太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究

为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制，本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况，筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL～400μg/m L。将25μg/mL～400μg/m L RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性，结果显示：RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01)，且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL～200μg/mL时呈剂量依赖式升高；Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量，结果显示：RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05)，且呈RPFRP剂量依赖式升高；ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，结果显示：与空白对照组相比，RPFRP处理的RAW264.7细...     

混饮低剂量ChlFN-α对肉鸡细胞免疫功能及细胞因子水平的影响

本实验研究低剂量鸡α-干扰素(ChtFN-α)对内鸡细胞免疫及细胞因子水平的影响.15日龄肉鸡连续混饮0.1 IU/mL、1 IU/mL和10 IU/mL剂量的ChIFN-α,分别在混饮后14 d和21 d翼静脉采取血样,采用中性红.结晶紫联合测定白细胞总数,经典方法进行白细胞分类计数,MTT比色分析法测定淋巴细胞转化能力,LDH释放法测定NK细胞的杀伤活性,双夹心ELISA法测定血清中IFN-γ、IL-4、IL-12水平.结果显示肉鸡连续混饮ChIFN-α后,能显著提高白细胞总数、淋巴细胞百分比和血清中IFN-γ水平,对IL-4、IL-12的浓度水平影响不显著,但提高IFN-γ/IL-4的比例,对淋巴细胞增殖和NK细胞的杀伤活性影响不明显.试验表明,混饮低剂量ChlFN-α后可调节肉鸡的细胞免疫功能及细胞因子水平,增强肉鸡的抗病能力.     

微量元素锌缺乏与鸡异嗜癖发生的关系

本研究在对鸡啄癖发生原因调查和临床症状观察的基础上,对病鸡的血液进行了生理、生化指标的分析.结果发现,病鸡白细胞总数增加到(19.93±6.08)×103/mL,血清磷和锌的含量降低,分别为6.48±0.64mg%、5.82±0.16μg/mL.这对鸡啄癖发生的病因和进行早期临床诊断有重要意义,同时也对预防鸡啄癖的发生有重要价值.     

HD11来源NDV Ex对鸡骨髓源树突状细胞活化和细胞因子水平的影响

利用重组鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(chGM-CSF)和重组鸡白细胞介素4(chIL-4)体外诱导鸡骨髓细胞分化为鸡骨髓源树突状细胞(chicken bone marrow-derived dendritic cells,chBMDCs),对诱导条件进行优化,利用鸡巨噬细胞系HD11来源的NDV Ex刺激未成熟ch...     

鸡与哺乳动物补体活性与C3含量的比较

本文研究了不同动物血清补体水平及其补体C3含量的差异.采取成年鸡、猪、羊、牛、豚鼠五种动物的新鲜血清,测定其补体总活性;生化合成C3α链N端21肽,免疫家兔,制备抗鸡C3抗体,用来测定不同动物血清中C3含量.结果表明,抗鸡C3抗体能够与各种哺乳动物血清中的补体C3发生特异性反应,可以用来测定各种动物血清中的C3含量,测定结果为鸡血清中的C3含量为0.34士0.005 mg/mL、猪1.47±0.008 mg/mL、山羊1.70±0.005mg/mL、牛1.78±0.007 mg/mL、豚鼠4.18±0.008 mg/mL,其中鸡血清中补体总活性和C3含量都远远低于哺乳动物,差异极显著(P＜0.01).     

肉鸡血清肌钙蛋白T与腹水综合征的关系研究

本试验建立了肉鸡血清中心源性肌钙蛋白T(Tn-T)的ELISA测定方法,用于对肉鸡腹水综合征的早期非损伤性诊断指标.结果表明,患腹水综合征肉鸡的血清Tn-T平均测定值为0.242±0.0703 ng/ml,而正常鸡的平均值为0.1 79±0.0467 ng/ml;以血清肌钙蛋白T测定值大于等于0.2 ng/ml作为判定肉鸡腹水综合征的标准,判别准确性达到78%.检测血液中肌钙蛋白T是诊断幼龄鸡早期心脏病的重要方法,可作为一种非损伤性方法用于针对肉鸡腹水综合征的育种方案中.     

