牛胚胎移植技术研究报告

1986～1989年间超排222头供体奶牛,获卵1740枚((?)=7.8),获可用胚1173枚((?)=5.3)。其中1988～1989年超排100头,获卵923枚((?)=9.2),获可用胚650枚((?)=6.5),1989年全部用国产激素超排23头,获卵327枚((?)=14.2),获可用胚242枚((?)=10.5)。共移植于612头受体黄牛,受胎率47.1%(288/612)。其中6个试验点移植171头,受胎率为59.1%(101/171)。     

奶牛鲜胚移植技术的研究

用PMSG+PG,PMSG+PG+激光照射,FSH+PG和PSH+PG+促排卵3号四组药物组合,超排处理15头黑白花奶牛。各组获得可用胚胎头均数分别为1.50±2.52枚(n=2)。3.30±2.52枚(n=3),2.86±3.85枚(n=7)和6.00±5.29枚(n=3),四组总头均数为3.40±3.70枚(n=15)。鲜胚移植三批受体妊娠率平均为62.2％(28/45),前两批移植妊娠率高达78.3％(18/23),其中1头供体一次冲胚11枚,移植11头受体,有9头妊娠。15头供体牛冲胚后40d内人工授精全部妊娠。     

南阳牛超数排卵研究

采用FSH共超排南阳牛60头次,共采卵258枚(头均4.87±3.69),其中可用胚153枚(头均2.89±2.58),育成牛超排反应有效率高于经产牛(86.2%︰71.0%),经产牛采卵数多于育成牛(头均5.22±4.53︰头均4.5±2.58),可用胚数也多于育成牛(头均3.07±3.06︰头均2.69±2.02),FSH的适宜剂量经产牛为340mg/头,育成牛为300mg/头。季节对南阳牛超排没有明显影响。     

奶牛胚胎切割移植试验报告

以裸胚切割和透明带内切割两种方法,切割31枚奶牛早期胚胎,一分为二。将41枚半胚(其中38枚成对)分别移植给26头受体牛,6头移植怀孕,成功率为23.1%,移植有透明带的半胚和无透明带的裸半胚怀孕成功率都为25%。2半胚在同一透明带内(透明带内切割)的怀孕成功率为40%,而将裸半胚重新装入空透明带内的移植5头(受体全为黑白花奶牛),均未怀孕。桑椹胚分割成半胚移植怀孕成功率为21.1%,而早期囊胚则为28.6%。     

奶牛胚胎一分为四分割移植试验

1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50％(9/18),胚胎移植妊娠率为150％(9/6)。得到同胚三犊一组,同胚二胎一组(其中一头产犊,一头流产)和单胎四个(其中两头产犊,两头流产)。     

延边黄牛胚胎移植及诱发双胎试验

为了研究适于延边黄牛的超数排卵及胚胎移植技术,选择2头供体牛和7头受体牛,进行了FSH-PG超数排卵和胚胎移植试验.结果表明,供体获得7枚可用胚胎,其中诱发双胎(人工授精后移植胚胎)3枚,单胚移植4枚,妊娠5头,移植率71.4%,诱发双胎率66.7%.     

奶牛胚胎分割移植试验研究

用简单方法直接分割7～8日龄新鲜胚胎(一分为二),裸半胚成对移植给66头受体,90d 妊检,移植妊娠率为56.1%(37/66)。除6头流产和尚有5头待产外,已有26头受体产犊35头,其中有9对同卵双胎,双胎率为34.6%(9/26),半胚产犊率为29.2%(35/110)。对影响成对半胚移植妊娠率和半胚产犊率的因素如胚胎质量、胚胎在体外停留时间、胚胎发育阶段、黄体状况、受体牛品种等进行了较系统的研究。此外对冷冻胚胎进行了分割试验,移植妊娠率为45.5%(5/11),产3头犊牛。对快速冷冻和常规冷冻胚胎分割后的移植妊娠率进行了比较,分别为25.0%(1/4)和57.4%(4/7)。     

