水提大孔吸附树脂柱色谱法制备桔梗总皂苷

系统研究了影响水提取桔梗总皂苷的各种因素 ,据此建立水提大孔吸附树脂柱色谱制备桔梗总皂苷的方法 ,即 :桔梗粉末 (840 μm)共加 2 0倍量水提取 3次 ,每次 0 .5h ,滤液行大孔吸附树脂柱 ,用水 乙醇溶剂系统洗脱 ,分离得到桔梗总皂苷 ,结果平均得率为 1 .60 3 %。该法操作简单、快速且成本低 ,适于工业化生产。     

大孔树脂吸附法高通量快速提取微生物次生代谢产物

为建立一种适合药物高通量筛选的快速提取微生物代谢产物中小分子化合物的方法,采用弱极性AB-8和中等极性ADS-17大孔吸附树脂从细菌发酵液吸附小分子代谢产物,并用50%乙醇溶液将吸附的小分子化合物洗脱下来,干燥后用二甲基亚砜溶解备用;应用流感病毒神经氨酸酶作为抗流感病毒药物筛选的靶标,MUNANA作为底物,测定发酵液中活性物质对神经氨酸酶的抑制活性。优化了神经氨酸酶抑制试验条件,底物500倍稀释、病毒用量1μLp、H 6.0为最佳反应条件。证实了大孔吸附树脂吸附法纯化的微生物发酵液中小分子化合物粗提物具有不同程度的流感病毒神经氨酸酶抑制活性。与直接使用发酵液及用有机溶剂乙酸乙酯提取法比较,用大孔吸附树脂吸附法制备的细菌代谢产物的抗流感病毒神经氨酸酶活性明显好于直接使用发酵液。该方法与乙酸乙酯提取法效果相当,但制备更简便,能实现高通量筛选。     

DM130大孔吸附树脂富集葎草中总黄酮的工艺研究

[目的]研究DM130大孔吸附树脂纯化葎草总黄酮工艺并采用梯度洗脱HPLC法测定各洗脱组分中牡荆素、木犀草素和大波斯菊苷的含量。[方法]通过单因素分析考察DM130大孔吸附树脂分离、纯化葎草总黄酮的最佳工艺条件。HPLC检测波长为350 nm,流速1 ml/min,温度25℃,色谱柱为Hanbon Kromasil C_8色谱柱（250.0 mm×4.6 mm,5.0μm）,流动相A为水相（甲醇：水：甲酸=30：70：0.1）,流动相B为有机相（0.1%甲酸甲醇,即每100 ml甲醇含0.1 ml甲酸）。[结果]DM130树脂具体工艺条件为控制上样浓度0.2mg/ml,流速2.0 BV/h,上样液pH值为6,洗脱用水4.0 BV,50%乙醇共3.5 BV进行洗脱,洗脱流速2.0 BV/h;牡荆素进样浓度在0.16～20.00μg/ml,大波斯菊苷进样浓度在0.16～20.00μg/ml,木犀草素进样浓度在0.40～50.00μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。[结论]DM130型树脂在此工艺条件下,纯化葎草总黄酮效果良好,总黄酮回收率可达近88%,各洗脱组分中牡荆素、木犀草素、大波斯菊苷含量不同。     

硅胶表面霉酚酸分子印迹聚合物的合成及应用

【目的】合成一种对霉酚酸具有特异性识别的分子印迹聚合物吸附材料,用于青贮饲料中霉酚酸的净化、富集和分析检测。【方法】以γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(γ-MPS)改性的硅胶为载体、霉酚酸酯为虚拟模板,合成硅胶表面接枝分子印迹聚合物,采用扫描电镜对制备材料进行表征,通过平衡吸附试验评价材料吸附特性。建立基于合成的分子印迹聚合物固相萃取-高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)法检测青贮饲料中霉酚酸。【结果】改性硅胶表面成功包裹一层印迹聚合物。静态吸附试验表明,印迹材料饱和吸附量为4.5 mg/g;动态吸附试验表明,该材料吸附速率快,60 min内即达到吸附平衡。基于该印迹材料作为固相萃取吸附剂建立了HPLC法,霉酚酸的回收率为76.0%～81.2%,相对标准偏差小于7%,检测限达60μg/kg。【结论】制备的硅胶表面霉酚酸分子印迹聚合物可特异性吸附霉酚酸,建立的分子印迹聚合物固相萃取–HPLC法可用于日常青贮饲料中霉酚酸的分析测定,了解青贮饲料被霉菌毒素污染的状况。研究结果可为青贮饲料的质量安全控制提供指导。     

