植物PPDK基因在基因工程中的应用

PPDK基因是C4酶系统中催化CO2初级受体——磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的生成,是C4途径的专一性酶,也是C4植物能进行高光合作用的限速酶之一。利用转基因工程原理及方法将PPDK导入粮食作物中,从而提高其产量和抗性,已成为科研人员研究的重点。     

PARMS在水稻基因编辑后代基因分型中的应用研究

基因编辑技术为植物基因功能研究和作物遗传改良提供了有效途径。目前基因编辑植株基因分型多采用PCR/RE法、PAGE检测法、Sanger测序法等手段,但这些方法存在操作复杂、耗时长或成本高等问题。PARMS技术(penta-primer amplification refractory mutation system,五引物扩增受阻突变体系)是最新开发出的基于荧光检测的SNP基因分型方法,具有操作简便、耗时短、成本低的优势。本研究利用PARMS技术对水稻CRISPR/Cas9基因编辑植株进行了基因分型,鉴定结果与PAGE检测和Sanger测序法一致,证明PARMS技术可用于水稻基因编辑植株后代基因分型,也为其它作物基因编辑后代基因分型技术选择提供了参考。     

生物技术在基因诱变中的应用

详细介绍了生物技术在基因诱变中的种类、诱变原理及应用情况.其中,定位诱变包括Kunkel法、PCR定位诱变、人工合成新基因,随机诱变包括使用致突菌株、易错PCR、DNA改组技术、随机引导重组、交错延伸技术.还介绍了一种利用DNA中原子结构变异产生定向性变异的新方法.     

谁在控制植物结瘤基因

我国科学家卢嘉锡与洪国藩主持的“生物固氮的分子基础及其化学模拟”研究取得重要成果,发现了控制结瘤基因活动的核酸蛋白复合物,并发现这个结合物内有多个结合位点。经多年研究发现,植物根瘤的形成是固氮菌内10多种基因活动的结果,但基因的活动受什么物质控制多年来仍是一个未解之谜。     

蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达

[目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达。[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30℃培养24 h后,然后调温至42℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性。[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735。SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性。[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据。     

基因工程技术在植物保护中的应用

基因工程是20世纪末迅速发展起来的新兴生物技术,在促进农业生产方面发挥了巨大作用,尤其在植物的抗病、抗虫、抗除草剂、抗逆及品种改良等方面提供了更为广阔的应用前景。笔者详细阐述了基因工程在农业中的应用,通过对基因工程技术的特征分析及在农业上应用效果的总结,论述了基因工程给我国目前农业发展带来的机遇与挑战及应采取的对策。     

外源基因在酵母中表达

阐述了酵母高效表达外源基因的载体系统，转化，转录和翻译，翻译后的蛋白质加工和分泌，对表达外源基因中出现的一些问题及其解决方法作了探讨。     

基因工程技术在食品工业中的应用

综述了基因工程技术在食品原料品质的改良、食品工业常用菌种的优化、转基因植物食品疫苗产业化等方面的应用,探讨了转基因食品的安全性问题以及转基因食品的安全管理评价方法。     

基因工程技术在环境保护中的应用

随着科技的发展,人类在为自己生产出越来越多生活资料的同时,产生有害物质的数量和种类也大幅度增加,对环境的污染日益严重。基因工程技术是在DNA分子水平上按照人们的意愿进行的定向改造生物的新技术。利用基因工程技术提高微生物净化环境的能力是用于环境治理的一项关键技术。本文简要介绍基因工程的原理、步骤与内容,概述其在环境保护中的应用,以期能对同类研究提供参考。     

花色苷生物合成关键酶基因在植物基因工程中的应用

文中主要论述了花色苷的合成途径及途径中所涉及的关键酶基因在植物基因工程中的应用,为花色苷在基因工程的应用提供基础资料。     

基因编辑助大豆在南方丰产

正中国农科院作物科学研究所植物转基因技术研究中心、大豆育种技术创新与新品种选育创新团队,利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术定点敲除大豆开花调控关键基因GmF T2a和GmF T5a,创制出更适合低纬度地区种植的突变体材料;同时系统解析了GmF T2a和GmF T5a基因在大豆花期调控中的遗传效应,为大豆品种的区域适应性改良     

叶绿体基因国际研讨会在长春召开

由挪威国家作物与环境研究所、美国中佛罗里达大学、吉林省农业科学院联合主办的叶绿体基因组和基因工程国际研讨会2007年12月7—9日在长春召开。这是首次在中国举办的叶绿体基因国际研讨会。     

甘露聚糖酶基因在烟草中的表达

构建了携带湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室克隆的甘露聚糖酶基因的重组植物表达载体pLM50,转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404),再用农杆菌介导的叶圆盘法对烟草(Nicotiana tabacumL.)叶片进行遗传转化,在含卡那霉素的MS筛选分化培养基上筛选。结果获基因转化烟草植株4株;经PCR、Western blot等方法检测,证明man基因在烟草转化植株中得了表达。     

基因工程技术在现代农药中的应用

对农药的新概念，基因工程农药，基因工程农药在植物保护中的作用及它对化学农药的影响，未来农药的发展进行综合评述。     

豌豆肌动蛋白基因在大肠杆菌中的表达

高等植物细胞内含有肌动蛋白，但含量较低，难于提取及进行进一步研究，我们用PCR的方法扩增肌动蛋白cDNA，并克隆到表达质粒pTrpHis，然后转化大肠杆菌DH5α，在IPTG诱导下，肌动蛋白表达在包涵体中，在没有IPTG诱导时，肌动蛋白表达在胞液中。     

青麻epsps基因在酵母中表达

将青麻epsps基因构建到酵母胞内表达载体pPIC3.5K中,利用电转化法将构建好的表达载体转入巴斯德毕赤酵母中,PCR技术筛选出阳性转化子,证明外源epsps基因已经整合到巴斯德毕赤酵母的基因组上,经诱导表达后SDS-PAGE分析获知外源基因在酵母中获得了表达。并且通过草甘膦压力筛选出耐性较好的重组酵母菌株,证明所获得的epsps基因具有生物学功能。     

DGAT基因在畜禽育种中的应用

DGAT是一种甘油酰基转移酶(Diacylgycerol Acyltransferase,DGAT),该酶与脂肪代谢、脂类在组织中的沉积有很大关系,它的主要作用机制是使二酰甘油加上脂肪酸酰基形成三酰甘油。编码该酶的基因有DGAT1和DGAT2,前者属于ACAT基因家族,后者属于DGAT2基因超家族。综述了DGAT基因定位、结构、生物学效应及在畜禽育种上的应用,并对DGAT基因在畜禽育种中的应用前景进行了探讨。