‘杂花’薰衣草再生体系的建立

为了获得高效稳定的薰衣草再生体系,本研究以‘杂花’薰衣草叶片为试材,研究了不同激素及浓度对愈伤组织诱导、不定芽分化及不定根形成的影响。结果表明：6-BA与NAA及6-BA与2,4-D组合均能诱导愈伤组织形成,最佳培养基配方分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,出愈率分别为95.2%、92%;6-BA与NAA组合诱导不定芽的效果显著优于6-BA与2,4-D的组合,适合诱导再生芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,分化率为68.1%;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,生根率为91.1%。本研究建立了‘杂花’薰衣草的再生体系,为利用转基因技术培育高产优质的薰衣草新品种提供技术支持。     

桔梗试管苗再生体系优化研究

桔梗有极高的药用作用和观赏价值.本试验以桔梗试管苗为外植体,通过筛选最适桔梗试管苗叶片愈伤组织诱导、分化、生根激素种类和浓度,对其再生体系进行优化.结果表明,最适的愈伤组织诱导培养基为:MS+4 mg/L 2,4-D+ 30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂;最适分化培养基为:MS+ 0.5 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂;最适生根培养基为:1/2 MS+0.25 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂.     

甜叶菊花药离体培养技术体系的建立

以‘皖甜1号’甜叶菊花蕾为试验材料,利用正交设计L9(34),分别以MS、B5和N6为基本培养基,研究了不同浓度的NAA、6-BA以及蔗糖和低温预处理、暗处理时间等条件,对甜叶菊花药愈伤组织诱导的影响以及不同培养基对甜叶菊花药愈伤组织分化影响。试验得出甜叶菊花药愈伤组织最佳诱导的培养基配方为MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,低温预处理1 d、暗培养14 d有利于甜叶菊愈伤组织的诱导,甜叶菊愈伤组织分化诱导的最佳培养基配方为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,不定芽在不加任何植物生长调节剂的MS培养基上伸长后,接种在1/2 MS+0.1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂培养基上生根效果好,生根率可达93.33%。该试验初步建立了甜叶菊花药离体培养技术体系,获得了甜叶菊花药培养再生植株,为甜叶菊新种质的创制和新品种的选育提供了帮助。     

腊花组培快繁体系研究

为探讨最适初代诱导、增殖继代生根的培养基配方,建立腊花的组织培养技术体系,以腊花嫩茎尖为实验材料,采用MS培养基,向培养基中添加不同配比组合的KT和NAA,对腊花进行初代诱导培养;设置6-BA和NAA不同激素浓度组合进行增殖培养;选用1/2MS培养基为腊花生根培养的基础培养基,添加IBA不同浓度配比培养实验。最佳初代诱芽培养基为MS+ KT 3.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L+琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L,pH 5.8,诱导率达88.8%。最佳增殖培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ 琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L,pH 5.8,增殖系数为3.6。最佳生根培养基为1/2MS+ IBA 0.6 mg/L+琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L+0.1 g/L活性炭,pH 5.8,生根率100%。     

红茄子叶和下胚轴离体再生体系研究

本研究以红茄的子叶和下胚轴为外植体,研究其子叶和下胚轴在不同激素的浓度和组合下分化率及再生频率的变化。在诱导愈伤组织时,低浓度的NAA和高浓度的6-BA会导致下胚轴的诱导能力略低于子叶;IAA和ZT的浓度升高时,红茄下胚轴的分化率随之增加,红茄子叶的分化率随之降低。在IAA浓度为0.3 mg/L时,不定芽分化率达到最高;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA;不定芽诱导最佳培养基为MS+0.3 mg/L IAA+2.0 mg/L 6-BA;不定芽生根最佳培养基为1/2MS。本研究建立的红茄再生体系,为红茄遗传转化研究奠定了基础。     

基于正交设计的铁皮石斛组织培养和耐盐性研究

利用正交设计法研究不同浓度的蔗糖及不同浓度NAA、6-BA、KT等激素对铁皮石斛组织培养的影响,并对铁皮石斛愈伤组织、分化组织、生根苗的耐盐性进行了分析。结果表明:铁皮石斛愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+蔗糖15g/L,分化组织增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+蔗糖15g/L,分化苗生根最适培养基为MS+活性炭1.0g/L+NAA 0.4mg/L+蔗糖30g/L。铁皮石斛愈伤组织耐盐临界浓度为0.6%,分化组织耐盐临界浓度在0.3%~0.6%之间,生根苗耐盐临界浓度在0.6%~0.9%之间。     

