LPS对小鼠乳腺组织中NF-κB、ACCα和β-Casein mRNA表达的影响

为探讨灌注不同质量浓度LPS对小鼠乳腺组织中NF-κB、ACCα和β-Casein mRNA表达的影响,选择30只雌性ICR小鼠为试验动物,受孕后随机分为试验组和对照组,试验组经第4对乳头灌注不同质量浓度LPS(0.1,5,10,50,100mg/L),对照组灌注生理盐水,于灌注后6h采集乳腺组织样品,组织学方法分析乳腺组织的病理变化;采用RT-PCR方法分析乳腺组织中NF-κB、ACCα和β-Casein mRNA表达的变化。病理切片结果显示,随着LPS灌注浓度的增加,乳腺小叶间炎性细胞数量逐步增加,乳腺小叶内腺泡结构破坏程度也变大;对乳腺组织中NF-κB、ACCα和β-Casein的mRNA表达水平进行分析时,发现灌注LPS小鼠乳腺组织中NF-κB mRNA的表达水平随着LPS灌注浓度的增加而逐步增加,而ACCα和β-Casein mRNA的表达水平则随着LPS灌注浓度的增加而逐步降低。结果表明,灌注LPS能够上调NF-κB mRNA的表达,下调ACCα和β-Casein mRNA的表达。     

脂多糖对小鼠乳腺组织中Toll-like Receptor4表达的影响

将40只雌性ICR小鼠,受孕后随机分为试验组和对照组。雌鼠产后10-11d,试验组经第4对乳头灌注LPS,对照组灌注生理盐水,分别于灌注后不同时间采集样本,组织学分析乳腺病理变化;分析对各组乳腺组织中TLR4和TNF-α mRNA表达变化。组织学结果显示,灌注1．5h后乳腺组织中炎性细胞增多,6、12h乳腺腺泡内有大量的炎性细胞浸润,腺泡结构崩解;6h TLR4 mRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）;4个试验组中TNF-αmRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）。试验结果表明LPS能够增强TLR4和TNF-α mRNA表达。     

木犀草素对LPS诱导的小鼠乳腺炎保护作用研究

为了观察木犀草素对LPS诱导的小鼠乳腺炎症的保护机制,试验采用LPS乳导管灌注方式建立小鼠乳腺炎动物模型,并通过ELISA法、H.E.染色、髓过氧化物酶(MPO)活性测定和Westernblot分析等检测了小鼠乳腺组织的相关指标。结果表明:与对照组相比,LPS能够明显导致乳腺组织病理学损伤,增加组织MPO活性,促进肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的产生以及NF-κB信号通路蛋白的表达,而木犀草素能够抑制LPS诱导的小鼠乳腺组织的炎症变化。说明木犀草素对小鼠乳腺炎症的发生具有一定保护作用。     

乳头灌注脂多糖对奶牛乳腺组织及机体免疫的影响

旨在通过乳头灌注脂多糖(LPS)体外模拟奶牛急性乳腺炎,研究奶牛乳腺组织及机体免疫活化状态。选用4头泌乳后期的荷斯坦奶牛16个乳区为研究对象,采用交叉试验设计,每期试验2 d,试验间隔10 d,试验组乳头管乳头灌注LPS 0. 1 mg,对照组乳头管灌注等量生理盐水。结果:试验组灌注LPS后,奶牛体温值和乳汁中体细胞数随时间变化而逐渐升高,而奶牛血液中白细胞数随时间变化而逐渐降低;乳腺组织的腺泡腔内充斥大量炎性细胞,部分腺泡组织萎缩甚至崩塌;试验组灌注LPS 12 h后奶牛血清中的髓过氧化物(MPO)活性极显著下降(P<0. 01),而乳腺组织中的MPO活性则极显著上升(P<0. 01);奶牛血清及乳清中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)的蛋白含量明显上升(P<0. 01);乳腺组织中Toll样受体4 (TLR4)、核因子NF-κB (p65)蛋白的表达量相比对照组极显著上升(P<0. 01)。研究表明,LPS能够诱导奶牛发生乳腺炎,使乳腺组织发生损伤,并激活机体的TLR4/NF-κB信号通路进而促进其下游炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的基因的表达,使机体发生免疫应答。     

