,对长序三宝木进行化学研究,并且探究了长序三宝木中化学成分的抗氧化活性.[方法]采用甲醇加热回流提取,结合MCI柱色谱、正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等分离技术及现代波谱技术对长序三宝木的抗氧化活性成分进行分离纯化;用广泛的光谱方法分离得到的化合物的结构进行了鉴定,并将已知化合物与文献资料进行比较,鉴定结构;同时进一步采用DPPH自由基清除实验、化合物清除羟自由基实验研究了部分化合物对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基和羟基自由基清除活性.[结果]共分离鉴定了8个化合物,分别为:4,5-二甲氧基铁屎米酮(1)、尿苷(2)、东莨菪内酯7-羟基-6-甲氧基香豆素(3)、trimethyl-3,4-dehydrochebulat(4)、没食子酸甲酯(5)、ficusol(6)、吐叶醇(7)和蚱蜢酮(8),没食子甲酸为长序三宝木正丁醇层萃取物中抗氧化的最主要成分,所有化合物均为首次从该植物中分离得到.其中化合物4、5和6具有显著的抗氧化活性,化合物5活性最好,其清除DPPH自由基和羟基自由基的IC50仅为0.23μmol/L和0.71μmol/L,比阳性对照维生素C(Vc)强20倍.结合在分离纯化过程中化合物表现出的理化性质及其构效关系,研究发现化合物的抗氧化能力主要来源于其结构中的酚羟基,其酚羟基数目越多抗氧化能力越强.[结论]化合物4、5和6抗氧化作用明显并具有有剂量依赖性.长序三宝木中化学成分生物活性多样,且具有较高的药用研究价值,因此长序三宝木应用价值的深入探索将进一步拓宽天然抗氧化剂研究与开发,同时为新的药物来源开辟新的道路.     

东北野生薄荷挥发油成分及抑菌活性研究

[目的]研究东北野生薄荷的挥发油化学成分及抑菌活性。[方法]运用水蒸气蒸馏法提取挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对挥发油化学成分进行分析。运用滤纸片琼脂板扩散法和二倍稀释法,对挥发油的抑菌活性和最小抑菌浓度进行研究。[结果]薄荷挥发油出油率为0.8%,通过运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定出东北野生薄荷的挥发油成分有59种。提取出的薄荷挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等常用菌种均有抑制作用,且抑菌圈直径分别为10.92、10.25、9.18 mm,最小抑菌浓度分别为1.56、3.13、12.50μL/mL。[结论]用GC-MS法检测出东北野生薄荷的挥发油化学成分较多,且挥发油表现出良好的抑菌活性,具有很大的市场潜力。     

脱皮大环柄菇化学成分分析及其抗氧化活性评价

[目的]分析脱皮大环柄菇化学成分并评价其抗氧化活性,为脱皮大环柄菇的综合利用提供科学依据.[方法]联合运用丙酮提取和真空旋转水蒸气蒸馏法从脱皮大环柄菇新鲜子实体中获得脱皮大环柄菇挥发油和丙酮粗提物,采用气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)分析脱皮大环柄菇挥发油化学成分,运用试管预试法检测丙酮粗提物的化学成分,通过自由基清除试验评价其抗氧化活性.[结果]GC-MS分析结果表明,脱皮大环柄菇挥发油主要化学成分为酮类化合物,其中4-甲基-4-羟基戊酮相对含量高达86.32%.试管预试法检测结果显示,脱皮大环柄菇丙酮粗提物含有生物碱、甾醇和萜类成分.自由基清除试验结果表明,脱皮大环柄菇丙酮粗提物具有有效的抗氧化活性,其清除羟自由基(·OH)和DPPH自由基的半数清除浓度(EC50)分别为260.45和552.87μg/mL.[结论]脱皮大环柄菇挥发油化学成分独特,含7种酮类化合物、1种醇类化合物和1种酯类化合物,丙酮粗提物因含有生物碱、甾醇和萜类等活性成分且具有有效的抗氧化活性,值得进一步研究开发.     

畜禽肌肉中氟虫腈及其代谢产物残留量的Orbitrap高分辨液相色谱串联质谱测定方法研究

应用Orbitrap高分辨液相色谱串联质谱联用仪建立适用于畜禽肌肉中氟虫腈及其代谢物的分析检测方法。畜禽肌肉样品采用乙腈水溶液(体积比8∶2)超声提取,经PRiME HLB柱净化后,选择Thermo Fisher Hypersil Gold C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,粒径1.7μm)进行分离,在Orbitrap高分辨质谱Full MS/dd-MS~2扫描模式下,采集Negative数据进行定性确证和定量分析。结果表明,氟虫腈及其代谢物在Negative模式下易生成前体离子[M-H]~-峰,用3种不同的碰撞能量碎裂前体离子,得到的碎片离子中[M-H-HCl]~-峰、[M-H-HCl-CF_3]~-峰和[M-H-HCl-SO_2CF_3]~-峰较为稳定,特征碎片均可以作为定性确证依据和定量离子,在0.1 ng/mL～20 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数r~2均0.99,各组分的平均回收率为95.2%～104.8%,相对标准偏差为5.95%～9.25%。方法准确度高、精密度好,便捷高效,可直接应用于畜禽肉中多种农兽药残留筛查和定量测定。     

