牦牛杂种优势利用新途径研究报告

本项研究提出了牦牛种间杂交的新途径（黑白花牛冻精×藏黄牛×牦牛，即三元杂交）。揭示了含１／２黑白花牛血液的杂种藏黄公牛（黑白花牛冻精×藏黄牛，以下简称杂种藏黄公牛）从半农半牧区引入高寒牧区后，有良好的适应性。它与牦牛自然交配，繁殖成活率４１４１％，比用“冻配”技术生产犏牛提高１７７１个百分点。自然交配繁殖的Ｆ１代犏牛杂种优势明显，初生重较大，公、母分别为２０２５±２６１ｋｇ、１９９５±２８４ｋｇ，相应比牦牛高６７５、６７０ｋｇ；生长发育快，２５岁时公、母体重分别为３１０７８±６８８ｋｇ、３０５７９±１４１６ｋｇ，比同龄牦牛相应重１２６４８和１４９９２ｋｇ；母犏牛２～３岁可初配，３～４岁挤奶，比牦牛提前１～２岁挤奶；第一胎（１８３天）挤奶量６５９３６ｋｇ±４１３４ｋｇ，为同胎次母牦牛的２６５倍、同胎次母黄犏牛的１７２倍。     

Utilization of Frozen Semen of Wild Yak

After domestication of wild yak and utilization of its frozen semen was successful in 1983, frozen semen of wild yak was used to improve domestic yak and local yellow cattle by artificial insemination(AI). Hybrid vigor of their F1 was obvious, i. e. , productive performance of F1 was significantly increased. Their offspring did not only have significant heterosis in performance but also can rejuvenate effectively their adaptability and survival, and can use alpine grassland more efficiently. This resulted in significant social and economic benefits.Compared with dairy cattle, beef cattle and yellow cattle, AI of yak was more difficult. Using AI to improve yak performance was difficult and significant in yak production areas of our country. It is necessary to invest more technique and fund to extend AI.     

Quantitative Histology Studies on the Test in Hybrid Bull of Wild and Domestic Yak

The testicular tissue of three types of yak bull (1/2 wild yak,cross 1/2 wild yak and domestic yak) were studied quantitatively at 6,12,18 and 24 months old. The results showed that the average values changed from breed to breed at the same age. But there were no significant difference. The volume density and the height of seminiferous tubule and epithelium increased with the age and testicular weight. The capacity rate of the testicular seminiferous tubule in three types were 78.71% ,75.78% and 78.58% respectively, which nearly reached the level of mature bull.     

