糖源对棉花花药培养的影响：II糖源对棉花花药愈伤组织增殖？…

不同糖源诱导产生的愈伤组织具有一定的后效应，一般在诱导阶段生长较慢的愈伤组织当转入同一培养基上培养时则表现出优势。以可溶性淀粉、蔗糖和麦芽糖为糖源的培养基上均可诱导棉花花药愈伤组织获得了胚胎发生和胚状体；葡萄糖虽有利于棉花花药愈伤组织生长，但却没能诱导胚胎发生和胚状体的形成。乳糖即不利于愈伤组织的生长，又不利于胚状体的形成。半乳糖作为糖源，愈伤组织虽能增殖，但生长速度极慢。山梨糖不能被棉花花药愈伤     

糖源对棉花花药培养的影响──Ⅱ 糖源对棉花花药愈伤组织增殖和分化的影响

不同糖源诱导产生的愈伤组织具有一定的后效应,一般在诱导阶段生长较慢的愈伤组织当转入同一培养基上培养时则表现出优势。以可溶性淀粉、蔗糖和麦芽糖为糖源的培养基上均可诱导棉花花药愈伤组织获得了胚胎发生和胚状体;葡萄糖虽有利于棉花花药愈伤组织生长,但却没能诱导胚胎发生和胚状体的形成。乳糖即不利于愈伤组织的生长,又不利于胚状体的形成。半乳糖作为糖源,愈伤组织虽能增殖,但生长速度极慢。山梨糖不能被棉花花药愈伤组织吸收,故以山梨糖为糖源时愈伤组织极易褐化死亡。甘露醇的添加促进了葡萄糖诱导形成胚性愈伤组织和胚状体。     

糖源对棉花花药培养的影响：I糖原对棉花花药愈伤组织诱导的 …

糖源在棉花花药培养中起着重要作用,不同糖源所起的作用不同。可溶性淀粉、蔗糖和葡萄糖有利于棉花花药愈伤组织的诱导和生长;麦芽糖对花药愈伤组织的诱导和生长促进作用不大;乳糖不利于愈伤组织的诱导。甘露醇的添加抑制了愈伤组织的诱导和生长。不同糖浓度对棉花花药愈伤组织诱导和生长的影响也不同,一般低浓度糖易诱导形成愈伤组织和愈伤组织的快速增殖。蔗糖的最佳使用浓度为３０ｇ／Ｌ。在不含糖源的培养基上棉花花药不能诱     

糖源对棉花花药培养的影响──Ⅰ 糖源对棉花花药愈伤组织诱导的影响

糖源在棉花花药培养中起着重要作用,不同糖源所起的作用不同。可溶性淀粉、蔗糖和葡萄糖有利于棉花花药愈伤组织的诱导和生长;麦芽糖对花药愈伤组织的诱导和生长促进作用不大;乳糖不利于愈伤组织的诱导。甘露醇的添加抑制了愈伤组织的诱导和生长。不同糖浓度对棉花花药愈伤组织诱导和生长的影响也不同,一般低浓度糖易诱导形成愈伤组织和愈伤组织的快速增殖。蔗糖的最佳使用浓度为３０ｇ／Ｌ。在不含糖源的培养基上棉花花药不能诱导形成愈伤组织,继代培养的愈伤组织也不易生长。培养条件和基因型也影响着糖源的使用效果。当以淀粉为糖源时,其具有胞外水解作用。     