辣蓼黄酮乙酸乙酯部分抑制炎症因子产生及p38丝裂原活化蛋白激酶和细胞外调节蛋白激酶1/2蛋白磷酸化调节猪圆环病毒2型诱导的炎症反应

本研究旨在探索辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(FEA)抵御猪圆环病毒2型(PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)诱导的炎症反应的分子机理。试验共设置7个组，分别为空白对照组、PCV2感染组、脂多糖阳性对照组、芦丁阳性对照组和FEA药物组(25、50和100μg/mL),每组4个重复。检测不同浓度FEA作用3D4/2细胞后的细胞活性；接种PCV2后，检测白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)含量及环氧合酶-1(COX-1)、环氧合酶-2(COX-2)活性；定量PCR检测COX-2、IL-6、IL-10、原癌基因(c-myc和c-fos)、氨基酸端激酶(c-jun)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的mRNA相对表达水平；Western-Blotting检测p38 MAPK、ERK1/2的蛋白相对表达水平。结果表明，25、50和100μg/mL的FEA对3D4/2细胞活力无显著影响(P>0.05)。与PCV2感染组相比，25、50和100μg/mL FEA药物组的IL-6、IL-10和I...     

鸡IL-2和IL-4融合基因真核表达质粒的构建及其表达产物的生物学活性

为提高鸡球虫病活疫苗的免疫效果并降低其副作用,本试验用合成的鸡白介素2(chIL-2)和鸡白介素4(chIL-4)基因片段构建3个融合基因真核表达质粒,并利用脂质体法将其转染至原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其表达水平,MTT法测定其表达的分泌产物活性。结果显示：成功构建的pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP、pCI-chIL-2-EGFP、 pCI-chIL-4-EGFP重组真核表达质粒能在原代鸡胚盲肠上皮细胞中高效表达;3种重组真核表达质粒转染后24～96 h的鸡脾淋巴细胞活性极显著高于空载组(P<0.01),且在72 h时达峰值;而单一因子组鸡脾淋巴细胞增殖活性极显著低于pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP组(P<0.01)。由此可见,本试验成功构建了能表达分泌chIL-2和chIL-4的融合基因重组质粒;且chIL-4-chIL-2融合蛋白生物学活性显著高于单一因子。     

牛乳中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶测定及热稳定性研究

对8头成年黑白花乳牛乳中SOD和CAT的活性进行测定;研究2种酶的热稳定性。SOD(U/mL)测定结果:新鲜乳为44.23±4.06,75℃/15s处理后为43.71±6.56,无显著变化(p>0.05),95℃/1min处理后为37.15±5.82,活性降低约15%(p<0.05);CAT活性(U/mL)分别为2.02±1.69,3.40±2.46,1.85±1.19,升温对CAT活性无显著影响(p>0.05)。     

维生素A对肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平维生素A对肉鸡生长性能、免疫及抗氧化功能的影响。采用单因子完全随机试验设计,选用1日龄健康爱拔益加(AA)肉鸡240只(公母各占1/2),随机分为5个组(在玉米-豆粕型饲粮中分别添加3 000、6 000、15 000、30 000和45 000 IU/kg维生素A),每个组6个重复,每个重复8只鸡,试验期42 d。结果表明:1)饲粮中添加不同水平维生素A对22~42日龄肉鸡的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及1~42日龄肉鸡的ADFI均有显著影响(P<0.05),对22~42日龄肉鸡的料重比(F/G)的影响有显著的趋势(0.05≤P<0.10),且22~42日龄和1~42日龄肉鸡的ADFI以及1~42日龄肉鸡的F/G随饲粮维生素A添加水平的增加均呈线性升高(P<0.05或0.05≤P<0.10),3 000 IU/kg组肉鸡增重效果较差,6 000和15 000 IU/kg组肉鸡增重高且F/G低,30 000和45 000 IU/kg组肉鸡ADFI较高、F/G不同程度升高。2)饲粮添加不同水平维生素A对21日龄血清白细胞介素-1(IL-1)和42日龄血清IL-1、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量有显著影响(P<0.05),对42日龄血清白细胞介素-2(IL-2)含量的影响有显著的趋势(0.05≤P<0.10),其中3 000、6 000和45 000 IU/kg组血清免疫因子含量较低,15 000 IU/kg组较高。3)饲粮添加不同水平维生素A对21日龄血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和42日龄血清GSH-Px、过氧化氢酶(CAT)活性有显著影响(P<0.05),且21日龄血清丙二醛(M DA)含量随饲粮维生素A添加水平的增加呈线性升高趋势(0.05≤P<0.10),42日龄血清MDA含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性随饲粮维生素A添加水平的增加分别呈显著的一次线性和二次曲线升高(P<0.05),其中45 000 IU/kg组血清MDA含量较高且T-SOD活性较低。综上,本试验条件下添加6 000和15 000 IU/kg的维生素A可使肉鸡获得较好的生长性能,且15 000 IU/kg维生素A可满足肉鸡免疫和抗氧化需要,而添加水平增至30 000和45 000 IU/kg时肉鸡生长性能和免疫抗氧化机能均有降低趋势。     

