大环内酯类抗生素对畜禽病原菌体外抗菌敏感性试验研究

针对兽医临床的细菌耐药现象,为指导临床合理用药,采用微量肉汤稀释法研究了三代大环内酯类抗生素泰乐菌素、替米考星和泰地罗新对兽医临床常见的15种共74株病原菌的体外抑菌效果。结果显示:对于革兰阳性菌,泰乐菌素和替米考星对乳房炎常见的金黄色葡萄球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌均有较强的抑菌活性,优于泰地罗新;泰地罗新对肺炎链球菌抑菌效果较强。对于革兰阴性菌,如支气管败血波氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌等致病菌,替米考星的抑菌效果比泰乐菌素强1～64倍,泰地罗新比替米考星强2～32倍。对引起肠道感染的大肠杆菌,泰地罗新亦表现出很好的抑菌活性,效果优于泰乐菌素和替米考星。本试验为畜禽细菌性疾病的防控以及大环内酯类抗菌药物的合理使用提供了基础数据。     

纳米材料抗菌性能的研究

试验以硒化铜粉体作为抗菌剂,选用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为试验菌种,采用抑菌圈法、最低抑菌浓度法、最低杀菌浓度法对纳米材料的抗菌性能进行了定性和定量研究。抑菌圈试验结果表明,硒化铜具有良好的抗菌性能。最低抑菌浓度试验结果表明,硒化铜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度均为30 mg/L。最低杀菌浓度结果表明,硒化铜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低杀菌浓度分别为220,180 mg/L,当达到该浓度时灭菌率均可达到99%以上。     

青霉素压力下金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素的耐药表型变化

为了阐明奶牛乳房炎源性金黄色葡萄球菌在青霉素压力作用下的表型变化,本试验对1株mec A基因缺失的金黄色葡萄球菌在体外进行亚抑菌浓度的青霉素诱导,利用K-B纸片法和电镜技术观察不同诱导代次金黄色葡萄球菌的表型特征,并用菌落计数法分析耐药亚群生长曲线。试验结果显示,随着诱导代次的增加,金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗菌药物即青霉素和苯唑西林的耐药性逐渐增强,对各浓度β-内酰胺类抗菌药物的耐药亚群比例升高;表型观察发现金黄色葡萄球菌诱导菌菌体变小,胞质浓缩,细胞壁疏松和增厚,有的胞浆内出现空泡。研究表明,金黄色葡萄球菌在亚抑菌浓度青霉素的体外作用下,发生了表型和生长曲线的适应性改变。这为金黄色葡萄球菌耐药机制的研究奠定了基础,并为临床上奶牛乳房炎的防治提供了依据。     

槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究

【目的】 制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】 通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1 000、1 500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75 ℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】 当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1 000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50 ℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2 μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】 本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。     

沙枣水提物体外抗菌作用研究

目的:探讨新疆沙枣水提取物在体外抗菌作用。方法:采用纸片琼脂扩散法(KB法)和试管连续(对倍)稀释法对新疆沙枣水提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、铜绿假单胞菌等菌株的抑菌圈直径,抗菌活性,最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)进行实验研究。结果:新疆沙枣水提取物在体外对对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、铜绿假单胞菌等其他菌种都没有抑菌效果,只对褔氏痢疾杆菌有轻微的抑菌作用。结论:新疆沙枣水提取物对褔氏痢疾杆菌有一定的抑制作用。     

氟苯尼考及其与多西环素联合的体外抗菌作用

对氟苯尼考 (Florfenicol)及其与多西环素 (Doxycycline)联合的体外抗菌活性、杀菌动力学曲线和抗菌后效应(PAE)作了研究。结果表明 :氟苯尼考对鸡大肠杆菌等 9种标准菌株最小抑菌浓度 (MIC)为 0 .2～ 1.6 mg/L ,与氯霉素相似或略低 ,比甲砜霉素低 1/2～ 1/80 ;对耐氯霉素、甲砜霉素的鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌和猪大肠杆菌临床分离株仍有较强抗菌作用 ;对鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌动力学曲线与甲砜霉素相似 ,表现为低浓度抑菌 (小于 4 MIC值 )、高浓度缓慢杀菌 ;对鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 PAE显著长于甲砜霉素 (P<0 .0 5 ) ,呈浓度依赖性 ,对鸡大肠杆菌的 PAE(1.4 5～ 2 .0 7h)显著长于对金黄色葡萄球菌 (0 .4 8～ 1.18h)。棋盘法测得氟苯尼考与多西环素联合对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、猪链球菌和金黄色葡萄球菌均为无关作用 ,对前 3种菌的部分抑菌浓度(FIC)指数值为 1.5 ,联合时的氟苯尼考 MIC值比其单独时减小了 1/2。氟苯尼考以 1∶ 2与多西环素联合时 ,对鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌速率与氟苯尼考单药相比均有所增加 ,当浓度大于或等于 4 MIC时呈现出协同作用 ;对鸡大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的 PAE与单药 PAE的较大值相近 ,与相应浓度的单药相比均表现为无关作用。     

