剪股颖粒线虫幼虫形态与分子检测方法

剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)是牧草、草坪上的重要线虫,该线虫在进口草籽中常以幼虫形态出现,与其它粒线虫属幼虫形态相似,很难快速鉴定到种.本实验通过对单条幼虫DNA进行提取和PCR扩增,获得其rDNA的ITS区域,测序后与基因库中的剪股颖粒线虫的rDNA的ITS区域序列进行比较,其结果与基因库中编码为AF396343.1的核酸序列吻合,从而鉴定为剪股颖粒线虫.此外,还使用5种限制性内切酶对PCR产物进行了酶切,获得了剪股颖粒线虫的ITS-RFLP指纹图谱.     

天津局从进境草籽中截获剪股颖粒线虫

天津局从进境草籽中截获剪股颖粒线虫●高崇省马以桂１９９７年７月２４日和３１日，我们在对从美国进口的两批剪股颖草籽实施室内线虫检验时，检出了国家局明令规定禁止进境的危险性线虫———剪股颖粒线虫（Ａｎｇｕｉｎａａｇｒｏｓｔｉｓ）。这是继深圳局今年４月份截...     

剪股颖粒线虫

剪股颖粒线虫葛建军（农业部植物检疫实验所１００２９）一、名称学名Ａｎｇｕｉｎａａｇｒｏｓｔｉｓ（Ｓｔｅｉｎｂｕｃｈ）Ｆｉｌｉｐ＇ｅｖ异名ＡｆｒｉｎａｗｖｅｌｉＶａｎｄｅｎＢｅｒｇＡｎｇｕｉｌｕｌａａｇｒｏｓｔｉｓ（Ｓｔｅｉｎｂｕｃｈ）Ｅｎｒｅｎｂｅｒ...     

剪股颖粒线虫环介导等温扩增检测技术研究

剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)是牧草上重要的病原线虫,被我国列入检疫性有害生物名单。本研究根据剪股颖粒线虫的rDNA-ITS区序列设计特异性的引物和探针,建立了环介导等温扩增和核酸试纸条检测技术。结果表明,该LAMP-核酸试纸条检测法的特异性强,供试2个剪股颖粒线虫虫株均为阳性,其他23种线虫均为阴性;灵敏度高,最低检测限为3.15 ng,检测灵敏度达1/400条2龄幼虫。该法操作简单,对设备要求低,适合口岸推广应用。     

美国剪股颖种子中剪股颖粒线虫的检疫鉴定

剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)是牧草和草坪上重要的有害生物,被我国列入检疫性有害生物名录。2018年,上海口岸从来自美国的细弱剪股颖种子中截获1种粒属线虫,由于该样品中仅分离得到幼虫,无法进行准确鉴定。本文采用形态学与分子生物学相结合的方法进行检测。采用28S通用引物扩增该线虫序列,测序获得741 bp的序列,与GenBank中登录的Anguina agrostis相似性达99.85%～100.00%;对ITS区扩增并测序,获得776 bp的序列,与GenBank中登录的Anguina agrostis的相似性达99.60%～100.00%。基于28S及ITS区序列构建的系统进化树均显示,该线虫与Anguina agrostis位于同一进化枝上。进一步采用剪股颖粒线虫鉴定国标方法推荐的特异引物对线虫进行PCR扩增,出现目的条带。综合形态学特征及分子鉴定结果,该粒属线虫群体鉴定为剪股颖粒线虫。     

天津局连续两次截获剪股颖粒线虫

天津局连续两次截获剪股颖粒线虫１９９７年７月２４日和３１日，天津局连续两次在来自美国俄勒冈州的剪股颖Ａｇｒｏｓｔｉｓｓｐｐ．草籽中检疫截获剪股颖粒线虫Ａｎｇｕｉｎａａｇｒｏｓｔｉｓ，且两次都挑取了虫瘿。我局及时出具了植物检疫证书和检疫处理通知单，通知...     

首次从进口画眉草中检出剪股颖粒线虫

首次从进口画眉草中检出剪股颖粒线虫陈燕群叶为民罗辉郑文华谢伟宏薛梅周立新廖宝安（深圳动植物检疫局５１８０１０）１９９７年４月３日和５月５日,珠海和深圳两公司经盐田港先后从美国进口画眉草Ｅｒａｇｒｏｓｔｉｓｃｕｒｖｕｌａ（Ｓｃｈｒａｄ．）Ｎｅｅｓ种子２...     