西德高产奶牛胚胎引进移植试验

解冻西德高产奶牛冻胚16枚,其中可用胚13枚,3枚为部分变性胚。将其分别移植给16头受体牛,3头妊娠产犊,二母一公,犊牛健康活泼,毛皮细薄光亮。     

南德温牛胚胎移植研究

为了研究适于大型肉牛———南德温牛的超数排卵及胚胎移植技术,选择11头适龄南德温牛为供体牛和9头南阳牛为受体牛,进行CIDR-FSH-PG超数排卵和胚胎移植试验。结果表明,供体牛均按时发情,反应率100%,共采胚99枚,获可用胚胎65枚,平均每头5.91枚,可用胚胎率65.0%,可用胚胎等级A、B、C级分别为38.5%、30.8%、30.7%,共移植受体9头,妊娠6头,受胎率66.67%,共产犊9头,其中产双犊3头,其余胚胎进行了冷冻保存。     

波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究

1999～2000年,在成都波尔山羊种羊场进行了波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究.对12只供体用FSH减量法进行超排处理,回收胚胎257枚,平均21.4±11.1枚,其中可用胚206枚,平均17.2±8.33枚.将170枚可用胚移植给同期发情的78只雅安奶山羊受体,其中2只在妊娠2个月后流产,49只受体羊妊娠到期产下纯种波尔山羊羔88只,移植受体妊娠率65.4%(51/78),产羔受体比率62.8%(49/78),胚胎成羔率51.8%(88/170).平均每只波尔山羊供体通过胚胎移植增加纯种后代7.33只.其中RB52号波尔山羊获16枚胚胎,移植给8只奶山羊(双胚),全部妊娠,产下13只纯种波尔山羊,胚胎成羔率达81.3%.结果表明,波尔山羊胚胎移植奶山羊能获得较高的妊娠率和胚胎成羔率,已可从研究阶段发展到产业化应用.     

肉牛IVF胚胎移植应用研究

;1999~2002年,应用肉牛IVF胚胎1000枚在当地7个移植点散养农户中移植受体母牛625头,总体受胎率为33.0%,已产活犊牛164头。其中诱导同期发情处理受体牛399头,发情217头,移植123头,受胎率25.2%;自然发情受体牛852头,移植502头,受胎率34.3%(P>0.05)。初步确定了应用国产氯前列烯醇(CLO)诱导同期发情的程序和剂量,对胚胎解冻方法和黄体功能与受胎率之间的关系进行了探讨,对不同品种、年龄和饲养管理方式的移植效果进行了比较,分析了受体牛移植后的再繁殖能力。     

山羊鲜胚及冻胚移植

经超排处理获黑山羊3日龄新鲜胚眙12枚,分别移植到同期发情的6只白色受体羊,其中2只妊娠,产羔3只,受体妊娠率为33.3‰(2/6),鲜胚移植成功率25.0%(3/12)。7日龄山羊冷冻胚胎35枚,分别移植到同期发情的18只浏阳黑山羊和白色马头山羊受体母羊,其中7只妊娠,受体妊娠率为38.89%(7/18)。产活羔10只,流产1只,冻胚移植成功率31.43%(11/35)。     

冷冻奶牛胚胎移植黄牛研究

采用国产试剂、器械超数排卵22头黑白花奶牛,超排成功率72.7％(16/22)。采集胚胎143枚,其中可用胚占70％(100/143),超排母牛采集胚数和可用胚数头均6.5枚和4.5枚,按采得胚母牛计算采集胚数和可用胚数头均8.9枚和6.3枚。胚胎移植经冷冻—解冻后68.2％(30/44)可用,胚胎移植18头同期发情黄牛受体,3头妊娠。其中两头受体双胎6个月时流产,1头受体黄牛产下1头黑白花公犊。     