热应激对不同品种(系)青年肉牛生产性能、营养物质表观消化率及血液生化指标的影响

本试验旨在研究热应激对不同品种(系)青年肉牛生产性能、营养物质表观消化率及血液生化指标的影响,探究不同品种(系)肉牛的耐热性差异。选取体重[(185.89±14.02)kg]相近、健康的青年西杂牛(西门塔尔牛×宣汉黄牛)、地方黄牛(宣汉黄牛)和犏牛(娟姗牛×麦洼牦牛)各6头为研究对象,试验期间不同品种(系)的青年肉牛饲喂相同饲粮。试验时间为2015年4—9月,预试期7d,正试期180d。结果表明:1)试验牛舍5—8月温湿度指数(THI)高于72,属于热应激期,且显著高于4月(热应激发生前)和9月(热应激发生后)(P0.05);热应激环境导致各试验牛呼吸频率和直肠温度显著升高(P0.05)。试验期间犏牛呼吸频率和直肠温度显著高于西杂牛和地方黄牛(P0.05)。2)热应激期内西杂牛、地方黄牛和犏牛单位体重干物质采食量均有不同程度降低,以6月为最低,均较4月显著降低(P0.05),且降低幅度为犏牛西杂牛地方黄牛。西杂牛、地方黄牛和犏牛的平均日增重(ADG)均在6月最低,分别较4月降低了27.62%(P0.05)、10.81%(P0.05)和46.15%(P0.05);西杂牛的ADG在4—7月显著高于犏牛(P0.05)。西杂牛和犏牛的料重比(F/G)以6月为最高,分别较4月升高了63.01%(P0.05)和89.03%(P0.05);地方黄牛的F/G在9月最高,较4月升高了53.12%(P0.05)。3)热应激期内西杂牛、地方黄牛和犏牛的粗蛋白质(CP)表观消化率均有不同程度降低,且7月均较4月显著降低(P0.05);西杂牛7月的粗脂肪(EE)表观消化率较4月显著降低(P0.05),而热应激对地方黄牛和犏牛的EE表观消化率无显著影响(P0.05);热应激期内犏牛中性洗涤纤维(NDF)(6月)和酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率(5—8月)较热应激发生前显著降低(P0.05);热应激期内西杂牛和犏牛钙(Ca)(西杂牛:6—8月;犏牛:5—8月)和磷(P)的表观消化率(西杂牛:6—7月;犏牛:5—8月)较热应激发生前显著降低(P0.05)。试验期间,不同品种(系)牛的CP表观消化率无显著差异(P0.05),西杂牛和地方黄牛的EE表观消化率显著高于犏牛(P0.05),地方黄牛的ADF表观消化率显著高于西杂牛和犏牛(P0.05),西杂牛和地方黄牛的P表观消化率显著高于犏牛(P0.05)。此外,5—9月地方黄牛的Ca表观消化率显著高于犏牛(P0.05)。4)西杂牛、地方黄牛和犏牛血清中葡萄糖(GLU)浓度均以6月最低,较4月分别降低了16.82%(P0.05)、12.82%(P0.05)和15.90%(P0.05);热应激期间各试验牛血清中非酯化脂肪酸(NEFA)浓度均以7月最低,显著低于4月(P0.05);试验期间西杂牛和地方黄牛血清中尿素氮(UN)浓度随年龄的增大呈先升高后降低变化,而犏牛血清中UN浓度则持续升高;6—9月各试验牛血清肌酐(CRE)浓度均显著高于4、5月(P0.05),且7—9月犏牛血清CRE浓度显著高于地方黄牛(P0.05)。综上所述,热应激导致不同品种(系)青年肉牛生产性能降低、饲粮营养物质消化率降低,地方黄牛的耐热应激能力强于西杂牛和犏牛,犏牛对热应激最敏感。     

青海省牛隐孢子虫感染状况的调查研究

对青海省牦牛、奶牛和黄牛的281份牛粪样进行隐孢子虫检查,发现隐孢子虫感染率为36.65%,其中牦牛为39.74%、黄牛为35.00%、奶牛为32.73%。犊牛感染率高于成年牛,暖季感染率高于冷季。     

不同父本冻精杂交甘南牦牛母本围产期疾病发生率分析

[目的]为提高甘南农牧交错区牦牛生产性能筛选最佳杂交父本。[方法]分别选取荷斯坦奶牛、西门塔尔、安格斯、娟姗牛优质冻精杂交甘南牦牛,比较妊娠牦牛的流产率、难产率,产后胎衣不下、子宫内膜炎症的发生率,产后当年与第二年发情的比率。[结果]荷斯坦奶牛、西门塔尔冻精人工授精甘南牦牛时,母本妊娠期的流产率和难产率显著高于安格斯、娟姗牛(P<0.05),荷斯坦奶牛、西门塔尔、安格斯作为父本杂交,母本的产后胎衣不下、子宫内膜炎症发病率显著高于娟姗牛(P<0.05)。娟姗牛冻精人工授精甘南牦牛,母本产后当年与第二年发情的比率分别为39.22±1.65%和35.29±1.84%,显著高于其他种公牛冻精杂交后母本的发情率,且只有娟姗牛试验组当年发情率高于第二年发情率。[结论]娟姗牛为父本时,围产期疾病发生率最低,繁育潜能利用率最高,可作为改良甘南牦牛最佳父本。     

Morphological Observation on the Test and Epididymis in Hybrid of Wild and Domestic Yaks During the Growth Periods

This paper was carried out on the morphological character of the test and epididymis of three types of yak bull age 6,12,18,24 months old (1/2 wild yak, cross 1/2 wild yak and domestic yak). The results showed that the weight and size of testes and epidiymis was increased with the age which was hardly affected by imbalance of food supply during the cold and warm seasons. The development were similar for three kinds of yak at the same age(P＞0.05).     

