二穗短柄草植株再生体系的建立

以成熟种子为外植体建立二穗短柄草植株再生体系,结果表明:二穗短柄草成熟种子经1%次氯酸钠消毒液处理20min,接种于MS+4%蔗糖(pH 5.5)培养基中培养5d,萌发率为90%,褐化率为10%,污染率为0;萌发种子转入到愈伤组织诱导培养基MS+1mg/L 6-BA+1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)上继代培养,光照条件下愈伤组织诱导率为86%,黑暗条件下愈伤组织诱导率为64%;二穗短柄草愈伤组织在MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)进行不定芽诱导,不定芽发生率为90%;无根丛生芽继代转入到不定根诱导培养基1/2MS+0.5mg/L IBA+0.25mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)中,5d以后可以见到不定根的形成,15d后不定根发生率为91%;在研究中还发现,二穗短柄草种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为94%。     

黑果枸杞组织培养研究

以黑果枸杞成熟种子为外植体,萌发无菌苗后诱导愈伤组织及不定芽分化获得再生植株,建立黑果枸杞组织培养体系。结果表明,MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长,诱导种子萌发成无菌苗的培养基为MS+6-BA1. 0 mg/L+GA_3 0. 5 mg/L;无菌苗脱分化形成愈伤组织适宜的培养基为MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 1 mg/L,诱导率80%,平均丛生芽数25株;诱导愈伤组织分化和生长适宜的培养基为MS+6-BA 0. 4 mg/L+NAA 0. 1 mg/L;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA 0. 3 mg/L+NAA 0. 2 mg/L.     

84k杨叶片离体快繁体系的优化

以84k杨成熟叶片为外植体,诱导愈伤组织及不定芽的分化,经过壮苗、生根过程获得再生植株,建立了84k杨组织培养和快速繁殖技术新体系。结果表明:最佳叶片不定芽诱导培养基MS+6-BA 0.8mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率100%,平均丛生芽数为15.06;最佳壮苗培养基为MS+IBA 0.6mg/L+6-BA 0.1mg/L;最佳生根适宜培养基为MS+IBA 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L,生根率100%;将生长良好的组培苗移栽并扣瓶培养1周,成活率达97%。     

楸叶泡桐杂种无性系9503的组织培养技术研究

以楸叶泡桐和白花泡桐杂交无性系的枝条为外植体,开展了离体芽增殖技术,以及愈伤组织诱导、芽分化和不定芽生根等组织培养技术的研究。结果表明,增殖培养基采用MS+8mg/L6-BA+0.3mg/LNAA,不定芽的增殖倍数可达到9;利用其叶片进行愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+12mg/L6-BA+0.4mg/LNAA,诱导率高达95%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+10mg/L6-BA+0.7mg/LNAA,不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.5mg/LIBA+0.3mg/LNAA,生根率100%。     

毛白杨叶片愈伤组织的诱导、芽的分化及不定根的再生

以毛白杨叶片为外植体进行组织培养研究。结果表明:培养基MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 1.0 mg/L有利于愈伤组织的诱导;培养基MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L诱导愈伤组织并且有大量不定芽发生;培养基MS ZT 0.1 mg/L NAA 0.3 mg/L可使叶片生根率达100%。     

丹红杨愈伤组织诱导与器官再生的影响因子分析

采用正交设计,首次建立了丹红杨离体培养技术体系.结果表明:丹红杨叶片最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.20 mg/L+6-BA1.00 mg/L,诱导率为57.50%;叶柄、无芽茎段最佳胚性愈伤组织培养基诱导为MS+6-BA0.30～0.80 mg/L+ZT0.30～0.80 mg/L+NAA0.02～0.05 mg/L,诱导率为82.26%;根最佳胚性愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA1.00 mg/L+KT0.50～1.00 mg/L+NAA0.50～1.00 mg/L.胚性愈伤组织增殖最佳培养基为MS+BR0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L.胚性愈伤组织分化不定芽最佳培养基为WPM+6-BA0.20 mg/L+TDZ0.001～0.003 mg/L+KT0.50 mg/L+NAA0.05～0.10 mg/L.     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