人参皂苷Ro的制备及含量测定

建立快速制备人参皂苷Ro的方法,并对人参的不同种类、不同部位、不同组织及鲜人参储藏过程中人参皂苷Ro的含量变化进行测定。采用D101大孔吸附树脂柱、中压柱层析等方法分离制备人参皂苷Ro,HPLC法测定人参皂苷Ro的含量,LC/MS分析结果。中压柱层析法制备人参皂苷Ro效果好,简单快速。人参皂苷Ro的含量差异为:生晒参鲜人参蜜制参红参;芦头支须主根毛须;表皮韧皮部木质部;随储藏期的延长人参皂苷Ro含量减少。     

建立矮膜苞芹HPLC指纹图谱

【目的】建立矮膜苞芹药材高效液相指纹图谱,为矮膜苞芹药材的质量控制及开发利用提供科学依据。【方法】采用HPLC法,WondaCract ODS-2 C₁₈色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm),流动相乙腈: 0.1% 甲酸水梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长283 nm。测定10批药材的指纹图谱,运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》和统计软件中聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法-判别分析对指纹图谱进行分析。【结果】标定出共有色谱峰13个,10批药材中有7批指纹图谱的相似度 >0.9。【结论】建立了矮膜苞芹指纹图谱共有模式,所建立的方法具有良好的精密度、稳定性和重复性。     

大孔吸附树脂纯化荭草花旗松素

比较8种大孔吸附树脂对荭草花旗松素的静态吸附和解吸效果,优化最佳树脂分离纯化荭草花旗松素的工艺技术参数。结果表明:AB-8树脂对荭草花旗松素的吸附和解吸性能较好,对于浓度1.803 mg/mL的花旗松素提取液,AB-8树脂的静态吸附率为61.02%,解吸率94.60%,回收率57.72%;AB-8树脂分离纯化荭草花旗松素的动态吸附和解吸的最佳条件为上柱液浓度1 mg/mL、上柱液流速1 mL/min、洗脱液乙醇的体积分数75%、洗脱液流速1 mL/min、洗脱液用量100 mL;此条件下荭草花旗松素回收率为54.18%,纯度为74.51%。     

HPLC法测定不同产地甜叶菊中糖苷含量

采用HPLC法测定14份不同产地的甜叶菊样品中甜菊糖苷含量.利用大孔树脂吸附法提取甜叶菊中甜菊糖苷,HPLC采用Zorbax-NH2(250.0 mm x4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(78:22,体积比),梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃,测定波长210 nm;进样量15 μL.结果表明,HPLC法操作简便、高效快速、稳定性好;14份样品中甜菊糖苷总含量为4.78％～15.52％,其中瑞鲍迪苷A含量为0.84％ ～ 11.21％,瑞鲍迪苷C含量为0.26％～1.55％,斯替维苷含量为0.80％ ～6.66％,甜菊双糖苷含量为0.01％～1.22％,杜尔可苷含量为0～0.28％.     

薰衣草提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

为从薰衣草提取物中寻找潜在的治疗阿尔茨海默病的乙酰胆碱酯酶抑制剂。采用经乙醇提取,聚酰胺柱、HP20树脂柱及制备液相分离纯化后,得到30个薰衣草提取物,测定其多酚含量,并以石杉碱甲为阳性对照,采用酶标仪测定405nm处吸光度值以筛选其乙酰胆碱酯酶抑制活性并计算抑制率,分析二者相关性。结果表明:薰衣草提取物对乙酰胆碱酯酶表现出了不同的抑制作用(抑制率3.00%～82.78%),其中7个提取物作用较为显著,抑制率均大于50%;有4个提取物表现出了微弱的抑制作用(抑制率小于10%);另外,近一半的薰衣草提取物多酚含量大于20μg·mL-1。薰衣草提取物具有乙酰胆碱酯酶抑制活性,表明其含有抑制乙酰胆碱酯酶的成分,经过相关性分析,多酚可能不是起主要作用的活性物质,为进一步跟踪分离活性成分奠定基础。     

