养鸡场常用药物敏感性试验方法

养鸡场应用抗菌药物治疗各种疾病是常用的方法。鸡发病后选择迅速奏效的药物,测定细菌对抗菌药物的敏感性,显得非常重要。药物敏感试验方法很多,现就常使用的几个方法做一介绍。1纸片法1.1接种用经火焰灭菌的接种环挑取待试验的纯培养物,以划线接种方式将挑取的细菌涂布在普通琼脂平板或鲜血琼脂平板培养基表面。也可以挑取待试细菌于少量灭菌生理盐水中制成细菌混悬液,用灭菌的棉拭子沾取菌液涂布到上述培养基表面,尽可能涂布得致密而均匀。1.2贴纸用灭菌尖头镊子镊取已制备好的各种干燥抗菌药纸片,分别密贴到上述培养基表面,为了使抗菌药…     

病料中细菌分离培养方法和抗生素敏感性试验

正1细菌分离培养的常用方法细菌分离培养的常用方法有平板划线分离法、加热分离法和实验动物分离法。1.1平板划线分离法这是目前临床上最常用的分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线分离而获得单个菌落,以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作:右手持接种棒,在酒精灯上火焰灭菌;待接种环冷却后,挑取被检料少许,左手持琼脂平板,以食指为支点,用拇指和无名指将平皿揭开一空隙。大约20℃时,迅速地将接种环轻轻地涂布在培     

鸽霍乱灭活菌苗的研制及应用

取AHP-A菌株划线接种于马丁琼脂斜面,经37℃培养24小时,用灭菌生理盐水5毫升洗下菌苔,并立即接种于马丁琼脂扁瓶内,接种量为每瓶2毫升,涂布均匀。经37℃培养24小时后,加入30毫升灭菌生理盐水,洗下菌苔,并将净菌液收集于1万毫升的灭菌玻瓶内。取样稀释,平板计数,并与硫酸     

鸭传染性浆膜炎的病原分离和防治

河北省肃宁县肉鸭养殖业兴起于上世纪90年代末。近几年鸭传染性浆膜炎在鸭群中发生较多.其中2008年上半年至2009年上半年尤其严重,这期间调查鸭群约500群,本病平均发病率为10%左右,死亡率为3%左右。有的鸭群发病率高达30%左右,死亡率10%以上。正一细菌分离培养及免疫试验1细菌的分离无菌采取病料分别接种于巧克力平板、麦康凯平板、营养琼脂平板,于10%CO_2浓度环境中培养48小时,挑取只在巧克力平板上生长的单个圆形细菌菌落,经镜检证明为纯培养物后,将其接种于血平板或巧克力平板进行扩繁培养。     

杭州地区规模猪场主要细菌性病原微生物的分离鉴定及药敏试验

无菌采集杭州地区规模猪场高热性病死猪病料,分别划线接种于营养琼脂平板、血琼脂平板、巧克力琼脂平板和营养肉汤中,采用厌氧培养和需氧培养方法分离、培养和纯化细菌,利用法国梅里埃公司的ATB细菌自动鉴定和药敏仪进行细菌鉴定,共分离鉴定出25株细菌;采用药敏纸片法对所分离细菌菌株进行药敏试验.     

徐闻县鸡大肠杆菌的分离鉴定与药物试验

1　试验材料1.1　收集徐闻县内不同养殖场的病、死鸡 ,解剖后主要呈现肝周炎、气囊炎、心包炎、腹膜炎等病理变化。1.2　按常规方法配制普通肉汤、普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板 ;商品化药敏试验纸 13种。2　试验方法2 .1　细菌分离培养剖检病、死鸡 ,无菌取其肝、脾、心包液和腹水划线接种于普通琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时涂片、革兰氏染色、镜检。挑取普通琼脂上圆形、微隆起、湿润、半透明、对光观察有光泽的单个散在菌落划线接种于麦康凯琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时挑取普通琼脂平板上对光观察有光泽的单个菌落涂片、革兰氏染色、镜检 ,观察其形状及染色特性 ;获得 6株大肠杆菌菌株。将其接种于普通肉汤中纯培养后密封 ,4℃保存备用。2 .2　生化试验取上述纯培养菌进行葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖发酵试验、吲哚试验、H2 S试验、甲基红 (MR)试验、V -P试验、枸椽酸盐利用试验、尿素分解试验。2 .3　动物试验取上述大肠杆菌肉汤培养液腹腔接种于三日龄健康小鸡 5只 ,接种量 0 5ml/只 ,另 5只三日龄健康小鸡皮下注射 0 5ml/只灭菌水作对照 ,记录死亡数。剖检观察病变 ,并对其肝脾...     