脂多糖对泌乳奶牛乳中氨基酸组成及蛋白质代谢相关基因表达的影响

本试验旨在通过半体内和体外试验研究灌注脂多糖(lipopolysacchride,LPS)对泌乳奶牛乳中氨基酸组成和蛋白质代谢相关基因表达的影响。半体内试验选用6头经产的荷斯坦奶牛[泌乳天数为(186±30)d],随机分为对照组和试验组,每组3头。采用交叉试验设计,每期正试期7 d,间隔期14 d;试验组阴外动脉灌注LPS(大肠杆菌型O111∶B4,0.01μg/kg),对照组阴外动脉灌注生理盐水。体外试验以乳腺上皮细胞为模型,基础培养基中LPS添加水平分别为0、0.1和10.0 ng/mL,培养24 h后,采用实时定量-PCR(qRT-PCR)法检测目的基因的相对表达水平。结果表明,阴外动脉灌注LPS后,乳中必需氨基酸、支链氨基酸含量随着灌注时间的增加呈先升高后降低的趋势(P>0.05),灌注后6 h达到最高;乳中非必需氨基酸含量随着灌注时间的增加呈先降低后升高的趋势(P>0.05),灌注后6 h达到最低。LPS提高了乳腺上皮细胞中p70核糖体蛋白S6激酶-1(S6K1)和真核起始因子4E结合蛋白-1(4EBP1)mRNA的表达水平(P>0.05),且具有剂量效应。LPS对雷帕霉素靶点(mTOR)、Janus激酶2(JAK2)mRNA表达水平影响差异不显著(P>0.05),但有提高的趋势。与对照组相比,LPS显著提高了信号转导和转录激活因子5(STAT5)mRNA表达水平(P<0.05)。综上所述,LPS通过干扰mTOR通路和JAK2/STAT5通路影响了乳蛋白及氨基酸组成。     

根皮素对LPS诱导的小鼠乳腺炎保护作用

为了研究根皮素对LPS诱导的小鼠乳腺组织的炎症变化,并证明根皮素对乳腺炎具有保护作用,试验应用乳导管内灌注LPS建立小鼠乳腺炎模型,进行H.E.染色、ELISA检测、Western-blott检测和髓过氧化物酶(MPO)检测等研究根皮素对乳腺组织的保护作用。结果表明:LPS能使乳腺组织产生病理学损伤,促进白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的产生,增加组织MPO活性,增强NF-κB信号通路蛋白的表达,而根皮素能够抑制LPS诱导的小鼠乳腺组织的炎症变化。说明根皮素对LPS诱导的小鼠乳腺炎具有一定保护作用。     

胞壁酰二肽对小鼠乳腺组织和乳腺细胞NOD2表达的影响

细菌感染是引起奶牛乳腺炎的主要原因,而胞壁酰二肽(MDP)几乎存在于所有细菌中,核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体是天然免疫中对病原微生物的病原体相关分子模式识别的一类感受器,在机体天然免疫应答中发挥重要作用。为了研究MDP对小鼠乳腺组织和乳腺细胞NOD2表达的影响,试验以小鼠为模型,采用不同浓度的MDP在体乳腺内灌注和对体外小鼠乳腺上皮细胞用不同浓度的MDP刺激,观察小鼠乳腺组织的病理组织学变化,乳腺组织及细胞中NOD2、下游的受体作用蛋白2(RIP2)表达的变化,以及炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达变化。结果表明:从乳腺灌注不同浓度MDP后可引起急性乳腺炎,乳腺组织中炎性细胞增多;MDP刺激后乳腺组织及细胞中NOD2、RIP2、TNF-αmRNA表达水平明显升高,细胞IL-6 mRNA表达水平没有明显升高。说明NOD2介导信号途径促使炎性细胞因子的表达。     

