阿魏根粗多糖对鸡脾脏和外周血淋巴细胞体外增殖作用的影响

为研究新疆阿魏多糖（FSP）对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞增殖作用的影响。本研究用水提醇沉法得到阿魏总多糖（FSP_t）和3种分级多糖（FSP₃₀、FSP₅₀、FSP₇₀）,并通过苯酚-硫酸法和红外光谱对FSP进行检测。通过MTT法测定各级FSP的安全浓度及其对鸡外周血T淋巴细胞及脾脏B淋巴细胞的增殖能力。结果显示,提取的FSP均具有多糖的特征峰,为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同PHA刺激T淋巴细胞增殖,其中FSP_t的增殖作用较强。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,除FSP₅₀外,所有多糖在一定浓度下均能单独和协同LPS刺激B淋巴细胞增殖,其中FSP₇₀和FSP_t增殖作用较强。综上所述,各级FSP中,FSP_t对脾脏B淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强,可以作为进一步研究的材料。     

不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响

试验旨在比较不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响。用不同浓度乙醇醇沉桑叶水提物,制备桑叶粗多糖MLP-1、MLP-2、MLP-3、MLP-4、MLP-5,采用苯酚硫酸法测定各提取物多糖含量。以5种桑叶粗多糖和桑叶水提物（MLAE）为试验药物,采用MTT法比较多糖含量分别在15.625、31.25、62.5、125、250 μg/mL浓度时各提取物单独刺激及协同LPS、PHA共同刺激小鼠脾脏B、T淋巴细增殖的变化。结果显示,多糖浓度在15.625~250 μg/mL范围内,各提取物无论单独还是协同LPS和PHA时均能促进小鼠脾脏B、T淋巴细胞的增殖,其中,MLP-1多糖含量在低浓度时能显著刺激脾脏B淋巴细胞增殖（P<0.05）;MLP-3和MLP-5在低浓度时表现出较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;MLAE协同LPS在大部分浓度点的脾脏B淋巴细胞的增殖能力均显著高于细胞对照组和LPS对照组,可显著提升体液免疫功能（P<0.05）。     

淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的调节作用研究

为研究淫羊藿多糖(EPS)体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定淫羊藿多糖活性及对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用。根据活性检测结果,选择用50%的乙醇醇沉的淫羊藿多糖进行安全浓度试验;根据安全浓度检测结果,选择2 500.00μg/mL、1 250.00μg/mL、625.00μg/mL、312.50μg/mL、156.25μg/mL 5个浓度,用MTT法测定淫羊藿多糖单独和协同LPS刺激对鸡脾脏淋巴细胞增殖率的影响。结果显示:不同浓度乙醇醇沉的淫羊藿多糖均具有良好的活性,但乙醇浓度为50%醇沉的淫羊藿多糖活性最佳。淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度为2 500.00μg/mL。淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏淋巴细胞,均显示出不同程度增强脾脏淋巴细胞的活性,且均在浓度为1 250.00μg/mL时显示出较强的体外增强鸡脾脏淋巴细胞增殖的能力,说明淫羊藿多糖在安全浓度范围内可刺激鸡脾脏淋巴细胞增殖,从而实现调节免疫功能的作用。     

列当多糖对鸡淋巴细胞体外增殖能力的影响

为探讨列当多糖(OSP)对鸡脾脏淋巴细胞和外周血淋巴细胞增殖作用的影响,试验用水提醇沉法提取列当多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对列当多糖进行检测,采用MTT法测定列当多糖的安全浓度及对鸡淋巴细胞的增殖能力。结果显示:试验所提取的列当多糖均具有多糖的特征峰为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对T淋巴细胞增殖的浓度范围最大。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对B淋巴细胞增殖的浓度范围最大。结果表明,OSP30及OSP80对脾脏淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强。     

黄芪多糖对红细胞调控T淋巴细胞增殖的影响

选择小鼠脾脏和外周血T淋巴细胞作为研究对象,通过体外试验探讨黄芪多糖的免疫调节作用。用不同剂量的黄芪多糖作用于红细胞和T淋巴细胞共同培养体系,48h后,应用MTT比色法检测细胞的增殖活性,研究黄芪多糖对红细胞免疫调控功能的影响。结果表明,小鼠红细胞、植物血凝素(PHA),单独作用对T淋巴细胞的增殖均有显著的促进作用,且红细胞对PHA激活的T淋巴细胞的增殖也有促进作用,但是二者没有明显的协同促进作用;黄芪多糖不能促进体外培养T淋巴细胞增殖,甚至还抑制PHA诱导的T淋巴细胞的增殖活性;但黄芪多糖可以协助红细胞对淋巴细胞的免疫调控功能,双方共同作用,引起淋巴细胞数目的增加和增强增殖功能。     

