抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体治疗效果观察

为分析抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体治疗效果,有效收集卵黄提纯制备出高效价抗体,将其视为治疗药物。将其应用在试验感染腹泻仔猪之中。结果:经过0.5~1.0d的攻毒治疗后均表现出程度不一的腹泻情况。观察组经口服用卵黄抗体液1.0d后,腹泻状况得以明显缓解,排泄出的粪便自黄色稀便转变为黏稠软便。对照组仔猪排出水样粪便。于3d内脱水死亡。证实实施抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体治疗猪流行性腹泻能取得满意效果。此类药物有助于改善仔猪发病状况,降低粪便指数,值得进一步推广。     

抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体治疗效果研究

文章利用猪流行腹泻病毒免疫原产蛋母鸡、在收集卵黄的基础上,提纯制作成高效的卵黄抗体,并加工成治疗剂用来治疗抗猪流行性腹泻病毒,治疗效果显著,具有临床研究意义,对降低猪死亡率,促进养殖业发展起到了重要作用。     

猪流行性腹泻病毒3种抗原卵黄抗体的制备

【目的】探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)3种不同抗原制备的卵黄抗体对PEDV的中和能力,为抗猪流行性腹泻卵黄抗体的制备提供新的方法和理论基础。【方法】根据PEDV S糖蛋白基因设计引物扩增PEDVS534基因(636~789位氨基酸)和PEDV COE基因(499~638位氨基酸),并构建原核表达质粒pET32a-PEDV S534和pET32a-COE,分别转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达。以原核表达的PEDV S534蛋白、COE蛋白以及PEDV灭活病毒为抗原,分别免疫产蛋鸡并制备卵黄抗体,通过病毒中和试验评价各卵黄抗体的中和效力。【结果】成功表达了PEDV S534蛋白和COE蛋白,Western-Blotting分析显示,2种蛋白均具有很好的免疫原性;制备的3种特异性卵黄抗体均具有一定的病毒中和能力,PEDV S534蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶12,COE蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶25,而PEDV灭活病毒的卵黄抗体中和效价达到1∶120。【结论】PEDV灭活病毒的中和能力最强,其次为COE蛋白特异性卵黄抗体,PEDV S534卵黄抗体的中和能力较弱。     

猪流行性腹泻病毒coe基因的克隆表达及卵黄抗体的制备

通过RT-PCR技术扩增猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)coe基因,将其克隆至原核表达载体p ET32a中,构建重组表达质粒p ET32a-coe,鉴定正确后进行诱导表达。结果表明,重组菌可表达相对分子量约为33 k D的融合蛋白;Western-Blotting结果显示,COE蛋白能与抗PEDV的阳性血清发生特异性结合反应,表明研究的COE蛋白具有良好的反应原性。纯化后的COE蛋白与弗氏佐剂按比率混合作为免疫抗原,免疫产蛋鸡,获得特异性抗猪流性腹泻病毒COE蛋白的卵黄抗体(Ig Y)。氯仿抽提法提取卵黄抗体,通过SDSPAGE、Western-Blotting对提取的卵黄抗体进行鉴定并用间接酶联免疫吸附实验(ELISA)对其进行效价检测。结果显示,纯化后的卵黄抗体Ig Y具有高度的特异性,其抗体效价可达1∶1 000。研究结果表明,表达的COE蛋白具有良好的免疫原性,作为免疫抗原制备的卵黄抗体具有较高的抗体效价。     

猪流行性腹泻病毒特异性SIgA抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

【目的】快速了解猪群感染猪流行性腹泻病毒或免疫猪流行性腹泻病毒相关疫苗后猪群特异性SIgA抗体水平。【方法】对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)ZJ08株进行纯化，采用纯化的病毒作为包被抗原，以辣根过氧化物酶标记的SC(Secretory component,SC)多克隆抗体为标记抗体，通过优化检测条件，建立乳汁中猪流行性腹泻病毒特异性SIgA抗体间接ELISA检测方法。【结果】成功建立了猪流行性腹泻病毒SIgA抗体检测方法。PEDV抗原的最佳包倍浓度为0.6μg·孔^-1，样本最佳稀释比例为1∶5，作用时间1 h;SC标记抗体最适稀释比例为1∶100，作用时间1.5 h。建立的ELISA方法能够特异性检测样本中抗PEDV SIgA抗体，与PoRV(Porcine rotavirus, PoRV)、 TGEV(Transmissible gastroenteritis virus, TGEV)的阳性乳汁均无交叉反应；批内、批间重复试验的变异系数小于10%，具有良好的特异性和重复性。通过临床采集的乳汁样品测定发...     

