黄芪多糖对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌作用

采用水提醇治法提取黄芪多糖,并应用琼脂扩散法研究了黄芪多糖对几种奶牛乳房炎主要致病菌的抑制效果。结果表明,10 mg/mL的黄芪多糖对3种细菌都有一定的抑制效果,其中对大肠埃希菌的抑制作用最强,抑菌圈达11.05 mm±0.31 mm,对链球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈分别为8.50 mm±0.71 mm和9.32 mm±0.21 mm。3种细菌的最小抑菌浓度不同,对大肠埃希菌的最小抑菌浓度为6.6 mg/mL,而对金黄色葡萄球菌和链球菌则为10.0 mg/mL。     

中药复方多糖提取方法优化及对家禽主要致病菌的体外抑菌作用

本文采用正交设计方法,对中药复方多糖的提取工艺进行了优化,并应用打孔灌注法、试管二倍稀释法研究中药复方多糖对家禽主要致病菌的抑菌作用及最低抑菌浓度.结果显示,中药复方多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶30,浸提时间4h,提取次数2次;中药复方多糖对4种细菌均有一定的抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈达(33.50±0.175)mm,对沙门菌、大肠杆菌、链球菌的抑菌圈分别为(20.00±0.200) mm、(27.23±0.132) mm、(8.45±0.141)mm;抑菌浓度分别为大肠杆菌125 g/L、金黄色葡萄球菌63 g/L、链球菌250 g/L、沙门菌125g/L.试验表明,中药复方多糖对家禽主要致病菌有较好的抑菌效果,可用于细菌病的防治.     

三峡库区獐牙菜提取物抑菌活性及稳定性研究

为了研究三峡库区獐牙菜的抑菌活性和稳定性,以纯化水、70%乙醇和乙酸乙酯作为提取溶剂对獐牙菜进行提取,通过测定抑菌圈直径大小和最低抑菌浓度(MIC)来比较不同溶剂提取物对5种常见食源性污染菌的抑制作用,同时考察热处理、pH值、紫外线照射、盐浓度对獐牙菜水提取物抑菌活性稳定性的影响。结果表明:3种溶剂提取物对测试菌均具有一定的抑菌活性,其中以纯化水提取物效果最好;热处理、pH值及紫外线照射对獐牙菜水提取物抑菌活性的稳定性影响较小,而增加盐浓度对獐牙菜水提取物的抑菌活性产生一定增效作用。     

杏鲍菇中多糖提取分离纯化工艺条件研究

试验以苯酚-浓硫酸法测定多糖,微波辅助浸提和乙醇沉淀法对杏鲍菇子实体粗多糖进行提取和分离纯化实验研究。结果表明,杏鲍菇子实体多糖提取的较优工艺条件为提取温度75℃、提取时间12min、料水比1∶35、微波功率400W、提取2次,在此较优条件下杏鲍菇粗多糖的得率达7.348%;纯化工艺条件为用40%氯仿、10%正丁醇、2%甲醇、40%乙醇、0.01%NaCl脱蛋白制精多糖。     

酿酒酵母发酵降解银杏叶多糖组分分析及活性研究

本试验以新鲜银杏叶为原料,采用酿酒酵母发酵法对其进行发酵降解。通过水提醇沉法制备获得粗多糖,经过脱蛋白脱色工序后用苯酚-硫酸法测定发酵降解后的银杏叶多糖含量,然后利用高效液相色谱法测定发酵后多糖中的单糖种类和摩尔百分比,最后对发酵降解后的银杏叶多糖的抑菌性和抗氧化性进行研究。结果表明：经过酿酒酵母发酵72 h后,银杏叶多糖含量由8.97%提高到11.18%,经过单糖种类鉴定,多糖中的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖;抑菌性试验结果表明其银杏叶多糖对三种指示菌均有不同程度的抑菌作用,与对照组相比,其抑菌圈均显著增大,酿酒酵母发酵过的银杏叶多糖溶液的浓度越高,抑菌能力越强,浓度为25 mg/mL的酿酒酵母发酵多糖溶液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为7.37 mm,浓度为75 mg/mL的酿酒酵母发酵多糖溶液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为10.71 mm;抗氧化试验结果表明,酿酒酵母发酵降解不同时期的银杏叶多糖都具有抑制氧自由基和清除羟自由基的能力,发酵过的多糖溶液抑制氧自由基和清除羟自由基的能力更强。基于以上结果表明,本研究可为银杏叶资源的利用提供思路。     

