二化螟幼虫被二化螟绒茧蜂寄生后巨形细胞的产生和变化

二化螟幼虫被其寄生蜂二化螟绒茧蜂(以下简称绒茧蜂)产卵寄生后,体内会发生一系列的生理生化变化,包括血细胞、血淋巴糖分、蛋白质、氨基酸、脂肪等变化。在研究过程中,我们发现二化螟幼虫血淋巴中还产生一种巨形细胞(giantcell),最大时的体积比一般的原血细胞大400倍左右。对巨形细胞的研究国内未见报道。     

Bt杀虫蛋白在亚洲玉米螟幼虫体内组织中的分布

采用ELISA法检测了亚洲玉米螟取食转基因玉米后,Bt杀虫蛋白(Cry1Ab杀虫蛋白)在幼虫体内组织中的分布情况.结果表明,中肠和血淋巴中Bt杀虫蛋白含量最高,分别为267 ng·g-1和417 ng·g-1,丝腺、脂肪体、马氏管的含量较低,生殖器官中未检测到Bt杀虫蛋白;幼虫取食转基因玉米3d后改喂普通玉米的亚洲玉米螟发育成的蛹、成虫及卵中不含Bt杀虫蛋白.     

与家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-3相互作用蛋白的筛选

丝氨酸蛋白酶抑制剂超基因蛋白质家族,参与调节昆虫体内多种生理反应。本研究在体外原核表达6His-Bmserpin-3,以此作为饵蛋白,采用His-pull down技术及SDS-PAGE分析,从家蚕血液中筛选出了能与Bmserpin-3结合的2个蛋白质,分子量分别为83.04、83.57 ku。对家蚕幼虫sp-2、sp-3在不同组织的表达变化分析可知,sp-2在脂肪体、血淋巴中表达量比较高,sp-3在精巢、脂肪体、血淋巴里表达量比较高。     

昆虫贮存蛋白主要种类及功能研究进展

贮存蛋白是昆虫体内一类特异性蛋白质,幼虫或若虫期的脂肪体内合成,并释入血淋巴中。化蛹时经脂肪体摄取,在细胞中以蛋白颗粒形式贮藏,贮存蛋白对成虫的变态发育和生殖等方面具有重要作用。综述了昆虫贮存蛋白分类和功能,其主要功能包括蛋白质和氨基酸储存库、参与表皮的形成、载体运输功能及其它功能,进一步分析了贮存蛋白的调节机理。     

麦穗鱼谷胱甘肽S-转移酶的活性分布及动力学特性

麦穗鱼Pseudorasbora parva谷胱甘肽S-硫转移酶（GSTs）的组织和亚细胞分布特征研究结果表明：肝胰脏、肠、鳃、卵巢、肾、脾脏、鳔、肌肉GSTs活性分别占41.73%,14.31%,12.11%,10.10%,8.62%,5.23%,4.33%,3.58%;差速离心结果表明,麦穗鱼GSTs活性大部分集中在胞质溶胶层中,其活性占43%～55%,而45%～57%的活性则分布于线粒体、细胞碎片、微粒体中,只有脾脏线粒体活性最高,约占42%.并对麦穗鱼GSTs动力学特性作以讨论.     

萘胺类化合物对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中GSH-Px活性的影响

为了解萘胺类化合物 CRL缓解家蚕氟中毒的机理 ,研究了 CRL对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活性的影响 .正常的家蚕 5龄幼虫血淋巴 GSH- Px在龄的中期活性较强 ,龄初和龄末活性较弱 .幼虫添食 15mmol/L的 Na F溶液后 ,GSH- Px活性显著增强 ,经 CRL添食处理后 ,GSH- Px的活性有所下降 .经 CRL和增效剂协同处理后 GSH- Px的活性会进一步下降     

萘胺类化合物对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中GSH-Px活性的影响

为了解萘胺类化合物CRL缓解家蚕氟中毒的机理,研究了CRL对氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性的影响。正常的家蚕5龄幼虫血淋巴GSH-Px在龄的中期活性较强,龄初和龄末活性较弱。幼虫添食15 mmol/L的NaF溶液后,GSH-Px活性显著增强,经CRL添食处理后,GSH-Px的活性有所下降。经CRL和增效剂协同处理后GSH-Px的活性会进一步下降。     

蜜蜂球囊菌分泌多种胞外酶侵染蜜蜂幼虫

对健康和患病蜜蜂幼虫血淋巴进行SDS-PAGE电泳和蛋白酶、酯酶的活性染色,以研究蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶种类及对蜜蜂侵染的作用.结果表明:健康蜜蜂幼虫血淋巴中的蛋白含量丰富,主要由4种高分子质量的蛋白组成,而患病幼虫血淋巴中的蛋白含量很少,主要蛋白组分被降解;在患病幼虫血淋巴中可以检测到健康幼虫所没有的多种蛋白酶和酯酶...     

