辐射徐长卿愈伤组织的研究

为探讨辐射处理对徐长卿愈伤组织的影响,获得有利变异植株,采用不同剂量60 Co-γ射线处理徐长卿愈伤组织,研究了辐射处理对愈伤组织致死率和分化变异的影响,并对不定芽的分化率和变异率、变异不定芽生根及试管苗移栽和定植进行研究。结果表明:经过剂量为8、12、16和20Gy 4种处理的愈伤组织死亡率随着辐射剂量的提高而增加;经过8、12、16Gy 3种处理剂量处理的愈伤组织能使分化的不定芽发生变异,其变异率随着辐射剂量增加而提高;变异不定芽培养的试管苗生根率、平均生根数、移栽与定植的成活率随着辐射剂量增加而降低。从经8Gy辐射处理的变异试管苗中筛选出1株长势非常旺盛的有利变异试管苗,试管苗的后代生长非常旺盛,有利变异保持不变。     

辐射山苦菜茎段愈伤组织的研究

为改良山苦菜基因型,以其茎段愈伤组织为材料,采用不同剂量60Coγ射线对其愈伤组织进行辐射处理,研究不同剂量射线对愈伤组织致死率和分化变异的影响以及对变异不定芽生根率、试管苗移栽和定植成活率的影响。结果表明,经过10,15,20 Gy这3种剂量辐射处理的愈伤组织致死率随着辐射剂量的增加而增加;10,15,20 Gy这3种处理剂量能使分化的不定芽发生变异,并且变异不定芽培养的试管苗生根率、平均生根数、移栽与定植的成活率均随着辐射剂量增加而降低,且试管苗长势较弱。从定植的变异试管苗中筛选出1株具有叶色浓绿有利性状的试管苗,且有利变异植株保持了山苦菜的所有植物学性状。对愈伤组织进行60Coγ射线处理能改变山苦菜的基因型。     

60Co-γ射线辐照对东方百合鳞片再生植株生长的影响及其细胞学效应

    以60Co-γ射线辐照东方百合鳞片后组培诱导芽的发生及增殖,对增殖的不定芽进行诱导生根以探讨辐照处理对不定芽生根的影响及射线辐射的细胞学效应.结果表明:辐射处理对不定芽生根率的影响不明显,而对生根芽叶片数、根数、根长等各生长指标的影响均达到极显著水平;在0.5～4.0 Gy范围内,再生植株芽高随辐射剂量升高呈显著下降的趋势.在0.5～1.0 Gy范围内对根尖细胞的有丝分裂表现为刺激效应,在2.0～4.0 Gy范围内表现为抑制效应;各辐照处理的畸形细胞率均高于对照,其中以2.0 Gy处理最高;辐照处理对再生植株根尖细胞染色体畸变类型的影响程度不同,染色体桥率受辐射剂量影响最严重,其次是落后染色体率和染色体片段率,对微核率产生的影响最弱.不同形态变异再生植株在染色体水平上的变异情况不同.1.0 Gy辐照处理是百合鳞片辐照结合组培的适宜辐照剂量.     

豆梨辐照效应研究

用辐射剂量为10、20、30、40 Gy的60Co射线对豆梨的叶片和叶片诱导的愈伤组织进行辐射处理,研究了辐照处理对叶片愈伤组织分化率、叶片与愈伤组织的组织褐化率、芽再生分化率、分化芽的数量以及再生苗继代培养成活的影响.结果表明,60Co射线对叶片愈伤组织分化、辐照组织的褐化、分化能力均有影响.低剂量(10 Gy)促进叶片愈伤组织的形成,而高剂量则起抑制作用.随着辐照剂量的增加,叶片和愈伤组织的褐化程度均加重,而分化能力减弱,再生苗继代培养成活率降低.适宜豆梨叶片和愈伤组织辐射诱变的辐照剂量为20～30 Gy.     

硝普钠对红掌愈伤形成及植株再生的影响

以红掌‘阿拉巴马’的间接不定芽再生体系为基础,研究了不同浓度的硝普钠(SNP)对红掌叶片诱导愈伤组织发生、不定芽再生及植株生根的影响。结果表明:在愈伤诱导培养基中添加SNP可一定程度上影响红掌愈伤组织的发生,其中20μmol/L SNP处理可显著提高愈伤的发生频率和鲜重,当SNP的浓度为80μmol/L时,愈伤的发生频率和鲜重均受到抑制。在不定芽分化培养基中添加SNP对不定芽的分化率没有显著影响,但40μmol/L SNP处理可显著提高不定芽的数量。将植株转接到添加20μmol/L SNP的生根培养基上,不定根的数量显著增加,但SNP处理对不定根的长度没有显著影响。综上,适宜浓度的SNP处理可促进红掌愈伤组织的诱导、不定芽再生和植株生根。     

60Co-γ辐射对番茄离体子叶再生及不定芽分化的影响

用0～100 Gy的60Co-γ射线对番茄品种'1479'的组培无菌苗子叶进行辐射,研究60Co-γ辐射对番茄组织培养中外植体分化的辐射效应.结果表明:60Co-γ射线辐射'1479'子叶后.其出愈率、胚性愈伤诱导率和胚性愈伤的分化情况受到显著的影响.高辐射剂量(>50 Gy)显著抑制了子叶外植体的出愈率和胚性愈伤组织的形成.并对胚性愈伤中芽的分化产生了显著的影响,但对胚性愈伤不定根的诱导影响较小.番茄子叶外植体半致死剂量为50 Gy左右.     