柞树叶提取液的体外抑菌活性试验

以不同浓度乙醇和水为提取介质,浸提柞树叶中的抑菌活性成分,获取对食源性细菌有抑制作用的柞树叶提取液。采用抑菌圈法分别检测不同提取介质获取柞树叶提取液在不同溶液p H值和不同处理温度条件下,对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌5种目标细菌的体外抑制作用,同时观察柞树叶提取液对新鲜果蔬的防腐保鲜效果。结果显示,采用不同提取介质获得的柞树叶提取液在体外对5种目标细菌的生长均有抑制作用,以75%乙醇作介质获得的提取液的抑菌效果最好(P0.05);酸性条件及热处理能在一定程度上增强柞树叶提取液的抑菌效果,p H为8时,抑菌活性稍有减弱,温度为100℃时,抑菌效果显著;柞树叶提取液可延长果蔬的储藏保鲜期。试验结果初步提示:柞树叶提取液在体外对食源性细菌的生长有较强的抑制作用,有望进一步开发为天然食品防腐剂。     

红树植物根际土壤细菌分离鉴定及抑菌活性的研究

为了从红树林植物根际土壤中分离出具有广谱抑菌作用的海洋细菌，试验以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌4种常见致病菌为指示菌，采用M10和P3培养基从红树植物根际土壤中分离细菌，以固体琼脂打孔法对分离的细菌进行抑菌活性筛选，并提取分离菌株的基因组DNA,PCR扩增16S rDNA基因并测序，同时采用邻接法构建系统发育树。结果表明：从红树植物土壤中分离得到654株细菌，其中107株细菌具有抑菌活性，占分离菌株的16.4%。菌株M36对大肠杆菌和链球菌抑菌活性最强，抑菌圈直径分别为13 mm、16 mm;菌株P19和P25对金黄色葡萄球的抑菌活性最强，抑菌圈直径均为16 mm;菌株P83对沙门氏菌抑菌活性最强，抑菌圈直径为13 mm;菌株M36和P31的抑菌谱最广。综合两种培养基的培养结果有抑菌活性的菌株被分成4个属，分别是肠杆菌属、芽孢杆菌属、葡萄球菌属、伯克霍尔德氏菌属，其中肠杆菌属为优势菌属，其次为芽孢杆菌属，占比分别为69.2%和15.9%。说明红树植物根际土壤中存在具有广谱抑菌活性的细菌。     

菊叶香藜总生物碱的提取工艺及抑菌活性研究

为了探索菊叶香藜中总生物碱提取的最优条件及菊叶香藜生物碱的抑菌效果,试验在超声波作用下利用正交试验探究乙醇浓度、提取温度、料液比、提取时间对总生物碱提取量的影响,并用不同浓度的生物碱作用于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌来评估其抑菌效果。结果表明:超声提取菊叶香藜总生物碱的最优条件为提取温度45℃,乙醇浓度70%,料液比1∶30,超声提取时间10 min,此时菊叶香藜生物碱提取率为1.01%;菊叶香藜生物碱溶液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制效果,当溶液浓度为9.45 mg/mL时,对大肠杆菌的抑菌圈最大直径为9.00 mm,属于中度敏感;当溶液浓度为18.9 mg/mL时,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈最大直径为15.20 mm,属于高度敏感。     