紫边碧玉组织培养研究

以紫边碧玉的叶片、茎段为外植体,研究其组织培养与快繁技术。试验结果表明:适宜叶片直接诱导丛生芽的培养基为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L+AC 0.2g/L,适宜茎段诱导丛生芽的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L+AC 0.2g/L,适宜丛生芽增殖的培养基为MS+6-BA 1mg/L+KT 1mg/L+NAA 0.2mg/L+AC 0.5g/L;增殖苗高3cm以上时,可直接炼苗移栽,成活率达98%以上。     

蓖麻离体培养体系的建立

为建立蓖麻的离体培养体系,以其无菌发芽的种子苗为材料,切取其根、茎、叶及顶芽为外植体,探讨不同诱导途径中不同生长调节剂对愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽诱导及腋芽增殖的影响。结果表明:(1)去种皮后消毒种子的萌发率最高,萌发所需时间最短,染菌率也低;筛选出种子萌发适宜培养基为MS 0;(2)器官发生型诱导途径中,诱导愈伤组织最适的培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L,其中以茎为外植体诱导率最高,可达90%,但愈伤组织的分化较困难;(3)器官型诱导途径中,叶基、叶脉处能直接诱导不定芽,最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 1 mg/L;(4)顶芽诱导腋芽增殖的效果最佳(51个芽/外植体),最适培养基为MS+6-BA 2 mg/L+TDZ 1 mg/L;(5)生根最适培养基为位1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L。     

北五味子组织培养研究

通过对北五味子(Schisandra chinensis)不同外植体诱导愈伤组织,进行不定芽分化、生根培养基优化筛选。结果表明:选用嫩叶作为外植体诱导愈伤组织的效果较好;培养基MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+NAA2.0mg/L为不定芽的分化最佳培养基组合,分化倍数可达4.7;生根阶段最适培养基为1/4MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+活性炭0.5g/L,生根率为89.13%,平均根长为3.1cm。     

南蛇藤愈伤组织的诱导和植株再生

以南蛇藤无菌苗子叶、上胚轴及幼根为材料,比较研究不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导、分化及植株再生。结果表明:上胚轴是诱导产生胚性愈伤组织的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.5¹.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.11.0mg/L);愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)和MS+6-BA(2.0mg/L)+IBA(0.1⁰.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.00.5mg/L);芽增殖最佳培养基为MS+6-BA(1.0².0mg/L)+NAA(0.1mg/L),增殖系数平均达7.05;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L,生根率达88%。     

金钱树叶片组培快繁成苗技术研究

以金钱树叶片及叶茎为外植体进行离体培养研究,结果表明:用浓度为0.1%的升汞溶液对金钱树材料进行消毒,时间10～15min效果较佳;在以叶片和叶茎为外植体的愈伤组织诱导中,叶片较叶茎易产生愈伤组织;MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的激素配比对诱导叶片愈伤组织的形成有利,诱导率高达74.1%;增殖培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L最佳;不定芽在1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的生根培养基上,生根最佳,生根率达86.2%,根多条、粗壮,植株长势良好、有活力;生根苗移栽在泥炭与椰糠2∶1的基质中,成活率较高。     

红檵木高效再生体系的建立

红檵木是极具观赏价值的常绿灌木。以红檵木的叶片和茎段为材料,通过优化愈伤组织诱导与增殖,不定芽诱导、增殖与生根的培养基与激素配比,进行红檵木高效再生体系研究。结果表明,红檵木外植体最佳消毒方案为两次升汞消毒法:0.1%Hg Cl2两次消毒,各3 min;最佳愈伤组织诱导与增殖的培养基配方分别为:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.7 mg/L、MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.06 mg/L;首次使用Ag NO3,获得最佳不定芽诱导培养基配方:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+Ag NO3 1 mg/L;不定芽增殖最佳培养基配方为:MS+6-BA1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L+V c 5.0 mg/L;最佳不定芽生根方案为:选择2.1~3.0 cm的不定芽,保留2~4叶片,接种至1/2 MS+IBA 4.5 mg/L培养基。从而建立了效果稳定的完整红檵木高效再生体系,为红檵木工厂化育苗及转基因体系建立奠定基础。     

