不同植物生长调节物质对杂种落叶松胚性愈伤组织增殖的影响

以日本落叶松×长白落叶松的胚性愈伤组织为材料,研究不同植物生长调节物质对胚性愈伤组织增殖和体细胞胚形成能力的影响。结果表明:2,4-D质量浓度对胚性愈伤组织增殖有显著影响,胚性愈伤组织增殖率随2,4-D质量浓度的升高而下降。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1与NAA0.5mg·L-1 BA0.05mg.L-1 KT0.05mg.L-1的培养基中,胚性愈伤组织可以长期维持与增殖;在添加IBA0.5mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基中愈伤组织的增殖效果最好,增殖系数达到4.6倍,而且转到体细胞胚成熟培养基后形成的体细胞胚数也最多,达到88.6个·g-1。在添加2,4-D0.1mg·L-1 BA0.05mg·L-1 KT0.05mg·L-1的培养基增殖的胚性愈伤组织形成的体细胞胚的萌发率和植株再生率最高,分别为66.7%和50%。     

日本落叶松胚性愈伤组织的诱导及体胚的形成

以优良日本落叶松种胚为外植体，经过愈伤组织阶段，成功地获得了成熟体细胞胚。试验结果表明，进行愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋BA1＋ZT1＋NAA0．1（单位：mg/L，下同）。白或白绿色、颗粒状、质地较疏松、半透明而有光泽的愈伤组织具有胚胎发生潜力，为胚性愈伤组织。体细胞原胚诱导的适宜培养基为MS＋BA0．5＋NAA0．05＋肌醇500，在后期胚的发育过程中过高的肌醇浓度有负作用。     

樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究

以樟树未成熟合子胚为外植体,探讨了外植体取材时间、植物生长调节剂配比、附加有机物等因素对胚性愈伤组织诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的影响。结果表明:不同采集时期的合子胚愈伤组织诱导率差异显著,只有心形胚时期的合子胚才能诱导胚性愈伤组织;在改良MS+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基初诱导情况下,后接入改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D培养基中,胚性愈伤组织诱导率可达77.78%;外加添加200 mg/L水解络蛋白和200 mg/L环糊精可保持胚性愈伤组织增殖和体细胞胚诱导,胚性愈伤组织增殖系数达3.86,每克愈伤组织平均分化116.67个体细胞胚,胚性愈伤组织继代周期以25～30 d为宜。在改良MS+200 mg/L环糊精+1.0 mg/L ABA+0.5 mg/L IAA中可以促使体胚成熟萌发,萌发率可达52.78%。将萌发的芽体转接到MS+0.1 mg/L BA+0.5 mg/L IAA+0.2 g/L AC生根培养可获得完整植株。     

冰糖橙胚状体、胚性愈伤组织的诱导及植株再生

以冰糖橙（Citrus sinensis）成熟果实中未发育胚珠为外植体,以MT为基本培养基,通过添加不同种类植物生长调节剂（ZT、GA3、BA、IAA以及2,4-D）、麦芽浸出物（ME）或AgNO3,诱导胚状体、胚性愈伤组织,并进行了植株再生研究。结果表明：不同培养基不仅影响胚状体的诱导率,而且影响诱导胚状体的类型;MT培养基有利于诱导出球型胚状体,MT＋1.0 mg/L GA3＋500 mg/L ME培养基有利于诱导子叶形胚状体;不同类型的胚状体在不同培养基中胚性愈伤组织发生的频率不同,球形胚状体和MT＋0.5 mg/LIAA＋0.1 mg/L ZT培养基最有利于胚性愈伤组织的诱导,球形胚状体接种于此培养基上胚性愈伤组织的发生率高达40%。这些胚状体经过生芽和生根培养,再生了大量完整植株。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

香樟子叶胚体胚发生诱导的研究

以香樟的子叶胚为外植体,以 MS 为基本培养基,研究不同植物生长调节剂组合对香樟子叶胚体胚发生诱导的影响。结果表明,配方 MS＋2,4 D 0·5 mg/L＋6 BA 1·0 mg/L＋水解酪蛋白（CH）1·0 g/L 对香樟子叶胚的体胚发生诱导率较高,诱导率为83·3％,平均体胚数为3·4枚,且生长状态较好;香樟体胚经萌发诱导处理后,萌发率可达48％。     

