口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫临床效果评估

为探索口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病疫苗联合免疫在猪场中的临床应用,研究进行了实验室和猪场临床效果评估,通过实验室对疫苗混合后的物理性状、疫苗效价变化进行探讨,证明联合免疫的可行性;分别选取40日龄的保育猪（2 500头）、后备母猪（1 000头）、经产母猪（1 000头）作为试验对象,将其分成5组（即：A、B、C、D、E组）通过检测口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病抗体效价来评估猪群的临床免疫效果。结果显示,3种疫苗联合免疫后效果不受影响,免疫副反应率比较低,猪只免疫次数以及人猪接触频率显著降低,特别是猪群进行二免后抗体效价更高,免疫持续期不受影响,此次研究结果适宜临床推广。     

猪繁殖与呼吸综合征高免血清的制备与临床治疗试验

为筛选免疫效价高的疫苗,获得高免血清并进行临床治疗观察。本试验选用3种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫健康新西兰大白兔,免疫后分别采血和分离血清,并用猪蓝耳病毒抗体PPA-ELISA检测试剂盒检测血清抗体效价,筛选出抗体效价较高的两种疫苗;免疫猪,制得高免血清对自然发病仔猪进行高免血清治疗试验。免疫兔试验表明,猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(CH-lR株)免疫后血清抗体效价最低,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)血清(简称高致病疫苗血清)抗体效价比猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(CH-la株)血清(简称灭活疫苗血清)低,用后两种疫苗免疫猪,血清抗体效价均能达到1∶1280。自然发病仔猪高免血清治疗试验显示,注射高致病疫苗血清对蓝耳病的治愈率为88%,灭活疫苗血清治愈率为76%。结果表明高免血清是无菌、安全的,所得两种血清可用于临床防治猪蓝耳病。     

猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗首免组合的筛选

为向基层动物防疫工作提供猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病3种疫苗科学合理的首免组合,将3种疫苗采取5种不同免疫组合免疫断奶仔猪。于免疫后21d、28d、35d、63d、112d采集血清,用酶联免疫吸附实验方法（ELISA）检测猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病抗体水平。结果表明,在阉割时免疫猪瘟疫苗和猪口蹄疫疫苗,第7天免疫高致病性猪蓝耳病疫苗,所产生的抗体水平较高,且持续时间较长,在生产实际中可以推广应用。     

猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病疫苗最佳免疫方法研究

为探索生猪重大疫病的科学免疫方法,确定最佳免疫程序,笔者设计并开展了口蹄疫（FMD）合成肽苗（或灭活苗）、猪瘟（HC）脾淋苗、高致病性蓝耳病弱毒疫苗（或灭活苗）的不同组合注射、单独注射、不同疫苗类型注射的试验研究.结果表明：3种疫苗不同组合注射或单独注射,以及使用不同类型疫苗注射,其免疫副反应均无明显差异;平均免疫抗体效价及群体合格率各组间存有差异;采用猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病3种疫苗同时分点注射,以及仔猪首免口蹄疫、猪蓝耳苗,再免疫口蹄疫、猪瘟苗的免疫效果最佳.     

猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序设计

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪,随机分成4组,分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,分别设计3种猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序,首免后第2周开始每隔2周分别采血检测抗体。试验结果表明只有试验Ⅰ组的免疫程序可行,即:21日龄进行猪瘟疫苗首免,60日龄加强免疫1次,母猪分娩前10日龄进行猪伪狂犬疫苗首免,35日龄加强免疫1次,35日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免,60日龄加强免疫1次。     

猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征的免疫程序设计

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒和抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪,随机分成4组,分别为试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组及对照组,分别设计3种猪瘟、猪伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合征免疫程序,首免后第2周开始每隔2周分别采血检测抗体.试验结果表明只有试验Ⅰ组的免疫程序可行,即：21日龄进行猪瘟疫苗首免,60日龄加强免疫1次,母猪分娩前10日龄进行猪伪狂犬疫苗首免,35日龄加强免疫1次,35日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免,60日龄加强免疫1次.     

