猪伪狂犬病病毒gE基因核酸探针的制备

伪狂犬病（pseudorabies,PR）又称Aujeszky氏病,是由伪狂犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种以发热、奇痒（猪一般除外）、呼吸和神经系统疾病为特征的重要传染病。控制和消灭伪狂犬病所面临的主要困难是伪狂犬病病毒的潜伏感染问题。目前,OIE推荐使用基因缺失疫苗,我国农业部已决定只生产和使用基因缺失疫苗。已有的商业化基因缺失疫苗普遍缺失了啦基因。随着基因缺失疫苗的广泛使用,迫切需要一种有效的检测强毒及其潜伏感染的诊断方法与之配套,因此进行了利用缺失的gE基因制备核酸探针的研究。     

猪伪狂犬病病毒gE基因核酸探针的制备

<正>猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种以发热、呼吸和神经系统疾病为特征的重要传染病,国内到目前为止,已经有20多个省市报道有伪狂犬病流行,并分离出Min A、陕A、AKW、DQ-8401、S、鄂A、京A等多株猪伪狂犬病病毒(PRV)。OIE推荐使用基因缺失疫苗,我国农业部已决定只生产和使用基因缺失疫苗,目前已经商业化基因缺失疫苗普遍缺失了g E基因,本文报道了利用缺失的g E基因制备核酸探针的研究。     

首株动物基因工程疫苗问世

据《京郊日报》报道 :我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世。伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种急性传染病 ,猪是这种病的主要宿主和传染来源。猪伪狂犬病目前已呈世界性分布 ,其流行正呈上升趋势 ,给畜牧业造成巨大损失。四川农业大学郭万柱教授等专家在国内率先系统地开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究 ,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。“猪伪狂犬病 (基因缺失 )活疫苗(SA215株 )”获得了国家新兽药证书 ,从而成为我国第一株动物病毒基因工程疫苗。试验研究和应用效果表明 ,该疫苗较常规疫苗及同类疫苗具有遗传稳定性、安全性好、免疫原性强、抗潜伏感染能力独特等优点 ,达到国际同类疫苗的应用标准。首株动物基因工程疫苗问世     

区分猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株和野毒株的gE-PCR方法的建立

根据编码猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地从猪伪狂犬病病毒感染的细胞中扩增出预期的178bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株均未扩增出相应的片段,经PCR扩增产物测序鉴定,证实了该扩增片段为预期目的片段;敏感性试验表明,该体系可检测到102TCID50的猪伪狂犬病病毒。本方法的建立能够区分基因缺失疫苗免疫猪和野毒感染猪,使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、准确。     

区分猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株和野毒株的gE—PCR方法的建立

根据编码猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地从猪伪狂犬病病毒感染的细胞中扩增出预期的178bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株均未扩增出相应的片段,经PCR扩增产物测序鉴定,证实了该扩增片段为预期目的片段;敏感性试验表明,该体系可检测到10^2TCID50的猪伪狂犬病病毒。本方法的建立能够区分基因缺失疫苗免疫猪和野毒感染猪,使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、准确。     

江西省部分规模种猪场猪伪狂犬病血清学调查报告

为掌握江西省种猪场猪伪狂犬病病毒的感染状况,对15个已使用猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗免疫的种猪场l 420份送检血清,采用猪伪狂犬病基因缺失鉴别ELISA方法进行血清学抗体监测,检测出猪伪狂犬病毒gE抗体阳性186份,阳性率为13.1%.结果表明,江西猪群中存在猪伪狂犬病病毒感染,且某些猪场猪伪狂犬病病毒的感染率较高...     