油菜不同类型外植体组织培养及再生研究

为建立高效的组织培养体系，以甘蓝型油菜杂交品种恢复系627R、621R和616R材料田间种植植株的侧芽、花托和无菌种子实生苗下胚轴为外植体，探索不同苗龄、预培养时间、预培养基、愈伤分化培养基、诱导出芽培养基以及成苗壮苗培养基中激素配比对芽再生、成苗植株生长势的影响。结果表明：无菌苗快速繁殖体系中，发芽6 天的无菌苗下胚轴或者子叶在预培养（MS+ 2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0 mg/L 6-BA+ 30 g/L 蔗糖+ 8 g/L 琼脂，pH 5.85）3 天后转移到分化培养基MS+ 3 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L NAA+5 mg/L AgNO3+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂(pH 5.85)，或者MS+ 3 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L IAA+ 5 mg/LAgNO3+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂(pH 5.85)生长，可以获得较高的芽再生频率，对于田间生长到抽薹开花期植株取样的外植体，腋芽的出芽频率高于花托培养的出芽频率，但是这2 类外植体在分化培养基（MS+ 10 mg/L 6-BA+ 1 mg/L NAA+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂，pH 5.85）生长30 天后都有成苗的潜力，上 述外植体经过组织培养出芽后转移到添加矮壮素的培养基（MS+15 mg/L CCC+15~20 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂，pH 5.85）上继续生长30 天，能够得到根系发达、生长势强的植株。甘蓝型油菜优良恢复系建立的组织培养体系能够快速获得生长势优的油菜植株，加速油菜良种的繁殖与评价。     

无籽西瓜茎段组织培养与嫁接育苗技术研究

以无籽西瓜(Citrullus lantus)墨童无菌苗的茎段为外植体,对组织培养与嫁接育苗技术研究进行了研究。结果表明：不同消毒剂对种胚萌发有一定影响,其中消毒剂二氧化氯250mg/L 处理有利于种胚萌芽,萌发率达82.5%;子叶芽诱导的最佳培养基配方为1/2MS +IAA0.2 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L;不同激素浓度对芽丛增殖和单芽生根也有一定影响,其中MS +6-BA0.4 mg/L +IAA0.2 mg/L +蔗糖30g/L+琼脂7g/L继代培养增殖率最高;MS+NAA0.5mg/L生根率最高(96.2%)。     

大白菜‘津育60’遗传转化前后组织培养条件的优化

为大白菜的遗传转化研究建立较高频率的组织再生体系,选择白菜子叶-子叶柄作为外植体,通过正交试验优化了农杆菌侵染前后的组织培养条件。结果显示：侵染前的最佳分化培养基组合为MS培养基+3 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+4 mg/L AgNO3+2%蔗糖+0.8%琼脂,侵染后的最佳分化培养基组合为MS培养基+3 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+4 mg/L AgNO3+2%蔗糖+0.8%琼脂。6-BA与NAA的浓度比由侵染前的3:0.3调整为3:0.01。     

条叶唇柱苣苔组织培养研究

以条叶唇柱苣苔(Chirita ophiopogoidesDFang etW T Wang)的幼嫩叶片、种子为外植体,以MS为基本培养基,建立了条叶唇柱苣苔的组织培养和再生体系.试验结果表明:条叶唇柱苣苔叶片诱导不定芽的最佳培养基为MS +2,4-D0.5 mg/L+ IAA 0.5 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,丛生芽分化的最佳培养基为MS+ KT 1.0 mg/L+ IAA 3.0 mg/L+ NAA 0.5mg/L; MS+ NAA 0.5 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L的培养基最适合继代,MS+ IBA 2.0 mg/L+ AC 0.5 mg/L培养基的生根效果最好,平均根长为4.67 cm,生根率达100％.     

马铃薯不同品种块茎再生体系的建立和优化

为建立最佳的马铃薯块茎再生体系,本研究分别以‘夏坡蒂’、‘费乌瑞它’以及‘克新1号’的试管薯和大田薯为试验材料,采用控制变量法对马铃薯块茎再生体系进行筛选,以获得其培养基最佳激素浓度配比,并对不同来源马铃薯块茎不定芽分化率进行对比。结果表明,‘夏坡蒂’、‘费乌瑞它’和‘克新1号’愈伤组织的最佳诱导培养基组合分别为MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L GA3+1 mg/L ZT、MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L GA3+2 mg/L ZT和MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3+2 mg/L ZT。‘夏坡蒂’与‘费乌瑞它’的不定芽最佳分化培养基组合为MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3+2 mg/L ZT;‘克新1号’的最佳分化培养基组合为MS+1 mg/L IAA+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L GA3+2 mg/L ZT。试管薯的块茎不定芽分化率显著高于大田薯。     

四季凤仙的组织培养及快繁体系的建立

以四季凤仙的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,对四季凤仙的组织培养及快繁技术进行了研究。结果表明:最佳的外植体除菌方式为5%的NaClO处理5min;四季凤仙的最佳不定芽诱导培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.10mg/L+GA30.01mg/L;芽的最佳增殖培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L;最佳生根培养为:1/2MS+IAA1.0mg/L。     

芝麻子叶基因转化受体系统的建立

试验以芝麻栽培种豫芝11号为材料,对子叶丛生芽诱导及植株再生体系以及子叶受体材料对卡那霉素、潮霉素和头孢霉素的天然耐性进行了研究,建立了芝麻子叶基因高频转化受体系统.结果表明,适宜的诱芽培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA+5.0 mg/L AgNO3 +1.0 mg/L ABA+3％蔗糖...     