采用国产药械对奶牛胚胎冷冻保存及移植研究

试验采用国产药械,对奶牛进行超数排卵、胚胎采集。在鲜胚移植成功的基础上,对胚胎进行冷冻保存和移植黄牛等项研究均获成功。其超排成功率达86％,采胚成功率达90.7％,产胚牛平均产胚8.97枚,有效胚7.25枚.冷冻保存45天以上解冻成活率88.7％,移植黄牛及改良牛112头次,妊娠产犊33头,冷冻移植成功率29.6％,其中成功率最高的试验基点达37.5％。可见采用价格低廉的国产药械。进行奶牛胚胎的冷冻移植是完全可行的。     

脂肪酸钙对放牧肉牛超数排卵效果及雌二醇和孕酮水平的影响

以探讨添加脂肪酸钙对放牧肉牛(婆罗门和BMY)超数排卵效果及血中雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平的影响为目的。将48头供体分为Ⅰ(放牧或对照组)、Ⅱ(放牧 浓缩饲料500 g/d)和Ⅲ(放牧 浓缩饲料500 g/d 脂肪酸钙100 g/d)3组,从同期发情处理开始到冲胚结束试验期32 d,并对供体牛在8个处理时段进行采血,用放射免疫分析法(R IA)分析E2和P4水平。试验结果表明:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组供体牛超数排卵的排卵率分别为75.4%,74.4%和81.7%(P>0.05),受精率分别为81.4%,55.6%和93.2%(P>0.05);获胚(卵)数分别为7.0枚,6.3枚和7.3枚(P>0.05),可用胚数分别为3.9枚,2.6枚和4.7枚,Ⅲ组显著高于Ⅱ组(P<0.05);E2平均水平分别为0.57 pg/mL,0.47 pg/mL和0.63 pg/mL(P>0.05),P4平均水平分别为3.53 ng/mL,5.03 ng/mL和3.74 ng/mL,Ⅱ组高于Ⅰ,Ⅲ组(P<0.01)。表明适量添加脂肪酸钙能改善全放牧肉牛的营养、增强体质,促进排卵与受精,增加超数排卵的可用胚数;能使供体牛的E2和P4水平比对照组有所提高;添加效果冬、春季优于夏、秋季。     

郏县红牛超数排卵研究

应用促卵泡素(FSH)连续4 d递减法肌肉注射郏县红牛进行超数排卵处理,重点探讨药物剂量、药物产地、季节以及重复超排等因素对郏县红牛超排的影响。结果表明,用加拿大FSH在300 mg剂量时的头均获胚总数和头均可用胚数(8.86和5.98枚)显著高于280 mg剂量组(6.32和3.05枚)和320 mg剂量组(6.56和4.12枚)(P0.05);用宁波产FSH在320 I U剂量条件下的头均获胚总数和头均可用胚数(8.12和5.46枚)显著高于280 I U组(5.55和2.76枚)和300 I U剂量组(6.32和3.77枚)(P0.05)。综合3个剂量的处理结果,进口FSH和国产FSH对郏县红牛的超排处理效果无显著差异,头均黄体数分别为13.89个和13.41个,头均获胚总数分别为6.94和6.74枚,头均可用胚数为4.42和3.95枚;在夏秋季(5-10月)超数排卵郏县红牛23头次,冬春季(11-次年4月)超数排卵郏县红牛21头次,发现超排季节对头均黄体数无显著影响(P0.05),但冬春季头均获胚总数(7.23枚)和头均可用胚数(6.51枚)显著高于夏秋季(4.57和2.90枚)(P0.05);对郏县红牛供体牛间隔70 d重复超排处理后发现,1次、2次和3次重复超排头均黄体数分别为14.30、13.12和12.23个,头均获胚总数分别为7.31、6.52和6.45枚,头均可用胚数分别为4.56、4.15和3.96枚,重复超排对上述3个指标均无显著影响(P0.05)。     