猪流行性腹泻病毒检测技术研究进展

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的猪急性高度接触性肠道传染病,主要临床症状表现为呕吐、水样腹泻、脱水等。近年来,PED在全球范围内暴发流行,使养猪业遭受巨大的经济损失。对猪流行性腹泻的检测方法(病毒的分离和鉴定、免疫电镜法、免疫学检测法、分子生物学检测等)进行了综述,以期对猪流行性腹泻病毒的防控提供理论依据。     

猪流行性腹泻与猪圆环病毒2型混合感染的诊断与分析

猪流行性腹泻病毒是引起猪腹泻的主要病原,近几年来,国内猪流行性腹泻呈高发态势,山西省多个地区规模化猪场发生哺乳仔猪腹泻,死亡率高达80%～100%。猪圆环病毒2型是我国目前感染率最高的疫病,可引发断奶仔猪多系统衰竭综合征,损害免疫系统,造成免疫抑制。山西省农业科学院畜牧兽医研究所猪病研究室从各地规模化猪场采集因腹泻病死哺乳仔猪肠道内容物及肠系膜淋巴结各53份进行分子学检测诊断。结果发现,猪流行性腹泻病毒阳性率为90.6%;猪圆环病毒2型阳性率为69.8%。认为当前猪流行性腹泻严重发生与猪圆环病毒2型混合感染有密切关系。因此,在预防猪流行性腹泻的同时,要重视猪圆环病毒2型的免疫工作,并采取相关的综合防控措施,控制猪流行性腹泻的发生。     

中药复方调节猪流行性腹泻免疫效果研究

为了确定中药复方对接种猪流行性腹泻疫苗的免疫调节作用,试验通过对免疫猪只投服复方中药,观察猪只的发病情况和抗体生成水平,评估中药对疫苗的免疫效果。结果表明试验组猪流行性腹泻平均抗体效价明显高于对照组(P0.05);添加复方的免疫组的平均抗体水平显著高于单纯免疫组和空白对照组(P0.05),但添加复方两组之间差异不显著。说明自拟中草药组方对猪流行性腹泻免疫有显著的增强效果。     

犬瘟热高免卵黄抗体的制备及防治试验

用鸡胚成纤维细胞培养犬瘟热病毒制备油乳剂灭活苗,多次免疫蛋鸡制备卵黄抗体。经临床治疗试验证实卵黄抗体可有效治疗犬瘟热早期感染,治愈率达85．7％。为生产异源动物抗体提供参考。     

猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联苗免疫试验

本研究采用猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和轮状病毒细胞培养物制备了三联灭活疫苗,实验室免疫结果表明,肉猪和妊娠母猪免疫后15d达到较高的免疫水平,免疫有效期超过6个月。妊娠母猪所产仔猪可获得高水平的被动免疫保护。试验场应用结果表明母猪保护率达98％,仔猪被动免疫保护达93％。     

抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为了制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白的单克隆抗体(Mab),以原核表达的融合蛋白GST-N为免疫原,免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,利用重组蛋白His-N和Vero细胞培养病毒液作为检测筛选抗原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果表明:获得3株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(5B2,3H1和4H5),单抗亚型鉴定均为Ig G1,轻链均为Kappa链。Western blot和间接免疫荧光试验结果表明,Mab能够识别重组N蛋白和PEDV。制备获得3株稳定性好、特异性强的Mab,可为今后建立检测猪流行性腹泻特异性诊断方法和研究PEDV核衣壳蛋白功能奠定基础。     

抗番鸭细小病毒卵黄抗体的制备

[目的]有效预防和治疗番鸭细小病毒病。[方法]用番鸭细小病毒连续免疫产蛋母鸡3次,收集鸡蛋,并制备出高免卵黄抗体。通过琼脂扩散试验对制备的卵黄抗体进行效价测定,用雏番鸭进行中和与治疗试验。[结果]制备的卵黄抗体琼扩效价达到1∶32,能有效中和番鸭细小病毒对雏番鸭的致病性,对发病的雏番鸭有很好的治疗作用。[结论]该研究为番鸭细小病毒的预防和治疗提供了一种有效的生物制品。     