酸马奶微生物代谢产物的提取及抑菌效果的分析

为了论证酸马奶微生物代谢产物的抑菌效果,试验进行了酸马奶原液微生物代谢产物与不同比例的增菌溶液微生物代谢产物对致病性大肠杆菌抑菌效果的研究,选择内蒙古锡林浩特地区酸马奶原液和不同比例(1/2、1/4、1/8、1/10)的增菌溶液(未灭菌和灭菌牛奶)作为试验样品,采用溶媒提取法提取微生物代谢产物,采用牛津杯法探讨微生物代谢产物对致病性大肠杆菌的抑菌效果。结果表明:酸马奶原液和不同比例增菌溶液微生物代谢产物在p H值为2的有机相中均有不同程度的抑菌效果,酸马奶原液的抑菌圈直径达28.26 mm,与其他溶液均差异显著(P0.05)。未灭菌牛奶中,1/2、1/8比例抑菌圈直径与1/4、1/10比例差异显著(P0.05);灭菌牛奶中,1/2比例与1/4、1/8比例抑菌圈直径差异显著(P0.05)。未灭菌与灭菌牛奶在相对应的1/2、1/4、1/8比例抑菌圈直径差异均不显著(P0.05)。说明酸马奶微生物代谢产物对致病性大肠杆菌有抑制作用,其中酸马奶原液的抑菌效果最好,未灭菌牛奶1/2比例和灭菌牛奶1/2比例次之。     

氧氟沙星对家蚕细菌病原的体外抑菌试验

通过对体外抑菌圈、最小抑菌浓度和最低杀菌浓度的测定,比较了氧氟沙星和氯霉素两种抗生素对家蚕细菌病原苏芸金杆菌和灵菌的抑菌效果。试验结果显示：在相同浓度下,氧氟沙星对苏芸金杆菌的抑菌圈直径大于氯霉素;氧氟沙星对苏芸金杆菌和灵菌的最小抑菌浓度和最低杀菌浓度均低于氯霉素,说明氧氟沙星对两种家蚕细菌病原具有较好的抑菌效果。     

可溶性玉米须多糖的提取与纯化

本试验采用水提醇沉法提取玉米须多糖,在不同的煎煮时间、提取温度、水料比条件下,探索最佳提取条件。并用不同体积的乙醇沉淀多糖,得出最佳醇沉体积比。水提后的玉米须残渣用β-葡聚糖酶和木聚糖酶酶解提取,比较用不同的酶量酶解条件下的最适提取条件,提取的粗多糖用三氯乙酸(TCA)法除多糖蛋白,用紫外扫描检验蛋白是否除尽。结果表明,玉米须多糖提取的最佳条件为:80min、80℃、18倍的水料比、2.5倍体积乙醇沉淀效果最佳;3%浓度的TCA溶液除蛋白质效果最好;通过紫外扫描检测纯化样品表明糖结合蛋白基本除尽。     

金银花等5种中药对猪源大肠杆菌抗菌活性的影响

为观察金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌体外抑菌效果,测定其最小抑菌浓度,本实验采用平皿打孔法测定各中草药的抑菌圈直径,梯度稀释法测定各中草药抑制病原菌生长的最小抑菌浓度,结果表明,金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌的抑菌圈直径分别为23.6、20.2、22.1、15.3、17.1 mm,最小抑菌浓度分别为0.2、0.3、0.2、0.6、0.5 g/mL,金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌体均有体外抑菌效果,其中金银花,黄连,五倍子的抑菌效果最好,赤芍和鱼腥草抑菌效果不明显。     

不同中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的体外抑菌试验

为研究中药复方对3种鸡细菌性腹泻病原菌的抑制效果,采用纸片法对自拟的6个中药复方进行敏感性试验,并用试管二倍法测定中药复方的最小抑菌浓度。结果表明,6个中药复方均具有不同程度的抑菌作用,其中复方4对大肠杆菌的抑菌效果较好,平均抑菌圈直径为21.2 mm,平均MIC值为62.5 mg/mL;复方1对沙门氏菌效果较好,平均抑菌圈直径为19.8 mm,平均MIC值为41.7 mg/mL;复方3对多杀性巴氏杆菌效果较好,平均抑菌圈直径为23.3 mm,平均MIC值为3.92 mg/mL,3个复方均呈高度敏感。表明中药复方可以用于鸡细菌性腹泻的防治。     