濒危药用植物天山雪莲高效植株再生体系的建立

以濒危药用植物天山雪莲叶片为研究材料进行组织培养和植株再生研究,旨在建立天山雪莲的高效植株再生体系,为其种群复壮、资源保护与可持续利用提供技术参考。研究结果表明:适合天山雪莲叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D(0.5 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L),诱导出愈率为97%;适合愈伤组织丛生芽分化的最佳培养基为MS+NAA(0.05 mg/L)+6-BA(0.4 mg/L)+水解乳蛋白(500 mg/L),分化率为66%,增殖倍数为5.1;适合生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA(0.3 mg/L),在此条件下,根发育良好,生根率为76.9%,植株健壮;组培苗炼苗后移栽,成活率可达89%。     

大花萱草不定芽直接诱导和植株再生的研究

本研究旨在不通过愈伤途径，直接诱导大花萱草不定芽，并建立相应的植株再生技术体系。实验以大花萱草‘32-1’幼芽为外植体，配制不同激素和活性炭的培养基，考察各因素对大花萱草植株再生的影响。结果表明：不同激素配比对大花萱草‘32-1’初代培养、继代增殖和生根培养影响差异显著。最适初代培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L，启动率和增殖系数分别是100.00%和5.60，可直接诱导出不定芽；最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，增殖系数为3.47；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+AC 2 g/L。     

影响甜樱桃离体小叶片再生的关键因子研究

适当提高蔗糖浓度能明显改善甜樱桃试管苗的状态，在F14培养基蔗糖浓度由原来2%增加到6%，增殖倍数由1~2增加到25~30，叶片由黄绿无光变为浓绿油亮，保持天数由原来的15d增加到70d。经过4步骤程序培养可以获得小叶片再生，即：①将普通继代试管苗接入F14（附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA30.2mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L，pH5.8）继代培养30d，获得小叶型高分化试管苗。②剪取并且横切2~3刀后将小叶片，先在0.1%VC无菌水中浸泡1到30min，然后接入MS或F14或WPM（附加6-BA2mg/L+2，4-D2mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L，pH5.8）进行光照培养3~4d，获得剪切口组织脱分化的小叶片。③转接1/2大量元素的WPM培养基（附加6-BA2mg/L+IAA2mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L，pH5.8）及在环境控制（15h/24h日光周期变化,光照2000lux，温度20℃；黑暗，温度15℃）下培养20~30d，得到诱导出红色愈伤组织（含有花色苷）的小叶片。④转接F14培养基（附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA32mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L，pH5.8）培养20d后得到由红色愈伤组织中萌发出不定芽，同时颜色变淡。小叶片再生不定芽率可达91%。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’高效再生体系的建立

矮牵牛(Petunia hybrida)是研究植物芳香性状的理想材料,但目前有关芳香型矮牵牛转基因技术体系的研究较少,为建立芳香型矮牵牛的高效再生体系,本研究以特异挥发苯环类物质的芳香型品种‘Carpet Blue’为材料,进行了表面消毒、愈伤组织诱导与不定芽分化、不定芽增殖、不定芽生根等研究。结果表明:先用75%酒精(C₂H₅OH)漂洗30 s,再用5%次氯酸钠(NaClO)消毒8 min,表面消毒效果最好,无菌外植体获得率可达93.75%;愈伤组织诱导与不定芽分化最适培养基为:MS+1.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L萘乙酸(NAA),诱导率可达100%,且能分化出健壮的不定芽;最适不定芽增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数可达14.67倍;最适生根培养基为1/2MS+0.05 mg/L吲哚丁酸(IBA),生根率为100%,平均根数达37.67条,平均根长达2.61 cm,生根指数最高,达9.82,单条不定根最长可达5.22 cm;炼苗移栽后,成活率高达92.50%。本研究初步建立了芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’的高效再生体系,为后续通过转基因手段研究苯环类挥发物质的代谢规律奠定了坚实基础。     

金鱼藤的组织培养和快速繁殖体系的建立

以金鱼藤(Asarina procumbens)叶柄为外植体,MS为基础培养基,进行组织培养和快速繁殖,研究不同浓度的植物生长调节剂对金鱼藤快繁体系建立的影响,建立了金鱼藤无性繁殖体系。结果表明,金鱼藤愈伤诱导的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA;不定芽分化最佳培养基为MS+1.5mg/L6-BA+(0.3~0.5)mg/LNAA+0.3mg/L KT;丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/L NAA,最佳生根培养基为MS培养基。