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用抗原免疫构建分泌兔出血症病毒抗独特型抗体的杂交瘤细胞 总被引:3,自引:0,他引:3
用纯化的兔出血症病毒(rabbithaemorhagicdiseasevirus,简称,RHDV)免疫Balb/c小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗RHDV抗体(Ab1)的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗RHDV独特型抗体(anti-idiotypicantibodies,Ab2)的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体(Ab1)免疫,诱导产生抗独特型抗体(Ab2)是一种具有广阔的应用前景的新技术 相似文献
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抗IBDV独特型抗体疫苗的制备与应用 总被引:1,自引:1,他引:0
应用提取纯化的抗IBDVIgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞在PEG作用下融合,应用ELISA法检测筛选,经有限稀释法克隆2次,获得2株(2B6株,5F4株)分泌抗IBDV独特型抗体的杂交瘤细胞株,其能诱生BALB/c小鼠产生高效价的含抗IBDV独特型抗体的腹水。用此独特型抗体分别与福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂按1∶1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,免疫接种SPF鸡和普通京白公鸡,然后用IBDV野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒,保护率分别为8/8、14/14,从而证实抗独特型抗体疫苗有潜在的研究和应用价值。 相似文献
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应用提取纯化的抗IBDV IgG免疫Balb/c小鼠,其脾细胞与SP2/O细胞在PEG作用下融合,应用ELISA法检测筛选,经有限稀释法克隆2次,获得了2株(2B6株、5F4株)分泌抗IBDV独特型抗体的杂交瘤细胞株,并能诱生Balb/c小鼠产生高效价的含抗IBDV独型抗体腹水。 相似文献
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为了预防家兔和野兔病毒性出血症RVHD,用牛痘病毒本哈根株构建 了一株重组牛痘RHDV病毒。此重组病毒表达RHDV衣壳蛋白(VP60)。对表达产物分析表明,此重组蛋白的大小为60KDa,作为抗原,在免疫沉淀和间接免疫荧光试验中可与抗RHDV抗体反应,用重组病毒免疫接种兔,可产生高水平的抗RHDV特异抗体。通过皮内和口服途径接种,可使免疫动物抵抗RHDV强毒的攻击。 相似文献
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崔尚金 《国外兽医学(畜禽传染病)》1996,16(4):50-54
用杆状病毒系统表达了兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白。表达产物的分析表明,用抗RHDV抗体的ELISA和Western-blot试验可证实60KD重组蛋白的抗原性。细胞培养上清和纯化蛋白的直接电镜表明,在昆虫细胞表达的衣壳蛋白可自我装配形成空病毒样粒子(VLP),其大小和形态与天然病毒类似。这些病毒粒子与抗RHDV的多克隆抗体以及四个识别病毒构象表位的单克隆抗体(MAb)均有免疫反应性。表明VLP 相似文献
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伊氏锥虫抗独特型抗体疫苗的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用纯化的伊氏锥 虫变异表面糖蛋白(VSG)免疫大白鼠制备出抗血清,经饱和硫酸铵盐析,DE-52纤维素离子交换层析和Sepharose4B新和层析提取VSG特异性多克隆LgG抗体。用Ab1免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ELISA抑制试验检测结果表明,8份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于25%。用正常大白鼠IgG致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体,采用Ab1-Sepharose4B 相似文献
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用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(VSG)免疫大白鼠制备出抗血清,经饱和硫酸铰盐析,DE-52纤维素离子交换层析和Sepharose4B亲和层析提取VSG特异性多克隆IgG抗体(Abl)。用Abl免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ELISA抑制试验检测结果表明,8份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于25%。用正常大白鼠IgG致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体,采用Abl-Sepharose4B亲和层析,可从每毫升兔抗独特型血清中获得97.4微克抗独特型抗体(Ab2)。经ELISA抑制试验检测表明,提取的兔抗独特型抗体(Ab2)对Abl与VSG的结合反应可产生明显的抑制效应,能识别Abl的抗原结合部位,其配位的空间构型与VSG表位具有相似性。 相似文献
10.
以纯化的兔出血症病毒免疫BALB/C鼠,应用杂交瘤技术获得了分泌抗RHDV单抗杂交瘤细胞17株,其中有3株杂交瘤细胞分泌单抗的ELISA效价为1:409600,1:4096;5株单抗具有血凝抑制活性。兔抗RHDV高兔血清对17株McAb的ELISA抑株为IgG2b。各株McAb与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应,也无沉淀反应特性。 相似文献
11.