桉树树皮化学成分分析

[目的]采用我国木材化学成分分析国家标准,对人工林桉树树皮的化学成分进行了测定和分析。[方法]测定桉树树皮的综纤维素、纤维素、木质素、灰分、抽提物含量,并与其他4种植物进行比较。[结果]人工林桉树树皮化学成分含量分别为,综纤维素79.35%,纤维素46.81%,木质素19.69%,1%NaOH抽提物19.83%,冷水抽提物5.30%,热水抽提物8.11%,苯醇抽提物2.63%,灰分2.82%。[结论]桉树树皮综纤维素、纤维素、灰分、抽提物含量较高,木质素含量较低。     

基于代谢组学分析桃胶中酚类化合物含量及抗氧化活性

为深入了解桃胶的营养价值,首先分析了5种不同颜色桃胶提取液中总酚含量及抗氧化活性差异,然后基于高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(LC-QTOF-MS)和高效液相色谱串联质谱(LC-MS)的代谢组学方法对桃胶提取液中的酚类物质进行定性定量分析.结果表明,不同颜色桃胶提取液中总酚含量和抗氧化活性存在明显差异,颜色越深总酚含量越多、抗氧化活性越强,颜色最深样品(S5)中总酚含量为28.23μmol/g,是颜色最浅样品组的7.8倍.基于LC-QTOF-MS分析桃胶提取液,共鉴定出32种活性化合物,其中黄酮类化合物有20种;基于LC-MS的靶向代谢组学方法对18种酚类化合物进行定量分析,发现橙皮素、柚皮素、表儿茶素、圣草酚含量最多.相关性分析结果表明,18种酚类化合物中,14种酚类化合物与总酚含量及抗氧化活性呈显著正相关关系.     

化橘红香精油化学成分的研究

用毛细管气相色谱和气相色谱—质谱联用系统对化橘红香精油的化学成分进行了研究。从70m×0.41mm Carbowax-20M玻璃毛细管柱中分离得到的峰,采用质谱方法鉴定出16个成分。其主要成分是柠檬烯(55.6％),β-蒎烯(12.0％),r-松油烯(11.6％)等。     

大叶桉乙醇提取物对茎瘤芥霜霉病的生物活性及其活性成分分析

本试验采冷浸法用乙醇对大叶桉叶抑菌活性成分进行提取,测定了提取物对茎瘤芥霜霉病菌孢子萌发抑制活性,利用气相色谱-质谱联用仪分析了其抑菌化学成分。结果表明,用20 mg/m L、10 mg/m L、5 mg/m L、2.5 mg/m L、1.25 mg/m L的大叶桉提取物对茎瘤芥霜霉病菌孢子萌发均有抑制活性,且抑制作用随着设置浓度的减小逐渐下降。通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)共检测到17种化合物,叶绿醇、1-(2-甲氧基-1-甲基乙氧基)异丙醇、米氏碱是大叶桉乙醇浸提物的主要化学成分,含量分别为38.31%、17.94%、10.26%。该研究明确了大叶桉叶乙醇浸提物的化学成分,为桉树资源综合开发利用奠定了基础。     

液-质联用分析锦锈杜鹃叶黄酮类成分

[目的]采用高效液相色谱—电喷雾离子阱质谱技术对锦锈杜鹃叶中的黄酮类化合物进行分析和鉴定。[方法]色谱条件为:Wa-ters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A相为水(含浓度0.1%甲酸),流动相B相为无水甲醇;梯度洗脱程序:0～24 min,31%～42%B;24～30 min,42%～50%B;30～35 min,50%～60%B;35～40 min,60%B;进样量20μl;流速为0.7 ml/min;柱温30℃;检测波长356 nm。质谱条件为:电离源:电喷雾离子源;负离子模式扫描;干燥气温度:350℃;干燥气体积流量(N2):10 L/min;雾化气压力275.8 KPa;毛细管电压:3.5 KV,毛细管出口电压100 V;质量扫描范围:m/z 200～700。使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。[结果]通过与文献数据和部分标准品对照,推断出锦锈杜鹃叶中含有5个黄酮类化合物,分别是金丝桃苷、异槲皮苷、广寄生苷、槲皮苷、槲皮素。[结论]液质联用技术具有快速、准确、有效的特点,是一种相对较好的定性测定方法。其对锦锈杜鹃叶中的黄酮类化合物进行分析和鉴定,为今后锦锈杜鹃的应用提供了一定的理论依据。     

十字花科蔬菜中莱菔素与莱菔硫烷含量测定方法研究

为快速、准确定性定量十字花科蔬菜中的活性成分莱菔素与莱菔硫烷,本试验建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定萝卜、西兰花、白菜中莱菔素与莱菔硫烷含量的方法.采用水解-乙酸乙酯提取莱菔素和莱菔硫烷,Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)...     

