用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验监测猪瘟抗体发现隐性猪瘟

用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验监测瘟血清抗体。测得该场母猪４０份血清样品中，猪瘟弱毒抗体效价ＯＤ值较高，有１００％保护率，测得仔猛进４０份血清样品中，猪瘟弱毒抗体效价ＯＤ值适中，有８７．６％的保护率。     

某猪场猪瘟强毒、弱毒抗体水平的检测

应用猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验方法，对河南某猪场47份母猪血清进行猪瘟抗体检测，有5份血清呈猪瘟强毒抗体阳性，阳性率为10.6%，猪瘟弱毒抗体阳性率为95.7%，其群体保护率为93％。在9份仔猪血清中，猪瘟强毒抗体为阴性，猪瘟弱毒抗体阳性率为22％，只有17％的群体保护率。检测结果表明：该猪场可能有猪瘟强毒感染。     

不同日龄仔猪的猪瘟弱毒抗体水平的测定

利用猪瘟单克隆抗体纯化抗原酶联免疫吸附试验试剂盒分别对２０、３６和６７日龄三个不同时期共１８５份仔猪血清进行猪瘟抗体水平的检测。结果,猪瘟弱毒抗体阳性率分别为０、８３．３３％和２１．９５％。     

母猪繁殖障碍性疾病血清流行病学调查

重庆某规模化猪场仅进行了猪瘟的常规免疫,母猪发生流产、死胎等现象严重。采集的154份血清样品其中母猪血清样45份,仔猪血清样109份）用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验检测猪温抗体水平,结果母猪血清猪瘟抗体阳性率为82.22%,仔猪血清抗体阳性率为0;用乳胶凝集试验检测伪狂犬病、细小病毒病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为20％、6.67%,仔猪血清抗体阳性率分别为5.5%、4.59%;用间接血球凝集试验检测衣原体病、弓形体病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为13.33%、0,仔猪血清抗体阳性率分别为10％、0;用试管凝集由氏杆菌病为阴性。     

用MAB-ELISA对仔猪母源猪瘟抗体的试验

用猪瘟兔化弱毒苗4头份免疫后的母猪3头，分别于分娩后定期日龄采血分离24头份血清样品，初生仔猪16头，分别于出生后定期日龄前腔静脉采血分离128头份血清样品，用单抗酶联免疫吸附试验检测血清猪瘟抗体滴度，结果表明，母猪猪瘟抗体效价持续较高，达100％保护率，哺乳前仔猪抗体效价为0，吃初乳后抗体水平不断提高，但抗体总体效价较低，仅有57．89％的保护率；仔猪20日龄前平源抗体水平差异较大，与母猪抗体水平不呈正相关。     

猪瘟的综合防制

我国应用猪瘟兔化弱毒疫苗进行免疫接种 ,较好地控制了该病的流行 ,但自 70年代以来 ,我国猪瘟的流行与发病特点已发生了很大的变化 [2 ]。近年来 ,全国各地陆续有猪瘟的发病报道 :阎高峰 1 998年对青海西宁市部分猪场进行猪瘟血清流行病学调查 ,平均血清阳性率达 1 9.1 4% ;李继祥等对重庆某规模化猪场进行了猪瘟的常规免疫 ,但母猪流产死胎仍然严重 ,单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验检测母猪血清猪瘟抗体阳性率 82 .2 2 % ,但仔猪血清抗体阳性率为 0 ;王庆普报道 1 999年 1 0月普兰店市某猪场仔猪 2 0 1头发生猪瘟 ,其中死亡 1 93头。纯石…     

重庆市甘规模化猪场猪瘟的诊断

重庆某猪场4头濒死仔猪病理变化疑以猪瘟，病科脾、淋巴结用兔体交互免疫试验检测也为猪瘟阳性。采用中国兽药监察所的猪瘟单抗纯化的强、弱毒抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）对该场的母猪及仔猪进行了血清流行病学调查，9.69%（19/196）的母猪及16.83%（33/188）的仔猪血清中即为猪瘟强毒（野毒）抗体阳性，又为猪瘟兔化弱毒抗体阳性。试验结果显示，猪瘟是该场母猪繁殖障碍及仔猪死亡的原因之一。     

猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验对猪瘟血清抗体的检测

应用猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）对青海省4个县的免疫猪场629份猪血样进行检测。结果，检出抗体阳性42份，平均阳性率为6.68%。提示经猪瘟疫苗免疫猪群感染了猪瘟强毒。     

猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。     

IHA与ELISA检测猪瘟病毒抗体的比较

应用间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟病毒抗体,IHA试验以1∶16为判定孔,抗体效价大于或等于1∶16为抗体阳性;ELISA试验以抗体阻断率40%为判定标准,阻断率大于或等于40%为抗体阳性,同步检测了122份规模化猪场不同阶段免疫猪血清.结果ELISA检测抗体阳性率比IHA检测抗体阳性率低,阴性、阳性相符的血清数为92份,相关性为 75.4%,不同抗体水平分布的血清数也不同,个别血清出现较大差异,卡方检验P值为0.13(＞0.05),两种检测方法统计上无差异,研究结果为选择猪瘟病毒抗体检测方法提供参考.     

