广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型的制作

本试验旨在制作广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型,初步判断猪发生动脉粥样硬化时的指数值,以期为今后建立相关模型提供依据。试验选取广西巴马小型猪试验组和对照组各10头,通过饲喂高脂高胆固醇饲料建立动脉粥样硬化模型,检测建模过程中血液生化指标,将动脉粥样硬化指数与血管切片作关联分析,初步拟定发生动脉粥样硬化时的指数值。屠宰后血管切片结果显示,试验组有2头广西巴马小型猪发生动脉粥样硬化,对照组均正常。2头广西巴马小型猪的血管切片结果与动脉粥样硬化指数进行关联分析后,初步拟定的动脉粥样硬化指数值在3.8以上,并持续3个月以上。     

螺旋藻激酶对大鼠动脉粥样硬化的影响

本研究旨在观察螺旋藻激酶（SPK）对大鼠动脉粥样硬化（AS）的影响并探讨其可能的作用机制。取SD大鼠60只随机均分为正常对照组、模型组、阳性对照组（辛伐他汀,0.005 g/kg）和SPK低、中、高剂量组（80、160、320 U/kg）。除正常对照组外,其余各组通过高脂饲料建立大鼠AS模型,同时给予相应药物,每天1次,试验期12周。末次给药60 min后股动脉取血,分离血清,测定总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量并计算动脉粥样硬化指数（AI）;测定大鼠血清丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;通过苏木精-伊红（HE）染色法在光镜下观察腹主动脉血管内膜形态改变。结果显示,与正常对照组相比,模型组大鼠AI及血清MDA含量显著升高（P<0.05）,血清NO含量和SOD活性显著下降（P<0.05）;与模型组比较,SPK高剂量大鼠AI和血清MDA含量显著降低（P<0.05）,NO含量和SOD活性显著升高（P<0.05）;病理结果显示：模型组有明显粥样斑块形成,SPK各剂量组粥样斑块形成明显减少,尤其中、高剂量组与正常对照组无明显差异。综上所述：SPK有明显的预防AS的作用,其作用机制可能与降低MDA、提高NO含量和SOD活性有关。     

中国实验用小型猪血液指标正常参考值分析

本试验旨在建立中国农业大学教授专家团队培育的小型猪(命名为"中国实验用小型猪")血液生理和生化指标的正常参考值范围,为小型猪作为人类疾病模型提供参考依据。用全自动化生化仪测定1、3、6和12月龄中国实验用小型猪血液的9项生理指标和22项生化指标,对同一月龄不同性别的血液测定值进行单因素独立样本t检验。试验结果显示,中国实验用小型猪绝大多数血液生理生化指标同一月龄不同性别间差异不显著(P>0.05),仅红细胞体积分布宽度和肌酐等指标存在显著差异(P<0.05)。中国实验用小型猪血液指标与巴马小型猪、贵州小型猪和五指山小型猪相比,大多数血液测定值接近。试验结果表明,中国实验用小型血液生理生化指标稳定,与人类正常参考值相比,小型猪9项血液生理指标中有4项和人类相接近,22项血液生化指标中有15项和人类相接近。     

大黄醇提液抗家兔实验性动脉粥样硬化作用的病理形态学研究

将30只雄性健康新西兰白兔随机分为5组,每组6只。对照组给予基础饲料;模型组给予高脂饲料;三个大黄组给予高脂饲料同时分别用不同药量的大黄醇提液灌胃。于第10周末处死家兔,观察、测量和比较主动脉弓、胸主动脉、腹主动脉和髂动脉分支处血管脂质斑块的病理变化,计算斑块面积占胸主动脉的百分比;光镜下观察心脏冠状血管的病理改变,并计算冠状小动脉粥样硬化的发生率,研究大黄醇提液抑制家兔动脉粥样硬化形成的作用。结果显示：大黄醇提液能一定程度上抑制家兔主动脉及腹主动脉AS形成,减少AS斑块面积,降低动脉分支处AS的发生率,减轻心脏冠状动脉AS的病变。     