糖对椰枣组织培养物的影响

【目的】为降低椰枣愈伤组织褐化率和提高体胚发生率,研究培养基中不同糖处理对愈伤组织和体胚发生的影响,为优化培养基配方提供依据。【方法】以椰枣组织培养物为研究对象,进行3种糖处理（蔗糖、蔗糖+果糖、蔗糖+葡萄糖）的组织培养试验,统计椰枣愈伤组织褐化率及体胚发生率,测定不同糖处理下愈伤组织、体胚和不定芽的淀粉、蔗糖、果糖、葡萄糖含量,综合分析不同糖处理对椰枣组织培养物影响的差异。【结果】在蔗糖培养基中增加果糖,体胚和不定芽的蔗糖含量和葡萄糖含量下降,愈伤组织和体胚的果糖含量及愈伤组织的淀粉含量上升,愈伤组织褐化率升高。在蔗糖培养基中增加葡萄糖,不定芽蔗糖含量和愈伤组织果糖含量降低,愈伤、体胚和不定芽的淀粉含量上升,愈伤和体胚的葡萄糖含量上升,体胚发生率升高。愈伤组织和体胚的淀粉和果糖含量显著高于不定芽的淀粉和果糖含量（P<0.05,下同）,愈伤组织的葡萄糖含量显著高于体胚和不定芽,体胚的蔗糖含量显著高于不定芽,不定芽的蔗糖含量显著高于愈伤组织。相关分析结果表明:愈伤组织褐化率与愈伤组织果糖含量、不定芽果糖含量均呈显著正相关;体胚发生率与体胚淀粉含量呈显著正相关;体胚发生率与体胚蔗糖含量、愈伤组织褐化率与愈伤组织果糖含量均呈极显著正相关（P<0.01,下同）;体胚发生率与体胚蔗糖含量、愈伤组织葡萄糖含量、体胚葡萄糖含量均呈极显著正相关,同时,与体胚淀粉含量呈显著正相关。【结论】在椰枣愈伤组织诱导与增殖培养过程中减少果糖的用量,在体胚发生培养时增加葡萄糖的用量,可降低愈伤组织的褐化率,提高体胚发生率。     

碳源对柑橘愈伤组织生长及体细胞胚胎发生能力的影响

为探讨继代多年的柑橘愈伤组织不能再生胚状体的原因,寻找碳源与柑橘愈伤组织体细胞胚胎发生之间的关系和选择柑橘愈伤组织快速生长的最佳碳源,本文就碳源对柑橘愈伤组织生长及体细胞胚胎发生能力的影响进行了探讨。结果表明:蔗糖和葡萄糖有利于柑橘愈伤组织生长,乳糖和甘油对柑橘愈伤组织的生长影响较小,而可溶性淀粉不利于柑橘愈伤组织的生长。不同碳源对具有体细胞胚胎发生能力的柑橘愈伤组织的影响各异,但对于失去再生能力的柑橘愈伤组织而言,不同碳源对其体细胞胚胎发生不起作用。     

不同糖源在球根花卉花粉萌发过程中的作用

以百合、唐菖蒲、郁金香和风信子等4种球根花卉花粉作为试材,研究了淀粉、果糖、麦芽糖、葡萄糖、乳糖和蔗糖等6种不同糖源的培养基对不同球根花卉花粉萌发率和花粉管生长状况的影响。结果表明,不同球根花卉花粉萌发对外源糖的利用存在选择性,对于不同植物种类,各糖源适宜的处理浓度也有所不同。唐菖蒲、郁金香和风信子对外源糖具有依赖性,而百合花粉在蒸馏水培养基中也能萌发。乳糖在各类球根花卉花粉萌发中的促萌效果最为显著,而其他糖源在球根花卉花粉萌发过程中的作用则稍有差异,对唐菖蒲、郁金香与风信子花粉,仅次于乳糖的糖源是葡萄糖,对于索邦百合花粉和兰州百合花粉较次的糖源分别为麦芽糖和蔗糖,淀粉的效果最差。     

栓皮栎胚性和非胚性愈伤组织生化特性研究

植物体细胞胚胎发生是一个复杂的过程,为进一步揭示胚性愈伤组织诱导的潜在能力,以栓皮栎未成熟合子胚诱导产生的胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织为材料,通过对可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、游离脯氨酸、总酚含量和蛋白酶活性的测定,研究体细胞胚胎发生过程中2种愈伤组织生化特性的差异。结果表明,胚性愈伤组织中可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白质及脯氨酸含量分别为97.6、25.3、28.3 mg·g^-1和202.8 mg·g^-1,均高于非胚性愈伤组织;两者的蛋白酶活性无显著性差异;但非胚性愈伤组织中多酚类化合物的含量显著高于胚性愈伤组织。     

