伊氏锥虫、马媾疫锥虫、布氏锥虫、刚果锥虫的18S rDNA部分序列测定与系统发育关系

对伊氏锥虫（Trypanosoma evansi）：新疆株（XJCA）、湖北株（HBM）、云南株（YNB）、广东株（GDB2）；马媾疫锥虫（Trypanosoma equiperdum）、布氏锥虫（Trypanosoma brucei）、刚果锥虫（Trypanosoma congolense）提取基因组DNA，根据已报道的伊氏锥虫株18SrDNA基因序列设计合成引物，用PCR扩增了锥虫虫株基因组DNA,伊氏锥虫新疆株、湖北株、云南株、广东株、布氏锥虫、刚果锥虫均为373bp的片段；马媾疫锥虫为372bp的片段，PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化，纯化后PCR产物经连接、转化后测序，将测得的序列用DNAMAN软件分析并与国外已发表的相应序列进行了同源性比较，并绘制了系统发育进化树。结果与国外AJ009153、AJ223564、D89527株同源性达到99％～100％，与另外11株同源性75％。本研究为锥虫分子流行病学研究及分类研究打下基础。     

伊氏锥虫和布氏锥虫动基体DNA酶切电泳比较

限制性内切酶ＭｂｏＩ，ＤｄｅＩ，Ｈｉｎｆｉ和ＴａｑＩ对布氏锥虫ＫＤＮＡ进行酶切后，电泳中均显示出多条ＤＮＡ区带，其总Ｋｂ数约等于２０ｋｂ，而各限制酶对伊氏锥虫ＫＮＤＡ消化后均显示出１至２条区带，总和约１ｋｂ明显区别于布氏锥虫。     

布氏锥虫的一种核苷酸运输系统与药物抗性有关

病原体的药物抗性是日益严重的问题，其机制尚不完全了解。一般认为细胞摄入抗布氏锥虫的药大多是通过一种至今尚未被识别的不平常的腺苷运输系统发生的，使用酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）以功能筛选的方法克隆了布氏锥虫指名亚种（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ ｂｒｕｃｅｉ）的一个编码核苷酸运输系统的基因－ＴｂＡＴ１。ＴｂＡＴ１在酵母中表达时，使酵母能摄取腺苷，并赋予对密胺基苯胂类药物（Ｍｅｌａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌ ａｒｓｅｎｉｃａｌｓ）的敏感性，抗药锥虫藏匿缺损ＴｂＡＴ１的变种，杀锥虫药进入细胞途径的分子识别开辟了诊断和治疗抗药锥虫病的途径。     

布氏锥虫马媾疫亚种体外培养的研究

用小白鼠腹腔巨噬细胞滋养层系统和无细胞培养系统成功地培养了布氏锥虫马媾疫亚种。开始建立无细胞培养系统培养时,从第6天起每日补种少量滋养层细胞系统培养的虫体,于3周内逐步建立了适应于无细胞培养系统的锥虫群体。长期连续培养两种系统培养物的虫密度均可稳定保持在7—10.O×10~5/ml左右,虫体有规律地呈岛屿状密集分布。培养液内2—ME和马血清的适宜浓度分别为0.3mM和20%,添加0.1mM次黄嘌呤可使培养物虫密度增加1倍左右,用烛罐可取代CO_2培养箱。体外连续培养120天。锥虫仍保持细长形态,具表面被膜,对小白鼠有感染性。     

布氏锥虫的葡糖基磷脂酰肌醇（GPI）

研究寄生虫有多种原因,其中最主要的原因是寻找新的防治方法,我们将来的许多研究将直接为了这个目的。不过,另一个重要原因是探索寄生虫有趣的生物学。这是由于寄生虫有奇特的生活史并交换根本不同的宿主,它们常对自己特殊的环境形成高度的适应性,这些适应性的研究已经揭示了一些基本的生物学机制。例如,对布氏锥虫（引起人的睡眠病和动物链虫病）的研究,使我们了解到葡糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol,GPI）蛋白质膜钩（proteinanchors）当布氏锥虫变异表面精蛋白（variantsurfaceglycoprotein,VSG）在1975年首…     

锥虫的抗药性

锥虫是人畜共患的寄生虫，主要分布在亚洲、非洲和拉丁美洲广大地区，锥虫病也是我国主要家畜寄生虫病之一，曾造成大批牛、马、骆驼发病死亡，防治锥虫病一向靠药物，长期使用药物后锥虫逐渐产生了抗药性，国外对这个问题早有发现，迄今已发表有关论文数百篇。国内注意较晚，于1988年在上海举行的以英法专家为主的国际性学术报告会上，云南畜牧兽医总站李松柏第一次公开谈到这个问题，他报道在云南省发现常用抗锥虫药按厂方推荐剂量已难于治愈家畜伊氏锥虫病，必须加倍剂量才能有效。1991年沈杰等报道，用小白鼠试验表明，抗锥虫特效药安推…     

布氏锥虫Trx-putative和Trx-like的抗氧化功能研究

硫氧还蛋白(Trx)是一种氧化还原调节蛋白,参与锥虫抗宿主氧化,生物信息学分析发现Trx-putative和Trx-like含有与Trx一样的"Tioredoxin-like super family"结构域,为了阐明其抗氧化功能,通过原核表达方法获得其重组蛋白,重组蛋白免疫SD大鼠制备抗性血清,间接免疫荧光试验观察其...     

布氏锥虫C型凝集素类似蛋白的鉴定

C型凝集素在机体免疫系统中具有重要的作用.为了解布氏锥虫(T.brucei)基因组编码的C型凝集素类似蛋白(CLLPs),本研究在GeneDB数据库中通过软件鉴定了13种T.brucei基因组编码的CLLPs家族基因序列,并分析它们之间的遗传进化关系.同时,采用RT-PCR方法检测了其中3种CLLPs基因在血液阶段(BSF)T.brucei虫体内的转录.利用PCR扩增并在大肠杆菌中对所选3种基因进行表达,以表达的重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.实验结果表明,本研究选择的3种CLLPs基因在BSF T.brucei虫体内均能够进行转录;而通过间接免疫荧光检测表明所选的3种CLLPs基因中,只有一种CLLP (Tb5290)在T.brucei的BSF阶段和昆虫阶段(PCF)表达.本研究首次在T.brucei中鉴定了C型凝集素家族的新成员,为进一步了解CLLPs在T.brucei中的生物学功能的研究奠定了基础.     

伊氏锥虫对杀锥虫药抗性的体外试验

伊氏锥虫对杀锥虫药抗性的体外试验涂洁贵摘译沈永林校１引言随着锥虫病流行地区的抗寄生虫药物广泛应用，开发新的抗锥虫药物来防止抗性的发生尤为紧迫。然而制药厂家对投资开发抗锥虫药兴趣甚微。使今后引进新药明显不可能，因此必须致力保持现有杀锥虫药的效果。在癌症...