猪子宫内膜炎病原的初步分离鉴定

金华某万头猪场多年来一直被母猪的子宫内膜炎所困扰。病原经分离鉴定后,初步定为肠杆菌科变形杆菌属的细菌。1症状病猪多为产后数日的母猪,体温稍高,食欲减退或废绝,泌乳量明显减少,阴户红肿。阴道排出淡红色或棕黄色有腥臭味的粘性或脓性分泌物,分泌物有时夹杂着胎衣或干酪样组织碎片。病猪发情周期异常,屡配不孕或受孕后易流产。个别后备母猪偶尔也可发生该病。2实验室诊断2.1分离培养取新鲜的阴道分泌物划线接种于血平板上,37℃培养12小时后,细菌呈迁徙生长,无单个菌落出现,不溶血。将上述材料划线接种在琼脂量为6%的普通营养琼脂平板上…     

牛链球菌Ⅰ型的分离与鉴定

2005年5月份,从石河子郊区某养殖场送检的以纤维素性腹膜炎为主要剖检变化的濒死蛋鸡中,分离到2株牛链球菌,现报道如下. 1方法 1.1细菌分离 无菌取濒死蛋鸡的肝脏、心血、脾脏,划线接种于5%兔血LB平板(按常规方法配制),37℃培养24 h,观察结果,并挑取单个菌落做纯培养.     

细菌对秸秆营养转化的影响

一、材料和方法 1.土壤纤维分解细菌的分离和培养:选择植物生长茂盛的土壤,在25厘米深处取样品,以无菌操作方法接种于郝奇逊氏平板培养基上,在厌氧和好氧条件下,28—32℃恒温培养3—6天,其中具有金黄色菌斑者,即为纤维分解细菌。直接在菌斑处取菌接种于无机盐秸杆粉液体培养,其中种子培养物用于秸杆粉的营养转化。     

鸡大肠杆菌病的实验室诊断

<正> 1 大肠杆菌病简介大肠杆菌是人和动物、禽类肠道中的常在菌。本菌有148个血清型。我国鸡的致病性大肠杆菌血清型有50个。病鸡的病变为气囊炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎、全眼球炎和肉芽肿,并引起鸡胚和鸡的死亡。2 病料的采集从感染病鸡的肝脏、输卵管、腹膜内的干酪样物进行无菌采样。组织和脏器的采集:新鲜尸体剖开腹腔后,不损坏肠道。首先烧烙脏器表面,将接种环自烧烙部位插人组织内缓缓转动接种环,取少量组织和液体做涂片镜检或接种在培养基上。3 检验程序3.1 分离培养营养琼脂:将病料直接接种在营养琼脂平板上,置37℃恒温箱培养24小时后观察。菌落为灰白色,1.5～2.0毫米圆形菌落。(营养琼脂配制:肉汤100毫升,琼脂2～3克。直接高压灭菌15磅30分钟。待琼脂冷至50℃～60℃倒板。)麦康凯琼脂:将病料直接接种在麦康凯平板上,置     

从文蛤中分离到一株致病性嗜盐菌

1992年5月我局对经南通口岸出口的活文蛤检疫中,检出一株致病性嗜盐菌,现报告如下。 一、分离培养 用无菌方法取文蛤内容物剪碎、混匀,接种于嗜盐菌增菌液中,充分摇匀,置37℃培养24小时。以白金耳取增菌液划线接种于嗜盐菌选择性琼脂平皿,培养24小时。从平皿中挑取中等大小、圆形、边缘整齐、光滑、微隆起、灰白色半透明、无     

动物实验室器材消毒技术

<正>动物实验室器材消毒目前国内尚无具体的技术规范,笔者根据多年从事动物实验室的工作经验,现将动物实验室器材消毒技术归纳如下,供参考。1实验台消毒试验台表面应先清洗,再用1 000~2 000 mg/L有效氯或有效溴溶液消毒,或用0.2%~0.5%的过氧乙酸溶液喷洒表面并保持30~50 min。2金属器材消毒2.1小的金属器材接种环等可用酒精灯烧灼灭菌。当接种环上有     

兽药检验用菌种的复苏与保存

1菌种的复苏(1)在超净化工作台上,将冻干菌种外壁用75%酒精棉消毒,放在灭菌的双碟内,待干,将菌种管的封口一端在酒精灯火焰上烧灼至红热,用灭菌毛细滴管吸取灭菌水,滴在灼热的菌种封口端,使其瞬间骤冷而炸裂。(2)用灭菌镊子,在火焰旁将炸裂的封口打开,放入灭菌双碟内,另取1支灭菌的毛细滴管,在火焰旁吸取普通肉汤培养基少许,加入冷冻管内,将冷冻干菌块搅动使之溶解,吸出管内菌液,分别接种到2个普通琼脂斜面及普通肉汤培养基内,斜面与肉汤置35~37℃培养22~24小时。毛细滴管及菌种管投入消毒液内。(3)取出培养物观察菌苔形态及有无杂菌,涂片,…     

