端粒酶活性影响因素的研究进展

端粒酶是真核生物细胞染色体末端富含G的简单重复结构。在生理状况下,随着细胞分裂次数增加,端粒在复制分裂过程中将逐渐丢失碱基,从而致使端粒逐渐缩短。当端粒缩短至一定长度时细胞将进人生长停止衰老死亡阶段,即出现细胞的凋亡。最近几年来,人们研究发现一种端粒酶能够逆转录合成端粒DNA,并添加到端粒从而达到防止端粒缩短,维持端粒的长度,进而保持染色体的稳定性。由于大多数生物体细胞生理状态下,     

端粒和端粒酶与衰老关系的研究进展

端粒是存在于线性染色体末端的一段特殊的DNA－蛋白质复合物，由于末端不能复制，正常体细胞随着细胞分裂的进行而逐渐丢失端粒序列，导致细胞老化和死亡。端粒酶是维持端粒长度的一种特殊的DNA聚合酶，在细胞的增殖、衰老及永生中起重要作用。本文就端粒和端粒酶及其与衰老的作一综述。     

端粒、端粒酶与动物衰老相关性的研究

端粒和端粒酶是现代生物学研究的热点, 端粒封闭染色体的末端并维持染色体的稳定性, 端粒的缺失会引起染色体融合并导致细胞的衰老及死亡。端粒酶的活化可延长染色体末端DNA , 维持基因组的稳定。并且端粒酶活性的异常表达又会引起细胞永生化或转化成癌细胞。因此,端粒和端粒酶的结构和功能的研究对于治疗肿瘤和控制细胞寿命有着极其重要的意义。作者综述端粒和端粒酶的结构和功能, 及其基因和调控机理, 并在此基础之上展望了端粒酶在抑制肿瘤、抗衰老等方面的应用。     

端粒酶与细胞永生化

端粒是真核细胞染色体末端的一种特殊结构,由端粒DNA和端粒蛋白质组成。正常动物细胞DNA的端粒随着细胞分裂而缩短,当缩短到一定长度时细胞将停止增殖并死亡。端粒酶可以从端粒DNA 3′OH末端延伸端粒或合成新的端粒。本文主要介绍了端粒酶的结构和功能以及在细胞永生化中的应用。     

端粒和端粒酶的研究进展

端粒和端粒酶是现代生物学研究的热点,端粒封闭了染色体的末端并维持了染色体的稳定性,端粒的缺失会引起染色体融合并导致细胞的衰老及死亡.端粒酶的活化可延长染色体末端DNA,维持基因组的稳定.并且端粒酶活性的异常表达又会引起细胞永生化或转化成癌细胞.因此端粒和端粒酶的结构和功能的研究对于治疗肿瘤和控制细胞寿命有着极其重要的意义.文章综述了端粒和端粒酶的结构和功能,及其与细胞老化的关系,并在此基础之上展望了端粒酶在抑制肿瘤、抗衰老等方面的应用.     

端粒酶与肿瘤相关性研究进展

端粒是一段存在于真核细胞染色体末端,随着细胞分裂而缩短的特殊结构。端粒酶可延长端粒,但在正常人体细胞内活性较低或无活性。大多数肿瘤细胞通过激活端粒酶活性,延伸端粒达到细胞无限增殖的可能。端粒酶的活性与肿瘤的发生密切相关。本文以近年来临床常见的恶性肿瘤为出发点,综述了其与端粒酶活性关系及端粒酶抑制剂的最新研究。     

端粒、端粒酶与衰老

端粒是真核细胞线性染色体末端的一种特殊结构，由于DNA的末端复制问题和自由基对端粒DNA的不可修复性损伤而使其缩短，进而导致细胞的衰老和死亡。端粒酶是一种具有保持种属特异性端粒长度的酶，在延缓机体的衰老中发挥重要的作用。     

端粒及其研究进展

端粒是真核生物染色体末端的一种特殊结构,由端粒DNA和端粒相关蛋白组成,它能维持染色体的结构稳定和功能,保护其免受核酸酶降解,防止其末端融合或重排等。端粒长度的维持机制主要有ALT机制和TA机制。端粒长度的维持以及端粒酶的利用在衰老的控制中起重要作用。本文在系统论述端粒的结构、端粒的维持机制以及端粒与衰老的关系等研究进展的基础上,就当前该研究领域中存在的问题提出了个人的观点。     

波尔山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性

利用端粒重复序列扩增（TRAP）法进行了山羊卵母细胞和附植前胚胎的端粒酶活性的测定;结果表明,山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性都为阳性.TPG定量比较发现,卵母细胞的TPG最低,为25.348U;4-细胞的TPG为273.832U,至8一细胞时,TPG又降低到56.117U,随后快速升高,桑椹胚的TPG为251.111U;囊胚的端粒酶活性最高,TPG为519.46U.     