兔动脉粥样硬化斑块与肾素-血管紧张素系统关系的研究

为探讨肾素 -血管紧张素系统 ( RAS)对实验性兔动脉粥样硬化 ( AS)的影响 ,采用 2 0只雄性新西兰大白兔 ,随机分为 2组。对照组饲以全价颗粒饲料 ,实验组采用高胆固醇饮食( HCD)饲喂法建立 AS模型。分别检测总胆固醇( TC)、血管紧张素转换酶 ( ACE)和血管紧张素 ( Ang ) ,并对主动脉 AS病灶进行病理检查。结果表明 :与对照组相比 ,高胆固醇饮食 1周后 TC开始显著升高 ,第 4周达高峰 ,第 1 6周组织中 Ang 水平显著升高 ( P <0 .0 5) ;病理检查见主动脉内膜满布淡黄色斑块 ,镜检由增厚的内膜、泡沫细胞和胆固醇结晶组成 ;对照组无异常。高胆固醇饮食 1 6周可建立兔 AS模型 ,RAS可影响 AS斑块的形成     

高脂高糖饮食对小型猪肠道微生物的影响

高能饮食是肥胖发生的重要诱因之一,肠道微生物在其中发挥重要作用.为探究高脂高糖饮食过程中肠道微生物组成的动态变化并筛选与肥胖发展密切相关的肠道微生物,本研究以广西巴马小型猪为动物模型,随机分为普通饮食组(CN组)和高脂高糖饮食组(HFD组),进行为期30 d的饮食干预,分别在干预0、7、15和30 d时收集粪便样品,利...     

新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞体外培养体系的建立

利用微量液体组织块贴壁法原代培养分离新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,进行常规传代培养、冷冻和复苏;通过接触抑制和解除抑制研究该类细胞的增殖潜力,免疫荧光进行鉴定;并通过脂质体介导对分离到的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞分别进行EGFP-N1和DsRed-N1基因转染。结果成功分离到新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,体外可以大量传代和冷冻,目前已经传至50代以上,生长良好;冷冻复苏和接触抑制解除后仍可以正常培养和传代;细胞免疫荧光检测,波形蛋白表达阳性,角形蛋白表达阴性;转染48h后荧光显微镜下可以观察到绿色荧光和红色荧光,表明瞬时转染新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞可以获得成功,其中转染DsRed-N1基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞已经传至60代以上。结果表明,本试验成功建立了新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞的体外培养体系,在体外能稳定培养和传代,并可以成功获得转基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞。     

饲粮添加甜菜碱对巴马香猪血常规指标和器官生长的影响

本试验旨在研究饲粮添加甜菜碱对巴马香猪血常规指标及器官生长的影响。选用26头体况相近的妊娠巴马香猪,随机分为2组,其中对照组12头,饲喂基础饲粮;试验组14头,在基础饲粮中添加3.5 kg/t甜菜碱。仔猪28日龄断奶并适应7 d后,每窝选取4头接近平均体重的仔猪,随机分为2组,每组2头,对照组或试验组的每2窝中的2头仔猪合并为1栏。对照组12栏,母猪添加组7栏,均饲喂基础饲粮;母-子猪添加组7栏,在基础饲粮中添加2.5 kg/t甜菜碱。分别于仔猪95和125日龄时,每栏选择接近平均体重的巴马香猪1头,前腔静脉采血,检测血常规指标;处死后分离心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃并称重并计算器官指数。结果表明,与对照组相比,母-子猪添加组95日龄时的嗜酸性粒细胞数(EOS)、体重、脾脏重和脾脏指数显著升高(P<0.05),平均血小板体积(MPV)显著降低(P<0.05);125日龄时的嗜碱性粒细胞百分比(BAS%)、体重、心脏重、肝脏重、脾脏重、肾脏重、胃重和肝脏指数显著升高(P<0.05)。与母猪添加组相比,母-子猪添加组95日龄时的体重、心脏重、肝脏重、脾脏重和肾脏重以及125日龄时的心脏重、肝脏重、肾脏重、胃重和肝脏指数显著增加(P<0.05)。由此可见,妊娠巴马香猪及其子代饲粮添加甜菜碱可影响血液中EOS、BAS%和MPV,增加体重,促进器官生长。     

