红叶石楠离体快繁技术体系的建立与优化

以红叶石楠茎尖为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA的浓度对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立了一套红叶石楠离体培养技术体系。试验结果表明:红叶石楠初代培养采用MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基、茎尖继代培养采用MS+6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的培养基为宜,通过正交试验确定,植株增高选用MS+6-BA1.0+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基效果较好,生根培养选用1/2MS+IBA1.0～1.5 mg/L培养基,生根率、移栽成活率可达100%。     

三苞唇柱苣苔离体培养体系的建立

以三苞唇柱苣苔(Chirita tribracteata W.T.Wang)的幼嫩叶片为外植体,开展外植体消毒灭菌、叶片愈伤组织的诱导及分化、继代增殖培养、生根培养以及植株玻璃化的研究。结果表明:叶片的灭菌方法可采用乙醇浸泡10 s结合升汞浸泡12~16 s;叶片的最佳愈伤组织诱导、分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1~0.5 mg/L或者MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1~0.5 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.1~0.3 mg/L,生根率为100.00%;培养基中不添加6-BA或添加低浓度的6-BA或者添加适量活性炭均可减轻植株的玻璃化。     

驱蚊香草组织培养技术研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体,应用正交设计法研究了在培养基中添加不同激素和浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。结果表明:不定芽诱导的最佳培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 2.5 mg/L,分化率为92%;继代增殖培养的最适培养基为:MS+NAA 0.12 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,增殖倍数为7.5;最佳生根培养基为:1/2 MS+IBA 0.15 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根率为90.5%。     

红叶李离体茎段培养与微体快繁的研究

[目的]为红叶李的商品化生产、遗传转化和品种定向改良奠定基础。[方法]以红叶李茎段为外植体,在MS、1/2MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA,研究不同激素浓度对红叶李增殖和生根的影响,建立红叶李的离体繁殖体系。[结果]适量浓度的6-BA和NAA组合比单独使用6-BA诱导率高,处理⑤(6-BA、NAA的浓度分别为1.0、0.2mg/L)的诱导率达75.0%,且腋芽生长良好。处理⑥(6-BA、NAA的浓度分别为2.0、0.2mg/L)的增殖系数为7.67,芽苗高度大于2cm的芽数为4.76。适合红叶李生根的最佳IBA浓度为0.5mg/L,生根率达98.3%。试管苗移栽成活率达85%以上。[结论]红叶李离体培养的最佳启动培养基为MS+6-6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

海沃德猕猴桃带芽茎段的组织培养快繁技术

以海沃德猕猴桃带芽茎段为外植体直接诱导再生芽,对继代增殖和生根等培养基进行筛选试验,建立海沃德猕猴桃组织培养快繁技术。结果表明:75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min为最佳消毒方法;诱导再生芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,其增殖系数为3.60;生根培养基为1/2MS+0.7 mg/L IBA,生根率达100%,平均生根数达7.8条。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

红叶石楠离体培养体系的构建

以红叶石楠扦插苗的茎尖作为外植体,研究了不同消毒剂的消毒灭菌效果,以及不同培养基、不同激素组合对茎尖生长扩繁的影响。试验结果表明:(1)红叶石楠茎尖外植体最佳消毒方法为用0.1%的升汞消毒处理4 min,存活率达56.7%;(2)最合适的基础培养基为MS培养基;(3)最佳的增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,愈伤诱导率为52.0%,增殖系数为4.1;(4)最佳的生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率达55%,平均根数为2.2。     

红叶石楠试管苗培养与快繁技术研究

以红叶石楠的茎段和顶芽为外植体,对影响红叶石楠组织培养能力的不同培养基成分进行研究。结果表明,不同培养阶段的培养基最佳激素配比:启动培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖培养基为1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L;在启动培养阶段添加0.1%的活性炭对培养效果有很好的改善。初步建立了红叶石楠的试管苗组培快繁技术体系。     

红叶石楠愈伤组织抗褐化研究以及悬浮细胞系的建立

以红叶石楠无菌苗叶片为试材,诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系。结果表明:红叶石楠愈伤组织初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达97%。继代培养以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为宜。针对红叶石楠愈伤组织继代培养过程中易褐化的问题,通过正交试验探讨了不同吸附剂、抗氧化剂及其它因素对褐化的影响。采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+Vc 1.0 mg/L+Ch 100 mg/L附加1%蔗糖的继代培养基,可以明显降低红叶石楠愈伤组织的褐化现象。将胚性愈伤组织接种到1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L附加2%蔗糖,pH 5.5液体培养基中悬浮震荡培养获得了分散性好、色泽鲜艳的悬浮细胞。     

瓜蒌的组培快速繁育

以当年生瓜蒌幼嫩带叶茎段作为外植体,通过MS 为基本培养基附加6-BA,NAA,等激素来进行组织培养的快繁。经过芽诱导、继代增殖、生根培养3 个阶段的连续培养。芽诱导以MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L 为最佳,继代增殖培养基为MS+BA0.2mg/L+IAA0.6mg/L 为最佳,增殖系数为4.0,生根最佳培养基为MS+ABT0.3mg/L,生根率92%。     

白玉银桦组培快繁技术研究

以白玉银桦的半木质化枝条为外植体,研究了适合白玉银桦丛芽诱导、增殖、生根培养的培养基组分,结果表明,最适诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L NAA;最佳增殖培养基为MS +1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.3 mg/L NAA,增殖系数达3.6以上;适宜的生根培养基为...     