苦参生物碱提取物对奶牛乳房炎病原菌的体外抗菌活性研究

为了研究苦参生物碱提取物对奶牛乳房炎病原菌的体外抗菌活性,试验采用浓度系列稀释法,应用苦参生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和停乳链球菌进行体外抗菌活性研究。结果表明:苦参生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和停乳链球菌最低抑菌浓度(MIC)分别为12.50,3.13,1.56,0.78 mg/m L,最低杀菌浓度(MBC)分别为12.50,6.25,1.56,1.56 mg/m L。说明苦参生物碱提取物对引起奶牛乳房炎常见的4种致病菌均有良好的抑菌和杀菌效果,为防治奶牛乳房炎中药有效成分的开发提供理论依据。     

盐穗木提取物对金黄色葡萄球菌抑菌效果研究

为了解盐穗木提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,解决金黄色葡萄球菌耐药性的问题,笔者测定盐穗木乙醇提取物和正丁醇萃取物的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)及生长曲线。结果表明,盐穗木正丁醇萃取物的抑菌活性显著高于乙醇提取物,盐穗木乙醇提取物和盐穗木正丁醇萃取物的MIC分别为150.00 mg/mL和25.00 mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL和50.00 mg/mL。说明盐穗木正丁醇萃取物有良好的抑菌效果,可为新型抗菌药物的研发奠定基础。     

10种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抗菌试验

采用试管法和平板法,分别测定了10种中草药对临床分离的一株鸡关节炎源性金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),从而为临床预防和治疗鸡金黄色葡萄球菌性关节炎提供理论依据。结果发现,10种单味中草药对临床分离的球菌均有一定的抗菌活性,尤其是黄连、大青叶、艾叶、连翘4 种中草药的体外抗菌效果更明显。     

32种中药水提取物的体外抗菌活性研究

本试验提取32味中草药水煎液,采用微量肉汤稀释法测定对标准大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性．筛选出对金黄色葡萄球菌具有较好体外抑菌活性的中草药11味,并对3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行了最低抑菌浓度（MIC）的测定。结果显示：有24味中草药水煎液具有体外抑菌活性．且对金黄色葡萄球菌的抑菌效力大于大肠杆菌．以黄连和黄柏对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好：3株MRSA对筛选的11味中草药中的10味均产生了不同程度的耐药,MIC增加2—4倍,仅香薷对MRSA的MIC减少2—4倍。     

20味中药对奶牛隐性乳房炎主要病原菌体外抗菌效果

采用平板法和试管法,分别测定了20味中草药对奶牛隐性乳房炎临床分离主要病原菌金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的抑菌直径、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果发现,20味单味中草药对临床分离的金黄色葡萄球菌和无乳链球菌均有一定的抗菌活性,尤其是蒲公英、黄连、连翘、穿心莲、黄芩、红花、野菊花等7味中草药的体外抗菌效果明显。     

抗菌药物联合使用对耐达氟沙星鸡毒支原体的体外抑制作用研究

为探究抗菌药物联合使用对耐达氟沙星鸡毒支原体的体外抑制效果,选择鸡毒支原体标准株S6和对达氟沙星MIC升高程度不同的突变株M1、M2和M4,分别测定泰乐菌素、大观霉素、林可霉素、泰妙菌素、替米考星和多西环素种对4株鸡毒支原体的最低抑菌浓度,并使用达氟沙星分别联合上述6种抗菌药物进行体外抑菌试验.结果显示:除达氟沙星外,...     

磷酸替米考星体外抑菌活性检测

采用微量稀释法来测定磷酸替米考星等药物对9种微生物的最小抑菌浓度(MIC),评价其抗菌活性。结果:磷酸替米考星对猪胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌等临床常见畜禽致病菌均有良好的抗菌活性,MIC均在0.004 9~2.5μg/m L;对猪肺炎支原体与鸡毒支原体的MIC分别为0.004 9 ccu/m L和0.312 5 ccu/m L,表现出显著的抑菌活性。磷酸替米考星与其他抗生素相比,抑菌活性好或相当,与其主要对照药物替米考星相比,具有更好的水溶性。结果显示磷酸替米考星可用于治疗由这些敏感菌所致的疾病。     