安徽三黄鸡β-防御素Gal-6cDNA基因片段的克隆与序列分析

根据基因库中鸡β-防御素Gal-6cDNA基因序列设计2对引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从安徽三黄鸡白细胞RNA中扩增了β-防御素Gal-6cDNA基因片段。得到了大小为250bp片段。将扩增产物纯化并克隆到PGEM-T-Easy载体上,转化感受态细胞DH-5α,经筛选获得重组质粒并测序,用P3/P4引物从重组质粒中扩增出成熟肽,大小约150个bp。测序后Blast分析表明,安徽三黄鸡序列与基因库上已发表的序列相差一个碱基,Gal-6多肽共有67个氨基酸组成,分别是20个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸的原片段、42个氨基酸的成熟肽。     

喷施6-BA对紫花苜蓿耐热性的影响

通过不同浓度和不同喷施次数处理研究了6-苄基腺嘌呤(6-BA)对紫花苜蓿热激胁迫下形态和生理反应的影响.实验结果表明: 喷施6-BA处理,⑴明显增加了紫花苜蓿恢复生长期植株鲜重、单株叶片数和分枝数增加量,其中30mg/L 6-BA处理的作用效果最显著;⑵明显提高了紫花苜蓿热激胁迫下保护酶POD活性,且低浓度喷施两次效果明显;⑶提高了热激过程中和恢复生长期苜蓿叶绿素含量,但差异不显著;⑷明显降低了膜脂氧化产物-MDA含量,其中30mg/L喷施两次与其它处理差异显著.6-BA不同处理均有减轻高温伤害和促进后期生长的作用,但不同浓度、不同喷施次数的6-BA作用效果不同,其中30mg/L浓度喷施两次效果最佳,表明低浓度、多次喷施6-BA 可以有效补充紫花苜蓿因高温造成的激素合成量减少,进而减轻高温伤害.     

DA-6对野大麦幼苗光合作用和生长的影响

研究了不同浓度的植物生长促进剂--DA-6对野大麦Hordeum brevisubulatum幼苗光合作用和生长的影响.在二叶期喷施较低质量浓度(5 mg/L,10 mg/L)的DA-6,可显著促进幼苗生长和叶绿素含量的提高;四叶期喷施较高质量浓度(20 mg/L,30 mg/L, 40 mg/L)的DA-6,可显著提高野大麦幼苗的生物量,其中20 mg/L和30 mg/L的处理,幼苗生物量分别提高55.1%和59.6%;光合作用能力分别提高12.8%和18.1%.     

6-BA和保水剂对匍匐翦股颖种茎耐贮性的影响

用不同浓度的6-BA、保水剂和6-BA＋保水剂配合处理粤选1号匍匐翦股颖种茎,以清水做对照（CK）,以探讨它们对匍匐翦股颖种茎采后贮藏2～16d的影响。结果表明：经6-BA、保水剂处理后后种茎保水能力提高,但保水剂处理易造成种茎贮藏期间萌动。进一步试验表明,贮藏期问7．5和10mg／L6-BA以及7．5mg／L6-BA＋2g／L保水剂处理种茎出苗势、成活率均有所提高,尤其是7．5和10mg／L6-BA处理的种茎在贮藏第16d成活率仍高速909,6以上,与对照相比差异显著（P〈0.05）;各处理对种茎萌发后的地上和地下生长均有一定促进作用;单施保水剂处理种茎在贮藏期间易萌动,不利于种茎贮藏。     