东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

为建立东方百合元帅、提拔、西伯利亚的高频愈伤体系,以幼叶、花丝、生长点为外植体,进行了不同激素组合的MS固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生研究。结果发现,Picloram比2,4-D更有利于胚性愈伤组织的诱导,幼叶、花丝更能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株,生长点的出愈率较低。幼叶在MS＋2mg／L Pieloram培养基,花丝在MS＋2mg／LPicloraIn＋0．1mg／L ABA培养基,生长点在MS＋2mg／LPieloram＋0．03mg／LTDZ培养基上能高效诱导出愈伤组织,来自幼叶的胚性愈伤组织在MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LKT＋0．1mg／LIBA培养基上能高频再生出芽,来自花丝的胚性愈伤组织在Ms＋1．5mg／LBA＋0．3mg／LKT＋0．2mg／LIBA培养基上能高频再生出芽。愈伤组织生长呈直线生长趋势。     

洋葱胚性愈伤组织的诱导及胚状体萌发的研究

以洋葱雄性不育系种子（10-8F）为材料,研究Picloram浓度对愈伤组织诱导及BA和2,4-D浓度配比对胚性愈伤组织诱导的影响,同时为探明胚状体发生的条件,研究了GA。和ABA对胚状体发生的影响。研究结果表明,洋葱愈伤组织在Picloram浓度为1mg／L时出愈率最高,达到72．3％;MS培养基中添加2mg／L BA和0．25mg／L2,4-D时促进胚性愈伤组织的诱导,诱导率（56．7％）显著高于其它处理;ABA浓度为0．5mg／L时胚状体萌发率（70．73％）最高且生长情况最好,但GA。对洋葱胚状体的萌发起抑制作用。     

湿地松器官性愈伤组织诱导与增殖

以湿地松成熟合子胚、胚苗顶芽、下胚轴、胚根为外植体,选用DCR,LP,TX3种培养基,与不同浓度NAA,2,4-D及6-BA组合,研究其器官性愈伤组织诱导、增殖培养的最适条件．结果表明：成熟合子胚、胚苗顶芽是诱导器官性愈伤组织理想的外植体,最佳诱导培养基为TX＋BA0．5mg／L＋NAA2．0mg／L＋30g／L蔗糖,诱导率达50％以上;最佳增殖培养基为TX＋BA0．3mg／L＋NAA 1．0mg／L＋CH 400mg／L＋30g／L蔗糖,继代周期25-30d,增殖率达3．46．     

糯玉米的成熟胚培养

以糯玉米成熟胚为外植体作离体培养,研究了在培养基中添加植物激素,硝酸银及有机物等对玉米愈伤组织的诱导和胚性愈伤组织继代生长的影响.结果表明:在诱导培养阶段,N6+6-BA 0.2 rag/L+2.4-D2mg/L的培养基诱导率最高,愈伤组织质量好;在继代培养阶段,MS+6一BA 0.2 mg/L+2,4-D2mg/L+AgNO,10 mg/L或CW(Coconut Water)10%的培养基可改善胚性愈伤的质量.     

毛稔叶片离体培养及植株再生研究

以毛稔叶片作为外植体, MS为基本培养基,研究不同种类激素的浓度配比对毛稔叶片离体再生的影响。结果表明,黑暗条件与光照12 h·d-1有利于毛稔愈伤组织形成,毛稔叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+2.0 mg·L-12,4-D+0.1 mg·L-1 NAA,光照12 h·d-1诱导40 d,愈伤诱导率为96%;叶片形成的愈伤组织分化率极低,分化率随6-BA浓度升高而升高,愈伤组织分化最适培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA+2.0 mg·L-16-BA,分化率为10%;最适生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA,生根率为88.89%。     

正交设计在根茎秋海棠‘Helen Lewis’组织培养中的应用

用正交试验设计法研究了6-BA,NAA和2,4-D 3种植物生长调节剂对根茎秋海棠 ‘Helen Lewis’叶片诱导不定芽的影响,建立了根茎秋海棠叶片再生体系。结果表明,诱导根茎秋海棠不定芽发生的最佳配方为：MS+2 mg·L-1 6\|BA+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 2,4-D,36 d时诱导率为86.7%,并有淡绿色愈伤组织形成。附加0.5 mg·L-1 6\|BA+0.2 mg·L-1 NAA的MS培养基有利于不定芽的分化和增殖。在1/2 MS+0.5 mg·L-1 IBA的培养基中生根效果最好,高于4 cm的再生植株移栽成活率达90%以上。     

‘闽牧6号’狼尾草组织培养再生体系的建立

为建立杂交狼尾草高效再生体系,以‘闽牧6号’狼尾草为材料,研究外植体、培养基、植物激素等对‘闽牧6号’狼尾草愈伤组织诱导、继代、分化的影响。结果表明:选择侧芽作为适宜外植体;诱导培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1)),诱导率最高,为89.9%;继代培养基采用NB+2,4-D(2mg·L~(-1))+KT(1mg·L~(-1)),愈伤组织形态最好;分化培养基采用NB+KT(1mg·L~(-1))+6-BA(2mg·L~(-1))+NAA(0.5mg·L~(-1)),分化率最高,为75%;生根培养基采用1/2MS培养基,形成了较为完善的组织培养再生体系。     