豌豆离体再生体系建立及遗传稳定性研究

【目的】提高速豌豆诱伤组织和不定芽的诱导率,建立豌豆高效离体再生体系.【方法】以半无叶型豌豆品种‘陇豌1号’和蔓生型豌豆品种‘S3008’的茎段为外植体,研究不同基因型、培养基激素配比对愈伤组织诱导、分化的影响.【结果】‘陇豌1号’茎段愈伤组织诱导率和分化率较高,分别达到88.7%和76.7%,‘S3008’茎段最高愈伤组织诱导率和分化率分别为86.7%和74.7%.诱导愈伤组织最适培养基是MS+2mg/L TDZ+0.2mg/L 2,4-D;诱导不定芽形成的最适培养基为MS+2mg/L TDZ+1mg/L 6-BA,平均不定芽数为4.3;在不定芽诱导生根培养基(1/2MS+20g/L蔗糖+1.5mg/L ABT)上,生根率为74.0%,移栽后再生植株成活率达86.0%.两个豌豆品种都能得到再生植株且繁殖系数高.【结论】本培养体系适宜豌豆离体再生.通过染色体分析,再生植株染色体数和供体亲本材料一致,初步表明再生植株遗传稳定.     

三个菊花品种花器官愈伤组织辐射效应的研究

用辐射剂量为10、15、20Gy的^60Coγ射线对金莲、白矮生和矮红3个小花型夏菊品种的舌状花和管状花产生的愈伤组织进行辐射处理，研究了辐射处理对愈伤组织褐化率、分化率以及分化芽的数量的影响。结果表明：γ射线对3个品种不同来源愈伤组织的褐化、分化能力均有影响，随着辐射剂量的增加，不同来源的愈伤组织的褐化程度均加重，而分化能力则减弱。此外，不同基因型和不同来源的愈伤组织，对γ射线敏感性也有差异，矮红品种的愈伤组织最敏感，舌状花产生的愈伤组织比管状花产生的愈伤组织辐射敏感性强。     

桑树毛状根再生条件研究

为建立桑树毛状根的再生体系,以桑树毛状根作为外植体,研究不同质量浓度6-BA和NAA配比对桑树毛状根愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,并对再生植株进行PCR检测。结果表明,桑树毛状根的最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA,最佳不定芽分化培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,3周愈伤组织不定芽分化率为16.7%。应用该不定芽获得再生植株的根系生长旺盛,叶片提取的基因组中含有rolB生根基因。     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

花榈木胚轴愈伤组织的诱导及植株再生

［目的］通过愈伤组织诱导途径,建立快速高效的花榈木再生体系。［方法］花榈木成熟种子在MS培养基中萌发获得无菌苗,以幼苗的胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽和生根。［结果］诱导花榈木愈伤组织的最适培养基为MS＋ 1.0 mg/L 2,4 D＋0.5 mg/L KT,诱导率达96.7％;诱导愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋0.5 mg/L NAA＋0.1 mg/L TDZ,其不定芽诱导率为85.0％;平均每块愈伤产生不定芽6.2个;生根的最适培养基为1/2WPM＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA,生根率为88.9％。炼苗移栽后,成活率可达85.0％。［结论］花榈木胚轴愈伤组织诱导途径的植株再生是一套快速高效的离体再生体系,可为花榈木种质资源保存、转基因、遗传育种等研究提供重要参考。     

高粱幼穗离体培养再生体系的建立

6个基因型的高粱幼穗接种于YD10、L2、YLMDS和MS1诱导培养基,结果在MS1培养基上6个基因型的幼穗都诱导出愈伤组织,05DL15A诱导率最高为96.0%,四杂40诱导率最低为27.5%。获得的淡黄色颗粒状愈伤组织分化出不定芽,不定芽高8cm左右转入生根培养基再生植株。     

金丝小枣愈伤组织诱导植株再生及染色体变异的研究

以金丝小枣枣头为外植体,用改良MS培养基为基本培养基,附加不同浓度的2,4—D、IBA诱导愈伤组织.IBA有利于致密的Ⅰ型愈伤组织形成,2,4—D易诱导出疏松的Ⅱ型愈伤组织,黑暗条件下诱导愈伤组织比光照条件下更有效.愈伤组织继代繁殖时,2,4—D的浓度影响了愈伤组织类型和染色体数目变异.两种愈伤组织再分化能力不同,Ⅰ型有6—BA分化出不定芽,而Ⅱ型未分化出芽.在IBAO.2 6—BAI时诱导出大量胚状体.选择了30个芽丛再生植株无性系进行继代繁殖,其中有1个四倍体,其余为二倍体.0.3ppmIBA最有利于生根.     