白术种苗的无性快速繁殖技术研究

以白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)的腋芽为外植体,以不同的光照时间、光照度和植物生长调节剂6-BA、NAA不同浓度配比以及MS、1/2 MS、1/4 MS培养基分别进行初代培养、愈伤组织诱导培养、愈伤组织增殖培养、愈伤组织丛生芽诱导培养、丛生芽生根培养,并炼苗移栽。结果表明,愈伤组织诱导培养基1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA的愈伤组织形成率为97.2%;愈伤组织增殖培养基MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA的愈伤组织增殖能力为9.5倍;愈伤组织丛生芽诱导培养基1/2MS+1.7 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的愈伤组织丛生芽诱导倍数为4.5倍;生根培养基1/4 MS+0.75mg/L NAA的生根率为96.7%,生根平均数为8.2条/芽,炼苗移栽的成活率在91.5%~93.0%。通过该方法进行白术种苗繁殖,有利于向国家作物种质资源库输送优质种质资源材料,丰富白术基因库,便于白术优质种质资源的交流与共享,从而提高育种水平与药材生产能力。     

黑色马铃薯的组织培养及快繁技术研究

[目的]研究黑色马铃薯的组织培养及快繁技术。[方法]以黑金刚马铃薯的块茎为外植体,于附加不同激素配的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件。[结果]适宜块茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L GA,诱导率可达95%以上;适宜丛生芽诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达92%以上;1/2MS培养基易于诱导生根,部分外植体可产生紫黑色小块茎,生根率达100%。[结论]该研究可为人工规模化生产黑色马铃薯种苗提供技术资料。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

葡萄水仙离体快繁技术研究

采用不同诱导、增殖和生根培养基进行葡萄水仙鳞片离体快繁技术研究,结果表明:鳞片不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0~1.5 mg/L+NAA 0.2~0.4 mg/L;不定芽增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg/L;蛭石是葡萄水仙试管苗最佳的驯化移栽基质,在该基质中生根苗移栽成活率达90%。     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

紫薇茎段离体培养体系的优化

以矮首领紫薇当年生半木质化带腋芽茎段、硬枝茎段以及叶片为外植体,从消毒时间、启动培养基、增殖培养基和生根培养基选择等方面进行离体培养体系的优化。结果表明,茎段为较好的外植体。最佳消毒时间:带腋芽茎段用0.1%升汞处理8 min,诱导率为66.67%;带水培芽茎段用0.1%升汞处理4 min,诱导率为65.55%;叶片用0.1%升汞处理4 min,诱导率为55.56%。带腋芽茎段最佳启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,诱导率为83.33%。腋芽和水培芽的最佳增殖培养基均为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.30 mg/L。腋芽增殖系数为2.42,芽长为3.2 cm;水培芽增殖系数为3.21,芽长为2.1 cm。腋芽最佳生根基本培养基为1/2MS,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率为96.67%;水培芽最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+活性炭(AC)0.1 g/L,生根率为81.25%。     

蕨菜组织培养技术的研究

[目的]以蕨菜叶柄为外植体研究蕨菜的组织培养技术。[方法]在1/2 MS培养基中设置不同的6-BA和IBA浓度,研究6-BA和IBA对蕨菜叶柄组织培养的影响。[结果]1/2 MS+0.2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L IBA为愈伤组织的最佳诱导培养基,诱导率为82%;1/2MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L 6-BA为愈伤组织的最佳增殖培养基,增殖倍数为8.07;1/2 MS+0.4 mg/L IBA为最佳生根培养基,生根率达100%,根数多、根长且健壮。[结论]结果为蕨菜植物的组培繁殖提供参考。     

铁线莲组培快繁技术研究

[目的]研究不同激素浓度对铁线莲诱导、增殖和生根的影响,建立铁线莲组培快繁技术。[方法]以铁线莲茎段为外植体,在MS培养基中加入不同浓度的6-BA、NAA和IBA,研究不同激素浓度对其腋芽诱导分化、诱导芽增殖和继代苗生根的影响。[结果]铁线莲腋芽诱导效果以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最佳;增殖培养以MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.50 mg/L为最佳;继代苗生根培养以MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 2.0 mg/L最佳。[结论]建立了铁线莲组培快繁技术体系,为其规模化生产提供理论依据。