用卵黄浸提液对三种鸡病抗体检测试验

本试验用卵黄聚乙二醇浸提液（卵黄液）进行鸡白痢（ＰＤ），传染性囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）的抗体检测，并与相应血清进行对比试验。结果表明卵黄液ＰＤ琼脂扩散（ＡＧＰ）试验与血清试验结果符合率１００％，ＩＢＤ ＡＧＰ试验和ＮＤ血凝抑制（ＨＩ）试验与血清试验结果基本一致（差异显著性检验Ｐ＞０．０５），可以代替血清进行其抗体检测；且卵黄液制备方法简单，省时省力，有实际应用价值。     

间接法Dot—ELISA检测鸡减蛋综合症抗体的建立及应用研究

应用ＳｅｐｈａｄｃｘＧ－２００层析法纯化鸡减蛋综合症病毒，利用ＮＣ膜作为载体，成功建立了检测ＥＤＳ－７６血请抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，被检血清浓度为１：２０，酶标兔抗鸡１ｇＧ浓度为１：２００．底物溶液最适ｐＨ值为７．２。对Ａ－Ｆ６个养禽场随机抽检血清１６０份，分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＨＩ和ＡＧＰ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出阳性率为５１．９％，ＨＩ检出阳性率为４６．９％，ＡＧＰ检出阳性率为３１．９％。对１４０日龄鸡人工感染试验，测定抗体消长规律。本方法不需特殊仪器。适用于基层兽医部门和养鸡场对ＥＤＳ－７６的血清学诊断和流行病学调查。     

斑点免疫金测定法检测鸡减蛋综合征抗体的研究

用胶体金标记提纯后的免抗鸡ＩｇＧ，建立了一件以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金作为标记物的检测ＥＤＳ－７６病毒抗体的斑点免疫金测定法（ＤＩＧＦＡ）．该法具有简便、灵敏、快速等优点，全过程于３～５分钟内完成，阳性结果在膜上呈现红色斑点；对鸡ＩｓＧ的最小检测量（灵敏度）为６３×１０－９ｇ；与其它病毒阳性血清无交叉反应。ＤＩＧＦＡ检测ＥＤＳ－７６抗体既可定性，也可定量。检测８０份待检血清，在ＨＩ检出的５６份阳性标本中（效价≥４ｌｏｇ２）用ＤＩＧＦＡ检出阳性标本５５份（效价≥６１ｏｇ２）二者阳性符合率为９８．２％．与ＨＩ比较，ＤＩＧＦＡ平均高２．５（ｌｏｇ２）。本技术为ＥＤＳ－７６和其它禽病的快速诊断和免疫监测提供了一个新的方法。     

鸡新城疫减蛋综合征和大肠杆菌病三联油佐剂苗免疫试验

应用鸡新城疫（ＮＤ）、减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）、大肠杆菌病三联油佐剂灭活苗进行田间免疫试验，结果表明该三联苗免疫鸡不仅抗体水平高，而且免疫持续时间长，具有与单苗同样的免疫效果。被检血清中ＮＤ抗体ＨＩ平均效价比卵黄高１￣２个滴度；血清与卵黄中ＥＤＳ－７６抗体ＨＩ平均效价基本相同（Ｐ〉０．０５），可用卵黄代替血清作为血清学检验材料。卵黄中未检出大肠杆菌凝集抗体。     

用微量及平板HA、HI试验诊断鸡新城疫的研究

用微量ＨＡ、ＨＩ试验及平板ＨＡ、ＨＩ试验检测病鸡肝、脾、脑组织中的新城疫（ＮＤ）病毒。肝脏的检出率为７３２％，脾脏为８８２％，脑的检出率为０。平板ＨＡ试验与微量ＨＡ试验的结果呈平行关系。血凝作用可被ＮＤ阳性血清所抑制。结果表明，直接用ＨＡ及ＨＩ试验检测组织中的病毒，具有较高的检出率和特异性，可望成为一种快速、简便、准确诊断ＮＤ的方法。     

抗鸡传染性法氏囊病病毒型特异性单克隆抗体的临床治疗试验

通过琼扩试验（ＡＧＰ）和病毒中和试验（ＶＮ）检测ＩＢＤＶ单抗Ｍ１２和Ｄ２９１，其中和效价分别为１：１２＾１４×１００和１：２＾１９×１００，琼扩抗体价分别为１：１２８０和１：１６０，常规免疫血清分别为１：２＾１０×１０（ＶＮ）和１：３２（ＡＧＰ）。将Ｍ１２和Ｄ２９１应用于临床治疗，Ｍ１２（２００只／ｍｌ）保护率为９３％；Ｄ２９１（４５０只／ｍｌ）为９４％；血清（４只／ｍｌ）为９２％，对照组成活率为     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验     