枸杞多糖对雏鸡淋巴细胞体外增殖及分泌IL-2的影响

为探讨枸杞多糖(LBP)对雏鸡T、B淋巴细胞体外增殖的影响,将不同浓度的LBP分别加入到用植物血凝素(PHA)刺激的体外培养的雏鸡胸腺、外周血、脾脏淋巴细胞中,以及用细菌脂多糖(LPS)刺激的体外培养的雏鸡法氏囊、外周血、脾脏淋巴细胞中,分别用MTT比色法和ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化以及IL-2的分泌量.结果显示:(1)LBP在一定浓度范围内时,均能刺激T、B淋巴细胞的增殖和促进IL-2的分泌,且随着多糖浓度的增加而增加；(2)LBP对同一器官来源的T、B淋巴细胞的OD值随着雏鸡日龄的增长均呈现增长趋势；(3)同浓度LBP对相同日龄雏鸡胸腺T淋巴细胞和法氏囊B淋巴细胞的OD值均高于外周血和脾脏的T、B淋巴细胞OD值.结果表明LBP能够促进雏鸡淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌,并且对淋巴细胞增殖的促进作用有一定的量效、时效关系和组织相关性.     

党参茎叶黄芪粉对鸡免疫增强作用的研究

为了研究党参茎叶黄芪粉对鸡的免疫增强作用,本试验对党参茎叶黄芪粉在体外和体内对提高鸡细胞免疫和体液免疫作用进行了研究。体外试验,首先测定了党参茎叶黄芪粉对鸡外周血淋巴细胞的安全浓度,然后在安全浓度下测定党参茎叶黄芪粉对外周血T淋巴细胞增殖的影响。体内试验,将党参茎叶黄芪粉分7个剂量饮水给药于雏鸡,另设药物对照组和空白对照组,观察其对新城疫疫苗免疫雏鸡的免疫增强作用及对鸡的体重的影响。结果显示,党参茎叶黄芪粉对鸡淋巴细胞的最大安全浓度为7.813μg·mL~(-1),在7.813～0.016μg·mL~(-1)范围内单独能显著刺激淋巴细胞增殖,在7.813～1.953μg·mL~(-1)范围内能协同植物血凝素(PHA)显著刺激T淋巴细胞增殖。体内试验表明,0.1%的党参茎叶黄芪粉能显著提高血清抗体效价从而增强体液免疫,并能提高日均增重,对鸡的生长和健康无不良影响。研究表明,党参茎叶黄芪粉在体外对鸡外周血T淋巴细胞有较强的细胞增殖作用;党参茎叶黄芪粉以0.1%比例饮水配合新城疫疫苗免疫雏鸡的效果最好,可以作为临床试验的最佳剂量。     

赤灵芝多糖对鸡淋巴细胞增殖的影响

为探讨赤灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)对体外培养鸡外周血淋巴细胞、脾脏淋巴细胞增殖的影响,将不同浓度的GLP单独或协同伴刀豆素球蛋白(Con A)刺激仔鸡外周血淋巴细胞、脾脏淋巴细胞,采用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明,单独刺激外周血淋巴细胞时,GLP在0.070~2.25 mg/m L的剂量范围内,其吸光度值均显著大于细胞对照组(P0.05),协同Con A刺激外周血淋巴细胞时,GLP+Con A组在0.141~2.25 mg/m L吸光度值显著大于Con A对照组(P0.05)。单独刺激脾脏淋巴细胞时,GLP在0.035~2.25 mg/m L浓度时的吸光度值显著大于细胞对照组(P0.05),协同Con A刺激脾脏淋巴细胞时,GLP+Con A组在0.035~2.25 mg/m L吸光度值显著大于Con A对照组(P0.05)。提示,GLP在体外不仅能单独刺激鸡淋巴细胞增殖,与Con A具有协同刺激作用,且在一定范围内呈现明显的量效关系。     

