莲瓣兰原生地萌发胚培养真菌污染的控制

以莲瓣兰杂交种子原生地共生萌发突破种皮后的胚为材料,研究氯化汞浓度、灭菌时间及超声波处理时间对莲瓣兰胚培养过程中真菌污染控制及胚成活情况的影响。结果表明,莲瓣兰杂交种子原生地共生萌发突破种皮后的胚灭菌过程中氯化汞浓度越高、灭菌时间和超声波处理时间越长,胚培养过程中真菌污染率越低,但是对胚造成的损伤程度高、胚成活率低。较适宜的灭菌方法是氯化汞浓度0.20%、灭菌时间10～15min、超声波处理时间4～6min,胚污染率控制在15.0%以内,胚成活率达到80.0%以上。     

沉香虎头兰、大雪兰正反交及种子无菌萌发研究

 以沉香虎头兰（Cymbidium tracyanum）（黄色素花）与大雪兰（C. mastersii）为父、母本进行正反交，用杂交种子进行无菌萌发研究和种胚发育观察。结果表明：这两种杂交兰花的结实率为60～100%；大雪兰和沉香虎头兰（黄素）杂交种子在1/2MS＋6-BA 1.0～3.0 mg/L＋NAA 0.5～2.0 mg/L无菌条件下的萌发率约为70%；正反交对种子的萌发率没有明显影响；在沉香虎头兰×大雪兰、大雪兰×沉香虎头兰的种子萌发过程中，种胚的发育有两种方式：一是在胚还未转绿时就突破种皮，另一种是胚转绿后再突破种皮，形成原球茎。     

碧玉兰×虎头兰种间杂交胚培养技术研究

以兰科兰属碧玉兰(Cymbidium lawianum)为母本,虎头兰(C.hookerianum)为父本进行杂交,分期采收种子进行培养,研究兰属附生兰杂交胚培养技术。结果表明,杂交种子完全成熟约需1年时间,授粉90 d的幼胚即具有良好的萌发能力;添加活性炭可促进杂交胚萌发,提高成活率,早期胚培养以1/2 MS NAA 1 mg/L 6-BA 0.1 mg/L 活性炭2 g/L萌发最佳;芽、根分化培养则以1/2 MS NAA 0.5 mg/L 6-BA 2 mg/L 香蕉泥100 g/L效果最好;壮苗培养基中加入香蕉汁和2,4-D效果明显,以1/2 MS NAA 0.5 mg/L 6-BA0.5 mg/L 2,4-D 0.3 mg/L 香蕉泥100 g/L最理想;注意光、温、湿的配合,炼苗成活率达90%以上。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。     

杀菌剂对莲瓣兰组织培养中真菌污染的控制作用

在莲瓣兰等地生兰的组织培养过程中，其成活率除了与培养物的品种类别、取材时机和取材部位等有很大关系外，初代培养和继代培养中的真菌、细菌污染也会严重影响其组培快繁的进程和成功率。在实践中，笔者通过在培养基中添加不同浓度的各种农用杀菌剂，逐渐探索出了控制莲瓣兰组培快繁中真菌或细菌污染的有效方法；从而用莲瓣兰的茎尖、基部腋芽和侧芽等为材料，培养获得了试管再生植株。     

独蒜兰种子无菌萌发过程观察和萌发培养基筛选

对独蒜兰种子无菌非共生萌发条件及萌发过程中原球茎发育进行了研究。结果表明低浓度的细胞分裂素(6-BA或KT)对独蒜兰种子萌发有良好的促进作用。在独蒜兰种子的发育过程中,种胚的发育有两种方式:一种是胚转绿后突破种皮,形成原球茎;另一种是胚还未转绿时就突破种皮。     

血叶兰的无菌播种与快速繁殖（英文）

[目的]研究野生中药资源血叶兰的无菌播种技术,实现其快速繁殖。[方法]以血叶兰种子为外植体,接种于4种不同的培养基MS、1/2MS、花宝1号(3.0 g/L)和1/2花宝1号(1.5g/L),80 d后统计萌发率,筛选适合血叶兰种子萌发的培养基。在培养基中添加不同激素配比,不同的有机物等,筛选适宜血叶兰原球茎增殖与分化、壮苗与生根的培养基。[结果]成熟血叶兰种子在1/2花宝1号(1.5 g/L)培养基中暗培养80 d左右形成原球茎团,萌发率为86.67%,是最适于血叶兰种子萌发的培养基;而种子萌发效果较差的是MS培养基。在1/2花宝1号(1.5 g/L)+6-BA 2.0 mg/L+椰汁100ml/L培养基中添加NAA 0.4-0.6 mg/L,原球茎团转接培养45 d左右形成原球茎和小芽的混合体,最高增殖倍数为6.11倍,增殖效果显著优于添加NAA 0.2和0.8 mg/L的培养基(P0.05)。将培养获得的小芽转接至分别添加10%土豆汁、10%香蕉汁和100 ml/L椰汁的花宝1号(3.0 g/L)+NAA 1.0 mg/L+培养基中进行壮苗和生根培养,结果表明添加香蕉汁10%的培养效果最佳,培养80 d后可形成完整植株,幼苗生根率为93.33%,株高7.19 cm。经温室大棚炼苗10 d后,将血叶兰试管苗移栽至泥炭土与1 cm火山石(3∶1)的混合基质中,60 d后成活率达91.7%。[结论]该研究以血叶兰种子为外植体所建立的血叶兰无菌播种育苗技术体系可用于血叶兰的种质资源保护、种苗生产及产业化开发等。     

