60株大肠杆菌的分离与致病性鉴定

大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是鸡肠道常在菌,部分菌株具有致病性。鸡大肠杆菌病就是由大肠杆菌中的某些致病性菌株引起的鸡感染性疾病。致病性大肠杆菌均携带毒力岛基因ChuA。为鉴定分离自临床病例的鸡大肠杆菌的致病性,本试验采用PCR法检测ChuA基因进行分子生物学鉴定,60株大肠杆菌中有31株属于致病性大肠杆菌,总阳性率为51.67%。     

鸡源致病性大肠杆菌血清型鉴定及耐药性分析

为了了解山东、河北和河南等省部分地区养殖场鸡源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,试验采用细菌分离和生化鉴定方法对鸡大肠杆菌进行分离和鉴定,通过动物试验确定分离大肠杆菌的致病性,应用血清学方法和药敏试验对致病性大肠杆菌的血清型及耐药性进行研究。结果表明:分离鉴定的119株大肠杆菌中致病性菌株有110株,其中92株致病性菌株能够定型,分别属于15个血清型,有5株出现交叉凝集,O14、O35、O1、O2、O78、O88为优势血清型;分离鉴定的致病性大肠杆菌对环丙沙星、头孢噻肟、头孢哌酮等最敏感,对林可霉素、头孢克肟、卡那霉素、庆大霉素、红霉素的耐药率达60%以上。说明分离的致病性大肠杆菌血清型存在复杂性,对大部分临床常用药物产生了不同程度的耐药。     

猪小肠抗菌肽的抗菌作用研究

采用琼脂糖弥散试验和活菌计数试验检测猪小肠抗菌肽对儿株细菌(鸡大肠杆菌(O1)C83845株、鸡白痢沙门氏菌C79-13株、大肠杆菌(O2)、大肠杆菌(O78)、猪致病性大肠杆菌自然分离株、鸡致病性大肠杆菌自然分离株、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌ATCC25923株、猪致病性沙门氏菌自然分离株、绿脓杆菌ATCC27853株、鱼致病性嗜水气单胞菌)的作用。结果表明，猪小肠抗菌肽对以上各株细菌均有不同程度的抑制作用，杀菌率由59．5％～98．5％不等。扫描电镜下观察猪小肠抗菌肽分别与鸡大肠杆菌(O1)C83845株、鸡白痢沙门氏菌C79-13株和金黄色葡萄球菌ATCC25923株在37．0℃条件下共培养15min后细菌形态学的改变，结果发现，有的细菌表面出现囊泡样或不规则突起样结构；有的细菌严重变形、扭曲，一端呈火柴头状；有的细菌表面变得粗糙、皱缩、胞膜破裂、内容物外流而死亡。     

鸡致病性大肠杆菌16S rRNA PCR鉴定方法的建立

为了建立一种鸡致病性大肠杆菌的快速检测方法,本试验通过无菌采集疑似感染致病性大肠杆菌鸡的心、肝、脾、肾作为病料,经过细菌分离培养、生化鉴定和致病力试验,利用大肠杆菌16S rRNA通用引物对3株致病菌进行PCR扩增,均得到了特异性扩增产物。并对扩增产物进行核酸测序和BLAST比对。结果显示,分离得到3株鸡致病性大肠杆菌(DZMG、DGCG1、DGCP3),扩增出的16S rRNA基因序列与鸡致病性大肠杆菌基因序列同源性为100%。提示该检测方法具有特异性高和简单快捷的特点。     

西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性检测

为了解西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的耐药情况,本试验对2016～2018年西昌地区21个猪场的106个病猪样本进行了大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测。通过培养特性、染色特点和形态观察以及PCR鉴定、致病性试验,共分离到28株肠外致病性大肠杆菌。采用K-B纸片法进行药敏试验,结果显示28株致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、强力霉素、四环素、庆大霉素、复方新诺明耐药严重,耐药率高于85%,对阿米卡星和头孢喹肟保持较高的敏感性,耐药率分别为14.3%和10.7%。28株大肠杆菌的多重耐药率高达100%,表明西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的耐药性强、耐药谱广。     

