苯酚—硫酸法测定灵芝多糖含量的条件研究

本文以摇瓶培养的灵芝菌丝体为样品，对利用苯酚－硫酸法测定灵芝多糖含量时的多糖提取和测定条件进行了较为详细、系统的研究，最终得到了一个多糖提取和测定的最佳条件，使得利用苯酚－硫酸法测定样品多糖含量的结果更加准确和稳定。     

不同灵芝中粗多糖含量的比较研究

本实验利用苯酚－硫酸法对同一菌种液体发酵的菌丝体、不同生长阶段的子实体及其孢子粉中的粗多糖的含量进行了分析，发现灵芝菌丝体中粗多糖的含量明显高于灵芝子实体和孢子粉中的含量，菌丝体中粗多糖含量是灵芝老化期子实体中粗多糖含量的6倍，是灵芝孢子粉中粗多糖含量的2．8倍。而粗多糖在灵芝子实体的生长过程中呈逐渐下降的趋势。另外，不同品种的灵芝子实体中多糖含量存在一定的差异，其中南韩灵芝最高，达到1．58％，而紫灵芝中粗多糖的含量相对较低，为1．05％。     

桂西北野生灵芝和人工栽培灵芝多糖含量比较

用苯酚-硫酸法测定了桂西北地区几种人工栽培灵芝和野生灵芝的多糖含量。结果表明:人工栽培赤芝的多糖含量均比野生赤芝的多糖含量高;人工栽培赤芝的多糖含量也比部分野生黑芝的多糖含量高。分析了不同样品灵芝多糖含量差异的原因,并探讨保护野生药用植物资源,用人工栽培灵芝替代野生灵芝的可行性。     

灵武长枣多糖含量测定的研究

灵武长枣样品经脱脂,脱小分子糖后,用蒸馏水沸水浴浸提、醇沉、洗涤得灵武长枣多糖,含量测定采用苯酚-硫酸比色法,用精制多糖测得其多糖对葡萄糖的换算因子。建立了一种简便、准确测定灵武长枣多糖含量的方法。结果表明:该方法测定简便可行,重现性较好,平均回收率为97.11%,所测全红灵武长枣样品中多糖含量为13.30%。     

食用菌总糖含量测定方法的研究

比较香菇（Lentinula edodes）和黑木耳（Auricularia auricula）在不同水解条件下的单位质量吸光值，筛选适宜水解条件，并通过测定姬松茸（Agaricus blazei）、鸡腿菇（Coprinus comatus）和茶树菇（Agrocybe aegerita）3种食用菌的总糖含量，对筛选的水解条件进行验证；采用正交试验优化苯酚-硫酸法的反应条件；最后选用苯酚硫酸法和费林氏滴定法分别测定4种供试食用菌的总糖含量，并进行比较。试验研究表明，食用菌适宜水解条件为：30mL盐酸，100℃水浴水解3h；优化的苯酚-硫酸法反应条件为：5％苯酚1．5mL，浓硫酸5．5mL，反应时间15min；苯酚硫酸法和费林氏滴定法两种方法测得的食用菌总糖含量无显著差异，因苯酚-硫酸法操作简单，且简化了前处理过程，故是国标法——费林氏滴定法较理想的替代方法之一。     

不同灵芝孢子粉产品的多糖成分比较

五种市售的灵芝(Ganoderma lingzhi)孢子粉产品被用于评价其多糖含量和成分,采用苯酚-硫酸法测定五种灵芝孢子粉产品的多糖含量、高效液相色谱分析其多糖指纹图谱、离子色谱分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成。根据结果,不同来源的灵芝孢子粉总糖含量在2.05%~8.82%之间、多糖含量在1.05%~1.87%之间,而且多糖的种类及其水解后单糖组成也有明显的差异,结果表明市售灵芝孢子粉产品的多糖有显著不同。     

姬松茸多糖粉中总糖含量的测定

本文以葡萄糖作为标准品，通过苯酚-硫酸法测定姬松茸粗多糖样品中的总糖含量。考察了苯酚与浓硫酸的用量和反应温度等因素对显色反应的影响以及显色反应的稳定性，得到了糖浓度与紫外吸光度关系的标准曲线，并通过对标准品和样品的测定对测定方法的精密度及准确度进行了检验。结果表明苯酚-硫酸法对该样品测定的最佳反应条件为：5％苯酚溶液1．6mL，浓硫酸6．5mL。水浴温度25℃；在0．0120～0．0160g/L，糖浓度与紫外吸光度(吸收光波长488．5nm)呈线性关系(r=0．9994)；对标准品测量值的相对平均误差≤1．17％。对样品测量值的标准偏差s=0．67(n=4)，平均加样回收率为101．9％。标准偏差s=2．80(n=4)。     