芍药花精油化学成分及其抗氧化活性

【目的】研究不同采摘时间鲜芍药花精油的化学成分及其体外抗氧化活性,为适时采收、合理开发及利用芍药花资源提供科学依据。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取日出前(06:00-07:00)和下午(17:00-18:00)采摘的芍药花精油,通过气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析鉴定,采用峰面积归一化法确定各组分的相对含量;测定质量浓度为20,50,100,150和200μg/mL芍药花精油溶液对DPPH自由基、ABTS自由基的清除效果,及对亚油酸脂质过氧化的抑制作用。【结果】从采摘于日出前的芍药花精油中共鉴定出35种化学组分,占精油总量的98.85%,主要成分为正二十五烷(21.14%)、正二十九烷(10.52%)、正二十三烷(9.30%)、棕榈酸(9.14%)、亚油酸(8.43%)、正二十四烷(6.74%)、3-十二烷基-2,5-呋喃二酮(4.13%)、正二十一烷(3.58%)、金合欢基丙酮(3.45%)、正二十六烷(3.21%)、香叶基芳樟醇(2.78%)等。从采摘于日出后经日晒的芍药花精油中共鉴定出27种化学组分,占精油总量的98.10%,主要成分为正二十五烷(22.54%)、棕榈酸(11.81%)、正二十七烷(10.27%)、正二十三烷(8.28%)、六氢金合欢基丙酮(8.80%)、金合欢基丙酮(7.35%)、正二十四烷(6.07%)、正二十六烷(3.96%)、正二十一烷(3.90%)、β-4,8,13-杜法三烯-1,3-二醇(3.40%)等。精油体外抗氧化活性结果表明,芍药花精油对DPPH自由基和ABTS自由基具有一定的清除能力,同时对亚油酸脂质过氧化具有一定的抑制作用,且体外抗氧化作用随着精油质量浓度的增大而增强。【结论】芍药花精油化学成分较丰富,且具有较好的体外抗氧化活性,在食品香料和医药方面具有较高的开发利用价值。     

枇杷皮色素提取物的体外抗氧化活性研究

[目的]研究枇杷皮色素提取物的体外抗氧化活性。[方法]以总还原力、DPPH自由基和ABTS自由基清除作用、金属离子螯合作用为指标评价枇杷皮色素提取物的体外抗氧化活性。[结果]枇杷皮色素提取物具有一定抗氧化活性,各项抗氧化活性指标与样品量呈量效关系。色素提取物对DPPH自由基和ABTS自由基清除作用、金属离子螯合作用的IC50分别为253.69、81.23、273.42μl。[结论]枇杷皮色素提取物具有一定的体外抗氧化活性,可作为具抗氧化活性的天然色素进行开发利用。     

大花蕙兰鲜花挥发油GC-MS分析及其抗菌活性研究

分析了海南岛人工栽培的大花蕙兰品种‘大凤’(Cymbidium hybridum‘Dafeng’)鲜花的挥发油成分。采用溶剂萃取法提取其鲜花挥发油,用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行化学成分分析。结果显示,从大花蕙兰鲜花挥发油中鉴定出35个化合物,占总油量的85.65%,其主要成分为亚麻酸乙酯(41.29%)和亚油酸乙酯(13.74%)。用滤纸片琼脂扩散法测定其抗菌活性,结果表明,该挥发油对金黄色葡萄球菌有抑制作用。     