白术对猪O型口蹄疫疫苗免疫效果及抗氧化性的影响

为提高猪O型口蹄疫疫苗的免疫效果,将试验猪分为5组,在免疫口蹄疫疫苗前分别饲喂基础日粮、添加了0.5%粉碎白术、1.0%粉碎白术、0.5%煎煮白术、1.0%煎煮白术的试验日粮,然后对各组猪进行口蹄疫的常规免疫,首免前和二免后3周后分别采血测定口蹄疫抗体水平。结果表明,首免前各试验组猪与对照组相比,除饲喂1.0%粉碎白术组外,口蹄疫抗体水平与对照组相比差异均不显著(P 0.05),且低于试剂盒0.4的阳性标准,二免后3周的测定结果表明,0.5%水平的粉碎白术和0.5%煎煮白术均较对照组显著提高了口蹄疫的抗体水平(P 0.05),试验中未见明显不良反应,对试验猪体增重的影响也不大;此外,首免前饲喂1.0%粉碎白术组的抗体水平均值为0.409,高于试剂盒0.4的阳性标准,且显著高于对照组(P0.05),二免后3周该组的均值为0.384,低于试剂盒0.4的阳性标准,与对照组差异不显著(P0.05)。总之,0.5%的煎煮或粉碎白术添加到基础日粮饲喂10 d,可显著提高O型口蹄疫疫苗二免后3周的口蹄疫抗体水平,生产中母源抗体对口蹄疫疫苗免疫失败的影响也值得重视。     

猪口蹄疫○型合成肽疫苗诱导的免疫抗体的监测

设3组猪群,首免和二免分别注射生理盐水1 mL、猪口蹄疫0型合成肽疫苗1 mL(说明书推荐免疫剂量)及猪口蹄疫0型合成肽疫苗3 mL(说明书推荐免疫剂量3倍量),二免28天后检测猪群的口蹄疫抗体,结果显示3组猪群的抗体合格率分别为33%、78%和100%,疫苗诱导的抗体水平达到农业部规定的动物强制免疫标准。     

Dot-PPA-ELISA对猪丹毒的免疫监测及抗体保护效价的测定

用猪瘟、猪肺疫、猪丹毒三联疫苗和猪丹毒1a、2型氢氧化铝吸附甲醛灭活疫苗分别免疫断奶仔猪，采用Dot-PPA-ELISA监测免疫猪血清抗体变化。结果，弱毒疫苗免疫后第7d猪丹毒血清抗体效价开始升高，第2～3周达最高值；灭活疫苗免疫后第3～4周抗体效价达最高值，且灭活疫苗免疫猪的抗体水平明显高于三联疫苗免疫猪。免疫6周后，用C43004(1a型)、C43179(1b型)和C43-12(2型)3株不同血清型的猪丹毒混合强毒同时对不同抗体效价的免疫猪和对照猪进行了皮肤内接种攻毒，并根据其皮肤和体温反应确定1：32为猪能抵抗混合强毒攻击的抗体保护效价。经对44头50～60日龄未免疫的断奶仔猪血清检测，其抗体效价在1：32以下的猪占88．36％，278头免疫猪血清的抗体效价在1：32或以上的猪占92．81％。表明Dot-PPA-ELISA适用于猪群猪丹毒的免疫监测和免疫力测定。     

猪穴位免疫鸡IBV疫苗后猪血清中抗鸡IBV抗体效价的变化

在猪后海穴注射免疫鸡IBV疫苗,应用间接血凝抑制试验(HI)观察免疫后不同时间猪血清中抗体效价的变化趋势。结果:仔猪50日龄、57日龄、71日龄分别强化免疫IBVH120灭活苗3次后,血清中HI效价逐渐增高,二免后7天达17log2,较常规颈部肌肉注射免疫猪高2-3log2;育肥猪分别在130、138、146、151日龄时进行4次H120、H94强化免疫,随着免疫次数的增多,血清HI效价逐渐增高,但不如仔猪的增高明显。结果说明猪穴免疫鸡IBV苗后,猪能对鸡IBV产生特异性免疫应答反应,且后海穴免疫引起的免疫应答较非穴位强。     