碳源及植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响

[目的]研究不同碳源和植物生长调节剂对亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的影响。[方法]以亳芍根茎为外植体,改变培养基中碳源(蔗糖、果糖、葡糖糖、麦芽糖、可溶性淀粉)和植物生长调节剂种类(6-BA、NAA、2,4-D),考察亳芍愈伤组织增长量和芍药苷积累量。[结果]碳源中,对亳芍愈伤组织的增长量以蔗糖最高,葡糖糖最有利于芍药苷积累;组合使用植物生长调节剂6-BA、NAA和2,4-D比单独使用6-BA更有利于愈伤组织生长和芍药苷积累,但高浓度的2,4-D抑制愈伤组织生长和芍药苷积累。[结论]确定了亳芍愈伤组织生长和芍药苷积累的最佳碳源和植物生长调节剂组合,为葡萄糖30 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L。     

棉花体细胞胚胎发生及主要物质生化代谢机制

本文利用组织培养和生理生化分析技术对陆地棉体细胞胚胎发生及主要生化代谢物质蛋白质、氨基酸、碳水化合物、可溶性糖等进行了初步的分析，对于鲜重变化进行了测定。结果表明：胚性愈伤组织蛋白质和碳水化合物含量则减少；氨基酸含量胚性愈伤组织普遍高于非胚性愈伤组织，个别氨基酸含量则明显增加或降低。胚性愈伤组织干物质累积较非胚性愈伤组织显著。     

棉花优良新品种泗棉3号高频体细胞胚发生和植株再生的研究

选择我国棉花优良品种泗棉３号进行组织培养，获得了具有高频胚胎发生的愈伤组织、胚状体和小植株。在附加ＺＴ的ＭＳ培养基上，泗棉３号的下胚轴、子叶、根均诱导获得了愈伤组织，但其形成率和形成量不同，其中下胚较易诱导获得愈伤组织，根和子叶较差。ＺＴ对愈伤组织形成和生长影响较大，其在愈伤组织诱导中较适的使用浓度为３．０或５．０ｍｇ／Ｌ。     

棉花体细胞胚的快速诱导法

研究结果表明,新型植物生长调节剂TDZ有利于棉花愈伤组织的诱导,但不利于棉花愈伤组织的增殖和保持,也不利于棉花体细胞胚的发生.当将在含TDZ的MS培养基上诱导产生的愈伤组织转移到不含任何激素的MS培养基上时,不久便分化出不同发育时期的体细胞胚.TDZ的最佳使用浓度为0.01mg/L.利用该法诱导棉花体细胞胚,从外植体接种到获得体细胞胚仅需60天的时间,比常规方法至少缩短30天.     

棉花优良品种中棉所27直接胚胎发生与植株再生

选用我国难培养基因型优良棉花品种中棉所27进行组织培养,研究了该品种体细胞胚胎发生与植株再生能力。该品种体细胞胚胎发生有2种情况:一是由外植体直接诱导获得胚性愈伤组织并形成不同发育时期的胚状体;二是先诱导获得非胚性愈伤组织,再经多次继代培养,获得胚胎发生。不同激素及其组合和浓度配比是影响中棉所27直接诱导获得胚性愈伤组织及体细胞胚胎发生的直接因素。另外,饥饿培养及继代周期对胚胎发生也有重要影响。0.1mg/LKT和0.1mg/LIAA组合、0.1mg/LKT和0.1mg/LZT组合、0.1mg/LZT单独使用,在饥饿条件下培养,均能直接高效诱导获得大量胚性愈伤组织,并有短期内形成不同发育时期的胚状体。胚状体在不含任何激素的MS B5培养基上培养有利于植株再生,并降低畸形苗形成率。另外,还发现不同培养基对中棉所27胚性愈伤组织增殖、体细胞胚形成和萌发的影响不同。     