饲粮能氨水平对不同品种猪肉质性状及相关基因表达的影响

本试验旨在研究饲粮能氮水平对不同品种猪肉质性状以及肌纤维类型和细胞因子相关基因表达的影响.选取巴马香猪和长白猪共96头(48头/品种),随机分为4组(每组24头猪),分别为长白猪饲喂NRC饲粮组、长白猪饲喂我国地方猪标准(GB)饲粮组、巴马香猪饲喂NRC饲粮组、巴马香猪饲喂GB饲粮组.试验从5周龄开始,至出栏时结束.分别于保育期、生长期和肥育期末,每组选择8头体况相近猪只屠宰,采集肌肉样品分析.结果表明:生长阶段显著影响了试验猪背最长肌熟肉率和肌球蛋白重链(MyHC)Ⅱx、MyHCⅡ易及白细胞介素-15(IL-15)mRNA表达水平(P<0.05),且随生长阶段呈增加趋势;与长白猪相比,巴马香猪的背最长肌熟肉率、MyHC Ⅰ mRNA表达水平显著升高(P<0.05),而滴水损失显著降低(P<0.05);与NRC饲粮相比,GB饲粮显著提高了生长期长白猪和巴马香猪的pH45 min(P<0.05),显著上调了保育期和肥育期猪背最长肌MyHC Ⅰ mRNA表达水平(P<0.05);与GB饲粮相比,NRC饲粮显著上调了生长期猪背最长肌MyHC Ⅰ mRNA表达水平(P<0.05).由此可见,品种和生长阶段均可显著影响肉质性状及相关基因的表达,饲粮能氮水平则主要通过与生长阶段产生互作效应影响肉质性状及肌纤维类型相关基因的表达.     

应用RAPD技术对中国3品系实验用小型猪进行亲缘关系的分析

随机扩增多态ＤＮＡ (ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ ,ＲＡＰＤ)技术 ,在动物、植物、微生物种属鉴定 ,亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用 ,但应用于小型猪方面的研究报道很少 ,尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究 ,目前国内外尚未见报道。贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果 ,已引起了国内外相关领域的关注。本实验应用 1 0 0条随机引物对上述 3品系小型猪的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ研究 ,旨在筛选具有品系间多态性的ＲＡ…     

广西巴马小型猪BMP2基因克隆、生物信息学及组织表达分析

本研究旨在对广西巴马小型猪骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2,BMP2）基因进行克隆及其结构和功能的预测,并检测其在广西巴马小型猪和长白猪中的表达差异。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,通过测序鉴定BMP2基因外显子区的单核苷酸多态性（SNPs）,利用多种生物信息学软件对广西巴马小型猪BMP2基因启动子区、编码区（CDS）、3'UTR区进行了分析,预测分析广西巴马小型猪BMP2基因编码蛋白的基本理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、跨膜区域、亲疏水性、蛋白质修饰结构、二级结构和三级结构等,并对miRNA结合位点及其相关通路进行分析,绘制了广西巴马小型猪和长白猪的组织表达谱。结果显示,试验成功克隆了广西巴马小型猪BMP2基因CDS区,总共1 188 bp,编码395个氨基酸;与猪参考基因组相比,广西巴马小型猪BMP2基因在G1663A、G1897C发生了同义突变,在C1896T（Pro→Leu）、T1971C（Gly→Ser）、G2000A（Leu→Ser）发生了3处错义突变;在3'UTR区域存在miR-142-5p、miR-129-5p等共13个miRNA结合区域;相似性比对结果显示,广西巴马小型猪与野猪、黄牛、水牛、山羊、绵羊、马、澳洲野犬、家犬、猕猴对应区段的相似性依次为99.92%、91.75%、91.84%、91.92%、91.92%、90.50%、89.43%、90.91%和90.91%;系统进化树结果表明,广西巴马小型猪与野猪的亲缘关系最近,与黄牛的亲缘关系相对较近,与猕猴亲缘关系较远;BMP2蛋白分子质量为44.55 ku,理论等电点为8.37,预测其有12个O-糖基化位点,42个磷酸化位点;预测分析发现该蛋白为亲水性蛋白,且是膜外蛋白。组织表达谱发现,广西巴马小型猪生长板软骨中BMP2基因表达量显著低于长白猪（P<0.05）。该研究为进一步探索广西巴马小型猪中BMP2基因的功能提供了理论基础,也为广西巴马小型猪品种资源的利用提供了重要参考。     

广西巴马小型猪血清淀粉样P物质基因cDNA的克隆及序列分析

为了研究SAP基因的结构特点,进一步构建广西巴马小型猪SAP基因相关疾病模型,试验根据GenBank上发表的猪SAP基因序列的保守性设计引物,以广西巴马小型猪血液为材料,进行RT-PCR扩增、连接、转化、测序和分析.结果表明:获得的SAP基因cDNA片段长度为928 bp;广西巴马小型猪SAP基因与普通猪和人类分别有9...     

