一种高效降解阿特拉津的混合菌发酵配方优化

前期降解试验表明2株能够高效降解阿特拉津的菌株:伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)LH-ZY01和丛毛单胞菌(Comamonas sp.)A2混合后降解效果明显提高,因此共降解具有重要的应用价值。为节约生产成本,通过响应面设计,利用2株能够高效降解阿特拉津的菌株,通过一系列显著因素优化设计,最终获得高密度培养上述2株菌的发酵培养基配方(g/L):蔗糖6.72,葡萄糖6.75,豆粕粉6.34,K_2HPO_4·3H_2O 0.6,KH_2PO_42.5,MgSO_4·7H_2O 0.3,NaCl 0.4,酵母粉3,pH 7.0~7.2。通过优化发酵配方和发酵方法,获得发酵液的总菌数为102亿/m L,其中伯克霍尔德氏菌菌数为62亿/m L,丛毛单胞菌菌数为40亿/m L。高密度发酵的优化配方为高效降解阿特拉津复合微生物的生产应用提供了重要依据。     

丁烯基多杀菌素高产菌株的诱变选育及培养基优化

利用不同剂量的亚硝基胍(nitroso-guanidin,简称NTG)对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)ASAGF58诱变处理不同时间,通过96孔板发酵培养结合生物检测进行高通量筛选;利用单因素试验和正交试验,对高产菌株产丁烯基多杀菌素的发酵培养基进行碳源、氮源优化。结果表明,从5 mg/mL NTG诱变处理50 min的突变株中,筛选出1株遗传稳定且丁烯基多杀菌素产量明显提高的突变菌株2-G4,该菌株丁烯基多杀菌素发酵产量比出发菌株提高86.7%;优化获得的最佳培养基配方为100.00 g/L葡萄糖、50.00 g/L糊精、20.00 g/L玉米浆干粉、80.00 g/L棉籽蛋白、5.00 g/L NaCl、5.00 g/L CaCO_3、1.02 g/L MgSO_4·7H_2O,pH值为7.2。2-G4菌株在该优化培养基中的丁烯基多杀菌素产量比优化前提高52.1%。     

产阿扎霉素F菌株Streptomyces malaysiensis种子培养条件研究

【目的】以阿扎霉素产生菌马来西亚链霉菌ECO-00002为试验菌株,优化种子培养基成份和培养条件,提高菌体的生物量。【方法】采用Plackett-Burman试验筛选适宜的碳氮源成分,并通过Response-Surface-Analysis(RSA)试验,找出其最大响应值;进一步通过对比试验,确定复合维生素、复合盐、CaCO_3的配比,同时优化pH值、装液量等种子培养条件。【结果】菌株种子生长主要的影响碳氮源为葡萄糖、酵母膏、麦芽膏,其最大响应值分别为1.45%、1.50%和2.0%;无机盐为CaCO_3 3.00 g/L、MgSO_4·7H_2O 1.00 g/L、MnSO_4·4H_2O 0.10 g/L、KH_2PO_4 0.20 g/L;培养条件为初始pH 7.50,装液量100 mL/500 mL,培养温度28℃,培养时间为200 r/min振荡培养40 h。【结论】在优化的种子培养基和培养条件下,菌株菌体生物量由原来的4.09 g提高到8.91 g,提高率为117.70%,优化效果显著。     

凝结芽孢杆菌发酵条件的优化

对一株畜禽用凝结芽孢杆菌菌株进行了发酵条件的优化,通过单因素实验对培养条件、培养基成分进行了筛选,通过正交实验对培养基组成进行了优化。结果表明,该菌株的最佳发酵条件:温度35℃、转速220 r/min、装液量10%、接种量3%、初始pH=7.0、发酵时间42 h;最佳培养基组成:葡萄糖8.0 g/L,酵母膏12.5 g/L,KH2PO4 3.0 g/L,MnSO4.H2O 0.18 g/L,MgSO4.7H2O0.125 g/L。在此最佳发酵条件和培养基组成下,发酵液活菌数达38×108 cfu/mL。     

好氧反硝化细菌LKX-1菌株培养基与发酵条件的优化

采用单因素试验法研究了蒙氏假单胞菌LKX-1菌株的发酵培养基组成和发酵条件,并采用正交试验法对发酵条件进行了优化。结果表明:适宜的发酵培养基配方为:麦芽糖2.0%,酵母粉2.0%,KH_2PO_4 0.15%,MgSO_4·7H_2O 0.10%;最适发酵条件为:发酵温度30℃,接种量1.0%,初始pH值7.0,装液量100 m L/瓶(三角瓶容量250 m L),发酵时间24 h;在此条件下,发酵液中活菌数可达4.5×10~(14)CFU/m L。     