棉花体细胞胚萌发及植株再生的研究

对棉花体细胞胚萌发规律及其影响因素进行研究结果,棉花体细胞胚的葫发可分为3种类型:①先出根,后出芽;②先出茅,后出根;③根、芽平衡生长,且3种类型所占的比例不同.不同基础培养基、不同激素种类和浓度,以及不同蔗糖浓度对棉花体细胞胚的萌发和植株再生的影响不同.BT培养基有利于根的发育,MS培养基有利于芽的发育,而SH培养基则有利于根、芽的平衡生长.KT的使用显著降低了棉花体细胞胚的生根率、生芽率、葫发率及再生植株率.低浓度的NAA有利于胚的葫发和再生植株,其最佳浓度为0.1 mg/L;MS培养基中添加0.1mg/L NAA,可使芽的分化率提高83.3%,再生植株率提高50.0%;而高浓度的NAA又抑制了芽的发育.在棉花体细胞胚萌发中蔗糖的最佳使用量为20g/L.     

不同红蓝配比的光质对棉花体细胞胚胎发生 和植株再生的影响

【目的】设置不同的光质组合,明确不同光质对棉花体细胞胚胎发生的影响,为提高棉花体细胞胚胎发生能力和加快棉花转基因过程提供依据。【方法】分别设置不同红蓝配比的光质组合B﹕R（蓝﹕红）=1﹕1、B﹕R（蓝﹕红）=3﹕1、B﹕R（蓝﹕红）=1﹕3和DL（日光灯）,将CCRI12（中棉所12）棉花下胚轴切段依次在愈伤诱导培养基上（callus induction medium,CIM）、胚性愈伤组织诱导培养基上（embryogenic callus differentiation medium,ECDM）、体细胞胚诱导培养基上（embryoid induction medium,EIM）和再生植株诱导培养基（regenerated-plantlet induced medium,RIM）上培养。统计在4种不同光质配比下,体细胞胚胎发生各个阶段对应的指标,包括愈伤增殖率（callus proliferation rate,CPR）、愈伤增殖量、胚性愈伤分化率、体细胞胚数量、生根率、下胚轴数量、再生棉花植株数量、叶绿素浓度等。【结果】与B﹕R=1﹕3和DL光质组合相比,B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1的光质组合均显著促进了愈伤的增殖率,但抑制体细胞胚长出下胚轴;与B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1相比,B﹕R=1﹕3和DL光质组合均促进胚性愈伤分化和诱导体细胞胚的产生,在诱导下胚轴生根方面,B﹕R=1﹕1组合生根率明显高于其他3种处理;B﹕R=1﹕3和B﹕R=1﹕1处理后下胚轴成苗数、植株高度和叶绿素浓度明显高于B﹕R=3﹕1和DL光质组合,B﹕R=1﹕3的促进效果最明显。【结论】 明确了不同光质组合在体细胞胚胎发生各个阶段的调控作用,在体细胞胚胎发生各个阶段可以选择性地应用最优的光质组合。其中红蓝配比为B﹕R=1﹕3的光质组合在整体上能促进棉花体细胞胚胎的发生。     

泗棉3号体细胞胚发生和植株再生

本文探讨了我国优良品种泗棉３号组织培养胚胎发生和植株再生所需要的条件。子叶、胚轴与胚根在不同ＺＴ浓度的培养基上均能诱导形成愈伤组织,其中以３．０ｍｇ／Ｌ和５．０ｍｇ／ＬＺＴ最有利于愈伤组织的诱导。随着ＺＴ浓度的增加,外植体分化根的能力减弱。     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小（1.0、1.5和2.0 mm）的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明：以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为：将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基（N6＋24-D 1.5 mg/L＋L-脯氨酸0.7 g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L＋硝酸银5μmol/L）,在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖60 g/L＋gelrite 3 g/L）,继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖30 g/L＋gelrite3 g/L）进行光培养,2～3 d即可分化出苗;待幼苗长到4～5 cm高时,移至生根培养基（1/2 MS＋IBA0.8 mg/L＋蔗糖30 g/L）,14～21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。