常用中草药对水产动物致病菌体外抑菌效果研究

试验旨在探讨黄柏、诃子、知母、苏木等常用中草药对水产动物致病菌的体外抑菌效果,为今后水产养殖细菌性疾病的防控提供参考。以美人鱼发光杆菌、嗜水气单胞菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌临床分离株为试验菌株,以抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）及联合抑菌指数（FICI）作为检测指标,研究常用中草药对水产病原菌的抑菌活性。采用水提法提取中草药有效成分,并通过琼脂平板打孔法测定中草药对水产致病菌抑菌圈,微量肉汤稀释法测定中草药MIC和MBC及微量肉汤棋盘稀释法测定联合抑菌指数（FICI）。结果显示,16种中草药对水产致病菌具有不同程度的抑菌作用。药敏试验结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种水产致病菌均具有抑菌效果,抑菌圈直径在10.5~29.0 mm之间,而4种病原菌对马齿苋均表现为耐药;MIC检测结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种病原菌的MIC值为7.81~250.00 mg/mL;MBC检测结果显示,苏木、女贞子、夏枯草、青皮对4种病原菌的MBC值为7.81~500.00 mg/mL;联合抑菌试验结果显示,苏木与夏枯草、女贞子及青皮联用仅对美人鱼发光杆菌起到协同抑菌作用,对嗜水气单胞菌、创伤弧菌及哈维氏弧菌均无抑菌作用,女贞子和青皮组合仅对哈维氏弧菌抑菌作用为相加作用,该组合在抑菌效果上对其他病原菌表现为无关或颉颃作用,其他药物组合在抑菌效果上对4种病原菌则表现为无关或颉颃作用;联合抑菌圈测定结果表明,中草药联合使用对4种病原菌抑菌作用不一。本试验结果表明常用中草药对水产动物致病菌具有一定程度的抑菌作用。     

恩拉霉素生物检测方法的改进

试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×10⁷个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。     

植物提取物及其复合物对鸡源致病菌的体外抑菌作用

本研究选取10种具有较强抑菌作用的植物提取物,研究其对鸡源致病菌(鸡大肠杆菌和鸡沙门氏菌)的体外抑菌作用,并分别筛选出对2种致病菌有较强抑菌作用的3种植物提取物,将其按不同比例复配,以获得抑菌效果更强的复合植物提取物。本研究分为2个试验。试验1:共设11个组,分别为百里香精油、牛至精油、肉桂精油、大蒜油、黄芩黄酮、竹叶黄酮、黄芪多糖、小檗碱、苦参碱和绿原酸和金霉素组(阳性对照组),每组6个重复,采用牛津杯法测定植物提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌作用。试验2:根据试验1的结果,选取对大肠杆菌抑菌效果较好的肉桂精油、苦参碱和绿原酸3种植物提取物,分别按照不同浓度比例进行两两和3种植物提取物复配,用牛津杯法测定复合物对大肠杆菌的抑菌作用,同时分别设相应浓度的3种单一植物提取物为对照组,共20个组,每组6个重复;选取对沙门氏菌抑菌效果较好的竹叶黄酮、黄芩黄酮和肉桂精油3种植物提取物,用牛津杯法测定不同浓度比例的复合物和相应浓度的单一植物提取物(对照组)对沙门氏菌的抑菌作用,共17个组,每组6个重复;根据以上结果,研究了竹叶黄酮和肉桂精油按不同浓度比例复配对沙门氏菌的抑菌作用,以筛选最佳复配比例,共15个组,每组6个重复。结果表明:5种植物提取物对大肠杆菌有抑菌作用,其抑菌作用从大到小依次为肉桂精油、苦参碱、绿原酸、百里香精油、牛至精油;8种植物提取物对沙门氏菌有抑菌作用,其抑菌作用从大到小依次为竹叶黄酮、黄芩黄酮、肉桂精油、苦参碱、绿原酸、牛至精油、百里香精油、大蒜油。与肉桂精油对照组相比,肉桂精油、苦参碱和绿原酸两两或3种植物提取物复配不能显著增强对大肠杆菌的抑菌作用(P0.05);竹叶黄酮和肉桂精油复配可显著增强对沙门氏菌的抑菌作用(P0.05),且在浓度比例为25∶150(1∶6)时抑菌作用达到最大。由此可见,10种植物提取物中,对大肠杆菌抑菌效果较好的3种植物提取物为肉桂精油、苦参碱和绿原酸,但这3种植物提取物复合物的抑菌作用并不大于单一肉桂精油;对沙门氏菌抑菌效果较好的3种植物提取物为竹叶黄酮、黄芩黄酮和肉桂精油,竹叶黄酮和肉桂精油复配增强了抑菌效果,且复配比例为1∶6时对沙门氏菌的抑菌作用最大。     