非典型猪瘟和隐性猪瘟的诊断和防制

疑某猪场发生非典型猪瘟，采取病死猪的脾、淋巴结，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测猪瘟抗原，结果阳性，诊断为猪瘟。同时用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法对猪群开展猪瘟抗体的检测，先后采集７５头份仔猪血样（２０～２８日龄），８５０头份生产母猪血样。检测结果表明，猪瘟抗体水平低于保护值（ＯＤ＜０．３）的仔猪１１头，占抽检仔猪的１４．６％，母猪１０头，占生产母猪的１．１７％。为此对以上低抗体的猪用猪瘟兔化苗再次进行加强免疫接种，经１５天后检测其血清抗体的ＯＤ值，结果仍然没有升高。通过本试验证实，猪瘟低抗体的猪，对免疫的应答能力很差，低抗体的母猪还可能成为猪瘟的隐性感染者，并能垂直传播到下一代，是非典型猪瘟的传染源。淘汰低抗体的母猪，是控制和消灭非典型猪瘟的有效措施。     

猪瘟和链球菌病混合感染的诊治

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种高度接触性、传染性疾病,猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种人畜共患传染病。某猪场存栏基础母猪180头,于2005年4月起开始发病,并陆续死亡。根据流行病学调查,临床症状观察,病理剖检和实验室诊断,确诊为猪瘟和猪链球菌混合感染,采取相应的防治措施,于1周后控制了疫情。     

新疆乌鲁木齐垦区猪瘟免疫程序的确定

多年来,新疆乌鲁木齐垦区没有一个科学合理的猪瘟免疫程序,免疫程序较为混乱,免疫效果亦不同。为探讨一种适合本地区的猪瘟免疫程序,有效预防猪瘟,而进行本试验。本试验是对仔猪猪瘟母源抗体的跟踪监测结果,对不同日龄仔猪免疫猪瘟疫苗,然后采集血样,检测猪瘟抗体效价。根据效价不断校正、最终确定为科学合理的猪瘟免疫程序,其免疫程序是:猪瘟的超前免疫,剂量1头份,根据抗体效价下降情况,35日龄进行二免,剂量4头份;仔猪常规免疫:一免30日龄、剂量2头份;二免50日龄、剂量4头份;生产母猪免疫:配种前(后)15d进行免疫,剂量4头份。应用此免疫程序的同时,严格遵守环境卫生消毒制度,再未发生猪瘟,抵御了猪瘟野毒的侵袋,提高了猪瘟防治水平,促进垦区生猪养殖向健康稳定的方向发展。     

不同批猪瘟活疫苗中猪瘟兔化弱毒E2基因主要抗原编码区序列分析

对12批猪瘟活疫苗中的猪瘟兔化弱毒病毒，以RT-PCR获得了E2基因的主要编码区的大约250bp大小的节片，在DNAstar上对这些节片的211pb进行了测序，观察到这些节片的编码序列高度同源性，其核苷酸序列和氨基酸序列有98.1%-100%相同，其中9批完全一致，结果表明猪瘟兔毒疫苗株的分子结构极其稳定。     

养猪场猪瘟净化技术研究

在４个流行仔猪猪瘟半年以上的养猪场实施了初乳前猪瘟首免的方法，进一步证实了这种免疫方法的免疫可靠性。随后，建立了以实施初乳前首免、建立严格隔离检疫和消毒制度、淘汰可疑带病毒母猪、建立健康种猪群等技术措施为主要内容的猪瘟净化技术，并在一个连续多年经常散发或暴发猪瘟的某养猪场应用，经连续３年多的临床和实验室检测，未发现临床病猪和健康带毒猪。     

RT-PCR技术检测猪瘟病毒的应用研究

本试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对猪瘟进行诊断应用研究.应用RT-PCR对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测,84份诊断为阳性,阳性率62.2%.从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份,经RT-PCR检测,37份为阳性,阳性率为13.4%.其中健康猪扁桃体带毒较高,246份扁桃体中有35份阳性,占14.2%.采自柳州健康猪的26份淋巴结材料全为阴性,只有邕宁县的1份健猪淋巴结阳性.结果表明,RT-PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断.     

RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究

应用反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)对猪瘟进行诊断应用研究。应用RT-PCR况对来自广西不同地区的135份疑似猪瘟病料进行检测，以份诊断为阳性，阳性率62．2％。从百色、柳州地区等采集的健康猪扁桃体和淋巴结共276份，经RT-PCR检测，37份为阳性，阳性率为13．4％。其中健康猪扁桃体带毒较高，246份扁桃体中有35份阳性，占14．2％。采自柳州健康猪的26份淋巴结材料全为阴性，只有邕宁县的1份健猪淋巴结阳性。结果表明，RT-PCR技术可应用于猪瘟的临床诊断。     

猪瘟病毒保护性抗原E2基因的克隆及在原核细胞中的表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ分两段扩增猪瘟病毒（ＨＣＶ）石门株Ｅ２基因,然后对其进行了克隆。利用两个片段重叠部分的单一ＢｇｌⅡ位点,将它们连接成为完整的Ｅ２基因,并克隆到ＰＵＣ１９质粒中,获得重 质粒ＰＨＣＦ２。另设计一对引物,以ＰＨＣＦ２为模板扩增出不含信号肽的Ｅ２基因,然后将其克隆到表达载体质粒ｐＢＶ２２０和ＰＥＴ＿２８ａ（＋）中,获得重组质粒ＰＢＶＥ２和ＰＥＴＥ２,用酶切,ＰＣＲ和序列分析鉴定Ｅ２基因插