青南地区牦牛生产性能的评估

通过1997－1999年对青海果洛家牦牛产乳性能、带犊、不带犊对母牛生长发育的影响、初生和1岁牦牛产肉性能及生长发育规律等生产性能综合研究，证实了导入野血公牦牛与当地家牦牛交配，可充分发挥野血牦牛耐粗饲、耐寒、生长发育快的优势，是一条在现行畜牧业体制下复壮家牦牛的简便措施。通过该地区牦牛生产性能现状的评估，将为牦牛杂交改良、本品种选育、政府部门的宏观决策提供理论依据。     

牦牛高效繁殖技术生产安犏牛试验研究

当年产犊牦牛采用“补饲+隔离断乳+生殖技术诱导”的高效繁殖技术,隔年产犊牦牛采用“补饲+生殖技术诱导”的高效繁殖技术,并采用安格斯肉牛细管冻精实施犏牛生产杂交试验,研究结果表明,采用牦牛高效繁育技术,与对照组相比,高效繁育组当年产犊母牦牛的发情率、受胎率、产犊率及犊牛成活率分别为67.50%、61.67%、56.67%和95.59%,分别提高38.33、35.83、35.83和11.59个百分点,差异极显著(P<0.01);采用牦牛高效繁育技术,与对照组相比,高效繁育组隔年产犊母牦牛的发情率、受胎率、产犊率及犊牛成活率分别为88.00%、83.00%、78.00%和96.16%,分别提高23.95%、25.76%、34.49%和7.25%,差异显著(P<0.05)。采用牦牛高效繁殖技术,显著提高当年产犊牦牛和隔年产犊牦牛的发情受胎效果,杂交后代犏犊牛的成活率也显著提高。     

牦牛育种工作的创新发展

牦牛是分布在青藏高原及周边地区特有的家畜.长期以来托牛业管理方式粗放,生产性能低下.大通种牛场进行导入野牦牛基因改良家托牛的育种研究,培育成功了世界上第一个牦牛新品种"大通托牛",并实施一系列综合技术措施,对托牛业发展有积极的促进作用.     

野牦牛mtDNA Cytb基因全序列测定及系统进化关系

为从分子水平探究牦牛的分类地位和遗传多样性,试验测定了野牦牛细胞色素b基因全序列,并以绵羊为外群,构建野牦牛、家牦牛、大额牛、普通牛、瘤牛、水牛、非洲野牛、欧洲野牛、美洲野牛、非洲水牛等牛亚科种间系统进化树.结果表明:野牦牛细胞色素b基因全序列长1 140bp,序列间共有13个SNP多态位点,核苷酸变异类型包括转换和颠换,无插入和缺失,表明野牦牛具有较丰富的遗传多样性.研究结果支持将牦牛划分为牛亚科中一个独立属(即牦牛属)的观点.     

HIF-1α和IL-17在牦牛、犏牛及黄牛睾丸中的表达比较研究

本研究旨在比较HIF-1α和IL-17在不同牛睾丸组织中的差异性表达,进一步探究HIF-1α与IL-17在牛睾丸组织中发挥调控功能的关联性。以成年牦牛、犏牛和黄牛的睾丸作为研究对象,采用Western-blot、实时荧光定量PCR法检测HIF-1α及IL-17蛋白和基因在3种牛睾丸组织的表达差异。结果显示,3种牛睾丸组织中HIF-1α与IL-17基因和蛋白表达都存在显著性差异,且在犏牛睾丸组织中的表达均极显著高于牦牛和黄牛（P<0.01）;此外,牦牛HIF-1α与IL-17蛋白水平表达显著高于黄牛（P<0.05,P<0.01）,而牦牛IL-17基因水平表达与黄牛差异不显著（P>0.05）。HIF-1α和IL-17基因和蛋白在不同牛睾丸组织中的表达差异说明其具有种属特异性;而牦牛和犏牛睾丸组织中显著性高表达提示HIF-1α和IL-17对适应低氧环境具有重要的调节作用。     