辣椒疫霉菌拮抗真菌M-12发酵条件的优化

采用土壤中分离筛选出的拮抗辣椒疫霉菌的青霉属菌株M-12,通过含毒介质菌碟法进行单因子试验及正交试验,对其发酵营养条件及培养条件进行了优化研究。试验结果表明:最佳培养基配方为玉米粉40g/L,蔗糖40g/L,蛋白胨3g/L,KCl0.5g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,K2HPO41.0g/L,FeSO4·7H2O0.01g/L;最佳培养条件为装瓶量125mL/250mL,初始pH为6.0,接种量6%,菌龄60h,培养温度26℃,摇床转数175r/min,发酵8d。     

海洋地下芽孢杆菌ZDC-01摇瓶培养基及发酵条件优化

ZDC-01菌株为分离自海洋、对保护地蔬菜土传病害具有较好防治效果的地下芽孢杆菌(Bacillus subterraneus)。为了提高菌株ZDC-01的活菌数,该研究通过单因子水平筛选和正交试验法对活性菌株ZDC-01的发酵培养基配方和摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明,菌株ZDC-01的最佳培养基组成为可溶性淀粉2.0%,豆饼粉3.0%,葡萄糖0.5%,鱼粉0.5%,K_2HPO_4 0.03%,CaCO_3 0.5%,MgSO_4·7H_2O 0.03%,(NH_4)_2SO_40.1%,NaCl 0.3%。最适发酵条件为培养温度30℃、摇床转速200 r/min、发酵起始pH 7.0、接菌量3%、装液量50m L/250m L、发酵时间48h。经验证,优化后发酵菌液活菌数为38×10~9cfu/m L,与初始发酵工艺的发酵菌液含菌量(23×10~9cfu/m L)相比,提高了65.22%。     

小麦全蚀病菌拮抗菌Bacillus methylotrophicusZ-9菌株产芽孢条件优化

甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)Z-9菌株对小麦全蚀病病原菌有显著拮抗活性,以芽孢产率和活菌数为主要指标,采用单因素试验和正交试验对Z-9菌株摇瓶产芽孢条件进行优化,为其工业生产提供试验依据。通过单因素试验确定最佳碳源、氮源和无机盐分别为玉米粉、黄豆饼粉和MnSO_4·H_2O、Mg SO_4·7H_2O。通过正交试验确定最适培养基组分为玉米粉1.0%、黄豆饼粉2.0%、MnSO_4·H_2O 0.04%、MgSO_4·7H_2O 0.04%、Na_-2HPO_4·2H_2O 0.4%、Na H_2PO_4·2H2O 0.2%;最适发酵条件为:初始p H值7.5,250 m L三角瓶装液量50 m L,37℃培养36 h。优化后发酵液的芽孢数量为1.60×109cfu/m L,较优化前提高了13.7倍,芽孢产率达到96.5%。     

两株海洋细菌AiL3和CⅢ-1混合发酵条件及对辣椒生长影响研究

通过单因素和正交试验对海洋细菌AiL3和CⅢ-1两菌株混合发酵条件进行了优化,初步测定并比较了混合发酵液与单菌株发酵液对辣椒的促生效果.结果表明,其最佳培养基为:酵母膏10.0 g/L、酵母粉5.0g/L、蔗糖8.0 g/L、木薯淀粉10.0 g/L、CaCl2· 2H2O 0.2 g/L、NaCl 0.2 g/L、FeSO4·7 H2O 0.1 g/L、MnSO4·7 H2O 0.5 g/L;最佳发酵条件为:初始pH值7.0、装液量230 mL/500 mL、接种量4％、发酵温度28℃、转速180 r/min、发酵时间52 h.优化后,两菌株的活菌数和芽孢量显著提高,活菌数达5.0× 1010 CFU/mL,芽孢量达4.5×1010 CFU/mL,芽孢生成率达90％以上,比优化前的活菌数和芽孢量提高了100倍以上.对盆栽辣椒幼苗进行灌根处理,两菌株的混合发酵液相比单菌株发酵液,其株高、茎粗、鲜重等均有显著提高.     

育肥猪发酵饲料用乳酸菌的培养基及培养条件优化

通过正交试验和响应面试验对用于育肥猪发酵饲料的乳酸菌培养基及培养条件进行了优化.结果表明:优化后的培养基配方为酵母粉10 g/L,蛋白胨15 g/L,葡萄糖6 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,MnSO4 0.05 g/L,K2HPO40.2 g/L;优化后的培养条件为培养基初始pH值7.25,培养温度36℃,转速165 r/min.     