灵芝孢子粉多糖含量检测方法的优化

探讨并优化了测定苯酚-硫酸法灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉多糖含量的检测条件,通过单因素和正交试验方法确定灵芝孢子粉多糖的最佳检测条件,并分析不同检测方法测定灵芝孢子粉多糖含量的差异。结果表明,灵芝孢子粉多糖苯酚-硫酸法的最佳测定条件为最大吸收波长489 nm,5%苯酚用量0.5 m L,浓硫酸用量2.5 m L,提取温度90℃,提取时间3.0 h,料液比(g·m L~(-1))为1:40,在此条件下平均回收率为99.54%,相对标准偏差(RSD)为0.90%。本试验优化后的检测方法具有良好的稳定性及重复性,回收率高,并能有效减少检测试剂苯酚和浓硫酸的使用量,具有实际应用意义。     

苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的比较

为确定一种比较准确、方便的香菇多糖测定方法,比较了苯酚硫酸法和高锰酸钾滴定法测定香菇多糖含量的差异:两种方法均稳定可行,重现性较好。但苯酚硫酸法测定香菇多糖含量高于高锰酸钾滴定法,苯酚硫酸法不仅灵敏度高,而且回收率也高于高锰酸钾滴定法;高锰酸钾滴定法操作也较繁琐。相对而言,苯酚硫酸法是测定香菇多糖较为理想的方法。     

白灵菇水溶性多糖和总黄酮的提取及含量测定

白灵菇为试材,采用硫酸-苯酚法测定其水溶性多糖。测得白灵菇中水溶性多糖含量为6．76％,平均回收率为96．42％．RSD为0．67％;采用超声波技术提取黄酮类物质,分光光度法测定其含量。测得总黄酮的含量为0．68％,平均回收率为99．12％,RSD为0．73％。     

灵芝多糖的微波法提取及抗氧化活性研究

采用单因子和正交实验优化灵芝子实体粗多糖微波法提取工艺和硫酸蒽酮比色法,建立了灵芝子实体粗多糖微波提取和检测方法。过60目筛的粉末作为样品,预浸1．5h,水提液pH8．0,料水比1：70,微波功率400W,微波时间20min,提取2次,然后采用90％硫酸-蒽酮法,水浴10min进行多糖比色检测。通过多糖清除DPPH自由基的实验,初步探讨了微波法提取灵芝多糖的抗氧化能力。     

西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究

采用正交试验,对影响灵芝多糖提取的4个主要因素（料水比、提取温度、提取时间、醇析浓度）进行了最佳工艺条件研究。结果表明,提取灵芝子实体粗多糖采用水提醇沉法,最优工艺条件为：料水比1∶50,提取温度90℃,提取2次,每次提取2h,90%乙醇醇析,3000r/min离心30 min取沉淀,sevage法除游离蛋白,离心取上层液即为灵芝粗多糖溶液。苯酚-硫酸法测定灵芝子实体粗多糖含量约为0.734%,这一含量在全国灵芝子实体多糖含量中处于中等水平,还有待于进一步的研究和开发利用。     

超声波-超低温冻融处理对灵芝孢子粉多糖提取的影响

利用苯酚-硫酸法对破壁处理后的灵芝孢子粉多糖含量进行测定,结果表明采用超低温冻融处理和超声波处理进行灵芝孢子粉破壁均具有效果好、成本低及操作简便等特点;增加冻结-解冻循环次数在一定程度上能提高多糖含量,循环次数以5次～7次为宜;将超声波处理法和超低温冻融法很好地结合起来,其多糖释放更高,效果更佳,此方法更具实用价值。     