牦牛、犏牛及黄牛肉脂肪酸和风味物质的分析

随机选取青海省果洛州同一放牧群体的1.5岁牦牛（♂）和犏牛（♂）各3头,与青海省湟中县1.5岁的3头黄牛（♂）做比较研究,利用气质联用仪对牦牛、犏牛和黄牛肉中脂肪酸组成及含量进行分析,利用高效液相色谱法对其肉中的肌苷、肌苷酸和硫胺素进行测定,采用高氯酸滴定法测定其肉中谷氨酸钠的含量。结果表明：①牦牛、犏牛和黄牛肉中饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸的含量无显著差异（P〉0.05）;多不饱和脂肪酸在犏牛肉中含量最高,明显高于牦牛和黄牛肉（P〉0.05）。②牦牛肉肌苷的含量明显高于同龄黄牛（P〈0.05）;三种牛肉中肌苷酸的含量无显著差异（P〉0.05）;犏牛肉硫胺素的含量最高,明显高于同龄黄牛（P〈0.05）;犏牛与黄牛肉谷氨酸钠的含量明显高于同龄牦牛（P〉0.05）。     

Growth and Development of The Kunlun Type of Wild Yak

The observation of body height and weight of 10 captured wild yak shows the body height and weight of the wild yak at three and four months old were similar with that of domestic yak. At their 24 months old, the body height and weight were higher by 26.9 % and 62.5 % than that of the domestic ones. The results indicate that, once adapted to the half-shed and half-grazing conditions, the tamed Kunlun type of wild yak with superior genetics would grow and develop faster than the domestic yak at elder ages.     

免疫技术提高牦牛种间杂交受胎率

用黑白花公牛精液经皮下注射家兔或牦年犊,均可获得交高滴度的血清精子抗体;用分离纯化获得的精子抗体（ＩｇＧ）强化免疫异种莴种;家禽可获得血清精子抗抗体。精子抗体和精子抗抗均具有较强的专一性。有子抗体和精子抗抗体分别进行主动免疫或被动免疫防治母牦牛免疫不孕能显著提高牦牛种间杂交的台率（分别２７．９５％和２２．２１％）,获得显著的经济效益。     

牦牛肌红蛋白的基因克隆测序、分离纯化、含量及其与乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶活力的关系

为探索牦牛适应高原缺氧环境的分子机制,测定了麦洼牦牛心肌和骨骼肌中肌红蛋白（Mb）含量及乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸脱氢酶（MDH）活力,并对牦牛Mb进行了分离纯化和基因克隆测序。牦牛心肌和骨骼肌中Mb含量显著高于水牛和黄牛（P〈0.01）;牦牛、黄牛和水牛心肌MDH/LDH活力比均显著高于骨骼肌;牦牛心肌MDH/LDH活力比显著高于水牛和黄牛,但在不同牛种骨骼肌之间无显著差异。各组织Mb含量与MDH/LDH活力比呈显著正相关。试验用RT-PCR方法从牦牛心肌中克隆了Mb基因,与普通牛相比,核苷酸序列同源性为99.5%,氨基酸序列完全相同;用盐析、CM-Sephadex阳离子交换层析、Sephadex G-50凝胶层析等方法分离纯化了牦牛Mb,SDS-PAGE显示其分子量约为17 ku。     