原儿茶酸对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制研究

【目的】 探究原儿茶酸对脂多糖(LPS)诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制。【方法】 将60只小鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+不同浓度原儿茶酸(20、40、80 mg/kg)组共5组,每组各12只。对照组小鼠用微量注射器经阴道灌注50 mL生理盐水,LPS组灌注50 mL LPS(1 mg/kg),原儿茶酸治疗组灌注50 mL LPS前1 h分别腹腔注射20、40、80 mg/kg原儿茶酸,注射24 h后,颈椎脱臼法处死所有小鼠。收集子宫组织,通过HE染色检测子宫组织病理变化,用试剂盒检测髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;Western blotting法检测p65、核因子-κB(NF-κB)的抑制蛋白(IκB)以及磷酸化p65、IκB(p-p65、p-IκB)蛋白表达水平。【结果】 组织病理结果显示,对照组小鼠子宫组织形态正常,子宫内膜上皮结构正常;LPS组小鼠子宫组织出现严重的炎性细胞浸润和子宫内膜上皮充血及水肿。与LPS组相比,随着原儿茶酸浓度的增加,小鼠子宫组织中炎性细胞明显减少,子宫内膜上皮充血水肿情况也明显得到改善。MPO活性检测表明,与对照组相比,LPS组MPO活性极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组MPO活性均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。ELISA结果表明,与对照组相比,LPS组小鼠子宫内膜组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组小鼠子宫内膜组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。Western blotting结果表明,与对照组相比,LPS组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】 原儿茶酸通过减轻子宫组织的病理变化,降低子宫组织MPO活性,抑制NF-κB信号通路及炎症细胞因子的产生,对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎起到保护作用。     

葛根素对乳腺组织雌激素及孕酮受体基因表达的影响

试验通过研究葛根素对乳腺组织中孕酮激素受体基因和雌二醇受体基因表达的影响,探讨葛根素对乳腺发育的影响,采用荧光定量RT-PCR方法检测小鼠乳腺组织中孕酮受体基因和雌二醇受体基因的表达.结果:与对照组相比,葛根素组小鼠ER表达量显著高于对照组(P＜0.05),而葛根素试验组小鼠PR表达量与对照组相比差异不显著(P＞ 0.05).结论: 葛根素具有上调乳腺组织ER表达的作用,这是其促乳腺发育的作用机理之一.     

脂多糖诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎模型的建立

本试验旨在建立脂多糖(LPS)诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎病理模型,为后续治疗乳腺炎的深入研究奠定基础。SD大鼠30只,于产后72h随机分为对照组(5只)和试验组(25只),试验组随机分为5组,各试验组大鼠经第4对乳头灌注LPS,剂量分别为10、20、30、40、50μg/侧,对照组灌注等量PBS。灌注后24h观察记录各大鼠临床症状、乳腺组织病理学变化。结果发现,在各试验组大鼠第4对乳腺均可观察到不同程度的炎症反应,且与LPS剂量呈正比例关系。结果表明,成功建立了LPS诱导哺乳期SD大鼠乳腺炎模型。     

LPS诱导小鼠子宫内膜炎模型的建立

为了建立小鼠子宫内膜炎模型,为子宫内膜炎的发病机理及其防治方法的研究提供合适的动物疾病模型,在小鼠子宫内灌注不同浓度的脂多糖(LPS),分别于灌注后12、24、36 h和48 h收集子宫,观察子宫组织形态学变化,检测子宫组织髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)的含量。结果在灌注LPS后可见小鼠子宫上皮细胞脱落、水肿、充血、出血和炎性细胞浸润。灌注1.25、2.5 mg/m L和5 mg/m L的LPS作用12 h,小鼠子宫组织MPO和NO含量极显著高于对照组(P0.01);灌注2.5 mg/m L和5 mg/m L的LPS作用24 h,小鼠子宫组织MPO和NO含量极显著高于对照组(P0.01)。表明采用子宫灌注LPS法成功建立小鼠子宫内膜炎模型,且每只小鼠灌注20μL浓度为2.5~5.0 mg/m L的LPS作用12~24 h为最佳的建模条件。     

实验性乳腺炎小鼠乳腺肥大细胞的变化

应用改良甲苯胺蓝染色法和苏木精-伊红染色法对金黄色葡萄球菌诱发实验性乳腺炎小鼠乳腺肥大细胞的数量、分布、活性进行了研究。正常对照组小鼠乳腺组织中肥大细胞主要分布于乳腺小叶之间的结缔组织中,有些围绕血管或乳腺导管分布,腺上皮之间没有肥大细胞分布;阳性试验组小鼠乳腺肥大细胞主要分布在相邻腺泡周围或腺导管上皮周围,胞质内充满异染颗粒,脱颗粒状态显著,甚至表现有颗粒耗竭现象,腺泡中有一定程度的肥大细胞浸润。肥大细胞计数结果显示,阳性试验组母鼠乳腺内的肥大细胞数急剧增多,显著高于正常对照组(P<0.05),而脱颗粒肥大细胞数阳性试验组与正常对照组相比极显著增多(P<0.01)。结论:肥大细胞在小鼠乳腺炎的致病机制中发挥重要作用,参与了乳腺炎的发病过程。     