微小隐孢子虫端粒序列及端粒酶活性的研究

为了探讨我国微小隐孢子虫(C.parvum)的端粒序列,试验根据国外已报道的端粒重复序列5’-CCTAAA-3’设计寡聚核苷酸探针(CCTAAA)5,并用地高辛标记,C.parvum基因组DNA经Bal31-HindⅢ酶切后进行Southern印迹杂交鉴定;并在此基础上,采用改进的端粒重复序列扩增(TRAP)法首次对子孢子和卵囊时期C.parvum的端粒酶活性进行检测。结果表明:C.parvum基因组DNA与探针(CCTAAA)5杂交,获得了较好的杂交条带,随着Bal31-HindⅢ酶切时间的延长,杂交信号逐渐减弱,说明C.parvum端粒序列定位在染色体的末端,与国外报道的C.parvum端粒序列一致,为5’-CCTAAA-3’;检测C.parvum端粒酶活性时发现,子孢子时期端粒酶具有活性,卵囊中未检测到端粒酶活性。     

应用端粒长度推断个体年龄的研究进展

细胞衰老机制是细胞生物学研究的一个重要课题。随着端粒及端粒酶与细胞衰老和年龄增长关系的揭示,端粒长度的缩短已经成为细胞衰老和年龄增长的生物学标志之一。作者首先介绍了端粒和端粒酶的结构、功能,进而分析其与细胞衰老、年龄增长的关系,并对端粒和端粒酶在年龄推断中的应用研究加以综述。     

shRNA介导chTERT基因沉默抑制MDCC-MSB1细胞增殖

几乎所有类型的人类肿瘤都可以检测到端粒酶的活性,通过抑制端粒酶逆转录酶基因(TERT)表达降低端粒酶活性可能是进行抗肿瘤治疗的一个新靶点。本试验通过构建靶向端粒酶TERT基因的shRNA(Sh1,Sh2和Sh3)表达质粒载体转染MDCC-MSB1细胞抑制chTERT基因表达,从而降低端粒酶活性及细胞增殖。Real-time PCR结果显示,Sh1和Sh3在质粒载体转染细胞后48,72,96h显著抑制chTERT基因表达(P<0.05),且呈持续效果;TRAP法端粒酶活性分析显示,Sh1和Sh3在质粒转染细胞72h显著降低端粒酶活性;流式细胞分析显示,Sh3在转染后72h显著降低了S期细胞的比例(P<0.01),G2/M期细胞比例显著上升(P<0.01),G0/G1期细胞比例没有明显变化(P>0.05),抑制了MDCC-MSB1细胞的增殖。结果提示,shRNA通过抑制TERT基因表达可有效降低端粒酶活性,阻滞肿瘤细胞的增殖,为抗癌症治疗提供了新的备选方案及具有参考价值的基础科学数据。     

蜜蜂端粒酶活性与端粒长度研究进展

端粒是存在于真核细胞染色体中的特殊结构,其功能是保护染色体末端的单链DNA不被机体识别成破损的双链DNA,避免错误修补,维持染色体的完整和细胞的活性,被称为“有丝分裂时钟”和“生命时钟”。在脊椎动物中,端粒的绝大部分是由一连串重复序列——(TTAGGG)n构成,在昆虫中,这种重复序列为(TTAGG)n,在植物中,这种重复序列为(TTTAGGG)n。端粒长度和端粒酶活性都可能影响动物的寿命,目前在医学上端粒的研究已经很成熟,但是在蜜蜂学上的研究很少,只有在蜜蜂滋养细胞和脂肪细胞上有所研究。目前应该以此为基础,借鉴端粒在医学上的研究,继续展开探索,以期获得更深入的结果,为提高蜜蜂寿命做出贡献。     

端粒、端粒相关蛋白及其与细胞衰老关系的研究进展

真核细胞的衰老及凋亡与端粒DNA序列长度的缩短有关。端粒相关蛋白则可能通过调节端粒酶或其他相关因子的行为对端粒长度进行调控。目前端粒的长度可作为细胞衰老的生物学指标之一。文中综述了端粒的结构、功能、相关蛋白及其与细胞衰老的关系。     

chTERT基因小干扰RNA对马立克氏病MDCC-MSB1细胞端粒酶活性的影响

本研究利用小干扰RNA技术探讨端粒酶催化亚单位对鸡马立克氏病MDCC-MSB1细胞端粒酶活性的影响。构建以chTERT基因为靶点的3个RNA干扰载体pRNAT-chTERT-siRNA,筛选并鉴定。利用脂质体转染MDCC-MSB1细胞48 h后,TRAP-PCR-ELISA法定量检测细胞端粒酶活性,并进一步筛选出最有效的小干扰RNA载体。结果显示:转染干扰载体的MDCC-MSB1细胞端粒酶活性逐渐降低,其中干扰载体pRNAT-chTERT-II转染后抑制效果最明显(0.01)。     