兔源抗IBDV独特型抗体疫苗的制备 总被引:3,自引:0,他引:3
用纯化的抗鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)抗体免疫家兔,将所获效从较高(1:16)的兔源抗IBDV独特型抗体分别与福氏完全和福氏不完全佐剂按1:1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,用该疫轩免疫迪卡公雏鸡和SPF组鸡,经用IBDV强毒株以点眼和滴鼻方式攻击,试验组的保护率分别为98/98,100/100,49/49,大群免疫接种的应答率为100%。 相似文献
12.
葛红霞 《畜牧兽医科技信息》2007,(3):9-10
单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞,浆细胞产生的针对单一抗原决定簇。单克隆抗体与抗血清(又称多克隆抗体,polyclonal antibody,PcAb)主要区别是单克隆抗体为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以单克隆单体是B细胞克隆的标志,是一种独特型的抗体。它的特异性是针对一个抗原决定簇的。与多克隆抗体相比单克隆抗体具有无可比拟的优越性:高特异性、高纯度、均质性好、亲和力不变、重复性好、效价高、成本低并可大量生产等优点。但是制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中分离得到,而是用分离生产抗体的B细胞克隆的方法得到它。Kohler和Milstein在1975年建立了体外淋巴细胞杂交瘤技术,利用该技术他们获得了第一株能分泌抗羊红血球单抗的杂交瘤细胞。 相似文献
13.
应用抗IBDV独特型抗体分别与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂按1∶1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,免疫接种SPF鸡和普通京白公鸡,然后用IBDV野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒,保护率分别为8/8,14/14,由此证实了抗独特型抗体疫苗潜在的研究价值和应用价值。 相似文献
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猪水泡病病毒抗独特型抗体的研究—Ab2的制备与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
用猪水泡病病毒中和单抗2B6和4H9免疫家兔,制备出SVDV兔抗独特型抗体。经亲和层析纯化,用ELISA鉴定性质,结果表明,所制备的Ab2能竞争抑制Ab1与SVDV抗原结合,同时,Ab2与Ab1的结合可被病毒抗原阻断,表明所制备的Ab2具有SVDV抗原内影像关系。 相似文献
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应用间接免疫荧光方法(ⅡF)进行筛选,获得3株稳定分泌特异性抗口蹄疫病毒(FMDV)单抗的杂交瘤细胞的2株稳定分泌特异性抗猪水泡病毒(SVDV)单抗的杂交瘤细胞。IIF重复测试阳性和阴性杂交瘤细胞上清,结果完全相符。IIF特异性试验表明,3株抗FMDV单抗只与FMDV反应,而不与相关的SVDV和PD15细胞反应,反之2株抗SVDV单抗只与SVDV反应,而不与FMDV和PD15细胞反应。实验证明,I 相似文献
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应用抗IBDV独特型抗体分别与福氏安全佐剂和福氏不完全佐剂按1:1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,免疫接种SPF鸡和普通京白公鸡,然后用IBDV野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒,保护率分别为8/8,14/14,野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒,保护率分别为8/8,14/14,由此证实了抗独特型抗体疫苗潜在研究价值和应用价值。 相似文献
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抗水貂肠炎细小病毒单克隆抗体的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
以我国分离的水貂肠炎细小病毒(MEV)为抗原免疫BALB/c小鼠获得的脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,筛选出8株分泌抗MEV的单克隆抗体杂交瘤细胞。经鉴定,8株杂交瘤细胞都属于B型抗MEV单克隆抗体。 相似文献
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用纯化的鸡抗禽流感病毒(AIV)抗体免疫家兔,制备抗独特型多克隆抗体;用戊二醛醛化的红细胞固定非特异性鸡抗体,再吸附兔抗鸡抗体,获得了纯的抗独特型抗体。经鉴定,该抗体既有弱的血凝性又有弱的血凝抑制性,并能与原病毒竞争性地和鸡抗AIV抗体结合。 相似文献
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用赭曲霉素A(OA)-BSA合成抗原免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与sp2/0细胞融合,通过克隆和ELISA法筛选,建立三株泌抗OA单克隆抗体杂交瘤细胞株(3C12,1D12和2G7)。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体效价为128^×(3C12)和64^×(1D12和2G7)腹水抗体效价为10^-7(3C12,1D12)和10^-6(2G7)。三株单抗(McAb)均属IgG类,分泌抗体 相似文献
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具有中和活性的减蛋综合征病毒单抗的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
用减蛋综合征病毒毒株WPDV205纯化抗原免疫BALB/c小鼠,在最后一次免疫后第3天取脾细胞与SP2/0细胞在PEG-4000的作用下融合。用间接ELISA初步筛选出阳性克隆10株(4B1、1D4、2D6、3D6、3A5、2A1、3C6、3C1、1B3和2C5)。这些杂交瘤细胞经克隆化和再次检测后生产腹水,用微量细胞中和试验筛选出具有中和活性的单克抗隆体4株(4B1、3C1、3C6和2C5),其 相似文献