伪狂犬病病毒感染抗体监测及伪狂犬病流行状况分析

在北京大兴和顺义区2个使用伪狂犬病病毒（porcine pseudorabies virus,PRV）Bartha株基因缺失疫苗的规模化猪场进行为期3年的猪伪狂犬病野毒感染抗体跟踪监测,并进行猪场的临床状况和组织样品的PCR检测,结果显示,北京市2011—2012年间在猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫猪场发生了猪伪狂犬病的流行。提示,应对该状况加以重视,对其发病原因需进行进一步的病毒分离和毒株分子遗传学分析。     

广西猪伪狂犬病毒感染状况调查报告

为了解广西猪伪狂犬病毒的感染状况,应用PCR技术对来自广西46个种猪场的1940份公猪精液进行了猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,阳性率为0;同时对广西25个已使用猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗猪场的1455份送检血清,采用了猪伪狂犬病基因缺失鉴别ELISA方法进行了血清学抗体监测,结果检出猪伪狂犬gE抗体阳性11份,阳性率为0.76%。结果表明,广西猪群中存在猪伪狂犬病野毒感染,但感染率较低。     

崇阳县猪伪狂犬病毒感染调查

为了解湖北省崇阳县猪伪狂犬病毒的感染状况,应用PCR技术对来自崇阳县不同规模7个种猪场的126份公猪精液进行了猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,阳性率为0;同时采取了这7个已使用猪伪狂犬病病毒g E基因缺失疫苗免疫血清420份,采用了猪伪狂犬病基因缺失鉴别ELISA方法进行了血清学抗体监测,结果检出猪伪狂犬g E抗体阳性10份,阳性率为2.37%。结果表明,崇阳县猪群中存在猪伪狂犬病野毒感染,但感染率较低,不同猪场感染差异大。     

猪伪狂犬基因缺失疫苗的的研究进展

猪伪狂犬病(Pseudorabies)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜以发热、奇痒(猪除外)、繁殖障碍、脑脊髓炎为主要症状的一种高度接触性传染病,给养殖业带来很大的危害。而对该病最有效的预防措施是采取疫苗免疫,疫苗免疫是预防该病的主要手段,临床上使用的疫苗又以猪伪狂犬基因缺失疫苗为主。文章就目前猪伪狂犬基因缺失疫苗的研究现状及主要的商品化基因缺失疫苗做一简要综述。     

青海省互助县猪伪狂犬病病毒感染情况调查与分析

<正>猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种以妊娠母猪繁殖障碍和哺乳仔猪神经症状及高死亡率为主要特征的急性传染病,是危害养猪业健康发展的重要疫病之一,目前国内外普遍采用PRV g E基因缺失疫苗对PR进行免疫预防,通过检测g E抗体鉴别区分疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,从而能有效监测猪群中PRV野毒感染情况,逐步淘汰PRV野毒感染猪。     

规模猪场应用伪狂犬gE基因缺失疫苗免疫及淘汰措施净化猪伪狂犬病技术

正伪狂犬病(PR)病毒主要毒力基因为gE和gI,诱导产生保护性免疫基因为gB、gC、gD等,通过给猪接种伪狂犬gE基因缺失疫苗,检测PR-gB和PR-gE抗体,区分免疫动物和感染动物,淘汰感染动物,从而为伪狂犬病的净化提供可操作的技术手段。本课题通过在一个规模猪场应用伪狂犬gE     

我国首株动物基因工程疫苗问世

我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世,开创了国内动物病毒基因工程疫苗实用化的先河。四川农业大学教授郭万柱等专家经过10多年的潜心研究,在国内率先开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究,运用缺失、重组和克隆等基因操作技术,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。近日,该项成果之一的″猪伪狂犬病基因缺失活疫苗SA215株″获得国家新兽药证书,从而成为我国第一株动物病毒基因工程疫苗。该疫苗较常规疫苗及同类疫苗具有遗传性稳定、安全性好、免疫原性强、抗潜伏感染能力独特等优点,达到国际同类疫苗的应用标准。我…     

规模化猪场猪伪狂犬病流行病学调查

猪伪狂犬病(PR)临床上以仔猪的神经症状、呼吸道系统疾病及种猪发生流产等繁殖性障碍为特征,猪伪狂犬病病毒(PRV)是引起PR的病原。猪呼吸道疾病综合征(PRDC)是由多种致病因素导致的一种猪复杂的呼吸道疾病,PRV也是引起PRDC的主要病毒性病原之一。近年来规模化猪场对PRV的免疫均选用了基因缺失苗,使用基因缺失苗能更好地利用针对特异性蛋白的Elisa检测方法,将缺失苗免疫动物与野毒感染动物或常规疫苗免疫动物区分开。2010年10月,我们对涪陵区19个使用过猪伪狂犬病gE缺失苗的规模化猪场进行了PRV病原抗体和疫苗抗体的监测。     