一株产冠毒素新菌株发酵条件的初步研究

通过对产冠毒素新菌株洋葱假单胞菌Pseudom onas cepaciaY57培养温度和时间的研究,发现菌株Y57在碳源充足的情况下,不同培养温度对菌株的生长影响不明显,但影响菌株的产素能力,以32~18℃的变温培养为佳;接着运用正交试验确定了菌株的最佳培养基配方,即:葡萄糖(20 g/L),蛋白胨(1.5 g/L),FeC l3(15μmol/L),KH2PO4(4.0 g/L),K2HPO4(1.8 g/L),MgSO4.7H2O(0.2 g/L);最后根据试验结果,确定了摇瓶发酵的最适条件为:采用最佳培养基配方,32℃培养1 d,降温至18℃发酵2 d,冠毒素的效价由优化前的98μg/mL提高到128μg/mL,提高了30%左右。     

金毛鳞伞液体培养基优化试验

以金毛鳞伞液体培养基优化为研究目标,在单因素试验的基础上进行正交试验,对金毛鳞伞液体培养基配方的碳源、氮源、无机盐(K2HPO4、MgSO4·7H2O)成分浓度进行筛选比较,以寻求最佳的液体培养基配方.结果表明,金毛鳞伞液体培养基最佳配方为:葡萄糖20 g/L、玉米粉50 g/L、豆粕50 g/L、K2HPO43 g/L、MgSO4·7H2O 4 g/L.     

1株生防菌的鉴定及其发酵条件优化

对草莓灰霉病菌具有较强拮抗活性的生防菌株F11进行分类学鉴定和抑菌效果评价,并采用正交试验和单因素试验对该菌株发酵配方和发酵条件进行优化,以期提高该菌株的发酵效率。结果表明,F11菌株对水稻稻瘟病菌、核盘菌等12种常见病原菌抑制率均达79.88%以上,表现出高效、广谱的抑菌特性,可作为植物病害生物防治的潜在资源。经菌落形态观察、生理生化测定、16S rRNA及gyrB基因测序分析,确定菌株F11为解淀粉芽孢杆菌(Bacillues amyloliqufaciens)。通过L_(16)(4~3×2°)正交试验优化,确定该菌株适宜的发酵培养基配方为:3.00_g/L牛肉膏、10.00 g/L蛋白胨、5.00 g/L NaCl、3.00 g/L葡萄糖、2.00 g/L MgCl_2。单因素试验结果进一步表明,基于优化配方,菌株F11培养的适宜初始pH为7.0、温度为30℃、振荡速率为150 r/min;平板计数显示,上述培养条件下活菌数为4.67×10~9 CFU/mL。     

北冬虫夏草深层发酵高产虫草素工艺的优化

对23个北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素的含量进行了测定,发现发酵液中虫草素含量最高的菌株为21号;对该菌株的发酵条件进行优化,获得最适培养基配方为:蔗糖40 g/L.蛋白胨15 g/L,MgSO4·7H2O0.5 g/L,KH2PO4 0.5 g/L,K2HPO4·3H2O 0.5g/L,pH自然;在此培养基中添加0.5 g/L腺嘌呤进行培养,可使发酵液中虫草素含量提高约30%,同时腺嘌呤的添加可以加快虫草素的合成.培养方式的考察结果表明:纯静置培养有利于虫草素的产生和积累,静置培养28 d,所得发酵液中虫草素含量达2.05 g/L,比优化前提高了2倍.     

均匀设计和SVR在有机磷降解菌培养基配方优化中的应用（英文）

为提高有机磷降解菌菌株的降解活性,在单因素实验的基础上采用均匀设计和支持向量回归(SVR)对菌株的无机盐培养基配方进行优化。结果表明,当经SVR优化后的培养基配方为葡萄糖1.24 g/L、NH_4NO_30.73 g、KH_2PO_4 0.96 g、KCl 0.50 g、Mg SO_4·7H_2O0.50 g、MnSO_4 0.02 g、CaCl_2 0.04 g、蒸馏水1 000 mL、pH 7.0时,降解率最高(SVR,76.68%),优于二次多项式逐步回归分析参比模型(QSAR,74.67%)。基于均匀设计和SVR的配方优化方法有望在多因素多水平配方优化试验中得到广泛应用。     