3种粒线虫多重PCR检测方法

 剪股颖粒线虫[Anguina agrostis (Steinbuch,1799) Filipjev,1936]、小麦粒线虫[Anguina tritici (Steinbuch,1799) Filipjev,1936]和维氏粒线虫[Anguina wevelli (Van den Berg,1985) Siddiqi,2000]都是重要的植物病原线虫,它们在成熟种子和虫瘿中的虫态通常是幼虫,而这3种线虫的幼虫形态非常相似,难以根据其特征对它们进行快速准确的种类鉴定。本研究根据这3种线虫的rDNA-ITS区域序列,分别设计筛选了特异性引物AgrF₁/AgrR1、TriF₁/TriR1、WevF₁/WevR1,构建了这3种线虫单条幼虫多重PCR检测体系,获得3个大小差异明显的片段,表明这些引物设计合理,适合这3种线虫的快速准确检测。     

致死粒线虫

致死粒线虫(Anguina funesta)对草业、畜牧业危害极大,被认为是经济意义最大的一种粒线虫.该线虫主要寄主是硬直黑麦草和多花黑麦草,不仅造成寄主植物地上部分产量严重下降,还可传播拉塞氏杆菌(Rathayibacter toxicus),该细菌可侵染多种牧草并产生毒素,牲畜误食受污染的牧草会中毒死亡.致死粒线虫...     

粒线虫分离方法的比较

以剪股颖粒线虫为例,本文比较了浅盘法、直接解剖法、研磨-浅盘法对粒线虫的分离效果。结果表明,直接解剖法分离线虫耗时最少、数量最多,分离数远远大于另外两种方法;而研磨-浅盘法分离得到的线虫数与浅盘法相比差异不大。口岸进行粒线虫检疫时,可以选择直接解剖法进行粒线虫分离,分离效率高。     

小杆线虫(Rhabditis sp.)对温室黄瓜根际植物寄生线虫的抑制作用

近年来，随着我国温室黄瓜复种指数的增大，线虫病害日趋严重。植物线虫不仅本身直接危害植物根系，导致黄瓜减产20％～50％，还常诱发一些病菌的侵害。根结线虫（Meloidogyne spp．）是温室黄瓜发生较严重的一种植物线虫，在常规栽培管理条件下，矮化线虫（Tylenchorhynchus spp．）也具有相当高的种群密度。     

郑州市绿地草坪重要植物寄生线虫鉴定

郑州市部分绿地草坪草存在植株矮小，长势衰弱，叶片枯黄等现象，推测其可能受植物线虫危害。为明确危害郑州市绿地草坪草的寄生线虫种类以及分布情况，2020—2021年，从郑州市12县/区辖区内的30个公园绿地随机采集136份草坪草疑似发病样品。采用浅盘法和漂浮法分离样品中的植物线虫，利用形态学和分子生物学鉴定相结合的方法，对分离到的植物线虫进行种类鉴定。结果表明，18个地区中的98份样品中检测到植物寄生线虫，检出率高达72.1%，覆盖调查地区的60.0%。同时，发现不同公园或绿地之间土壤中线虫数量差异悬殊，其中上街东虢湖公园线虫密度可达98.68条/100 m L土，而新郑龙湖城市湿地公园线虫密度仅为1.10条/100 mL土。种类鉴定结果显示，本次调查共检测到9种重要草坪草植物寄生线虫：小叶螺旋线虫（Helicotylenchus microlobus）、花生茎线虫（Ditylenchus arachis）、马铃薯腐烂茎线虫（D. destructor）、茎线虫属线虫（Ditylenchus sp.）、菲利普孢囊线虫（Heterodera filipjevi）、南方根结线虫（Meloido...     

禾谷孢囊线虫在冬小麦上的繁殖特点及对其生育的影响

室外盆栽试验结果表明，禾谷孢囊线虫（Heteroderaavenae）对冬小麦有很强的侵染力，能在其上大量繁殖。所试初始密度（Pi）分别为0（对照）、1000、3000、5000、7000、10000［卵和二龄幼虫粒（头）／盆（直径10厘米，容积450毫升）〕时，该线虫均可在小麦根部最终形成大量孢囊（Pf），在0－7000的密度范围内，孢囊量随初始密度的增高而增大，其中，7000时的孢囊量明显较多，但10000时的孢囊量却明显下降；禾谷孢囊线虫在冬小麦上具有很高的繁殖速率（Pf/Pi），除密度为10000外，其余的繁殖速率值均大于10，且相互之间无显著差异。本研究还表明禾谷孢囊线虫在所试密度范围内对冬小麦株高、地上部干重（包括籽粒）无显著影响。     