6-BA对假俭草绿期影响的研究

用6-BA(0、5、10、15和20 mg/L)对盆栽假俭草Elemochloa ophiuroides优良品系E-126进行处理,研究其对提高假俭草的抗寒性和绿期的影响.结果表明,在低温条件下,6-BA处理的假俭草与对照相比,不仅降低了电导率,抑制了叶绿素的分解,而且提高了可溶性糖、脯氨酸的含量,从而提高了抗寒性,延长了青绿期,其中效果最好的处理为10 mg/L,可延长假俭草绿期16～17 d.     

鸭、鹅Gal-6的克隆与序列分析

根据GenBank公布的鸡β-防御素Gal-6基因序列设计2对引物，应用反转录-聚合酶链式反应技术，从鸭、鹅不同组织中扩增了β-防御素基因片段，大小为250bp。选取鸭16个组织和鹅的肝脏检测其表达情况，结果表明，除在肾、皮肤、法氏囊外，其他组织均检测为阳性。经筛选获得重组质粒并测序，从重组质粒中扩增出成熟肽，大小约150bp。克隆的多肽由67个氨基酸组成，分别是20个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸的原片段、42个氨基酸的成熟肽。BLAST分析表明，鸭基因序列与基因库中已公布的序列相差1个碱基，鹅基因序列则完全相同。     

N.b和SCM6交叉感染对家蚕中肠碱性磷酸酶活性的影响

以家蚕病原性微孢子虫Nosema Bombyx和SCM6交叉感染家蚕,每种交叉感染设不同病原浓度下的同时攻毒和先后攻毒处理,每2d取样测定中肠碱性磷酸酶活性.试验结果表明,当家蚕受到不同浓度的N.b、SCM6感染及不同组合的交叉感染后,受到感染的家蚕中肠AKP活性均出现一定程度的降低,被SCM6/N.b组合感染的家蚕中肠AKP活性高于N.b/SCM6及N.b-SCM6组合.     

一株鸭源H6N6亚型禽流感病毒的全基因组序列分析及对小鼠的感染性研究

为了解H6N6亚型禽流感病毒(AIV)的生物学特性,本研究对2015年在广东活禽交易市场分离的一株鸭源AIV DK/GD/S1182/2015(H6N6)进行了全基因组测序、遗传演化分析和对BALB/c小鼠的感染性试验。序列分析显示,该病毒的HA蛋白裂解位点处仅有一个碱性氨基酸,符合低致病性AIV的分子特征;HA蛋白的222V和228S,可以增强病毒对α-2,6唾液酸受体的结合能力。NA蛋白颈部有11个氨基酸的缺失,这将会影响NA的神经氨酸酶活性;该病毒可能是2010年广东H6N6猪流感病毒与2014年广西AIV重组产生。小鼠感染性试验表明,该分离株不需要预先适应就能够在小鼠的肺脏内高效复制,提示该分离株具有感染哺乳动物的潜在风险。本研究对H6亚型AIV监测和相关生物学特性研究具有一定的指导作用。     

新城疫油佐剂灭活疫苗对鸽的免疫试验

用新城疫 (ND)油佐剂灭活疫苗以 1mL/只注射鸽子 ,试验鸽无不良反应 ;以 0 1mL/只免疫鸽子后 ,试验鸽在 2 4天时HI水平从免疫前的 0上升到 2 7 3 ,经ND标准强毒攻击 ,免疫鸽获 6 /6的全保护     

人参皂甙Rb1和黄芪多糖对微血管内皮细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响

取中药提取物人参皂甙Rb1和黄芪多糖作用于体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞，用硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）、ELISA法测定白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF—α）水平的变化，为分析其免疫作用机制提供试验依据。微血管内皮细胞在人参皂甙Rb1和黄芪多糖的作用下，细胞分泌NO、IL-6和TNF—α均增多，并且随着浓度的增加内皮细胞分泌量也增加。