核型多角体病毒对烟青虫血淋巴的影响

为研究烟青虫核型多角体病毒(Heas NPV)侵染所引发的免疫机理,本试验以浓度105PIB/μl、106PIB/μl和107PIB/μl Heas NPV侵染5龄幼虫,分别测定了处理后烟青虫幼虫血淋巴中血细胞总量、浆血细胞和颗粒细胞的数量、酚氧化酶(PO)的活性以及血淋巴的体外黑化率,同时还用显微镜观察了Heas NPV侵染血细胞的过程。结果显示:与对照组相比,106PIB/μl和107PIB/μl的Heas NPV溶液处理导致5龄幼虫血淋巴中血细胞总量、浆血细胞和颗粒细胞的数量显著上升(P0.05),并且在感毒后3 d达到峰值。105PIB/μl的Heas NPV溶液处理后,烟青虫5龄幼虫血淋巴中血细胞总量、浆血细胞和颗粒细胞的数量呈缓慢上升趋势。106PIB/μl的Heas NPV溶液处理的5龄幼虫的PO活性先增长后下降。在连续观察的5 d内,对照组幼虫血淋巴体外黑化率始终为100%,而处理组幼虫血淋巴体外黑化率呈下降趋势。以上结果说明,烟青虫幼虫血淋巴中的细胞免疫和体液免疫在Heas NPV侵染防御中发挥了重要作用,幼虫感染病毒后通过血细胞数量的增加和PO活性的升高来清除外来病原物。     

高温诱导对家蚕血淋巴的影响

[目的]了解高温诱导对家蚕血细胞数量和血淋巴谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活性的影响。[方法]用姬姆萨染色法对家蚕血细胞进行分类,38．0℃高温诱导四龄家蚕不同时间,分别用计数板计量家蚕血细胞数量变化并检测家蚕幼虫血淋巴中GSH—PX的活性变化。[结果]对照条件下培养的家蚕幼虫血细胞数量随幼虫体重增加有明显的增长,38．0℃高温诱导下的家蚕幼虫血细胞数量增长几乎为零,但血淋巴中GSH-PX活性显著升高。[结论]高温诱导抑制家蚕血细胞的分化和生长,证明昆虫GSH—PX是抵制高温伤害的重要保护酶系。     

Unigene derived SSR analysis for the <Emphasis Type="Italic">Fugu rubripes</Emphasis> and insights into the characteristics of EST-SSR distribution in tissues/organs

A total of 11348 Unigene derived ESTs from five cDNA libraries corresponding to five different tissues/organs were screened for EST-SSR, and 1097 EST-SSRs (9.67%) were detected. There were considerable variations in the amount of EST-SSRs among the five tissues/organs. In all the tissues/organs, trinucleotide repeats (67.74%) were found to be most abundant. The trinucleotide repeats GCG were the most abundant in three tissues/organs that ranged from 80.2% in skin, 83.3% in gut, to 90.2% in fin. Dinucleotide was the second abundant repeat type (13.58%), followed by tetra-(12.38%), hexa-(5.34%), and penta-(0.96%) nucleotide repeats. Furthermore, the results of the present study also indicated that the EST-SSR motifs were not randomly distributed in tissues/organs of fugu, such as trinucleotide repeats were found to be strikingly abundant in fin, followed by skin and gut, tetra-nucleotide repeats were especially rich in muscle, while pentanucleotide repeats were less common in any tissue or organ. Most of the EST-SSRs in five tissues/organs that were assigned functions during the present study represent housekeeping genes.     