5种硫酸化多糖刺激鸡外周血淋巴细胞增殖的效果比较

比较了硫酸化黄芪多糖(sAPS)、硫酸化淫羊藿多糖(sEPS)、硫酸化香菇多糖(sLNT)、硫酸化当归多糖(sCAPS)和硫酸化枸杞多糖(sLBS)体外对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响。首先测定5种硫酸化多糖对淋巴细胞的安全浓度,然后取安全浓度范围内的各硫酸化多糖分别单独或与ConA一起加入到淋巴细胞的培养体系中,用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明,5种硫酸化多糖在合适的剂量均可单独或协同ConA刺激淋巴细胞增殖,且有一定的量效关系,以sAPS60效果最好,sEPS5次之。     

黄芪成分对鸡外周血淋巴细胞增殖反应的影响

采用ELISA方法检测不同工艺生产的黄芪多糖和黄芪皂苷体外对ConA和LPS刺激鸡外周血中淋巴细胞增殖反应影响。4种工艺生产的黄芪多糖及2种工艺生产的黄芪皂苷对ConA诱导的鸡外周血T淋巴细胞增殖有明显的促进作用。其中2种黄芪多糖对LPS诱导的鸡外周血B淋巴细胞增殖也有明显促进作用。实验所用的3种工艺生产的黄芪皂苷对LPS诱导的鸡外周血B淋巴细胞增殖均无促进作用。说明不同工艺生产的黄芪多糖和黄芪皂苷体外对鸡免疫细胞功能的影响有很大差异。     

Effects of Polysaccharides from Ferula sinkiangensis Root on Proliferation of Chicken Peripheral Lymphocyte and Spleen Lymphocyte in vitro

To investigate the effects of Ferula sinkiangensis polysaccharides (FSP) on cell proliferation of chicken splenic lymphocytes and peripheral lymphocyte in vitro. By the method of water extract-alcohol precipitation,total Ferula sinkiangensis polysaccharide (FSP_t) and 30%,50%,70% gradient alcohol precipitation of polysaccharides (FSP₃₀,FSP₅₀ and FSP₇₀) were extracted, and detected by phenol-sulfuric acid method and infrared spectroscopy method. The safe concentration of all classifications of polysaccharide were detected and the effect of FSP on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood were measured by MTT method. The results showed that the absorption peak of FSP were conformed to belong by polysaccharide compounds. Peripheral blood T lymphocyte proliferation test indicated that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with PHA could stimulate T lymphocyte proliferation under a certain concentration,and FSP_t showed a better proliferation effect. Spleen B lymphocyte proliferation test showed that FSP_t,FSP₃₀ and FSP₇₀ alone or cooperated with LPS could stimulate B lymphocyte proliferation under a certain concentration,FSP_t and FSP₇₀ showed a better proliferation effect. In conclusion,FSP showed the strong effect on lymphocyte proliferation of chicken spleen and peripheral blood in vitro,and that would be the materials for further research.     

Effect of Different Mulberry Leaf Extracts on Spleen Lymphocyte Proliferation in Mice

This experiment was aimed to compare the effects of different mulberry leaf extract on spleen lymphocyte proliferation in mice. Mulberry leaf polysaccharides (MLP-1, MLP-2, MLP-3, MLP-4 and MLP-5) were prepared with mulberry leaf aqueous extract (MLAE) by different concentration of alcohol deposit, polysaccharides concentration of all extracts were determined by phenol sulfuric acid method. Five different MLPs and MLAE were as the experimental drug, when polysaccharide concentration was 15.625, 31.25, 62.5, 125 and 250 μg/mL, the changes of spleen B and T lymphocytes proliferation in mice which were stimulated by MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation of drugs with LPS and PHA were determined by MTT method. The results showed that when polysaccharide concentration was in the range of 15.625 to 250 μg/mL, MLPs and MLAE in single or synergistical stimulation with LPS and PHA could stimulate the spleen B and T lymphocytes proliferation, MLP-1 at low concentration could stimulate significantly spleen B lymphocyte proliferation remarkably (P<0.05), and MLP-3 and MLP-5 at low concentrations showed strong stimulation ability of T lymphocyte proliferation. When MLAE was in synergistical stimulation with LPS at most concentrations points, the spleen B lymphocytes proliferation in mice were significantly higher than those of the cell control and LPS control groups, which revealed that MLAE could significantly improve the humoral immune function (P<0.05).     