猪流行性腹泻病毒血清学及临床诊断方法研究进展

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是急性、高度传染性猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的致病原,可感染所有日龄的猪,并在哺乳仔猪中引起较高的死亡率。当前使用的疫苗难以对感染仔猪提供有效保护。因此,研制高效安全的PEDV疫苗是防控PED的关键。同时,建立敏感有效的血清学检测方法对于PEDV感染的临床诊断以及免疫后体液免疫应答水平的监测与评估至关重要。本文对当前主要的PEDV血清学研究结果进行概述,并对感染或免疫后抗体消长规律进行讨论,以期为PEDV的诊断与防控提供参考。     

一种防控猪流行性腹泻的新免疫方案的实践与分析

该研究通过对2个不同的猪群,采取不同的猪流行性腹泻免疫方案,随后统计生产中实际出生仔猪腹泻率数据,母猪抗体检测数据,腹泻仔猪抗原检测数据,评价不同免疫方案的实施效果。试验结果显示：采用新免疫方案的二区哺乳仔猪腹泻率为3.6%,比一区旧免疫方案的腹泻率8.2%低;一区、二区母猪经过不同疫苗、不同免疫方式免疫,一区、二区母猪血清抗体阳性率分别为84.3%、 97.5%;一区、二区仔猪猪流行性腹泻抗原阳性率分别为19.4%、 0.0%。可见,采用新免疫方案达到了良好的防控效果。     

一株新分离的猪流行性腹泻病毒变异株的评估

为了对一株猪流行性腹泻变异株病毒进行评估,将该病毒接种于Vero细胞单层进行继代培养检测病毒液的病毒含量,通过血清学、分子生物学和免疫荧光检测病毒的纯净性和稳定性,用最后一代收获的病毒液攻击4～6周龄猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清中和抗体阴性的断奶仔猪,观察致病情.结果显示:分离病毒具有较好的细胞适应性;在传代过程中...     

仔猪病毒性腹泻研究进展

对由猪轮状病毒（RV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的仔猪病毒性腹泻在疫苗免疫、临床症状、病原特征、流行病学等方面的研究进行了阐述。     

猪流行性腹泻和猪圆环病毒病混合感染的诊治

猪流行性腹泻病和圆环病毒病属于两种病毒性传染性疾病,致病原分别为猪流行性腹泻病毒和猪圆环病毒。猪流行性腹泻病毒是仔猪群中很容易出现的一类病毒性腹泻疾病,而圆环病毒属于典型的免疫抑制疾病。两种疾病混合感染发生,会导致猪临床症状加剧,死亡率升高。本文主要结合实际情况分析的猪流行性腹泻和猪圆环病毒病混合感染的诊断与防治过程。     

猪流行性腹泻的诊断技术及预防策略

猪流行性腹泻是一种非常常见的急性接触性肠道传染病,一般是由猪流行性腹泻病毒引起的。在当前,该病的流行区域正在不断增大,其流行强度强度也有不断增大的明显趋势,其高发病率高死亡率给养猪业造成严重的损失。本文针对猪流行性腹泻的病原学、诊断技术和预防措施进行总结和分析,希望对有效防制猪流行性腹泻提供有效参考。     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

用DVH弱毒疫苗和DVH油乳剂苗免疫健康高产蛋鸡,可以制备高免卵黄抗体.高免卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎疗效的试验表明,用卵黄抗体治疗DVH的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间.卵黄抗体的中和效价应达28.5以上,并且在感染DVH24 h以内对雏鸭进行肌肉注射,免疫效果为最适宜.     

抗重组猪三十九肽胆囊收缩素卵黄抗体的制备

制备重组猪三十九肽胆囊收缩素(GST-CCK39),以其为抗原免疫28周龄的蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价卵黄抗体,并用免疫琼脂扩散试验、ELISA、Dot-ELISA检测其效价及特异性。结果表明,免疫琼脂扩散测得特异性抗体效价达1∶16以上,ELISA效价达1∶12 800以上;Dot-ELISA显示所获得卵黄抗体具有较强的特异性;高效价,特异性的卵黄抗体可维持50 d以上。表明用重组蛋白GST-CCK39免疫蛋鸡后能获得效价高、特异性强的卵黄抗体。