广西巴马小型猪MyoD1基因克隆及其真核表达载体的构建

本研究旨在对广西巴马小型猪成肌细胞决定基因1(myoblast-determining 1,MyoD1)进行克隆分析,并构建MyoD1基因真核表达载体pEGFP-N1-MyoD1,为进一步研究该基因在广西巴马小型猪骨骼肌发育中的调控作用奠定基础。以广西巴马小型猪的肝脏组织为材料,应用RT-PCR技术克隆得到广西巴马小型猪MyoD1基因编码序列,对其核苷酸序列和蛋白质序列进行生物信息学分析,并构建该基因的真核表达载体,经过PCR和双酶切验证,通过脂质体转染,将重组质粒转染C2C12细胞,在细胞水平验证了该载体的正确性。结果显示,广西巴马小型猪MyoD1基因编码区序列长960 bp,编码319个氨基酸,核苷酸序列与猪、牛、水牛、绵羊、马、人、小家鼠、褐家鼠、家犬的同源性依次为99.7%、92.8%、92.9%、92.6%、91.5%、82.9%、82.9%、82.0%和90.9%;系统进化树分析表明,广西巴马小型猪MyoD1基因在不同物种及进化过程中具有高度保守性;蛋白质结构分析表明,MyoD1蛋白为膜外蛋白,在第4-116位氨基酸处存在1个MyoD家族标志性的MyoD结构域,对广西巴马小型猪、猪和人的MyoD1蛋白高级结构比较发现其具有极高的相似性。本研究构建的广西巴马小型猪MyoD1基因表达载体pEGFP-N1-MyoD1,转染C2C12细胞后产生绿色荧光信号,表明MyoD1基因在C2C12细胞中成功表达。     

Effects of dietary protein/energy ratio on growth performance,carcass trait,meat quality,and plasma metabolites in pigs of different genotypes

Background:The protein/energy ratio is important for the production performance and utilization of available feed resources by animals.Increased protein consumption by mammals leads to elevated feed costs and increased nitrogen release into the environment.This study aimed to evaluate the effects of dietary protein/energy ratio on the growth performance,carcass traits,meat quality,and plasma metabolites of pigs of different genotypes.Methods:Bama mini-pigs and Landrace pigs were randomly assigned to two dietary treatment groups(Chinese conventional diet with low protein/energy ratio or National Research Council diet with high protein/energy ratio;n = 24 per treatment) in a 2x2 factorial arrangement.Blood and muscle samples were collected at the end of the nursery,growing,and finishing phases.Results:We observed significant interactions(P 0.05) between breed and diet for total fat percentage,intramuscular fat(IMF) content,protein content in biceps femoris(BF) muscle,and plasma urea nitrogen(UN) concentration in the nursery phase;for average daily gain(ADG),average daily feed intake(ADFI),dry matter,IMF content in psoas major(PM) muscle,and plasma total protein and albumin concentrations in the growing phase;and for drip loss and plasma UN concentration in the finishing phase.Breed influenced(P 0.05) growth performance,carcass traits,and meat quality,but not plasma metabolites.Throughout the trial,Landrace pigs showed significantly higher(P 0.05) ADG,ADFI,dressing percentage,lean mass rate,and loin-eye area than did Bama mini-pigs,but significantly lower(P 0.05)feed/gain ratio,fat percentage,backfat thickness,and IMF content.Dietary protein/energy ratio influenced the pH value,chemical composition of BF and PM muscles,and plasma activities of glutamic-pyruvic transaminase and gamma-glutamyl transpeptidase,and plasma concentration of UN.Conclusions:Compared with Landrace pigs,Bama mini-pigs showed slower growth and lower carcass performance,but had better meat quality.Moreover,unlike Landrace pigs,the dietary protein/energy ratio did not affect the growth performance of Bama mini-pigs.These results suggest that,in swine production,low dietary protein/energy ratio may be useful for reducing feed costs and minimizing the adverse effects of ammonia release into the environment.     

猪链球菌2型感染SPF小型猪模型的构建

构建了致病性猪链球菌2型(SS2)感染模型。通过典型临床症状观察、剖检病变和组织学观察及病原分离鉴定,证实该模型能成功模拟自然感染状态下SS2引起的典型临床症状和病理变化特点,稳定性好,可进一步用于致病性SS2在动物体内动态分布规律、致病机制和机体免疫应答以及疫苗的效果评价和相关药物筛选等方面的研究,对于猪链球菌2型感染的防控具有重要意义。     