湖州出口竹苗内植物寄生线虫种类调查

通过对浙江省湖州市云峰苗圃、安吉竹博园的各种竹苗根围的寄生线虫种类的调查和鉴定，发现了标明剑线虫（Xiphinema insigne）、胼胝拟毛刺线虫（Paratrichodorus porosus）、双宫螺旋线虫（Helicotylenchus dihystera）、戴维恩垫刃线虫（Tylenchus davainei）和矮化线虫（Tylenchorhynchus sp．）等，并对其进行了形态学描述。通过不同季节定点定株调查统计竹苗根围线虫群体数量发现，竹苗根围线虫群体密度在1年中的变化与气候明显相关。从春到秋，种群数量呈增长趋势．秋天是线虫种群数量、种类最为繁盛时期。     

从拉脱维亚进境的介质中截获桑沃滑刃线虫

2006年2月，广东南海局接受了一批来自拉脱维亚介质的报检，该批介质为原厂包装未使用过的介质，主要成分为苔藓（peat—moss）。介质经我实验室浅盘法浸泡，分离得到4个属（种）的植物寄生线虫，包括有：滑刃线虫（Aphelenchoides sp．）、茎线虫（Ditylenchus sp．）、垫刃线虫（Tylenchus sp．）和长尾线虫（Seinura sp．）。由于滑刃线虫的数量相对较多，在分离的线虫种群中占绝对优势，我们对该线虫进行了细致的观察，并对相关形态特征进行了测量，获得了许多数据。通过查阅滑刃线虫分类鉴定资料，鉴定该虫为桑沃滑刃线虫（Aphelenchoides sansvali Chaturvedi ，Singh and Khera，1979），该虫的形态特征及测量数值如下。     

植物线虫的识别与分离

线虫是类低等动物，呈长管状（少数雌虫呈柠檬形、肾形、囊形等）。可在湿润的物体表面上运动。线虫的结构很简单，一个外壁包着身体，体内充满具有一定压力的液体。体壁是透明的，在显微镜下线虫的口腔、内部食道等均看得清楚。一、植物线虫的识别植物线虫主要分布在土壤...     

基于MAXENT的维氏粒线虫(Anguina wevelli)在我国的潜在分布研究

维氏粒线虫(Anguina wevelli)是危害牧草及草坪草的一类重要植物病原线虫。本文利用MAXENT生态位模型预测了维氏粒线虫在我国的适生区域,并结合该虫在我国的寄主及我国的地理信息,得出了该线虫在我国的潜在分布区域,结果显示,该线虫在我国云南保山南部及临沧东北部地区高度适生,云南除迪庆、怒江、丽江、昭通、西双版纳、文山、红河外的大部分中度适生。预测结果运用ROC曲线(受试者工作特征曲线)验证,测试数据的AUC(areas under curve,曲线下面积)值为0.971,达到了较好的精度。做好进境草籽的检验检疫对于保护上述地区的畜牧业发展有重要意义。     

豆类作物胞囊线虫的鉴别

豆类作物胞囊线虫的鉴别彭德良（中国农业科学院植物保护研究所北京１０００９４）许多种线虫可危害豆类作物,其中以胞囊线虫属Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ（Ｓｃｈｍｉｄｔ,１８７１）的线虫发生普遍,危害严重。据报道,全世界危害豆类作物的胞囊线虫有大豆胞囊线虫［１］,...     

植物线虫分类和鉴定研究的新进展

植物线虫分类和鉴定研究的新进展郑经武，方中达（南京农业大学植保系２１００９５）长期以来，植物线虫的分类与鉴定都是以形态特征为主要依据，但这种建立在形态学基础上的分类，不能完全揭示线虫类群之间系统发育及进化关系。由于同一种线虫其形态和测量值等存在一定的...     

松材线虫在台湾发生及防治

松材线虫在台湾发生及防治阮祥胜（福州动植物检疫局３５００１３）松材线虫Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ（Ｓｔｅｉｎｅｒ＆Ｂｕｈｒｅｒ）Ｎｉｃｋｌｅ自１９１３年首次在日本报道发生之后〔１〕，逐渐蔓延，成为２０世纪以来日本林业最为严重的...