柳叶腊梅叶乙醇提取物成分分析及其体外抗氧化研究

[目的]柳叶腊梅是我国特有品种,在民间常被畲族人民用于治疗感冒及肠胃不适,曾被誉为江西四大著名药材之一.柳叶腊梅叶中富含多种生物活性成分,其中,黄酮类化合物是柳叶腊梅叶中含量较高且具有生物活性的成分之一.通过鉴定柳叶腊梅叶乙醇提取物中的黄酮类化合物的成分组成,测定其体外抗氧化活性,确定其中主要抗氧化活性物质等,为柳叶腊梅叶的功能作用提供依据.[方法]柳叶腊梅叶经超声提取、聚酰胺树脂纯化得到柳叶腊梅叶乙醇提取物.利用LC-MS对柳叶腊梅叶乙醇提取物的成分进行分析,推测出可能的成分后,采用HPLC比对标准品,并通过加标实验确定其具体成分.体外抗氧化实验测定柳叶腊梅叶乙醇提取物清除自由基能力和还原力.利用HPLC测定柳叶腊梅叶乙醇提取物清除ABTS和DPPH自由基的主要活性物质.[结果]利用LC-MS和HPLC共定性及定量测出9种黄酮类物质,包括芦丁(2.612±0.275)μg/mg、金丝桃苷(5.308±0.093)μg/mg、异槲皮苷(13.301±0.072)μg/mg、山奈酚-3-O-芸香糖苷(1.321±0.097)μg/mg、木犀草素-5-O-葡萄糖苷(13.479±0.041)μg/mg、紫云英苷(13.959±0.025)μg/mg、阿福豆苷(9.781±0.033)μg/mg、槲皮素(45.489±1.206)μg/mg、山奈酚(51.293±0.715)μg/mg等9种黄酮单体物质.其中,山奈酚-3-O-芸香糖苷和阿福豆苷在柳叶腊梅叶总黄酮中首次发现.柳叶腊梅叶乙醇提取物具有良好的抗氧化活性,其体外清除ABTS自由基和DPPH自由基的IC50值分别为(54.588±4.117)μg/mL和(28.053±1.778)μg/mL.柳叶腊梅叶总黄酮在20μg/mL至120μg/mL的选定范围内,铁还原能力呈剂量依赖性.利用HPLC测定出柳叶腊梅叶乙醇提取物清除ABTS和DPPH自由基的主要活性物质为槲皮素和山奈酚.另外,金丝桃苷、异槲皮苷和紫云英苷3种黄酮单体物质,也具有清除ABTS自由基和DPPH自由基的作用,但活性作用明显弱于槲皮素和山奈酚.[结论]利用LC-MS和HPLC鉴定出柳叶腊梅叶乙醇提取物9种成分.柳叶腊梅叶乙醇提取物具有良好的体外抗氧化活性,并且主要活性物质为槲皮素和山奈酚.     

蔬菜中萝卜硫素的质谱测定方法

[目的]建立萝卜硫素的液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)快速测定方法.[方法]采用Acquity UPLC BEH Amide(150 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱进行色谱分离,流动相为含0.04％乙酸的乙腈与0.04％乙酸水溶液梯度洗脱12 min,流速为0.2 mL/min;在质谱正离子模式下用多反应离子监测(MRM)模式来进行定量测定.[结果]萝卜硫素在9.7～310.0μg/L线性关系良好(r=0.9995),回收率为74.2％～124.2％,RSD为1.35％～7.19％;测定结果重复性好,RSD为2.93％;方法的定量限为0.0025μg/L(S/N=10),检出限为0.0012μg/L(S/N=5).[结论]该方法灵敏度高、选择性好,适用于蔬菜遗传育种、营养和药用价值开发研究中萝卜硫素的快速测定.     

液相色谱质谱法测定萤火虫荧光素

[目的]建立快速测定D-虫荧光素的液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)分析方法,并对荧光素的碎裂机理进行解析。[方法]采用Shim-pack VP-ODS(150 L×2.0 mm,5μm)色谱柱,甲醇、水梯度洗脱12min进行色谱分离;在质谱正离子模式下,用6对反应监测离子对(MRM)进行定性、定量分析。[结果]目标化合物在0.625～125.000μg/L线性关系良好(r=0.996 9),检出限为0.250μg/L(S/N为5)。[结论]该方法灵敏度高、选择性好,不仅可用于萤火虫发光机理、发光强弱差异、发光颜色差异方面的研究,还可以用于其他需要定量测定荧光素的研究。     

QuEChERS-高效液相色谱-串联飞行时间高分辨质谱法筛查测定饲料中35种有机磷类药物

[目的]利用高效液相色谱-高分辨四级杆飞行时间质谱(HPLC-QTOF/MS)技术,建立饲料中35种有机磷类药物的快速筛查方法.[方法]饲料样品经乙腈-0.2％甲酸溶液提取,QuEChERS方法净化,建立了35种分析物的数据库.目标药物经Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,在正离子模式下进行数据采集,可在7 min内实现对35种杀虫剂药物的良好分离.[结果]在10、50、100μg/kg添加浓度下的回收率为80.87％～114.21％,相对标准偏差(RSD)为3.69％～11.65％(n=6),方法定量限(LOQ,S/N=10)为0.2～0.5μg/kg,在5～100μg/L质量浓度范围内呈良好线性(R2≥0.9984).结合精确质量数、保留时间和同位素峰形匹配度对目标化合物进行快速筛查与确证.[结论]该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于饲料中有机磷类药物残留的高通量筛查与定性鉴定.