鹅抗ND、IBD双联高免血清的研制与应用

用ＩＢＤ和ＮＤ油乳剂免疫原，经３次免疫鹅后，可获得ＩＢＤ琼扩（ＡＧＰ）抗体效价为１：６４，ＮＤ血抑制（ＨＩ）抗体效价为１：２０４８的双联高免鹅血清．鹅在第３次免疫后１５天，血清中抗体效价开始达到高峰．并至少可维持１０天以上。经临床应用表明，抗ＩＢＤ－ＮＤ双联高免鹅血清对ＩＢＤ单纯性感染病鸡群的治愈率平均为９５．１％，对ＩＢＤ、ＮＤ混合感染病鸡群的治愈率平均为８８．２％。     

快速检测鸡新城疫病毒的聚乙二醇单抗夹心ELISA试验的建立和应用

以抗鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验为基础，在６０００，建立了ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ法，使用此法检测临诊样品，与单抗夹心ＥＬＩＳＡ相比，时间缩短７０分钟且提高了ＯＤ４９０值，易于识别。结果表明，ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡＩ法具有实际应用价值。ＰＥＧ能加强抗原－抗体反应的速率和强度，这种效应在固相夹心ＥＬＩＳＡ第二步表现尤其明显。ＰＥＧ的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ＥＬＩＳＡ试验可能具有     

广东种禽场四种疫病抗体检测

１９９５年１０月至１９９６年５月，我站对各市送来的３５个种禽场，６２６７份禽血清运行ＮＤ，ＩＢＤ，ＭＧ，ＳＰ四种疫病抗体检测，结果：ＮＤＨＩ－Ｔ检测５９９８份血清，阳性率为９０．１６％，合格率为７５．８９％，幅度为０～１００％，说明种鸡场ＮＤ免疫水平比较高，但悬殊甚大。ＩＢＤＡＧＤ检测６２６７份血清，阳性率为８７．９４％，证明我省种鸡场生产的鸡苗ＩＢＤ的母源抗体是相当高的，大多数小鸡可以避免ＩＢＤ     

用微量及平板HA,HI试验诊断鸡新城疫的研究

用微量ＨＡ，ＨＩ试验及平板ＨＡ，ＨＩ试验检测病鸡肝，脾，脑组织中的新城疫病毒。肝脏的检出率为７３．２％，３脾脏为８８．２％，脑的检出率为０。平板ＨＡ试验与微量ＨＡ试验的结果呈平行关系。血凝作用可被ＮＤ阳性血清所抑制。结果表明，直接用ＨＡ及ＨＩ试验检测组织中的病毒，具有较高的检出率和特异性，可望成为一种快速，简便，准确诊断ＮＤ的方法。     

麻鸭感染新城疫病毒HI抗体效价的比较研究

以ＮＤＶ强毒，弱毒分别感染麻鸭，３０天后检测其血清ＨＩ抗体水平，并与自然感染ＮＤＶ动物，对照组动物血清ＨＩ抗体水平作比较；强毒感染动物血清与其所产蛋卵黄上清ＨＩ抗体水平作比较，结果表明，麻鸭群为ＮＤＶ野毒感染；鸭群血清ＨＩ抗体水平检测，以５０％以上检样出现７（ｌｏｇ２）以上的ＨＩ效价，可作为鸭群为受ＮＤＶ野毒感染的标志；鸭卵黄不宜替代鸭血清作ＮＤＶＨＩ抗体检测。     

用抗传染性氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及 …

用酶标记抗传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体，建立夹心阻断ＥＬＩＳＡ，检测ＩＢＤＶ鸡血清抗体。用Ｄ７８细胞毒免疫２４日龄的雏鸡，每周采血一次，共４次，用夹心阻断ＥＬＩＳＡ、微量细胞中和试验（ＶＮ）、琼脂扩散试验（ＮＧＰ）检测鸡血清抗体，结果表明：夹心阻断ＥＬＩＳＡ同ＶＮ之间具有较高的相关性（ｒ＝０．８１２６），与ＡＧＰ的相关性较低（ｒ＝０Ｘ．７５７５）。     

鸡新城疫—传染性法氏囊炎母源抗体的监测

应用血凝抑制试验（ＨＩ），琼脂扩散试验（ＡＧＰ）对１￣２５日龄肉用及蛋用雏鸡的血清和１￣２１日龄鸡胚中的卵黄提取液、胚体浸液、血清进行了鸡新城疫（ＮＤ）、传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）母原性免疫抗体消长动态的监测。试验结果表明，雏鸡母源抗体的消长动态呈下山峰势；鸡胚中卵黄内ＮＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在６￣９（ｌｏｇ２）１８日胚龄其抗体水平开始下降，ＩＢＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在２￣３（ｌｏｇ２）     