独蒜兰种子快速萌发培养研究

[目的]以独蒜兰种子为试验材料,探索其种子萌发的最佳培养条件。[方法]通过用不同浓度的次氯酸钙进行浸种处理,采用NAA、6-BA和活性炭3因素3水平的正交试验探讨其对独蒜兰种子萌发的影响,并观察独蒜兰种子萌发生长过程。[结果]采用0.05 mol/L的次氯酸钙浸种处理独蒜兰种子10 min后,将其接入B₅+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+活性炭1.0 g/L+20.0 g/L蔗糖培养基中,培养50 d后统计种子萌发率为100%。[结论]该研究为独蒜兰植物大规模栽种生产提供科学依据。     

不同移栽基质对莲瓣兰试管苗影响的研究

[目的]研究不同移栽基质配比对莲瓣兰试管苗移栽成活率的影响,为莲瓣兰试管苗移栽提供理论依据。[方法]以莲瓣兰组织培养生根试管苗为试验材料,采用正交试验设计研究不同移栽基质的种类和配比对莲瓣兰试管苗移栽的影响。[结果]影响莲瓣兰试管苗移栽基质效果的各因素作用大小为栗树叶〉红仙土〉碎树皮〉珍珠岩,以栗树叶：红仙土为4：1配比的移栽基质成活率最高,根生长情况最好。[结论]栗树叶：红仙土为4：1配比的移栽基质可以作为莲瓣兰试管苗移栽基质。     

莲瓣兰“滇梅”根状茎的增殖与分化技术研究

[目的]研究莲瓣兰"滇梅"(Cymbidium tortisepalum‘Dian Mei’)根状茎的增殖与分化技术,为提升莲瓣兰的苗体质量和大规模化产业化生产提供良好的理论依据和技术支撑。[方法]以莲瓣兰"滇梅"根状茎为试验材料,研究不同植物生长调节剂6-BA、CPPU、TDZ和活性炭对"滇梅"根状茎增殖和分化的影响。[结果]选用1/2MS培养基为基本培养基,"滇梅"根状茎增殖的最佳配方为2.0 mg/L TDZ+0.3 mg/L NAA+0.5 g/L活性炭。"滇梅"根状茎分化的最佳配方为2.0 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA同时培养基中不增添活性炭。添加活性炭对于"滇梅"根状茎的分化有抑制作用。[结论]TDZ作为一种高效植物生长调节剂对于莲瓣兰"滇梅"根状茎的增殖分化有显著的效果,明显优于其他植物生长调节剂。     

莲瓣兰与大花蕙兰“黄金薄荷”种间杂种胚培养研究

以莲瓣兰为母本,大花蕙兰“黄金薄荷”为父本进行杂交,并对杂种胚进行无菌萌发.成功建立了该杂交组合的组培快繁体系,为进一步开展其种质创新提供了基础条件.     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

野生黄蝉兰无菌快繁技术的研究

[目的]建立野生黄蝉兰的无菌快繁技术体系。[方法]以云南野生黄蝉兰为试材,以自交果实为外植体,通过在1／2MS基本培养基中,添加不同浓度的BA和NAA以及附加物质香蕉泥和活性碳进行培养,构建野生黄蝉兰的非共生萌发和快繁技术体系。[结果]野生黄蝉兰在2．0～2．5mg／LBA与0．5～1．0mg／LNAA的激素组合处理下,40d后种子萌发率可达93％;1／2MS＋2．5mg／LBA＋0．1mg／LNAA＋浓度8％香蕉泥培养的野生黄蝉兰丛芽增殖率为320％;1／2MS＋0．3mg／LNAA＋0．3％活性炭诱导生根率达100％,且植株长势正常。[结论]通过植物组织培养技术,成功构建了野生黄蝉兰的非共生萌发和快繁技术体系。     

虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖研究

[目的]研究虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖.[方法]以虎雪兰、朱砂兰、蕙兰‘绿春兰’为亲本,采用正反交杂交法进行育种试验得到果实,对成熟的种子进行无菌萌发试验,并对种子萌发获得的小苗进行增殖研究.[结果]朱砂兰为母本获得杂交种子无菌萌发最适培养基为：1/2MS ＋0.5 mg/L BA ＋0.2 mg/L NAA ＋3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为：1/2MS＋1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L KT ＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.蕙兰‘绿春兰’为母本获得种子萌发最适培养基为：1/2MS＋ 1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA＋ 3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为1/2MS＋ 1.5 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/LNAA ＋0.5 mg/L KT＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.[结论]该方法为虎雪兰的种质资源栽培提供了理论依据.     

