大花天竺葵组织培养初探

以‘亚里士多德’系列的大花天竺葵新品种的叶、叶柄和带芽茎段为外植体,进行了不定芽、愈伤组织的诱导及芽萌发的研究。结果表明,大花天竺葵叶片诱导不定芽分化的最适培养基为MS＋0.5 mg·L^-1NAA＋3.0·L^-16-BA,诱导率75.61%,平均不定芽个数4.98;叶柄诱导愈伤组织的最适培养基为MS＋0.3·L^-1NAA＋1.0·L^-16-BA,诱导率47.2%;带芽茎段诱导不定芽的最适培养基为MS＋0.5·L^-1NAA＋1.0·L^-16-BA,诱导率81.27%。     

红掌分蘖芽愈伤组织诱导与再生研究

以红掌分蘖芽为外植体,研究了芽基部愈伤组织诱导与再生的方法。结果表明,无菌分蘖苗在MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.05 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基,能诱导出直径0.5～1.0 cm、质地坚硬的愈伤组织,愈伤组织在1/2MS+0.2 mg·L~(-1) 6-BA+0.05 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖的培养基中分化出芽,平均每个愈伤组织上长6个有效芽,芽苗转入1/2MS+0.2～0.5 mg·L~(-1) IBA+20 g·L~(-1)蔗糖的培养基后,可发育为苗高3 cm以上、带有不定根和气生根的生根苗。     

山苍子植株再生体系的优化

【目的】研究优化山苍子茎段愈伤组织诱导和植株再生体系的方法,提高不定芽的分化率和生根率,为山苍子良种的工厂化繁育及遗传转化体系的建立提供技术支撑。【方法】本研究以山苍子茎段节间(不带芽)为外植体,通过比较不同植物生长调节剂对其愈伤组织的诱导、增殖以及不定芽的分化、生根的影响,确定山苍子愈伤组织诱导和植株再生的最适培养基。在此基础上,对获得的再生植株进行移栽试验,比较不同基质对移栽成活率的影响。【结果】山苍子茎段愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.3 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,其诱导率为100%;愈伤组织增殖的最适培养基为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,愈伤组织增殖系数达3.43;诱导不定芽分化的最适培养基为1/2 MS+0.5 mg·L^-1<...     

中药多花黄精组培快繁技术体系研究

本文以多花黄精顶芽为外植体开发了一种多花黄精组培快繁的新方法。研究发现,外植体经75%的酒精结合10%的NaClO消毒后,污染率为4±0. 08%。文中研究了1/2 MS培养基添加不同浓度(0.1～4 mg·L~(-1))的细胞分裂素(6-BA、2,4-D及TDZ)及不同浓度生长素(NAA及IBA)对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化及不定芽生根的影响。结果表明:外植体愈伤组织诱导及不定芽分化的最佳培养基组合为1/2 MS+6-BA(3 mg·L~(-1))+TDZ(0. 5 mg·L~(-1))+NAA(0. 2 mg·L~(-1)),不定芽最佳生根培养基组合为1/2 MS+NAA(0. 4 mg·L~(-1))。应用此繁殖方法,将一个顶芽组织培养繁殖6个月后可获得约80株组培苗。组培苗移植到温室后成活率为(96±1. 3)%。     

全红杨组织培养与快速繁殖技术研究

为建立全红杨组织培养与快繁体系,以全红杨叶柄为外植体,进行不同激素配比对愈伤组织诱导、不定芽分化、生根培养等影响研究。结果表明:适宜愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA0. 2 mg·L~(-1)+NAA 0. 05 mg·L~(-1)+蔗糖25. 0 g·L~(-1)+琼脂6. 0 g·L~(-1),诱导率96. 67%;适宜不定芽分化培养基为MS+6-BA 0. 5 mg·L~(-1)+NAA 0. 2 mg·L~(-1)+蔗糖30. 0 g·L~(-1)+琼脂6. 0 g·L~(-1),分化率100%;适宜生根培养基为1/2MS+IBA 0. 3 mg·L~(-1)+蔗糖20. 0 g·L~(-1)+琼脂6. 0 g·L~(-1),生根率100%。本研究也为选育杨树良种、种质资源保存、扩大栽培与推广等提供研究基础。     

中荷64杨组织培养快繁技术研究

以中荷64杨叶柄为外植体,通过对比试验确定中荷64杨组织快繁体系。结果表明:愈伤组织诱导与继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+2,4-D 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1);不定芽分化与继代培养基为MS+6-BA 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.02 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1);生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1),将组培苗进行了移栽,成活率90%以上,为中荷64杨的推广和应用提供了保障。     

中国水仙花器官愈伤组织诱导、分化及组织学观察

为了建立中国水仙遗传转化体系,为转基因分子育种提供良好受体,以中国水仙‘金盏银台’品种的不同花器官为实验材料,以MS为基本培养基,研究了花药、花梗、子房、花柄愈伤组织诱导情况.对愈伤组织诱导效果较好的花梗和花药培养基中添加不同浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)、硫酸腺嘌呤(Ad)、萘乙酸(NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),筛选出愈伤组织诱导及鳞茎芽再生的最适培养基配方.结果表明:花梗愈伤组织诱导及鳞茎芽分化的最佳培养基为MS+1 g·L-1NaH2P04+0.003 g· L-16-BA+0.001 g· L-1NAA+0.2 g·L-1 Ad+30g· L-1蔗糖,花药愈伤组织诱导及鳞茎芽分化的最佳培养基为MS +0.002 g·L-16-BA +0.001 g·L-1 NAA +30 g·L-1蔗糖;花梗愈伤组织诱导到鳞茎芽分化的时间需要30～35 d,而花药这一过程为80～90 d.对花梗愈伤组织诱导及鳞茎芽分化过程进行组织学观察表明:本研究中产生的小鳞茎是由愈伤组织再分化得来的,表明花梗更有利于作为转基因受体,从而解决了转基因研究过程的一个瓶颈问题.     