植物端粒DNA结合蛋白及端粒酶活性调控研究

植物衰老和种子劣变机理的研究一直是农业科学领域关注的热点。植物衰老会对农业产生巨大的负面影响，牧草提前衰老也会导致草地生产力下降，限制草产业的发展。由于种子劣变，全球每年约有25%的种子失去活力，导致巨额的经济损失，严重影响农业的健康发展。深入揭示植物衰老特性和调控机制，不仅对于阐明植物生态适应性及种群稳定性具有重要价值，而且对于延缓衰老技术和调控措施的选择具有重要实践意义。在模式植物拟南芥研究中发现，染色体端粒与植物衰老以及种子活力密切相关。端粒是染色体末端的重复DNA序列，由端粒DNA和结合蛋白组成。端粒结合蛋白是一组与端粒DNA结合的蛋白质，主要是帮助稳定端粒结构并保护端粒免受DNA修复系统的干扰，其次还参与了基因表达、DNA复制和染色体结构调节等许多生物学过程。端粒酶由端粒酶逆转录酶（TERT）和端粒酶RNA(TER)两个亚单位组成，端粒酶逆转录酶亚基参与线粒体功能以及相关基因表达调控，通过对端粒酶新功能的探索，有助于提高植物的抗逆性，从而延缓植物的衰老进程，为提高作物产量提供一条新的途径。近年来在植物中研究发现，端粒的动态变化与植物衰老存在相关性，植物端粒内稳态的维持机制仍存...     

端粒、端粒酶及其与细胞衰老的关系

1端粒的结构与端粒结合蛋白端粒是真核生物线性染色体末端由重复DNA序列和蛋白质结合形成的复合结构。它的存在及其特殊构像的维持,是从纤毛虫、发育期的酵母到哺乳动物,保护线性染色体末端、顺利完成DNA末端复制的共同解决方案〔1〕。端粒功能的缺失会造成严重的遗传不稳定性,影响染色体的完整性和传代的连续性,并能导致细胞生活力和更新能力的丧失。端粒结构的形成和功能的维持需要端粒结合蛋白的参与。人体细胞主要的四种端粒结合蛋白是TRF1(telomericrepeat binding factor1)、TRF2、Tankyrase(TRF1-interactingankyrinrelated A…     

小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构早期端粒酶活性的测定

采用端粒酶重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-银染法,对小鼠卵母细胞、体内受精胚胎及重构胚的各阶段端粒酶活性进行测定,对PCR产物的电泳条带进行灰度值分析,计算端粒酶总产品总量。结果表明:(1)体内受精胚胎及核移植重构胚各阶段的端粒酶活性随胚胎分裂呈上升趋势,囊胚期最高(P0.05);(2)体内受精胚胎的端粒酶活性高于体细胞核移植重构胚端粒酶活性。同时进行囊胚计数并测定单卵裂球相对端粒酶活性,结果表明:单卵裂球的端粒酶活性呈下降趋势,囊胚期端粒酶活性最低(P0.05)。以上结果说明小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构胚端粒酶活性变化与细胞发育水平及细胞发育全能性有关。     

水牛卵母细胞和体外受精早期胚胎端粒酶活性测定

为了解水牛卵母细胞和体外受精（IVF）胚胎早期发育过程中端粒酶的活性变化,本研究利用端粒重复序列扩增法（TRAP）进行了水牛未成熟卵母细胞,成熟卵母细胞和2～4细胞,8～16细胞,桑椹胚以及囊胚各阶段的早期胚胎端粒酶活性的测定。依据电泳条带在成像系统下的光密度值,计算端粒酶的相对活性（RTA）。结果发现,未成熟卵母细胞端粒酶活性比成熟卵母细胞高（P〈0.05）,受精后2～4和8～16细胞胚胎端粒酶活性相对较低,桑椹胚端粒酶活性明显升高（P〈0.05）,囊胚阶段达到最高水平。通过对水牛不同发育阶段胚胎细胞数计数及单细胞相对端粒酶活性的分析比较结果显示,卵母细胞的单细胞端粒酶活性最高,囊胚阶段的最低。单细胞端粒酶活性从未成熟卵母细胞到IVF囊胚阶段呈逐渐降低的趋势。这些结果表明,水牛卵母细胞及早期胚胎的端粒酶活性变化与其成熟、发育阻断及全能性的逐步降低有关。