中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响

为筛选增强免疫作用较好的中药成分和研制新型复方中药成分免疫增强剂，比较了4种浓度的当归多糖（CAPS）、黄芪多糖（APS）、板蓝根多糖（IRPS）、淫羊藿多糖（EPS）、蜂胶多糖（PPS）、淫羊藿黄酮（EF）、蜂胶黄酮（PF）、黄芪皂苷（AS）和人参皂苷（GS）9种中药成分对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明，多数中药成分能促进淋巴细胞增殖，其中APS、EPS、GS和AS等在一定浓度既能单独又能协同ConA或LPS刺激淋巴细胞增殖，以EPS和APS作用最强。同时根据浓度试验结果，选出各药的合适浓度，进一步比较它们作用的差异，发现EPS和GS效果最好。这些中药成分可以作为复方中药成分免疫增强剂的组分药。     

白花蛇舌草提取物对肉鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为了研究中药白花蛇舌草对肉鸡免疫力的调节作用,探讨其作用机理。在体外培养的肉鸡血液和脾脏淋巴细胞中加入不同浓度的白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮等成分,观测其对淋巴细胞增殖功能的影响。白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮分别在浓度为4 000 mg/L、1 000 mg/L~2 000 mg/L和5 mg/L~100 mg/L时对鸡血液淋巴细胞有明显的刺激增殖作用(P0.05),在浓度为200 mg/L~800 mg/L、10 mg/L~1 600 mg/L和25 mg/L~50 mg/L时对鸡脾脏淋巴细胞的增殖具有明显的刺激作用(P0.05)。研究结果说明白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮对体外培养的肉鸡淋巴细胞的增殖均有促进作用。     

4种中药多糖对免疫雏鸡黏膜免疫功能的影响

为了探讨4种多糖增强雏鸡黏膜免疫的作用和机理.将450羽罗曼公鸡随机分成9组,14日龄用新支二联弱毒苗点眼滴鼻,同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、牛膝多糖(AIRPS)和山药多糖(CYPS)溶液,对照组注射生理盐水,连续注射3 d,1次/d.于免疫后第10 d、20 d、30 d、40 d、50 d和60 d每组随机抽取5羽迫杀,刮取空肠黏液,用ELISA方法测定SIgA的含量;采盲肠扁桃体和十二指肠.用免疫组织化学法测定盲肠扁桃体和肠绒毛SIgA细胞阳性面积.实验结果表明:4种多糖均能显著提高空肠黏液中SIgA的含量和盲肠扁桃体、小肠绒毛的SIgA阳性细胞数,低剂量的APS、IRPS的效果优于高剂量的ARPS、CYPS.提示4种多糖均可以有效地增强黏膜的屏障作用,从而提高机体抗感染能力.     

黄芪多糖和淫羊藿多糖对培养细胞增殖和衰老的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖(astragalus polysaccharide，APS)和淫羊藿多糖(epimedium polysaccharide，EPS)分别加入到培养12h和24h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，测定加药后CEF增殖率和成层率的动态变化。结果表明，2种多糖均能促进细胞增殖和延缓细胞衰老，EPS的作用强于APS，具有一定的量效、时效关系。     

鬼臼多糖的分离纯化及药理学活性

目的：分离纯化鬼臼多糖（PEP）,测定PEP的单糖组成,观察PEP对小鼠脾脏、胸腺指数、溶菌酶含量及脾脏淋巴细胞增殖的影响.方法：用热水抽提及醇沉法纯化鬼臼多糖,采用纸层析法和红外光谱对PEP的组成进行研究,用比浊法测溶菌酶含量,用MTT法研究PEP对脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果：PEP的得率为60%,PEP含有葡萄糖、果糖、甘露糖、和阿拉伯糖,红外光谱扫描表现出一般多糖类物质的特征吸收峰.PEP能够提高脾脏指数,但对胸腺指数和血清中的溶菌酶含量的影响不明显.MTT结果显示,PEP能够显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且与ConA有协同作用.     

不同日龄鸡脾脏中T淋巴细胞增殖功能的动态观察

本研究采用四甲基偶氮唑盐淋巴细胞转化实验法对不同时期鸡的脾脏中T淋巴细胞的增值功能进行检测。结果发现,在胚胎20日龄和出壳后1日龄刀豆蛋白刺激组的A值很小,但到4日龄时A值迅速增大,到7日龄时达到最大,随后又减小,直至35日龄时趋于稳定。由于T淋巴细胞的增殖功能与其鸡免疫功能呈正相关,所以说脾脏中T淋巴细胞的细胞免疫功能随着日龄增长基本呈现逐渐增强的趋势,并在7日龄时达到成熟水平。