Improved Biotin Detection Method of Enduracidinmold

The national standard pinella mildew element biological detection method was improved, using dry filter paper method instead of cylinder plate method, the potassium content of different samples of pinella mold were determined,and the extract composition, extraction time, the concentration of bacteria test and other factors influence on the test results of the established enramycin between concentration and the antibacterial circle diameter of linear equations was studied. The results showed that using acetone extraction liquid acetone (A:1 mol/mL HCl:water =35:12:56, pH value was adjusted to 3.0 with 1 mol/mL HCl) leaching provided sample, extraction time of 3.5 h could fully immersed test of enramycin. Use of biological indicator bacteria CMCC (B) 63501 spore count of 3.4×10⁷ per mL of the measurement of living flat dish, the formation of the inhibitory circle edge rule was clear, good accuracy. Using dry filter paper method could effectively eliminate the extraction or dilute acidic fluid itself to detect strains inhibitory effect, and the utility model had the advantages of simple operation, good repeatability. It could be used for large quantities of samples of enramycin content determination.Enramycin standard solution at concentrations for 150~500 U/mL and its bacteriostatic circle diameter and valence have good linear regression.The resulting regression equation was Y=0.00944X+11.55344, the correlation coefficient was R=0.9962, the final effective range was 0.75~2.5 U, the measured results were more close to the true value.It could be used as an efficient enduracidin determination method, worthy of promotion and use.     

桑宁茶多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用研究

为探寻桑宁茶多糖对糖尿病模型小鼠的降血糖作用 ,利用分级纯化的方法 ,得到 3种不同纯度的桑宁茶多糖 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ ) ;以常规降糖药格列本脲 (优降糖 )为阳性治疗对照 ,通过对糖尿病小鼠进行降血糖治疗试验 ,研究了 3种桑宁茶多糖的降血糖作用。结果表明 :3种桑宁茶多糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠均有显著的降血糖作用 ,降糖效果以初步纯化的多糖效果最好 ,且效果均优于格列苯脲。     

真菌多糖激发子的筛选及对蛹虫草多糖激发条件的优化

选取7种药用真菌多糖作为激发子,以蛹虫草多糖含量为评价指标,筛选出对蛹虫草多糖产生有显著诱导作用的多糖激发子CM-JS,该激发子可使蛹虫草干菌丝中的多糖含量提高54.16%。进一步以蛹虫草多糖含量为响应值,用响应曲面分析法研究多糖激发子CM-JS的浓度、添加时间和激发时间等因素对多糖激发效果的影响,得出各因素的影响作用依次为多糖激发子浓度>添加时间>激发时间,CM-JS多糖激发子激发蛹虫草多糖产生的最优条件为:CM-JS的添加质量浓度70.328μg/mL,加入时间为菌种发酵第2天,激发时间3 d。在此优化条件下,加入CM-JS多糖激发子生产蛹虫草干菌丝中的多糖质量比可达342.5 mg/g。     

葫芦多糖体外抗鸡新城疫病毒作用的研究

为研究葫芦多糖抗新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV） 活性,本试验采用水提醇沉法提取葫芦总多糖及4种分级多糖,通过苯酚-硫酸法及红外光谱对葫芦多糖进行检测,MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全浓度,多糖的安全浓度统一定为78.125 μg/mL,以3种加药方式（先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加药）,检测葫芦多糖对NDV的阻断、抑制及直接杀灭作用。结果表明,葫芦总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及直接杀灭作用强于对NDV的阻断作用。70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖（LSP₇₀、LSP₈₀）及总多糖（LSP_t）,抑制作用下的病毒抑制率分别为40.41%、44.54%、61.85%,杀灭作用下的病毒抑制率分别为44.74%、58.76%和59.38%,阻断作用下对NDV的抑制率,其中LSP₈₀组最高达37.14%,其余各组均低于25%。综上可知,70%、80%梯度醇沉的葫芦多糖及葫芦总多糖的抗NDV活性较好,可作为进一步研究的材料。