牛胚胎移植试验研究

本研究应用国产激素和器械对奶牛进行超数排卵，采用胚胎移植技术使黄牛繁殖奶牛。５ａ共超排供体牛１８５头，成功１５９头，成功率为８１．９５％；共获卵１２０１枚，头均７．５５±６．３７枚，其中可用胚胎８８０枚，头均５．６８±４．９６枚。同期发情处理受体牛２３６头，发情１３９头，发情率５８．９０％；鲜胚移植受体牛１７８头，受胎７８头，受胎率为４３，８２％，其中移植受体黄牛１４５头，受胎６１头，受胎率４２．０７％，移植受体奶牛３３头，受胎１７头，受胎率为５１．５２％；冷冻胚胎移植受体牛６１头，受胎２７头，受胎率为３７．７０％；５３胚胎移植产犊８５头。确立了应用国产激素垂体促卵泡素（ＦＳＨ）和前列腺素（ＰＧＧ＿（２２））诱发牛超数排卵和发情同期化处理的最佳程序和剂量，并总结出了采卵方法、胚胎鉴定、胚胎冷冻保存和移植等相应环节的技术规程。     

鲁西黄牛超数排卵与冻胚移植

1990～1991年按鲁西黄牛超排技术程序,用 FSH+PGF_(2α)对11头鲁西黄牛进行超排处理,有效率为100%。共获卵119枚,其中可用胚92枚,胚胎可用率为77.3%。按鲁西黄牛胚胎冷冻解冻技术程序,以甘油作冷冻保护剂,对 A、B 级胚胎进行常规冷冻。解冻33枚,27枚可用,解冻恢复率为81.8%。将23枚可用胚移植23头受体,90天妊检,13头妊娠,妊娠率为56.5%。     

奶牛鲜胚移植黄牛或奶牛技术应用

对１３头黑白花奶牛作超排处理，超排有效１１头，有效率８４．６％，头均获胚３．５枚，其中可用胚头均２．８枚。移植受体奶牛８头，妊娠４头，妊娠率５０％；移植受体黄牛１６头；妊娠８头，妊娠率５０％。卵巢和黄体发育好的供体牛在超排有效反应及超排后黄体数明显优于差的供体牛（Ｐ〈０．０１）。进口ＦＳＨ和国产ＦＳＨ的超排效果没有显著差异（Ｐ〉０．０５）。     

脂肪酸钙对放牧肉牛超数排卵效果及雌二醇和孕酮水平的影响*

 以探讨添加脂肪酸钙对放牧肉牛(婆罗门和BMY)超数排卵效果及血中雌二醇(E₂)和孕酮(P₄)水平的影响为目的。将48头供体分为Ⅰ(放牧或对照组)、Ⅱ(放牧＋浓缩饲料500 g/d)和Ⅲ(放牧＋浓缩饲料500 g/d＋脂肪酸钙100 g/d)3组,从同期发情处理开始到冲胚结束试验期32 d,并对供体牛在8个处理时段进行采血,用放射免疫分析法(RIA)分析E₂和P₄水平。试验结果表明：Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组供体牛超数排卵的排卵率分别为75.4%,74.4%和81.7%(P＞0.05),受精率分别为81.4%,55.6%和93.2%(P＞0.05);获胚(卵)数分别为7.0枚,6.3枚和7.3枚(P＞0.05),可用胚数分别为3.9枚,2.6枚和4.7枚,Ⅲ组显著高于Ⅱ组(P＜0.05);E₂平均水平分别为0.57 pg/mL,0.47 pg/mL和0.63 pg/mL(P＞0.05),P₄平均水平分别为3.53 ng/mL,5.03 ng/mL和3.74 ng/mL,Ⅱ组高于Ⅰ,Ⅲ组(P＜0.01)。表明适量添加脂肪酸钙能改善全放牧肉牛的营养、增强体质,促进排卵与受精,增加超数排卵的可用胚数;能使供体牛的E₂和P₄水平比对照组有所提高;添加效果冬、春季优于夏、秋季。