Effect of 6-BA and 2, 4-D on Soybean Transformation

Regeneration from cotyledonary nodes and embryonic tips of soybean "Peking" was studied. The disinfectant ways of the mercuric chloride and chlorine gas were used and the concentrations of 6-BA and 2, 4-D were studied in the culture medium. The results showed that the sterilization effect of chlorine gas was better than that of mercuric chloride. The best concentration of 6-BA was 1.0 mg · L-1 and the best concentration of 2, 4-D was 2.0 mg · L-1 in the germinating medium. The number of buds of each explant was 3.56 and 2.98, respectively. The best concentrations of 6-BA and 2, 4-D were 3.0 mg·L-1 and 3.5 mg·L-1 in regeneration of embryonic tips. The best inducing time was 16-20 h and the mean shoots per explant was 2.69 and 2.78, respectively.     

苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

香港四照花外植体的抗褐化处理与诱导培养

以香港四照花Dendrobenthamia hongkongensis嫩叶、茎段和带芽茎段为外植体,研究外植体类型、消毒时间、基本培养基、预处理方法、抗褐化剂种类及质量浓度对香港四照花褐化的影响以及6-苄基腺膘呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）和2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）对3种外植体诱导培养的影响。结果表明:香港四照花外植体的最佳消毒时间为1.0 g·L-1氯化汞消毒5 min;最适基本培养基为木本植物用培养基（woody plant medium,WPM）;用1.0 g·L-1聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浸泡3.0 h,3种外植体褐化率明显下降;1.0 g·L-1柠檬酸（CA）是嫩叶的最佳抗褐化剂,褐化率为27.4%;2.0 g·L-1 PVP为茎段和带芽茎段的最佳抗褐化剂,其褐化率分别为13.3%和16.7%;嫩芽的最佳愈伤组织诱导培养基为WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-12,4-D;茎段和带芽茎段最佳诱导培养基均为WPM+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 2,4-D。     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100 d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素+ 20 g·L-1葡萄糖+10 mg·L-1腺嘌呤+500 mg·L-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60 d的幼胚培养56 d后未形成不定芽,花后100 d的幼胚比花后75 d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.010 0 mg·L-1 4-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram） + 3.0 mg·L-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10 mg·L-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。图1表2参16     

紫山药愈伤组织的诱导及其分化

以紫山药无菌苗为试材,研究了植物生长调节剂种类、材料类型、光暗条件等对其愈伤组织诱导及其分化的影响。结果表明:(1)细胞分裂素6-BA和KT对紫山药愈伤组织的诱导效果差异不显著,适合紫山药茎段愈伤组织诱导的最佳植物生长调节剂组合为KT 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1或6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1;(2)同一培养基上不同外植体愈伤诱导效果存在差异,在植物生长调节剂配比6-BA 2.0mg·L-1+NAA 2.0mg·L-1下,微型块茎、茎段的愈伤组织诱导率比叶片高,分别为91.167%、86.300%、45.167%;(3)添加0.25g·L-1的活性炭能明显减轻紫山药茎段愈伤组织的褐化,愈伤生长良好,且愈伤组织的诱导率较高;(4)光暗条件对紫山药茎段愈伤组织诱导率的影响差异不显著,但暗处有利于愈伤组织的增殖生长;(5)不同植物生长调节剂配比对愈伤组织不定芽分化的影响显著,适合紫山药愈伤组织再分化的最佳植物生长调节剂配比为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.02mg·L-1,诱导率达50%以上,芽苗生长粗壮。     

连香树组织培养及植株再生体系的初步研究

连香树是连香树科连香树属、第三纪古热带的孑遗植物,为我国珍稀濒危二级保护树种,具有极高的科研、经济及观赏价值。试验对连香树无菌体系的建立及植株再生技术进行了研究。结果表明:(1)连香树外植体的最佳消毒方法为0.1%升汞消毒12min;(2)芽增殖最佳培养基:MS+6-BA 1.0mg.L-1+NAA 0.5mg.L-1+GA32.0mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂7.0g.L-1,pH 6.0;(3)愈伤诱导的最佳培养基:MS+6-BA 0.1mg.L-1+2,4-D 2.0mg.L-1+蔗糖30g.L-1+琼脂7.0g.L-1,pH 6.0;(4)生根培养基:1/2MS+IBA 1.0mg.L-1+6-BA 0.1mg.L-1+蔗糖20g.L-1+琼脂6.8g.L-1,pH 6.0。