2种灵芝液体培养的比较研究

比较赤芝和松杉灵芝液体培养菌丝体生物量和多糖含量。在相同的培养条件下,对赤芝和松杉灵芝进行液体培养,采用热水浸提法提取干燥菌丝体多糖,通过蒽酮-硫酸法测定赤芝和松杉灵芝多糖含量。测得赤芝多糖含量为7.22%,松杉灵芝多糖含量为3.78%,液体培养赤芝生长速度比松杉灵芝快,多糖含量也比松杉灵芝高,因此,赤芝更适合用于液体培养生产灵芝多糖。     

不同基料种植的姬松茸营养成分的比较研究

利用原子分光光度法、苯酚一硫酸法、氨基酸分析法及凯氏定氮法,分析比较了以芦笋老茎为主要基料栽培的姬松茸子实体和传统以稻杆为主要基料种植的姬松茸子实体中Ca2＋、多糖、蛋白质和氨基酸的含量。结果表明,芦笋老茎做基料培育的姬松茸中钙含量比普通姬松茸高66．71％,多糖、总蛋白质和总氨基酸的含量分别高22．49％、6．3％、28．04％。     

不同灵芝培养料及其菌糟营养成分分析

以4种不同配方灵芝培养基(木屑、常规菌草、巨菌草、巨菌草沼渣)及其菌糟为试材,采用国标法测定灵芝培养基及其菌糟中的粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和氨基酸含量,并利用苯酚硫酸法、国标法分别测定出芝后菌糟粗多糖、重金属含量。结果表明:4种灵芝菌糟营养丰富,粗蛋白质含量分别为8.86%、9.22%、12.40%、9.42%;粗多糖含量分别为3.0%、4.5%、4.7%、3.3%;4种菌糟所含氨基酸种类齐全,含量丰富;重金属含量在饲料卫生标准规定的范围内,且远低于有机肥料的标准。因此,4种灵芝菌糟在用作饲料及饲料添加剂、肥料、无土栽培基质等方面具有很大的开发潜力。     

不同日常食用加工方法对灵芝中活性成分利用的比较

为阐明日常的食用加工方法是否能充分利用灵芝(Ganoderma lingzhi)中的活性成分,用苯酚硫酸法和HPLC法分别检测龙芝二号子实体片经水煮、焖烧、水泡、酒浸四种加工处理的提取液中灵芝多糖和灵芝三萜含量,结果水煮、焖烧、水泡40min后多糖基本全部溶出,三萜溶出率分别为85.5%、83.1%、51.1%;50%的白酒浸泡7d后三萜溶出率为95.0%,而多糖溶出率仅为0.31%;用这些方法比较龙芝二号与菌草灵芝的处理结果,结果多糖和三萜溶出效果基本相同;通过比较,焖烧40min能使灵芝片中有效成分大部分溶出。     

掌状玫耳多糖的提取与组成分析

从掌状玫耳菌丝中提取的掌状玫耳多糖ＭＨ，经苯酚—硫酸法测得ＭＨ的总糖含量为４１％，ＰＣ与ＧＣ分析表明ＭＨ的单糖组成为Ｆｕｃ，Ｘｙｚ，Ｍａｎ，Ｇｌｃ和一未知单糖ｘ，各单糖的摩尔比依次为１７∶１∶１６∶６０∶１１。     

不同生长期赤灵芝子实体多糖含量变化研究

目的：研究不同生长期灵芝子实体多糖含量的变化规律。方法：采用超声波协同回流提取子实体，蒽酮-硫酸法测定灵芝多糖的含量。结果：现蕾后开伞前子实体中多糖含量最低，为11．2mg/g，30d子实体多糖含量为13．0mg包孢子粉弹射期间，子实体多糖含量随着子实体生长而增加，从18．2mg/g上升到24．7mg／g，此时，子实体停止生长，不再弹射孢子粉。     

酶解低温提取灵芝水提取物过程研究

通过试验选出了以木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶为组合的复合酶的最佳灵芝水提取物(粗多糖)初步提取条件,以硫酸苯酚法检测其多糖产出率,结果表明:最佳酶解条件为pH4.5,反应温度45℃,料液比1∶30,复合酶用量0.8%(对底物),反应时间3 h,酶解次数2次。复合酶最佳酶配比为木瓜蛋白酶∶纤维素酶∶果胶酶=1∶2∶2。酶解低温提取所获得的灵芝水提物中的灵芝多糖含量较传统的水提醇沉法中的热水浸提提升了20%以上,为今后酶解低温提取在工业上的应用提供了重要依据。