戊唑醇降解菌B1的培养基优化

为了获得戊唑醇降解菌的培养基,扩大菌株生长繁殖,提高其降解能力。试验以实验室分离出的戊唑醇降解菌B1为研究对象,通过单因素试验和正交试验确定该菌株生长的最适碳氮源、无机盐及其基础盐培养基的最佳配方。结果表明:降解菌B1的基础盐培养基最佳碳氮源分别为蔗糖、酵母浸粉,培养基最优配方:蔗糖0.2%,酵母浸粉0.1%,K_2HPO_4 0.15%,KH_2PO_(4 ) 0.1%,MgSO_4·7 H_2O 0.03%,CaCl_2·2H_2O 0.002 5%,Fe_2(SO_4)_3 0.000 8%。影响菌体生长的主次因素:K_2HPO_4蔗糖酵母浸粉CaCl_2·2H_2OKH_2PO_4Fe_2(SO_4)_3MgSO_4·7H_2O。优化培养基组成,可为B1的大量繁殖提供理论依据。     

1株木质素降解菌的筛选、鉴定及液态发酵条件优化

  目的  制作应用于园林绿化废弃物的以木质素降解菌为原材料的高效液体菌剂。  方法  通过苯胺蓝平板褪色圈法和愈创木酚平板变色圈法从分离纯化得到的22株菌中筛选目标菌株,并用内转录间隔区(ITS)测序法对目标菌株进行鉴定,然后通过单因素试验对目标菌株的培养时间、接种量和培养基配方(碳源和氮源)进行优化,最后根据单因素试验结果,采用均匀实验结合人工神经网络算法寻找目标菌株的最佳发酵条件。  结果  根据平板褪色和显色结果,选定菌株Q01为目标菌株。经鉴定,菌株Q01为栓菌属Trametes真菌。根据单因素试验和均匀试验结果,确定菌株Q01的最优发酵条件为培养时间5 d,接种菌液体积分数为12.5%;培养基配方为木质素磺酸钠14.00 g·L?1、蛋白胨12.30 g·L?1、酵母粉5.00 g·L?1、豆饼粉3.00 g·L?1、五水合硫酸铜0.12 g·L?1、氯化钠0.53 g·L?1、pH自然。优化条件后菌株Q01的生物量提高1.27倍,锰过氧化物酶活性提高31.71倍,木质素过氧化物酶活性提高19.12倍,漆酶活性略有降低,但3种木质素酶的总酶活性提高了4.38倍。  结论  菌株Q01在优化后的发酵条件下制得的液体菌剂具有高酶活性和高生物量的特点,在降解园林绿化废弃物木质素方面具有一定应用潜力。图6表3参29     

产辅酶Q_(10)根瘤土壤杆菌的紫外诱变选育及其发酵培养基优化

以根瘤土壤杆菌作为出发菌株,经过紫外诱变、平板初筛、摇瓶发酵复筛,最终获得1株辅酶Q_(10)高产菌株Q-6,其辅酶Q_(10)产量为11.92 mg/L,较出发菌株提高92.57%,且其遗传性稳定,可用于进一步研究。然后在单因素试验的基础上,应用响应面分析方法,对其发酵培养基进行优化,得到生产辅酶Q_(10)的最佳发酵培养基配方(葡萄糖35.46 g/L、酵母浸膏12.33 g/L、Na_2HPO_41.58 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.39 g/L),在此培养基下辅酶Q_(10)产量最高,为11.32 mg/L,较单因素试验最高值提高8.53%。     

多粘芽孢杆菌Dw 6菌株培养条件的优化及其发酵液抑菌活性的初步研究

10倍稀释法筛选出最佳产抑菌活性物质的多粘类芽孢杆菌Dw-6菌株,试验表明Dw-6菌株最佳培养基为发酵培养基.利用4因素均匀设计方案进行培养基配方的优选,同时进行培养时间和发酵条件的优化.结果表明,Dw-6菌株优化后的培养基配方为(50 mL)蛋白胨3.83 g、酵母浸出粉3.9 g、MgSO4·7H2O0.105 g、K2 HPO4·3H2O 0.17 g,最佳培养时间48 h,初始pH 7.0,培养温度30℃.经培养基优化后,Dw-6菌株在培养基初始pH 7.0时,30℃培养48 h的发酵上清液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及出芽短梗霉菌均表现出很强的抑制作用.     

白蚁肠道纤维素分解菌的筛选鉴定及产酶条件的研究

从白蚁肠道中筛选出1株强降解纤维素的菌,经培养特征及生理生化试验初步鉴定其隶属于放线菌类链霉菌属菌株.液体摇瓶发酵试验显示其最佳的摇瓶发酵培养基配方为:CMC 5 g、(NH_4)_2SO_4 6 g、牛肉膏6 g、KH_2PO_40.50 g、MgSO_4·7H_2O 0.50 g、CaCl_2 0.10 g、FeSO_4 0.10 g、水1 000 mL;产酶最佳条件:发酵时间约120 h、起始pH为5.0、装料量为60～80 mL.此时分解菌所产酶酶活最高,其CMC酶活、滤纸酶活、脱脂棉酶活分别达到583、1 654和28单位.