山羊抗IBD,ND二联高免血清制备和应用

山羊抗ＩＢＤ，ＮＤ二联高兔血清抗体效价，ＩＢＤ为ＡＧＰ１：１０２４－４０９６，ＮＤ为ＨＩ１：１２８０－５１２０；实验室治疗有效率，ＩＢＤ为９６％，ＮＤ为９０％；实验室预防保护率，ＩＢＤ为９８％，ＮＤ为９４％。双抗血清在－１５－２０℃保存一年，其ＩＢＤ效介为１：６４，ＮＤ为１：３２０，现地治疗早期ＩＢＤ病鸡３６２７只，ＮＤ病鸡４６８９只，治愈率分别为９６．２％和９０．４％治疗ＩＢＤ，ＮＤ混感鸡１６９     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的免疫及攻毒保护试验

对应用当地分离病毒株研制的鸡产蛋下降综合症系列油乳剂灭活苗进行了免疫试验。结果表明,免疫后,鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）油乳剂灭活苗、鸡新城疫（ＮＤ）－产蛋下降综合症二联油乳剂灭活苗及鸡新城疫－鸡传染性支气管炎（ＩＢ）－产蛋下降综合症三联油乳剂灭活苗免疫组的血清ＥＤＳ７６ＨＩ抗体迅速上升,维持４个月后仍在６．８－８（ｌｏｇ２）以上,并且能够抵抗强毒的攻击。证明所研制的ＥＤＳ７６油苗、ＮＤ－ＥＤＳ７６二联油苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联油苗对ＥＤＳ７６具有良好的免疫作用,能够抵抗ＥＤＳ７６强毒的攻击并产生高而持久的血清ＨＩ抗体。此外,对ＮＤ－ＥＤＳ７６二联苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联苗免疫组的血清ＮＤＨＩ抗体测定结果表明,上述二联苗、三联苗能产生与接种ＮＤ油苗一样良好的ＮＤ免疫效果,在免疫后１３０天时,其血清ＨＩ抗体仍高达９－１１（ｌｏｇ２）以上,与对照组有极显著的差异     

ELISA法与HI法检测鸡新城疫抗体的比较及ELISA阴,阳性临界点对 …

应用商品化酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂盒和血球凝集抑制（ＨＩ）试验同时测定１８７份常规鸡新城疫（ＮＤ）抗体血样。结果显示，二种方法的抗体效价呈显著相关，其相关系数为０．８３。在此基础上，以ＨＩ法为标准方法对ＥＬＩＳＡ的临床检测结果进行了分析。ＨＩ法的测定结果表明，该试验群的抗体阳性率为５４．５％。按试剂盒提供的阴、阳性临界点判定结果，ＥＬＩＳＡ的相对灵敏度为９７．１％，相对特异性为６１．２％     

醛化刺猬红细胞的制备及其在鸡新城疫HA和HI试验中的应用

本文首次证明刺猬红细胞具有凝集鸡新城疫（ＮＤ）病毒的特征，并能被抗ＮＤ特异血清抑制。用１％醛化刺猬红细胞进行ＮＤ的血凝（ＨＡ）及血凝抑制（ＨＩ）试验，与用０．５％新鲜鸡红细胞检测的结果相差一个滴度，图象清晰、稳定。易于判断，可代替鸡红细胞进行ＮＤ的ＨＡ和ＨＩ试验。此外，醛化刺猬红细胞具有保存期长，使用方便，反应均一，无自凝等特点     

应用C—ELISA检测禽流感病毒核蛋白抗体

应用杆状病毒表达的重组核蛋白及单抗建立了竞争ＥＬＩＳＡ（Ｃ－ＥＬＩＳＡ），用于抗Ａ型禽流感病毒核蛋白抗体的检测。试验检测了７５６只鸡，１１２３只火鸡，７０７只鸸鹋和１２６１只鸵鸟的共３８４７个血清样品。与琼脂扩散试验（ＡＧＩＤ）对比，Ｃ－ＥＬＩＳＡ方法对上述四种血样的敏感性均为１００％；而与血凝抑制试验（ＨＩ）相比，则其敏感性在鸡、火鸡和鸸鹋为１００％。鸵鸟为９６．２％。经ＡＧＩＤ检测为阴性而Ｃ－     

中草药饲料添加剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响

应用自制中草药饲料添加剂饲喂蛋用雏鸡，采用β－微量鸡新城疫血凝抑制试验（ＮＤ－ＨＩ）、醋酸纤维薄膜电泳法（测血清丙球蛋白，γ－Ｉｇ）和α－萘酯酶法（ＡＮＡＥ）检测了参试雏鸡的三项免疫学指标。实验结果表明，该中草药饲料添加剂能显著地提高三项免疫学指标（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）