欧美杨111号组织培养再生体系的建立

以欧美杨111号叶片为外植体,以MS和1/2MS为基本培养基,附加不同浓度的NAA、6-BA和IBA,观察不定芽诱导和生根情况,确定欧美杨111号植株再生体系。结果显示:欧美杨111号叶片最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖25 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),pH值6.5,不定芽分化率为96.67%;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.3 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1),pH值6.0,全部生根,平均根数13.2条。     

楸叶泡桐杂种无性系9503的组织培养技术研究

以楸叶泡桐和白花泡桐杂交无性系的枝条为外植体,开展了离体芽增殖技术,以及愈伤组织诱导、芽分化和不定芽生根等组织培养技术的研究。结果表明,增殖培养基采用MS+8mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,不定芽的增殖倍数可达到9;利用其叶片进行愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+12mg/L6-BA+0.4mg/LNAA,诱导率高达95%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+10mg/L6-BA+0.7mg/LNAA,不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.5mg/LIBA+0.3mg/LNAA,生根率100%。     

巨桉无性系EG5叶片高效再生体系的建立

以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

北五味子组织培养研究

通过对北五味子(Schisandra chinensis)不同外植体诱导愈伤组织,进行不定芽分化、生根培养基优化筛选。结果表明:选用嫩叶作为外植体诱导愈伤组织的效果较好;培养基MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+NAA2.0mg/L为不定芽的分化最佳培养基组合,分化倍数可达4.7;生根阶段最适培养基为1/4MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+活性炭0.5g/L,生根率为89.13%,平均根长为3.1cm。     

赛黑桦组织培养技术研究

以赛黑桦休眠枝萌发的腋芽为外植体,研究了不同种类和不同浓度植物激素对赛黑桦外植体诱导、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根等环节的影响。结果表明:(1)外植体芽的诱导培养以WPM+6-BA0.5 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)为最佳培养基;(2)愈伤组织诱导以WPM+6-BA1.0 mg·L~(-1)+NAA0.02 mg·L~(-1)为最佳培养基;(3)在芽增殖培养中以WPM+6-BA0.1 mg·L~(-1)+NAA0.02 mg·L~(-1)增殖效果最好,增殖系数达4.0;(4)生根培养以WPM+NAA0.05 mg·L~(-1)效果最佳,生根率91.7%;(5)生根苗移栽成活率达90%以上。     

麻疯树叶盘法高效再生的研究

以温室中1年生麻疯树顶端幼嫩叶片为外植体,研究了在MS基本培养基中添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA)和吲哚丁酸(IBA)对不定芽再生的影响,并采用60天暗培养的方法筛选出愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳激素组合为MS+5 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1IBA,该组合的不定芽诱导率高达75.8%。将该组合诱导出的愈伤组织接种至MS+1.5 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1IBA的固体培养基中,研究了赤霉素对不定芽再生的影响,最佳赤霉素浓度为0.05 mg.L-1,麻疯树叶盘再生率达到90.9%,平均不定芽个数达到4.6个。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

紫娇花组织培养中愈伤组织的诱导及植株再生

紫娇花种子经灭菌处理后,于试管内培养基中萌发,取幼苗的下胚轴、子叶,进行愈伤组织的诱导、不定芽的分化及试管苗生根技术的研究。结果显示,紫娇花种子最佳灭菌方式为0.1%升汞浸泡10 min,污染率可控制在37.0%,萌芽率达到86.3%;愈伤组织最适诱导部位为下胚轴,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,诱导率达到83.7%;紫娇花不定芽分化的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,不定芽分化率为48.0%;最适生根培养基为1/4 MS+0.1 mg/L NAA+0.5%AC,生根率可接近100%。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

中红杨离体叶片植株再生体系建立

以中红杨组培苗的叶片为试验材料,研究了基本培养基、植物生长调节物质浓度、外源添加物和光照条件对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:1)最适基本培养基为MS,最佳植物生长调节剂和外源添加物的组合为0.5 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖;2)暗培养有利于愈伤组织诱导,光照16 h·d^-1有利于不定芽的诱导,不定芽形成率可达83.3%;3)将叶片再生植株转接到MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA培养基中壮苗培养,在1/2 MS+0.2 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂培养基诱导生根,生根率96.4%,生根苗大田移栽成活率86.8%。     

蒙古栎体细胞胚胎发生技术研究

为建立蒙古栎体细胞胚胎发生体系,以蒙古栎未成熟合子胚为外植体,通过不同种源、外植体的取材时间、诱导培养基配比、培养条件等筛选得到胚性愈伤组织,进而进行体胚增殖。结果表明:7月上旬是最佳的取材时期(合子胚大小约10 mm),蒙古栎合子胚在培养基MS+2,4-D1 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中胚性愈伤组织诱导率可达85.7%,光照条件对胚性愈伤组织的诱导率影响不显著。不同种源对胚性愈伤组织的诱导率有显著影响。在培养基MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中体胚增殖率最大72.3%,且培养4周时胚性愈伤组织状态最佳。