寡果糖诱导瘤胃急性酸中毒对山羊瘤胃发酵、蹄组织结构及炎症因子、金属蛋白酶表达的影响

本试验旨在研究寡果糖诱导瘤胃酸中毒对山羊瘤胃发酵、蹄组织结构、蹄部炎症因子及金属蛋白酶表达的影响。采用随机区组设计,将8头健康装有永久性瘤胃瘘管的波杂山羊(波尔山羊×长江三角洲白山羊)随机分为对照组和诱导酸中毒的试验组,每组4头。其中试验组山羊瘤胃寡果糖灌注量为21 g/kg BW。分别于灌注前(0 h)和灌注后4、8、12、24和48 h采集瘤胃液,同时分别在0、4、8、24和48 h通过颈静脉采集血液,灌注后48 h屠宰2组山羊,采集蹄组织。结果表明:与对照组相比,试验组山羊瘤胃液p H、挥发性脂肪酸浓度平均值显著降低(P0.05),血液和瘤胃液中乳酸和脂多糖浓度平均值显著提高(P0.05);组织形态学结果显示,与对照组相比,试验组山羊蹄组织中次级表皮蹄小叶和次级真皮蹄小叶的长度变短,蹄小叶形状不规则;实时定量PCR检测结果显示,较对照组比较,试验组山羊蹄组织中基质金属蛋白酶组织抑制物-1的mRNA的相对表达量显著降低(P0.05),白细胞介素-6、膜型基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶-2的mRNA的相对表达量显著升高(P0.05)。结果提示,寡果糖诱导山羊急性瘤胃酸中毒可导致山羊瘤胃发酵紊乱,提高瘤胃液和血液中脂多糖与乳酸浓度,导致山羊蹄组织相关炎症因子与金属蛋白酶表达改变,最终引发山羊急性蹄叶炎。     

十二指肠大豆小肽梯度灌注对泌乳奶山羊血液指标、乳成分及肽转运载体在小肠中表达丰度的影响

本试验通过十二指肠大豆小肽梯度灌注,旨在研究不同水平的小肽对泌乳中期奶山羊乳成分、血液生化指标、激素水平及小肠肽转运载体(PepT1)表达活性的影响.试验选用12只平均体重为(38±2)kg、带有十二指肠瘘管的泌乳奶山羊,分成4组,分别灌注小肽0、60、120、180 g/d,试验日粮相同,连续灌注14 d.结果表明:通过小肽的灌注,(1)增加了乳蛋白产量(P＜0.05),乳蛋白含量也有所增加,但仅在120 g/d试验组差异显著(P＜0.05).乳脂产量与乳脂含量随着灌注量的升高呈显著下降趋势(P＜0.05).乳中尿素氮含量随着灌注量的升高而增加(P＜0.05);(2)血清中总蛋白和球蛋白含量均高于对照组,但仅在120 g/d试验组差异显著(P＜0.05).白蛋白含量反而较对照组相比有所降低(P＜0.05),尿素氮的含量显著升高(P＜0.05).血清中生长激素浓度随着大豆小肽灌注量的增加而升高(P＜0.05),胰岛素浓度也表现出增加趋势,但只有在180 g/d试验组差异显著(P＜0.05);(3)PepT1表达在十二指肠、空肠、回肠随着灌注量的增加而升高.小肽灌注组PepT1在十二指肠表达丰度分别是对照组的1.6、2.6、5.4倍;回肠表达丰度是对照组的1.1、1.4、3.3倍;在空肠中表达是对照组的1.1、1.8、2.4倍.随着灌注量的增加,PepT1在十二指肠表达的增加尤为显著,在180 g/d试验组,PepT1十二指肠表达量分别为空肠、回肠的1.5、1.6倍.本研究揭示,小肽的灌注可以提高PepT1表达活性,增加小肽吸收,促进乳蛋白合成,并在120 g/d试验组表现尤为显著.     