高分辨率熔解曲线分析法检测牦牛脂蛋白脂酶外显子7的多态性及与生长性状相关性分析

脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)是一个分子质量为54 kb的糖蛋白,其活性受营养因素、激素水平等调节,因牦牛生存环境的特殊性,试验拟从分子水平研究天峻县牦牛脂蛋白脂酶外显子7(LPL-Exon7)基因的多态性,并与生长发育性状进行关联分析,从而为牦牛营养调控、品种资源保护和遗传育种提供科学理论依据。试验采集青海省海西州天峻县牦牛抗凝血106份,提取血样DNA,并利用PCR技术和高分辨率熔解曲线分析法对候选基因LPL-Exon7进行多态性分析,并于采血的同时对牦牛体重、体斜长、体高、胸围和管围等生长性状指标进行了相关性和遗传效应分析。结果表明,高原牦牛LPL-Exon7基因在高原牦牛和野血牦牛中都表现为多态,存在3种基因型,即AA、AB和BB,由1对等位基因A和B控制,A等位基因均为优势等位基因。经χ²检验,符合哈迪—温伯格(Hardy-Weinberg)定律,处于平衡状态(P>0.05)。该位点在高原牦牛和野血牦牛群体中公、母牦牛的多态信息含量为0.3588和0.2103、0.3219和0.3343,高原牦牛母牛的多态信息含量PIC<0.25,处于低度多态,高原牦牛公牛和野血牦牛公、母牛的多态信息含量均在0.250.05)。因此,初步推断牦牛LPL-Exon7可以作为牦牛标记辅助选择的遗传标记之一。     

不同季节和气候条件对种公牛精液品质的影响的研究

[目的]研究不同季节气候条件对种公牛精液品质的影响。[方法]从采精种公牛中随机抽出5头,选取气温最高（7月份）最低（1月份）和适中温度（4,9月份）进行试验,分别对不同时期所采得的精液进行检测。[结果]在最高温度月份7月份（25℃）时5头种公牛的平均精液量为5.88mL,原精活率67.2%,精液密度16.64亿/mL,冻后活率33.8%,生产冻精数143.4剂,精子畸形率23%。1月份环境温度平均在-11.2℃时,5头种公牛的精液量平均为5.7mL,原精活率66.8%,精液密度13.3亿/mL,冻后活率37.4%,生产冻精数为275.8剂,精子畸形率17.8%。在4,9月份环境温度12℃时精液量为6.6mL,原精活率73.2%,精液密度16.92亿/mL,冻后活率41.8%,生产冻精数404.4剂,精子畸形率12.6%。精液量之间差异显著（P〈0.05）,原精活率之间差异显著（P〈0.05）,精子畸形率之间差异显著（P〈0.05）。冻后活率和冻精生产数差异不显著。[结论]环境温度过高或者过低都会影响精液品质,种公牛在适宜的温度下生产的精液品质也会更加优良,种公牛在温度较高的条件下生产精液品质比在低温条件下还要差,种公牛最适宜的生产温度为12℃～16℃。     

野牦牛改良家牦牛的生产性能效果试验研究

[目的]为提高牦牛的生产性能。[方法]随机选择家牦牛63头为对照组,1/2野血牦牛57头为实验组,测定6月龄、18月龄体尺、体重,日增重,并将测定数据进行方差分析t检验。[结果]表明：6月龄1/2野血牦牛体高、体斜长、胸围、管围、体重比同龄家牦牛平均提高7.48%、7.93%、8.03%、9.64%、24.26%,差异...     

安格斯肉牛冻精与隔年产犊牦牛杂交改良效果分析

通过对上年未产犊牦牛采用补饲与同期发情处理技术,并采用安格斯肉牛细管冻精开展牦牛杂交,出生的犏牛犊采用犊牛培育技术,对不同培育条件对犏牛犊牛生长发育的影响,研究结果表明,采用上年未产犊母牦牛补饲技术,与对照组相比,试验组隔年产犊母牦牛的发情率、受胎率、产犊率及犊牛成活率分别为86.67%、82.23%、78.34%和96.46%,分别提高22.84%、27.59%、33.03%和7.62%,差异显著(P<0.05)。采用犏牛犊牛培育技术,与传统对照组相比,犊牛培育组和培育对照组公、母犏牛初生的体高、体斜长、胸围、管围体重明显增加,差异显著(P<0.05)。上年未产犊母牦牛补饲与同期发情处理技术结合犏牛犊牛培育技术,显著提高其杂交一代犏牛的生长发育速度,提高犊牛的繁殖成活率。