番鸭法氏囊相关淋巴组织的分布及组织学研究

研究了番鸭法氏囊柄部淋巴组织的分布及组织学结构。番鸭法氏囊柄部分布有多量的淋巴组织,以法氏囊柄的背侧淋巴组织分布面积最大、数量最多。其组织学结构包括淋巴相关上皮、上皮内淋巴细胞、圆顶区、淋巴滤泡以及高内皮静脉,其结构与其他粘膜相关淋巴组织相似。研究结果表明,分布于法氏囊柄部的淋巴组织是一种粘膜相关淋巴组织。     

运输应激猪组织病理性损伤、HSP_(27)的组织分布及其相关性研究

利用组织学、免疫组织化学以及临床血液检测等方法,探讨持续运输应激对育肥出栏猪组织的病理性损伤以及组织损伤与HSP27组织定位之间的相关性。结果表明:运输应激初期(1～2h),反映组织损伤的血液肌酸激酶(CK)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性都显著升高;应激4h时,CK及AST活性有所下降;当应激持续到6h和10h时,CK活性又显著升高。组织病理损伤也呈现出相似的波动变化。免疫组织化学结果显示,随着应激时间的延长,HSP27在组织中的定位没有发生肉眼可见的变化;HSP27主要分布在心肌和肝细胞胞浆中,在背最长肌的细胞浆和细胞核中均呈强阳性表达,在肺脏细支气管的黏膜下层有强阳性表达,在受检组织的血管壁及内皮细胞中也有强阳性表达。     

对虾白斑综合征病毒射阳株的分离及其在螯虾体内的动态分布

从江苏射阳某对虾养殖场采集患白斑综合征的病死对虾，以对虾组织镁浆液接种克氏原螯虾并传至2代。结果螯虾全部发病死亡。用斑点杂交和单抗ELISA检测对虾和2代螯虾，均为白斑综合征病毒（WSSV）阳性，将此WSSV命名为射阳株，进一步用斑点杂交和单抗ELISA检测射阳株在肌注和口服感染螯虾体内的动态分布，并与青岛株的动态分布相比较。口服和肌注螯虾在感染后12h，病毒首先在血淋巴中检出，然后减少，36h后又明显检出，并增加至高峰然后减少；肠上皮、心脏、肌肉中的病毒在口服和肌注感染后36h同时出现并呈总体递增分布；此外，病毒在胃上皮、真皮和结缔组织中也有不同程度的分布。感染死亡螯虾各主要组织器官均可检出病毒；电镜观察死亡螯虾鳃、心脏、肝胰腺、直皮、卵巢等器官的超薄切片，均可见到典型的病毒粒子，显示死亡螯虾内病毒已形成周血感染。WSSV射阳株与青岛株在螯虾的动态分布具有相似性。     

间接免疫荧光检测石蜡切片中鸭肿头出血症病毒及抗原定位方法的初步建立

 【目的】建立间接免疫荧光（IFA）检测石蜡切片中鸭肿头出血症病毒（DSHDV）的方法,为DSHDV感染的实验室诊断、DSHDV在感染鸭组织细胞中的亚细胞定位和动态研究提供有效的检测手段。【方法】用差速离心纯化DSHDV,将纯化DSHDV免疫家兔制备兔抗DSHDV高免血清,并以DEAE-SephadexA-50柱层析纯化出兔抗DSHDV IgG,建立IFA检测石蜡切片中DSHDV的方法;利用建立的IFA对28日龄鸭人工感染DSHDV死亡鸭不同组织器官以及临床样品进行检测。应用PAGE电泳分析DSHDV基因组特性。【结果】IFA最佳条件为：切片在0.01 mol•L-1 柠檬酸（pH 6.0）缓冲液微波修复20 min后,以10%马血清37℃下封闭30 min,然后加入1﹕50的一抗4℃孵育过夜,最后加入1﹕100 FITC标记的含0.01%伊文斯蓝的二抗37℃孵育30 min。IFA检测DSHDV感染死亡鸭肝脏石蜡切片为阳性,而检测鸭瘟、禽流感病毒(H5N1)、鸭病毒性肝炎、鸭疫里默氏杆菌感染死亡鸭肝脏石蜡切片为阴性。IFA检测28日龄人工感染DSHDV死亡鸭的不同组织器官,心、肝、脾、胰、肺、肾、法氏囊、食管、气管、胸肌、胸腺、十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠为阳性;哈德氏腺、脑、皮肤、腺胃为阴性。阳性组织中病毒抗原主要分布在细胞浆。经甲醛固定保持1～6年的临床死亡鸭的病毒分离阳性肝脏,IFA检测结果也呈阳性。DSHDV具有呼肠孤病毒特征,有10条分节段核酸,呈“334”分布。【结论】建立的检测石蜡组织切片中DSHDV抗原的IFA具有直观、特异性强的优点,应用于DSHDV在感染鸭组织细胞中的亚细胞定位具有良好效果,可用于DSHDV感染的实验室诊断、病原在鸭组织细胞中分布研究。DSHDV抗原存在感染细胞浆,肠道、肾脏、法氏囊和胸腺是DSHDV侵害的主要靶器官。     