let-7g对小鼠乳腺发育和泌乳相关功能基因Tgfbr1的作用及其机理

运用生物信息学方法对let-7g进行靶基因预测，构建含有与其结合位点互补序列的荧光素酶报告质粒将其与phRL-TK及let-7gmimics或negative control共转染小鼠乳腺上皮细胞，双荧光素酶报告系统检测试剂盒测定荧光素酶的表达；用let-7ginhibitor和let-7g mimics或negative control分别转染小鼠乳腺上皮细胞，并应用细胞活力分析技术、qRT—PCR技术、Western blotting、HPLC分析let-7g的表达变化及其对小鼠乳腺上皮细胞的影响。结果显示：经酶切及测序证实荧光素酶报告质粒构建成功；将荧光素酶报告基因、phRL—TK与let-7g mimics共转染小鼠乳腺上皮细胞，荧光素酶活性与对照组（即共转染荧光素酶报告基因、phRL-TK与Negative Control的小鼠乳腺上皮细胞组）相比显著降低（P〈0．05）；与阴性对照组和空白对照组相比较，let-7g inhibitor转染后，TGFβ3RI蛋白表达量显著增加（P〈0．01），细胞活性显著增强（P〈0．05），β-酪蛋白表达量增加（P〉0．05），而let-7g mimics转染后，TGFβRI蛋白表达量显著减少（P〈0．01），细胞活性显著降低（P〈0．05），β-酪蛋白表达量显著减少（P〈0．05）。结果表明，在小鼠乳腺上皮细胞中，let-7g能够靶向结合Tgfbr1，且负调控其表达；let-7g可通过抑制靶蛋白TGFβRI的表达，进而调控小鼠乳腺上皮细胞的增殖及β-酪蛋白的分泌。     

脂多糖对小鼠子宫内膜Toll样受体4介导的炎性信号通路的影响

革兰阴性菌感染可引起子宫内膜炎,机体的Toll样受体4(TLR4)可接受革兰阴性菌的细胞壁主要成分脂多糖(LPS)的刺激引发一系列炎症反应。为了研究LPS对TLR4介导的炎性信号通路的影响,本试验以小鼠为模型,分别用不同浓度的LPS对小鼠进行在体子宫灌注和处理体外培养的子宫内膜上皮细胞系。组织学观察显示,灌注不同浓度LPS后子宫内膜组织中炎性细胞增多。通过RT-PCR对各组中TLR4和核转录因子κB(NF-κB)、IL-6的mRNA表达水平进行检测,发现LPS刺激能够增强TLR4和NF-κB、IL-6 mRNA表达,影响TLR4介导的炎性信号通路。     

家兔乳头管灌注脂多糖诱发血清急性期蛋白的动态变化

检测和分析经乳头管灌注脂多糖(LPS)前后家兔血清急性期蛋白含量的动态变化。11只泌乳家兔(产后7d)经乳头管灌注LPS建立乳房炎模型,在灌注前2h,灌注后6、12、24、48、72h和5、7d分别测定血清中结合珠蛋白(HP)、C-反应蛋白(CRP)和白蛋白(ALB)含量,同时取乳腺组织观察病理变化。组织病理学结果显示,灌注LPS后6h后乳腺组织出现病理变化,腺泡腔中观察到嗜中性粒白细胞;灌注24h时组织损伤加重,乳腺组织结构紊乱,浸润大量嗜中性粒白细胞;48h后乳腺组织开始自我修复,7d时恢复正常。灌注LPS前血清中HP含量低于检出限,灌注LPS后6h时HP含量显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,48h开始显著降低(P<0.05);CRP含量在灌注LPS后6～72h内显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,72h后逐渐降低,5d时恢复到健康水平;ALB含量在灌注LPS后12～72h内显著降低(P<0.05),5d时恢复到健康水平。结果表明,HP、CRP和ALB含量在灌注LPS前后发生了规律性的变化,其中HP含量对LPS诱导的急性乳房炎反应敏感,提示HP可作为评价乳腺组织炎症程度和乳房炎的早期诊断...     