猪禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏分析

为研究致病性大肠杆菌的耐药性,本文从广东省内临床发病猪禽的内脏中分离出50株菌株,经过分离鉴定试验筛选出23株致病性大肠杆菌,最后对23株致病性大肠杆菌进行药敏试验。药敏试验实验结果表明,所分离的23株致病性大肠杆菌对头孢吡肟、赛头孢、新头孢、林可霉素、恩诺沙星、环丙沙星、泰乐菌素、替米考星等抗菌药较为敏感,高度敏感和中度敏感比率之和均在75%以上。所有菌株至少对3种抗菌药耐药,27号菌和36号菌对抗菌药有较强耐药性,分别对12和11种药物耐药。对于猪源致病性大肠杆菌,可选环丙沙星、新头孢和恩诺沙星进行治疗。对禽源致病性大肠杆菌,可选新头孢、头孢吡肟和环丙沙星用于治疗。     

山西省致病性猪大肠杆菌分离及生物特性研究

研究从山西省主要养猪区80多个养猪场(户)的病死猪及疑似大肠杆菌病猪粪便、肠道、肛门等部位采集病料接种于营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美蓝培养基等纯化培养,将疑似菌落革兰氏染色、镜检;对初步分离菌经生化试验、致病性试验、大肠杆菌O抗原血清型鉴定等,对山西省流行的猪大肠杆菌病病原进行生物学特性研究。研究结果表明,病原菌纯化、镜检结果有123株疑似菌株符合猪大肠杆菌形态特征;生化试验中有8株病原菌产生H2S,有5株病原菌VP试验、枸橼酸盐利用试验是阳性,这13株病原菌不符合猪大肠杆菌的生化特性,其余110株病原菌符合大肠杆菌生化特性;致病性研究结果表明有97株病原菌是致病性猪大肠杆菌;大肠杆菌O抗原血清型鉴定结果:94株血清型分属于36个血清型,其中O138、O101、O9、O107、O141有35株,共占所鉴定分离菌株的37.2%,这几种血清型均为山西这80多个猪场目前流行的优势血清型,通过鉴定摸清了流行在山西省猪致病性大肠杆菌血清型特点、优势血清型菌株及分布状况。这一研究结果为山西省制定猪大肠杆菌病防治策略提供了依据。     

四川规模化鸡场鸡致病性E.coli血清型、耐药性和质粒图谱的研究

从四川10个规模化鸡场分离的经生化鉴定、动物回归试验获得46株鸡致病性E.coli。对46株鸡致病性E.coli进行了耐药性、血清型鉴定和质粒DNA分析的研究。试验结果表明：鸡致病性大杆菌易产生耐药性，且多为多重耐药；鉴定出36株大肠杆菌的O血清型共16种，占鉴定菌株的78.3%；流行的主要血清为O89、O141、O119、O127和O131，共22株，占定型菌株的61.6%，鸡致病性大肠杆菌血清型多，各地血清型各类差异大；质粒得率为100％，来源相同的菌株有相同或相似的质粒图谱和酶切图谱，来源不同的菌株质粒图谱一般不同，同一血清型可以有不同的质粒图谱。     

云南撒坝猪源大肠杆菌优势血清型强毒力岛的检测及其致病性

为研究撒坝猪大肠杆菌强毒力岛(HPI)的致病性,对撒坝猪致病性大肠杆菌进行了分离和血清型鉴定,获取优势血清型,采用PCR检测HPI,进行同源性比较,并通过耐药性试验和致病性试验对分离菌株与HPI的相关性进行分析。结果显示:分离得到101株大肠杆菌,确定血清型84株,其中O_3、O_4、O_(24)为优势血清型;HPI阳性率为88.64%,与GenBank登录的参考序列同源性比较大于99.3%;氨基糖苷类药物耐药性试验结果显示分离菌株普遍耐药,而HPI阳性株耐药性强,并检出含aac(3)-Ⅱa基因12株,含有aac(6′)-Ⅰb基因21株;致病性试验表明含irp2的菌株致病性强,而具有fyuA-irp2基因簇的菌株致病性更强。结果表明:HPI对大肠杆菌的毒力有增强作用。     

仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

从20多个猪场中采集仔猪腹泻粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经接种小白鼠进行致病性鉴定后，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出1株猪水肿病致大肠杆菌。对其中112株进行了药敏试验；先锋霉素V的敏感菌株为96.3%，环丙沙星为56.3%，诺氟沙星为50.5%，卡那霉素和庆大霉素均为45.9%。蓖株的耐药率，四环素为96.8%，链霉素为71.8%，复方新诺明为67.5%，随机抽取10株进行了5种微量糖发酵试验；结果均符合大肠杆菌生化特性。此外对广西某猪场分离出的大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定为阴性。     

动物源大肠杆菌及沙门氏菌抗药性的快速检测

利用本室自主研制的新型96点阵药敏检测盒检测山东地区动物源大肠杆菌、沙门氏菌的药物敏感性,试验结果表明,大肠杆菌对氨苄西林和喹诺酮类药物的抗药率达98%以上,禽源大肠杆菌的抗药率高于猪源大肠杆菌,猪源大肠杆菌的抗药谱广于禽源大肠杆菌;沙门氏菌抗药率略低于大肠杆菌,但同样呈现多重抗药,主要集中在5抗-7抗和13抗-14抗两个范围。96点阵抗生素药敏检测盒是适合于试验室进行大规模抗药性监测的新工具,具有简易、准确、快速、大通量、节约的优点,为临床治疗中抗生素的使用、细菌病的治疗提供了技术保障,从而达到避免盲目使用抗生素,降低细菌抗药率的目的。     

猪源分离大肠埃希菌产ESBLs的基因型及耐药性分析

为了解上海地区规模化猪场分离的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分离率、耐药性和基因型,收集2010年9月-2011年3月从上海地区10个规模化养猪场分离的296株大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法进行药敏试验以及PCR技术分别检测TEM、CTX-M、OXA和SHV基因。在296株大肠埃希菌中,52株大肠埃希菌产ESBLs,产酶率为17．6％。在52株ESBLs菌株中,46株为TEM型,占88．5％;15株为CTX—M型,占28．8％;11株为同时携带TEM型和CTX—M型,占21．2％。大肠埃希菌产ESBLs株对10种常用抗菌药物的耐药性较为严重,而且存在多重耐药;上海地区猪源大肠埃希菌产ESBLs株流行的主要基因型为TEM型和CTX—M型。     

水貂出血性肺炎大肠杆菌毒力基因测定和H基因分型

为了分离鉴定引起水貂出血性肺炎的大肠杆菌,并对其致病性、血清型和毒力基因进行鉴定.本研究主要通过细菌分离鉴定试验对具有典型肺炎症状的死亡水貂的病原体进行分离,利用16S rRNA对进行细菌鉴定,并通过PCR方法对分离细菌的血清型和毒力基因进行检测,分析分离菌对动物的致病性.结果显示:28例水貂肺炎病例中分离出8株大肠杆...     

国内外致泻大肠埃希氏菌O157:H7的检测标准比较及建议

致泻大肠埃希氏菌O157:H7（STEC O157:H7）是大肠埃希氏菌中致病性最严重的一种食源性致病菌,主要存在于牛肉、牛奶、水果及其制品中,对身体健康造成很大危害,甚至引发死亡。食品中STEC O157:H7检测尤为重要。本文对国内外STEC O157:H7的检测标准进行比较,提出我国标准在样品前处理、快速筛选方法的应用等方面需要加强,以便为该菌快速准确检测提供帮助,实现与国际标准化体系建设接轨,满足实验室检测需要。     

宠物源性大肠杆菌耐药性调查

本试验采用微量肉汤稀释法对120株宠物医院分离的大肠杆菌进行头孢噻呋、恩诺沙星等13种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)值测定,并利用WHONET 5.4软件对数据进行处理,以了解广州市宠物源性大肠杆菌的耐药情况。通过对其耐药谱型的调查,为指导宠物临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据。     