紫苏组织培养的研究

以紫苏为材料,通过对其子叶、下胚轴、幼嫩叶片最佳外植体的筛选、愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立紫苏的离体培养再生体系,为紫苏种质资源保存及快速繁殖提供理论依据和技术支撑。结果表明:紫苏种子萌发最佳培养基MS培养基;最佳消毒方法为0.1%升汞消毒8 min。此时种子萌发率最高达96%。离体培养最佳外植体为叶片。紫苏叶片和子叶诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率分别为97.5%和91.7%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,叶片优于子叶。最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1 mg/L,生根率为100%。     

银白杨不定芽诱导与增殖分化研究

为建立优良银白杨离体快繁再生体系,培育速生高产的银白杨苗木,以西藏银白杨叶片、茎段作为不定芽诱导的初始材料,以MS为基本培养基,对不定芽诱导中产生的愈伤组织进行二次不定芽诱导,研究不同激素浓度及配比对银白杨不同材料不定芽诱导与增殖分化的影响。研究表明:6-BA∶NAA为5∶1是银白杨不定芽诱导的最优激素浓度配比,银白杨不定芽诱导的最佳培养材料为当年生带腋芽茎段;6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L)为愈伤组织诱导不定芽最优激素浓度组合;不定芽增殖的最优激素7浓度组合为6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),平均增殖系数最高。综合考虑得出:MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)为银白杨不定芽诱导分化的最佳培养基,不定芽诱导的最佳材料为银白杨当年生带腋芽茎段;愈伤组织不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L)+KT(0.2mg/L);不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA(1.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+KT(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L),pH5.8。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

植物生长调节剂对黑果枸杞愈伤组织诱导、增殖及分化的影响

为建立黑果枸杞高频再生体系及进行细胞突变体筛选、遗传转化奠定基础,以黑果枸杞叶片、茎段和腋芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的植物生长调节剂进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的继代培养过程中,高浓度的2,4-D有利于愈伤组织的诱导,但对愈伤组织的生长有一定的抑制作用,最佳培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L;在愈伤组织的再分化过程中,6-BA对再生芽的分化效果最好,出芽率高,且多诱导出丛芽,最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.10mg/L。试验表明:黑果枸杞叶片、茎段和腋芽均可诱导愈伤组织,茎段诱导率最高;筛选出了茎段愈伤组织诱导、增殖及再生芽分化的适宜培养基,为其细胞工程育种及规模化生产提供支撑。     

三角梅愈伤组织诱导和植株再生

以三角梅(Bougainvillea glabra choisy.)当年生枝条为材料,比较研究不同激素配比条件下外植体愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:三角梅茎段在MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.05mg/L培养基上,可诱导出愈伤组织,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,经再分化可获得无性系芽,继而产生丛生芽;将高度大于3cm的增殖芽接种于添加1/2MS+IAA 1.0mg/L培养基上可诱导产生不定根,生根率高达50%。生根后移栽成活,获得完整再生植株。     

葡萄柚品种哈路比叶片离体再生体系的优化

为给葡萄柚的大规模育苗提供方法,以葡萄柚品种哈路比的叶片为外植体,在MS培养基中添加不同浓度配比的激素,探索其离体再生的优化体系。试验结果如下:培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D愈伤组织诱导率最高为78.57%,愈伤组织呈黄绿色,结构疏松,长势良好;MS+3.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基激素浓度配比,分化率最高为48%,不定芽分化快,长势良好;培养基MS+2.0 mg/L IBA有利于诱导生根,生根率达60.74%。初步建立了葡萄柚哈路比的离体再生体系。     

黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分化

以黑荆树叶片为外植体,MS培养基为基本培养基,研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织,但诱导率差异达极显著水平;不同外源激素组合上诱导的愈伤组织,其增长率为165.21%~208.53%,其中以6-BA与IBA组合的增长率最大;在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽,但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑,筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA,诱导率为43.36%,平均增量和增长率分别为1.04 g和208.53%;最适宜继代时间为18~21 d;最适宜愈伤组织分化培养基为MS+0.05 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,分化率为51.85%,每块愈伤组织上分化5~8个芽点。