十二指肠大豆小肽梯度灌注对山羊乳腺氨基酸吸收与氨肽酶N基因表达的影响

旨在研究乳腺对不同水平大豆小肽的吸收利用情况.试验选用8只带有十二指肠瘘管和颈动脉、乳静脉血插管的泌乳奶山羊(体质量38 kg±k2 kg),采用交叉设计,分别向十二指肠灌注大豆小肽0、60、120和180 g·d~(-1),连续灌注14 d.结果表明:通过小肽的灌注,(1)提高了乳蛋白产量与乳蛋白含量,而且乳蛋白产量显著提高(P＜0.05).乳脂产量与乳脂含量随着灌注量的升高呈显著下降趋势(P＜0.05).(2)乳腺血浆流星有轻微的提高,但不显著(P＞0.05).与对照组相比,各处理组血浆流量/产奶量出现下降,但只有120 g·~(-1)灌注组下降显著(P＜0.05).(3)与对照组相比,大部分游离氨基酸在60和120 g·d~(-1)灌注组吸收量增加,而在180 g·d~(-1)灌注组出现下降趋势.除了PB-Ile,大豆小肽的灌注增加了所有肽结合必需氨基酸的乳腺吸收.但PB-Val、PB-Leu、PB-Phe、PB-Thr、PB-Met和PB-Lys均在120 g·d~(-1)灌注组吸收率最高.非必需氨基酸中,小肽的灌注提高了PB-Ser、PBTyr、PB-Pro的吸收(P＜0.05),而PB-Gly的吸收却出现了下降(P＞0.05).(4)除了Lys,处理组中所有必需氨基酸的乳中分泌量都高于对照组,从0～120 g·d~(-1)试验组,这些氨基酸乳中分泌量随着小肽灌注量的升高而呈增加趋势(P＜0.05);在180 g·d~(-1)灌注组,大部分必需氨基酸的分泌量增加不显著(P＞0.05),且低于120 g·d~(-1)灌注组.(5)小肽的灌注明显促进了APN基因的表达.灌注60、120和180 g·d~(-1)小肽后,氨肽酶N(APN)的表达分别是对照组的13.55、18.69和10.01倍.结论:乳腺组织能够吸收动脉血液中的小肽,大豆小肽的灌注提高了乳蛋白产量显示乳腺组织可以将吸收的小肽用于乳蛋白的合成.但当乳腺所需的氨基酸达到饱和以后,再增加氨基酸的浓度会出现吸收抑制.APN表达变化与乳腺小肽吸收增加相一致,这可能因为APN是调控小肽乳腺吸收利用的主要酶类之一.     

视黄醇对试验性乳腺炎大鼠炎性细胞因子释放的影响

为研究视黄醇对脂多糖(LPS)诱发的乳腺炎大鼠炎性细胞因子释放的影响,40只清洁级SD孕鼠自怀孕第10天起,3个试验组(每组8只)分别为低(L)、中(M)、高(H)剂量组,分别灌胃视黄醇(溶解于大豆油)4 000、8 000和16 000 U/kg·d,对照组灌胃等量的大豆油,连续灌胃1 d。产后72 h分别灌注灭菌生理盐水和10μg/侧LPS到大鼠第4对乳腺(两侧)内,12 h处死大鼠。LPS灌注乳腺12 h后,乳腺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)均显著升高,白细胞介素-2(IL-2)水平显著降低。与阳性对照组相比,灌胃中、高剂量的视黄醇显著降低乳腺组织中TNF-α水平,低、中、高剂量视黄醇能显著降低血清中TNF-α水平,显著提高血清中IL-2水平。结果证实:视黄醇能抑制炎性细胞因子过度释放,提高机体免疫力,对LPS诱发的试验性乳腺炎大鼠有一定的保护作用。     

视黄醇对LPS诱发的原代培养大鼠乳腺上皮细胞炎症反应的调节

本研究旨在优化大鼠乳腺上皮细胞培养体系,建立LPS诱发的炎症反应模型,研究视黄醇对其炎症反应的调节机制.采用胶原酶与透明质酸酶联合消化分离大鼠乳腺上皮细胞.待细胞铺满整个培养瓶的90％时,(1)用不同浓度的LPS处理乳腺上皮细胞,24 h收集细胞及培养上清液；(2)分为试验组(添加1 μmol· L-1视黄醇)和对照组,处理24 h后更换培养液,用10μg·mL-1的LPS处理细胞,分别于不同时间点收集细胞.结果表明:LPS 处理大鼠乳腺上皮细胞后引起各个时间点炎性因子mRNA表达极显著升高,视黄醇能显著下调上述炎性细胞因子的表达.视黄醇预处理能减轻LPS诱发的大鼠乳腺上皮细胞的炎症损伤.