黄芩苷和环丙沙星联合对鸵鸟源大肠杆菌的协同作用简

为研究黄芩苷能否增强喹诺酮类药物环丙沙星对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性,本试验先用二倍稀释法测定单个药物对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性,进而筛选出10株耐药菌株（T1～T4、T7、T8、T10、T12、T21、T25）,然后采用微量肉汤稀释棋盘法,用环丙沙星和黄芩苷对以上10株耐药菌株进行体外联合药敏试验。结果发现环丙沙星和黄芩苷单用的MIC分别为64和512或1024 μg/mL;联合用药后,对10株耐药菌的分级抑菌浓度进行测定,其中T1、T2、T3、T7、T8、T10、T12、T21的分级抑菌浓度均为0.375,T4、T25的分级抑菌浓度均为0.25,10株菌的分级抑菌浓度均小于0.5。结果表明,环丙沙星和黄芩苷联合对鸵鸟源大肠杆菌起协同作用。     

12味中药对鸡血清型O_(78)大肠杆菌的抗菌活性观察

本研究旨在观察乌梅、芦荟等12味中药的水煎液对鸡致病性大肠杆菌O78的抗菌活性。选取乌梅、芦荟等12味中药加水煎煮以获得中药水提取物,测定其对鸡致病性大肠杆菌O78的最低抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并对体外抑菌效果较好的单味中药进行体内试验。乌梅、芦荟、白头翁抗菌活性较好,桔梗、连翘、大黄、白芍、白术几乎无抗菌活性,其中乌梅、白头翁与芦荟水提取物对鸡致病性大肠杆菌O78的MIC分别为2.57、2.06和2.31mg/mL。乌梅、芦荟、白头翁具有一定的抗鸡致病性大肠杆菌O78的作用,将为开发新的抗鸡致病性大肠杆菌的药物奠定理论基础。     

Comparison of plasmid profile analysis, antibiogram testing, resistotyping and biotyping in the identification of Escherichia coli isolates from poultry.

Twenty isolates of Escherichia coli from poultry, predominantly from birds with colibacillosis, were collected and plasmid profile analysis, antibiogram testing, resistotyping and biotyping were compared as epidemiological tools for the differentiation and identification of the isolates. Plasmid profile analysis, in conjunction with any one of the other three tests, was found to be more valuable as an epidemiological tool than one test alone.     

Evaluation of catheter-associated urinary tract infections and multi-drug-resistant Escherichia coli isolates from the urine of dogs with indwelling urinary catheters

OBJECTIVE: To determine the frequency of urinary tract infections (UTIs) in dogs with indwelling urinary catheters in an intensive care unit (ICU) and the frequency of multi-drug-resistant (MDR) Escherichia coli UTIs in those dogs. DESIGN: Prospective study. ANIMALS: All dogs in the ICU with an indwelling urinary catheter from January 2003 through December 2003. PROCEDURES: Urine samples and rectal swab specimens were collected at admission and every 3 days until discharge from the hospital. Escherichia coli isolates from urine samples and rectal swab specimens and those from dogs that were temporally or spatially associated with dogs with MDR E coli UTIs underwent antimicrobial susceptibility testing. Pulsed-field gel electrophoresis was performed on MDR isolates from urine and rectal swab specimens. RESULTS: Urinary catheters were placed in 137 dogs. Twenty-six UTIs were diagnosed, 15 on the day of admission and 11 after 3 or more days of catheterization. Of 12 dogs with E coli UTIs, 6 were infected at admission and 6 acquired the infection in the ICU. Two MDR E coli UTIs were detected, 1 of which was acquired in the ICU. One MDR E coli urinary isolate had an electrophoresis pattern similar to that of rectal isolates from the same dog. Urinary E coli isolates were most frequently resistant to ampicillin and cephalothin. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: The ICU-acquired MDR E coli UTI likely originated from the dog's intestinal flora during hospitalization. Dogs that have been referred from a community practice may have MDR E coli UTIs at the time of admission.     

丹顶鹤源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对扎龙自然保护区丹顶鹤源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对17种抗微生物药的敏感性。结果表明:丹顶鹤源大肠杆菌分离株对各抗微生物药的敏感性不同。受试菌株对氨苄西林、头孢噻吩的耐药率分别为57.5%、47.5%,对氟苯尼考、氨曲南、阿莫西林/棒酸均敏感。