规模化鸡场五种常用消毒剂的消毒效果评价

为研究规模化鸡场五种常用消毒剂(过氧乙酸、聚维酮碘、稀戊二醛、月卞三甲氯铵、烧碱)对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的消毒效果,采用倍比稀释法分别测定这五种消毒剂的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果显示:五种消毒剂中,月卞三甲氯铵对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌的最低抑菌浓度最小,过氧乙酸对大肠杆菌的最低抑菌浓度最小;月卞三甲氯铵对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌的最低杀菌浓度最小,过氧乙酸对大肠杆菌的最低杀菌浓度最小。试验表明,月卞三甲氯铵对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌的杀菌作用最强,过氧乙酸对大肠杆菌的杀菌作用最强。     

氟苯尼考与替米考星对奶牛乳房炎常见病原菌的联合药敏试验

本试验对氟苯尼考和替米考星在5种常见奶牛乳房炎病原菌(致病性大肠杆菌、停乳链球菌、乳房链球菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌)联合药敏试验中的相互作用进行了研究。结果表明,氟苯尼考和替米考星单独使用时对各菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.5~4μg/m L和1~8μg/m L,二者联合后的部分抑菌指数(FIC)介于0.375~0.75,表现出协同作用或相加作用。     

鹿白细胞抗菌肽的体外抗菌试验

应用氯化铵裂解、超声波破碎和离子交换层析等方法，从鹿白细胞中提取出阳离子抗菌肽混合物。经平板抑菌试验初步检测其抗菌活性后，采用微量反应板法测定了鹿抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等9个标准菌株的最小抑菌浓度（MIC），结果显示，该混合抗菌肽对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有抑制活性。体外杀菌曲线试验表明，鹿抗菌肽的杀菌作用是非浓度依赖性的，杀菌效果迅速，可在2min内杀灭63．8％的受试细菌。     

头孢喹诺对临床分离菌株抗菌活性研究

本研究旨在评价头孢喹诺对上海市养殖场临床分离菌株的体外抗菌作用,为头孢喹诺的临床使用提供参考依据。从上海市养殖场分离并鉴定大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌各若干株,采用微量肉汤稀释法测定头孢喹诺对各菌株的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）,推算MIC₅₀和MIC₉₀,并绘制头孢喹诺对这4种细菌的杀菌动力学曲线。头孢喹诺对金黄色葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌和大肠杆菌的MIC₅₀分别为0.063、0.063、0.032、0.125 μg/mL,MIC₉₀分别为0.125、0.125、0.125、0.25 μg/mL;在很小的浓度变化范围内头孢喹诺能够快速抑菌,在抑菌浓度为1倍或2倍MIC时,24 h内能杀灭金黄色葡萄球菌、大肠杆菌或链球菌、沙门氏菌。头孢喹诺对上述几种临床分离细菌具有很强的抑菌效果和杀菌活性。     

篦齿蒿提取物的抗菌试验

为了研究篦齿蒿(Neopallasia pectinata)水提取物及醇提取物的体外抑菌作用,采用牛津杯法测定篦齿蒿各种提取物对大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌,沙门菌和链球菌的抑菌圈直径。用试管2倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),以金黄色葡萄球菌和链球菌感染小鼠,判断其体内抗菌效果。结果表明,篦齿蒿各种提取物都具有一定的抑菌作用,尤其是对金黄色葡萄球菌,其乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物是体外抗菌的主要活性部分。篦齿蒿提取物对链球菌感染小鼠体内抗菌效果较差,对金黄色葡萄球菌感染小鼠体内抗菌成分主要集中在乙酸乙酯提取物内,对小鼠死亡保护率明显高于阴性对照组,可达75%。     

功劳叶提取物的体外抗菌活性研究

采用水提法和乙醇回流加热法分别提取功劳叶,应用牛津杯法和试管二倍稀释法分别检测功劳叶提取物对试验菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MinimumInhibitory Consistency,MIC)和最低杀菌浓度(Minimum Bactericidal Consistency,MBC)。结果显示,功劳叶醇提物金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为20.69 mm、15.40 mE;MIC值分别是31.3 mg/mL、125 mg/mL;MBC值分别是62.5 mg/mL、500 mg/mL。功劳叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈13.54mm,其MIC值、MBC值分别是62.5 mg/mL、500 mg/mL,对大肠杆菌抗菌活性较弱,其MIC值为500 mg/mL,MBC500 mg/mL。功劳叶不同提取物对细菌的抗菌活性有所差异,功劳叶醇提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均由不同程度的抑菌或杀菌能力。     

酿酒酵母表达基因工程抗菌肽Pa-AMP05的抗菌活性研究

本实验采用琼脂扩散和稀释法,对发酵得到的基因工程抗菌肽Pa-AMP05的抗菌活性进行研究,结果表明,抗菌肽Pa-AMP05具有较强的抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为15.625μg/mL,对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为31.25μg/mL;且其浓度与抗菌活性呈线性正相关。