向美出口食品和饲料须先取得美FDA注册

本刊讯 :我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世 ,同时还开创了国内动物病毒基因工程疫苗实用化的先河。据介绍 ,伪狂犬病是由伪犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种急性传染病。猪是这种病的主要宿主和传染来源 ,猪伪狂犬病目前已呈世界性分布 ,其流行正呈上升趋势 ,给畜牧业造成巨大损失。四川农业大学教授郭万柱等专家经过10多年的潜心研究 ,在国内率先开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究 ,运用缺失、重组和克隆等基因操作技术 ,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。近日 ,其标志性成果之一…     

伪狂犬病病毒广西B、W株gE基因的扩增、克隆及序列分析

在已鉴定了的伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）11种糖蛋白中，gE是其中十分重要的一种非必需糖蛋白，是伪狂犬病病毒重要的毒力基因，它在介导感染细胞的融合，病毒在细胞间的扩散，病毒粒子的释放等方面均起着十分重要的作用，尤其是在影响伪狂犬病病毒神经嗜性和毒力方面的作用。利用PRV gE基因缺失疫苗，结合血清学方法可以区分疫苗接种猪和野毒感染猪。     

猪伪狂犬病的净化条件

●伪狂犬病基因缺失疫苗:　　1.　自然弱毒疫苗(缺失部分gE基因)　　2.　基因工程缺失疫苗(双缺失:TK、gE)　　●鉴别诊断技术:　　gE-ELISA　区分疫苗免疫动物和野毒感染动物。疫苗免疫接种是防制和控制乃至根除伪狂犬病的根本措施。早期的猪伪狂犬疫苗大多为弱毒苗和灭活苗,弱 毒苗和灭活苗在预防控制伪狂犬病方面 虽然能起一定的作用,但是弱毒苗不能防 止病毒在动物体内的复制和排出,即存在 着毒力返强和散毒的危险;而灭活苗虽然 安全性较好,但其免疫效率却较低,免疫时用量较大、有时还可能导致注射部位肿胀,出现过敏反应。因此…     

一种检测猪伪狂犬病野毒方法的建立

猪伪狂犬病是危害养猪业的重要病毒性传染病,如何鉴别疫苗接种动物和野毒感染动物是控制和净化该病的前提。本试验根据不同猪伪狂犬疫苗株gE基因缺失的特点,建立了一种猪伪狂犬病野毒病原核酸的PCR检测方法。该方法可以检出猪伪狂犬病野毒,而不能检出猪伪狂犬病疫苗株,实现了疫苗毒和野毒的鉴别检验,同时不能检测出猪常见病毒性传染病病原。最低检测限度为10~3个病毒核酸拷贝。在组织样品检测中不受宿主组织核酸干扰,能区分野毒感染动物组织和疫苗免疫动物组织,是一种值得推广的伪狂犬病毒野毒检测方法。     

猪伪狂犬疫苗研究进展

目前,疫苗接种是预防、控制甚至消灭猪伪狂犬病主要的措施之一。国内外已研制出猪伪狂犬病的灭活疫苗、弱毒疫苗、基因缺失弱毒疫苗已经相对成熟,而病毒载体重组疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗尚处于实验室研究阶段。本文对猪伪狂犬疫苗做简要综述。一、灭活疫苗灭活疫苗是将猪伪狂犬病毒接种于鸡胚或细胞,当病毒滴度达到要求时收获病毒,灭活后加入免疫     

青海海北州地区猪伪狂犬病病毒野毒株感染的血清学调查

<正>猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性、接触性传染病,可引起母猪屡配不孕,妊娠母猪流产,仔猪发病死亡,成年猪潜伏感染,长期带毒并排毒。g E基因是PRV的主要毒力基因,PRV g E基因缺失弱毒疫苗,在我国的大规模免疫应用,对预防和控制PR起到了极其重要的作用。但自2011年以来,