甜魔芋愈伤组织诱导与植株再生研究

以甜魔芋球茎为外植体,进行愈伤组织诱导、芽分化及植株再生研究.结果表明:球茎在MS附加1.5 mg/LBA和1.5 mg/LNAA的培养基中,愈伤组织诱导率达100%;在MS附加1.0～1.5 mg/LBA和0.2mg/LNAA分化培养基中,其分化率达90%以上;不定芽在生根培养基MS附加0.5 mg/L BA和0.2 mg/LN从上,能100%生根形成完整的植株.     

甘菊下胚轴离体再生体系的建立

以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明:将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7 d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS+1.0 mg/L 2, 4-D+0.5 mg/L 6-BA的培养基上培养15 d后,愈伤组织形成率最高为8666%,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30 d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25.50%,平均每个外植体产生不定芽数目为4.25个;不定芽在添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培养基中培养15 d后,生根率达到100%。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,均可以获得健壮的开花植株。      

辣椒愈伤组织辐射诱变及离体再生培养的研究

为了提高辣椒的育种效率,采用60Co-γ对辣椒的愈伤组织进行辐射,诱导出再生植株并构建离体再生培养体系。梯度辐射结果表明,20Gy的辐射剂量最为合适,在保证较高存活率的前提下,能够产生足够多的变异。对辐射处理后的愈伤组织诱导再生植株进行了初步的研究。结果表明,组织培养结合辐射诱变进行育种,可以得到丰富的变异体,增加选择机会,缩短育种周期。     

辣椒愈伤组织辐射诱变及离体再生培养的研究

为了提高辣椒的育种效率,采用60Co-γ对辣椒的愈伤组织进行辐射,诱导出再生植株并构建离体再生培养体系。梯度辐射结果表明,20Gy的辐射剂量最为合适,在保证较高存活率的前提下,能够产生足够多的变异。对辐射处理后的愈伤组织诱导再生植株进行了初步的研究。结果表明,组织培养结合辐射诱变进行育种,可以得到丰富的变异体,增加选择机会,缩短育种周期。     

~(60)Co-γ射线对小麦幼胚离体后的诱变效应

为了促进四川高产小麦的发展,拓宽种质资源,用四川小麦川麦58等与北方小麦济麦22等杂交的F1代幼胚为材料,利用辐射诱变产生突变体,探讨4、6、8、12 Gy等不同辐射剂量对小麦幼胚离体培养的影响。结果表明,任何剂量的~(60)Co-γ射线对小麦幼胚离体后胚状体诱导率、愈伤组织的增值倍数及植株的再生率都有显著影响,所有处理随辐照剂量的增大而显著下降,其中愈伤组织诱导率从0 Gy 96.04%降到12 Gy 74.74%,愈伤组织增值倍数从3.22倍降到1.41倍,增值后绿点率从54.44%降到33.36%,剂量4和6 Gy的绿点率显著低于对照,而二者无显著差异。剂量6 Gy的植株再生率为19.76%,约为对照一半左右,当剂量达到8 Gy后,植株再生率大幅度下降,由此得出6 Gy的剂量是小麦幼胚辐射适宜的诱变剂量。     

西番莲胚乳愈伤组织诱导和三倍体植株再生

用紫果西番莲种子的胚乳作外植体离体培养,在MS＋BA0．2mg/L NAA2.0mg/L培养基上诱导获得乳白色或淡黄色结构致密的愈伤组织,诱导频率达到84．7％。愈伤组织在MS＋BA2mg/L NAA0．2mg/L上分化不定芽的频率最高,达65％,增殖系数达到5．2。再生的不定芽在1／2MS＋IBA1mg/L上诱导生根的效果好,生根率达63％。再生植株经根尖染色体计数有95．3％的细胞染色体数目为2n=3x=27,证明再生植株为三倍体。说明胚乳培养是获得三倍体的高效途径。     

辐射对甘蓝型油菜下胚轴再生的影响

为探讨辐射对离体培养的甘蓝型油菜再生的影响,试验选择再生频率较高的甘蓝型黄籽油菜品系SH31、K81和甘蓝型黑籽品系P52,以种子、预培养的下胚轴为诱变材料进行不同剂量的60Co-γ射线照射处理,分析了辐射对油菜芽再生的影响。结果显示:甘蓝型油菜种子经60Co-γ射线辐射后离体培养,以下胚轴为外植体,外植体芽再生率随60Co-γ剂量的增加而降低;用不同剂量的γ射线直接对预培养的下胚轴进行辐射,10~30 Gyγ射线辐射可明显促进外植体的再生,并且随浓度增加而增加,但是当浓度超过40 Gy,再生率则随浓度增加而降低。另外预培养的时间对辐射后芽的再生影响较大,预培养4 d的外植体芽再生率高于预培养2 d的。