浙江省一规模猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定

2017年12月,浙江省杭州市萧山区某规模猪场保育舍猪群出现高热(41.5℃)、咳嗽、腹式呼吸、关节肿胀伴有跛行和被毛粗乱等临床症状。为确诊疾病,明确病因,剖检2头40日龄病死猪,用接种环刮取肺脏病料接种血平板,再用金黄色葡萄球菌作交叉划线,于37℃5%CO2条件下培养24 h。结果显示:病料培养血平板上生长出大量半透明、不溶血小菌落,菌落直径为0.5~1 mm;靠近金黄色葡萄球菌菌苔的菌落较大,随着与葡萄球菌生长线距离的增加而变小或不生长,呈"卫星现象"。挑取可疑菌落进行纯化培养,将纯培养物制成菌悬液,以DNA纯化试剂盒提取DNA并进行PCR检测。扩增产物电泳后,被检菌株电泳道出现一条1 090 bp条带,表明该菌株为副猪嗜血杆菌。     

动物实验室器材消毒技术

动物实验室器材消毒目前国内尚无具体的技术规范,笔者根据多年从事动物实验室的工作经验,现将动物实验室器材消毒技术归纳如下,供参考。1实验台消毒试验台表面应先清洗,再用1 000~2 000 mg/L有效氯或有效溴溶液消毒,或用0.2%~0.5%的过氧乙酸溶液喷洒表面并保持30~50 min。2金属器材消毒2.1小的金属器材接种环等可用酒精灯烧灼灭菌。     

牛宰前抗生素残留的检测

药物残留是指在牲畜宰后的铜体内,经检验,查出残留的某种药物。随着我国牧业的发展,抗生素。人工合成激素被大量地应用到饲料添加剂中,所以药物残留问题日益严重,使人们的健康受到威胁。为了调查药物残留情况,可对牛屠宰点的牛（抽样）,进行宰前抗生素残留的检测。检测青霉素和四环素的方法与步骤是：①取出琼脂盘,用无菌棉签浸入细菌悬液瓶中,之后,把棉签在瓶口处按几下,以除去过多的悬液。②用蘸有细菌悬液的棉签在琼胎盘的培养基上划线,先划平行线,后垂直均匀划线。③将浸有４头牛尿液的无菌纸片分别放置于对应的带菌平板上…     

一例黄羽肉鸡感染QX型IBV的实验室诊断

2017年12月份,广东省台山市某养殖场所饲养的黄羽肉鸡发生了一种以呼吸困难、潜伏期短、发病速度快为主要特征的疫病;以支气管有粘液或干酪样物为主要剖检病变。无菌采集病鸡的肝脏,接种麦康凯琼脂平板和血平板培养基均未见细菌生长。将采集的气管、脾脏、肾脏等组织用PBS充分研磨无菌处理后,接种10日龄SPF鸡胚,连续培养5d,鸡胚呈侏儒状。根据传染性支气管炎病毒S1基因设计引物,以收获的鸡胚尿囊液提取的RNA为模板,经过RT-PCR扩增、序列测定和分析,判定为QX型传染性支气管炎病毒。通过实验室诊断技术结合临床症状和流行病学等进行综合分析,将此次疫病确诊为QX型传染性支气管炎病毒感染所致。     

家兔大肠杆菌性腹泻的病原特性研究

由埃希氏大肠杆菌引起的腹泻,通常称为粘液性肠炎,是仔、幼兔发病和死亡率很高的肠道疾病。患兔以胶冻样或水样腹泻为特征。我们先后剖检了40～90日龄的腹泻死亡兔105例,从肝脏、淋巴结、肠道中分离出埃希氏大肠杆菌73株。现将其病原特性等报道如下。一、细菌的分离与培养特性取病死兔肝、心血、淋巴结、空肠、盲肠内容物,划线接种于普通琼脂、血琼脂、     

十一种药物对猪痢疾密螺旋体的抑制试验效果

1983年初以来,我们应用11种药物进行了对猪痢疾密螺旋体的抑制试验。现将阶段结果报告如下。试验材料和方法 1.猪痢疾密螺旋体由辽宁省畜牧兽医科研所提供。在试验前,取日溶血区而积相似的培养皿,每个培养平皿以2毫升生理盐水冲洗或用灭菌毛笔刮取培养面,将冲洗液倒入试管,吹打均匀后作为试验用菌液。 2.药物将n种药物分别以灭菌生理盐水稀释成相当     

出口蝮蛇中三相鞭毛抗原沙门氏菌的分离鉴定

1987年10月,我们从出口的蝮蛇中检出一株具有三相鞭毛抗原的波茨坦(S.Potsdan)沙门氏菌变种,这在国内外尚未见过报道,现将分离鉴定情况报告如下: 一、分离培养 活剖蝮蛇样品,无菌采取肠道,直接投入亚硒酸盐煌绿增菌液内增菌后,划线接种SS琼脂平板,37℃培养24小时,挑取园整、光滑中等大小的可疑菌落