规模猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果试验

为比较猪场不同口蹄疫疫苗的免疫效果,选择健康仔猪134头,选用猪口蹄疫O型合成肽疫苗及由政府招投标的3家公司生产的猪口蹄疫(O型Ⅱ)灭活疫苗进行免疫效果试验。经试验,134头健康仔猪在60日龄、90日龄、120日龄分别注射不同种类的疫苗,于免疫后30 d抽取血样进行抗体检测。结果表明,经二免后的抗体合格率均能达到农业部规定的抗体合格率≥70%要求,表明采用O型合成肽疫苗及不同厂家生产的O型Ⅱ灭活疫苗经二免后猪群都能产生良好的抗体保护率。     

猪群O型口蹄疫抗体水平监测与免疫接种

为了解广西田东县猪群O型口蹄疫免疫抗体水平,采用液相阻断ELISA方法,对2014年1—12月采集经O型口蹄疫疫苗免疫28 d后的猪群血清进行抗体效价检测,对比不同规模不同猪群免疫效果,对比2种免疫模式的免疫合格率和抗体消长规律,确定生猪二免后抗体维持时间和三免日龄。结果:母猪、肉猪、仔猪免疫合格率分别为93.2%、75.8%和47.4%;规模场猪、散养猪免疫合率分别为81.9%和71.4%;2种免疫模式一免后30 d免疫合格率分别为59.1%、60.9%,二免后10、30、60、90 d均能达到免疫保护水平,且在二免后30 d最高,且可维持约60 d。结果提示:应加强散养户生猪的口蹄疫免疫;二次免疫合格率高于一次免疫合格率;生猪饲养周期过长,应在二免60 d后再次强化免疫,才能达到全程保护。     

不同毒株制备的两种猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果对比试验

本试验采用2种不同毒株的口蹄疫灭活疫苗分别对120头35日龄仔猪进行了免疫效果试验。结果显示:首次免疫时,猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组。75日龄二免时,使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(OZK/93株+OR/80株)免疫组的抗体合格率和疫苗稳定性均优于使用猪口蹄疫O型灭活疫苗(O/MYA98/BY/2010株)免疫组。表明两种疫苗各有其优缺点,对不同日龄段仔猪的免疫效果存在一定的差异。     

六种猪口蹄疫OA二价灭活疫苗免疫效果的评估

为建立一种简便有效并适用于猪场的口蹄疫OA二价灭活疫苗质量评价模型,本研究对6个厂家的口蹄疫OA二价苗进行了146S抗原含量检测和猪群免疫实验。将1 341头仔猪随机分为6组,分别免疫A、B、C、D、E、F等6个厂家生产的猪口蹄疫OA二价灭活疫苗,并检测了首免后26 d、二免后30 d和出栏前(二免后85 d)猪群的抗体水平。试验结果表明,疫苗E和A的抗原含量超过30μg,疫苗F和D的抗原含量在20～30μg之间,疫苗B和C的抗原含量在10～20μg之间,但抗原含量和免疫抗体之间不存在直接的线性关系。根据本研究的抗体合格率和平均抗体效价计算模型,疫苗C和E诱导产生的首免、二免和出栏前的抗体反应最强、抗体效价更高。     

猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗有效免疫试验初探

为推广猪瘟、猪口蹄疫和高致病性猪蓝耳病3种疫苗有效免疫,在前期开展"猪瘟疫苗(脾淋源)、猪O型口蹄疫疫苗和高致病性猪蓝耳病疫苗有效免疫试验"确定新的免疫程序基础上进行扩大试验,进一步验证猪瘟疫苗1头份免疫剂量足以产生可靠的免疫保护;先免疫接种猪瘟疫苗,1周后免疫接种口蹄疫和高致病性猪蓝耳病疫苗,二者有明显的协同促进作用,适宜在农村散户中使用;3种疫苗同时分点注射,相互之间干扰较大,猪瘟病毒抗体产生时间推迟,不宜推广使用。     

纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。     

猪细小病毒BQ株灭活疫苗免疫剂量及免疫持续期的初步研究

为确定猪细小病毒(PPV)BQ株灭活疫苗(PPV-BQ)的免疫剂量及免疫持续期,本研究与市场上销售的2种PPV灭活疫苗A和B进行了比较。试验分6组,每组免疫3头PPV抗体阴性猪,1组～3组分别免疫BQ株灭活疫苗1mL、2mL、4mL,4组～5组按照说明书免疫A、B两种PPV灭活疫苗,6组为阴性对照组(免疫油佐剂)。两周后进行二免,定期检测血清抗体水平。结果表明,注射疫苗组均产生了PPV抗体,都能持续到免疫后24周。免疫不同剂量PPV-BQ各组间抗体水平差异不显著(p0.05),PPV-BQ与PPV-A抗体水平差异不显著(p0.05),与PPV-B抗体水平差异极显著(p0.01),显著优于PPV-B。PPV-BQ1mL免疫剂量即可达到或超过同类产品的免疫效果,是较为理想的PPV灭活疫苗。     

猪瘟、猪口蹄疫、猪蓝耳病疫苗组合免疫对比试验

本试验对猪瘟、猪口蹄疫、猪蓝耳病3种疫苗同时分点注射与分时注射的免疫效果进行了对比,结果表明:三种疫苗同时分点注射与分时注射的免疫效果差异不明显,有的疫苗组合可以达到一次注射后所有抗体合格率均超70%的效果,适用于春秋集中免疫。     

膜分离法纯化浓缩猪伪狂犬病疫苗毒的效果

本研究使用不同孔径的陶瓷(有机)膜过滤器,对不合格的猪伪狂犬病毒细胞收获液(病毒含量≤104TCID50/mL)滤除杂蛋白、超滤浓缩、除菌处理得到纯化浓缩的猪伪狂犬病疫苗病毒液;然后对纯化浓缩的猪伪狂犬病疫苗病毒液分别进行杂蛋白去除率检验与无菌检验、病毒含量测定、安全检验、效力检验;将检验合格的纯化浓缩的猪伪狂犬病疫苗病毒液添加保护剂冻干,并对纯化浓缩的猪伪狂犬病冻干活疫苗进行以上各项检验,以及进行免疫猪体内抗体消长变化的检测。结果表明:纯化的猪伪狂犬病疫苗杂蛋白去除率平均达到68.3%以上,病毒含量≥105TCID50/mL,效力检验合格;免疫猪体内抗猪伪狂犬病毒抗体增长幅度比同时期未纯化的常规疫苗显著,其中免疫至84 d时中和抗体效价平均高达40.35稀释倍数左右,比常规疫苗中和抗体效价平均高出14.22稀释倍数。此项研究为畜禽疫苗的纯化提供一定的参考。     

口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病3种疫苗不同组合对猪的免疫效果评价

为探索口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)和高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)3种疫苗以不同组合方式对猪免疫的效果,选择广西玉林市非疫区2个小型本地品种猪场,40日龄左右仔猪各75头,随机分成5组,对3种疫苗的5种免疫组合方式分别进行了免疫试验,检测免疫后各时间点FMD、CSF和HP-PRRS的抗体水平和免疫副反应情况,对不同免疫组合方式的免疫效果进行评估。结果表明,先免疫FMD和CSF疫苗,7 d后再免疫HP-PRRS疫苗的免疫组,免疫后3种疫病的抗体水平和免疫副反应情况均优于其他组,说明该免疫组合方式适合在玉林市农村散养猪中推广应用。