口虾蛄乳酸脱氢酶同工酶组织特异性的研究

以口虾蛄为材料进行研究,用聚丙烯酰胶凝胶电泳法,对其肌肉、心胜、腹鳃、肝胰腺及眼球5种组织器官进行乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的研究分析。结果表明：不同组织中乳酸脱氢酶(LDH)的同工酶谱带存在差异,具有明显的组织特异性。肌肉、腹鳃、肝胰腺和心脏中有2条酶带,眼球中只有1条酶带,心脏中的谱带表达最浓,而腹鳃中的酶带表达最弱。     

猪ESR mRNA在不同组织表达的定量研究

以看家基因GAPDH为内标,采用半定量RT-PCR法检查了ESRmRNA在卵巢等12种组织中表达情况。结果表明ESR基因有2种表达产物,其中在肠、卵巢、脾、心、肺、肝等组织的表达产物为一种形式,而子宫、肌肉等组织为另一种形式,在肾中2种形式的表达产物共存。通过计算机凝胶成像分析系统,对胶进行扫描,显示出在12种组织中,ESRmRNA表达量在肺中最高,其次是卵巢、肠、心、子宫、脾、肝、肌肉等。在输卵管、肾、脂肪和乳腺组织中,ESRmRNA表达量很少。     

二花脸猪Smad4基因的克隆与卵巢组织mRNA的表达水平

[目的]了解二花脸猪Smad4(common-mediator Sma4)基因的序列特征和组织表达特征,分析二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA表达水平的差异.[方法]采用克隆测序技术获得二花脸猪Smad4基因cDNA序列,利用生物信息学方法分析二花脸猪Smad4基因的序列特征和蛋白的理化性质、高级结构,RT-PCR检测其组织表达特征,并采用real-time PCR技术检测二花脸猪与商品猪卵巢组织中Smad4基因mRNA的表达水平.[结果]二花脸猪Smad4基因编码区序列全长1 659 bp,编码一个含有5 52个氨基酸残基的蛋白质,氨基酸序列与其它哺乳动物的同源性均在98％以上;二花脸猪Smad4也包括3个典型的结构域(MH1、SAD和MH2).二花脸猪Smad4基因在所检测的组织中均有表达,且卵巢组织中mRNA的表达水平极显著高于商品猪(P＜0.01).[结论]二花脸猪Smad4基因可能拥有其它哺乳动物Smad4基因相同的功能及其可能与猪高繁殖力间有一定相关.     

猪GPAT基因SNPs位点分析和表达规律的研究

为了进一步探索谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶GPAT基因与肉质、风味性状的关系,采用PCR-SSCP方法分析其遗传多态性、采用Real time PCR方法分析其组织表达规律。在外显子1和14寻找到了3个单核苷酸多态位点,结果表明,各等位基因在民猪、大白、长白、杜洛克、北京黑猪和野家杂交猪中的分布存在着极显著的差异(P<0.01)。GPAT在所检测的12种组织中均表达,其中肝脏中表达量最高。研究结果为肉质和风味性状分子标记的确定提供了基础。     

变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒在人工感染猪体内分布情况

为了解变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒在人工感染猪体内分布规律.把5只35日龄的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体阴性的仔猪随机分成5组,分别为变异性PRRSV( FJ06A株)人工感染组(3只)、同居感染组(1只)和对照组(1只).记录各组猪的临床表现,并于攻毒后14 d屠宰,采集每只猪的心、肝、肺、脾、肾、胰、颌...