虎源FPV主要抗原表位区基因的原核表达及免疫原性分析

为筛选出制备猫瘟热亚单位疫苗的最佳佐剂类型与首选抗原片段,本试验对虎源FPV-HLJ株VP2全长基因及其截短基因片段PAB进行原核表达,切胶法纯化的表达蛋白经Western blot分析后,分别与氢氧化铝胶佐剂及弗氏佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠体液免疫水平,初步评价各疫苗的免疫效果。结果表明:VP2、PAB融合蛋白主要以包涵体形式表达,切胶法获得的高纯度表达蛋白均能与鼠抗虎源FPV阳性血清发生特异性反应。纯化蛋白各佐剂免疫组免疫小鼠后均引起较强的特异性抗体IgG反应,其中PAB蛋白各免疫佐剂组抗体水平明显高于VP2蛋白相应免疫佐剂组,且PAB蛋白+氢氧化铝胶组与PAB蛋白+弗氏佐剂组抗体水平无显著差异(P0.05),但与未加佐剂组差异显著(P0.01)。研究证实,PAB蛋白具有良好的免疫原性,可与氢氧化铝胶佐剂协同用于FPV亚单位疫苗的制备。     

鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗对H9亚型禽流感灭活疫苗体液免疫应答影响的研究

将150只维扬麻鸡商品雏鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ 5组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组对应免疫A、B、C 3种IBD活疫苗和同一种H9亚型AI灭活疫苗,Ⅳ组为免疫对照组,只免疫H9亚型AI灭活疫苗,Ⅴ组为空白对照组。IBD中等毒力活疫苗二免后,定期监测鸡群H9亚型AI灭活疫苗免疫后的HI抗体消长情况,以评价这3种IBD活疫苗对H9亚型AI灭活疫苗体液免疫应答的影响。结果发现,45日龄前（即IBD疫苗二免后23 d前、H9亚型AI灭活疫苗二免后20 d前）,Ⅰ组与Ⅳ组、Ⅱ组与Ⅳ组H9亚型AIV抗体水平均差异显著（P<0.05）,Ⅲ组与Ⅳ组间差异不显著（P>0.05）。在45日龄后（即H9亚型AI灭活疫苗二免20 d后）,试验鸡的H9亚型AIV HI抗体水平均无显著差异。     

Hypolipidemic and anti‐inflammatory effects of aorta and heart tissues of cattle and pigs in the atherosclerosis rat model

The aim of this study was to investigate the effects of aorta and heart tissues obtained from cattle and pigs on atherosclerosis disorders. Atherosclerosis model rats were provided with the respective diets consisting of aorta and heart tissues. Administration of each tissue suppressed body weight gain as compared to that of the control. In particular, the aorta tissues of pigs and cattle demonstrated significant suppressions in body weight gain in the model rats. The aorta tissues of pigs and cattle showed a significant increase and decrease in the serum high‐density lipoproteins and atherogenic index, respectively, which was correlated with the increase in apolipoprotein A1. Hematological analysis revealed that aorta tissues of pigs and cattle clearly reduced the ratio of granulocytes/lymphocytes in the atherosclerosis rats. Serum vascular cellular adhesion molecule‐1 levels in the atherosclerosis rats, which were administered these aorta tissues, were also significantly reduced. Additionally, there was an increase in von Willebrand factor in the rat serum. Based on the results obtained, the aorta tissues of pigs and cattle, in particular, demonstrated positive effects in the atherosclerosis rats due to the alteration of lipid metabolism and reduction in inflammation related to atherosclerosis.     

广西陆川猪和巴马香猪的分子生物学研究进展

陆川猪和巴马香猪均为产于广西被列入国家级地方品种遗传资源名录的具有优良性能的品种。近年来,深入开展地方品种猪的分子生物学基础研究已成为重点。作者现对广西陆川猪的遗传与繁殖、猪支原体肺炎病原分子致病机制,以及巴马香猪的遗传与繁殖、疾病模型方面的分子生物学研究作一综述。     

复方中药对禽流感抗体效价的影响

为了研究复方中药对禽流感抗体水平的影响,选择120只试验鸡随机分成四组,试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ鸡日粮中添加0．5％、1．0％、1．5％的复方中药,对照组日粮不添加,分别于免疫后的10d、20d、30d测定HI抗体效价并进行t检验,试验组Ⅱ、Ⅲ与对照组相比差异显著。试验组Ⅱ与Ⅲ相比,差异不显著,试验组Ⅰ与对照组相比差异不显著。结论：复方中药对禽流感抗体水平的提高有明显的促进作用,1．0％添加量能够达到比较好的促进作用。