蝴蝶兰快速繁殖技术的研究

[目的]对蝴蝶兰种子诱导原球茎和芽苗再生的条件进行研究。[方法]建立蝴蝶兰种子无菌播种高效萌发体系,以及原球茎诱导和芽苗再生的培养体系,对其各生长阶段的培养基以及所添加的激素组合及浓度进行选择。[结果]对种子萌发来说,选择授粉后120d未开裂的蝴蝶兰果荚内的种子播种为宜;最适培养基pH值为5．2～5．6。蝴蝶兰种子萌发最适宜的培养基为：花宝1号（300倍稀释）＋3mg／L6-BA4-0．1mg／LNAA＋20g／L蔗糖＋2g／L蛋白胨＋0．2％活性炭＋6g／L琼脂;在此条件下,蝴蝶兰的萌发率最高达65％。培养基中添加活性炭能有效防止蝴蝶兰芽苗的褐化现象．添加蛋白胨能促进蝴蝶兰种子萌发和幼苗的生长。[结论]该方法研究了蝴蝶兰种子诱导原球茎和芽苗再生的培养条件,为蝴蝶兰的种质栽培提供了理论依据。     

格力兜兰的无菌播种与组培快繁研究

[目的]研究格力兜兰的无菌播种与组培快繁,探讨其最佳培养条件,以期能够商品化生产格力兜兰,实现其资源保护和可持续利用。[方法]以人工授粉的种子为外植体,进行无菌播种试验,并对其进行幼苗形态键成和生根壮苗条件研究。[结果]210 d胚龄的种子萌发率高;种子萌发最佳培养基为1/2 RE+NAA 0.5 mg/L+BA 0.2 mg/L+CM 50 ml/L+CH 1 g/L,壮苗培养基为MS+NAA 1.0mg/L+BA 0.2 mg/L+活性碳0.6 mg/L+香蕉泥50 g/L。[结论]该研究实现了格力兜兰的快速繁殖,提高了其繁殖系数,能够进行商品化育苗。     

4种浸种药剂对籼粳杂交晚稻种子发芽的影响

[目的]确定对籼粳杂交晚稻种子安全性较高的浸种药剂及浓度,从而更好地为生产服务。[方法]以籼粳杂交晚稻种子甬优9号、甬优12号和甬优538号为供试品种,分别采用常规浸种浓度和高浓度4种浸种药剂处理种子,研究种子发芽势、发芽率和发芽指数的变化。[结果]用20％氰烯·杀螟丹可湿性粉剂1．00和1．67吕／L、1．5％二硫氰基甲烷可湿性粉剂2．22和4．00g／L浸种安全性最高,对甬优9号、甬优12号及甬优538号种子发芽势、发芽率和发芽指数无明显抑制作用;16％咪酰·杀螟丹可湿性粉剂2．00g／L和17％杀螟·乙蒜素可湿性粉剂3．33g/L常规浓度浸种时对杂交晚稻种子比较安全。但是,在相同条件下,甬优9号、12号和甬优538号3种籼粳杂交晚稻种子对药剂的敏感程度有差异,甬优9号耐药,甬优12号次之,甬优538号最敏感。[结论]甬优9号、12号和甬优538号3种籼粳杂交晚稻种子的浸种药剂在安全性方面首选20％氰烯·杀螟丹可湿性粉剂,而常规浸种浓度的16％咪酰·杀螟丹可湿性粉剂和17％杀螟·乙蒜素可湿性粉剂也比较安全。     

冬凤兰非共生萌发和低温离体保存（英文）

[Objective] The aim of the research was to establish asymbiotic germination and low-temperature in vitro conservation technique system of Cymbidium dayanum by using plant tissue culture technique to realize its rapid propagation and long-term conservation in vitro.[Method] With mature seeds of C.dayanum as explants,different media were selected to establish asymbiotic germination technique system.With protocorms as materials,conservation,resumptive proliferation and plant regeneration conditions were selected to establish low-temperature in vitro conservation technique system preliminarily.[Result] Mature seeds of C.dayanum could germinate after cultured 90 days on MS media as well as "Hyponex 1" media.The germination rate reached more than 98%.Protocorms inoculated in "Hyponex 1" media could be conserved continuously at 5 ℃ in dark for more than 18 months and the survival rate could reach 90%.Conserved protocorms could realize resumptive proliferation culture both on 1/2 MS and "Hyponex 1" media.The seedling-strengthening and rooting media were 1/2 MS media.[Conclusion] This research provided practical basis for in vitro conservation and rapid propagation of C.dayanum germplasm resource.