人参茎叶总皂苷对小菜蛾取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响

以人参(Panax ginseng C.A.Mey)茎叶总皂苷为试验材料,以小菜蛾(Plutella xylostella(L.))为试验昆虫,测定小菜蛾取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性。结果表明:人参茎叶总皂苷对小菜蛾取食有明显抑制作用;低质量浓度人参茎叶总皂苷能够激活小菜蛾体内多功能氧化酶系(MFO)活性,而高质量浓度人参茎叶总皂苷对小菜蛾体内多功能氧化酶系(MFO)活性具有抑制作用;人参茎叶总皂苷,能够抑制谷胱甘肽-S-转移酶及羧酸酯酶活性;低质量浓度时人参茎叶总皂苷对小菜蛾体内乙酰胆碱酯酶活性影响不大,中质量浓度能够抑制小菜蛾体内乙酰胆碱酯酶活性,而高质量浓度时抑制作用与中质量浓度相比有所减弱。     

山楂原花青素的大孔吸附树脂纯化及动脉血管舒张作用

为了比较HPD826氢键型吸附树脂比通用型D101树脂对极性较强的原花青素有较好的纯化作用,且采用树脂法制备的提取物是否具有确切的内皮依赖性舒张动脉血管的活性,本研究通过静态试验比较了2种大孔吸附树脂对山楂果中原花青素的吸附-解吸性能,HPD826型吸附量、解析率及吸附速率常数均优于D101型。用HPD826树脂通过动态试验优化了吸附分离程序,上样浓度为25 mg/mL,流速为1.5 BV/h,解吸程序为:水洗1.5BV;45%(v/v)乙醇解吸1.5 BV;90%乙醇活化洗脱1 BV;最后水洗2 BV,洗脱流速为1.5 BV/h。用这种程序,45%乙醇解吸部分的原花青素得率为81.48%,经HPLC测定,制备的提取物中以表儿茶素和原花青素B2为主,10种原花青素成分总含量达干重的42%,其对内皮完整的血管具有舒张作用,浓度在1.4～140 mg/L范围内。     

大孔树脂分离制备麦芽低聚糖

[目的]介绍大孔树脂吸附法制备麦芽低聚糖的技术。[方法]采用静态吸附与动态试验相结合的方式,研究大孔树脂对不同聚合度麦芽聚糖吸附能力的差异。[结果]大孔树脂可吸附2倍柱体积麦芽糖浆中的多糖,且所吸附多糖无法被去离子水洗脱,而只能用95%乙醇洗脱。所用大孔树脂可有效吸附麦芽糖浆中的低聚糖,且其对麦芽低聚糖的吸附能力与低聚糖的聚合度呈正相关;同时,大孔树脂所吸附的麦芽低聚糖可以被去离子水洗脱。在50～150 mg/ml范围内,麦芽糖浆上样浓度越低,大孔树脂对低聚糖的分离效果越明显。[结论]利用大孔树脂分离制备麦芽低聚糖是可行的。     

HPLC和UV法对比测定蚊不叮霜中VB1的含量

【目的】 对比研究高效液相色谱法(HPLC)和紫外可见分光光度法(UV)测定蚊不叮霜中维生素B₁含量。为高效、快速、准确测定蚊不叮霜中维生素B₁的含量奠定基础。【方法】 UV法的检测波长为246 nm,采用百分吸收系数法计算维生素B₁的含量;HPLC法检测波长为267 nm,色谱柱选用C18柱。【结果】 UV法在7.47～14.94 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 3),精密度实验RSD=0.30%,重复性实验RSD=1.04%,平均回收率105.13%,RSD=1.72%,样品在处理后30 min内稳定(RSD=0.91%);HPLC法在4.85～11.31 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),精密度实验RSD=0.28%,重复性实验RSD=0.90%,平均回收率101.77%,RSD=1.93%,样品在处理后12 h内稳定(RSD=0.39%)。【结论】 HPLC法测得三批样品的平均含量分别为8.39、8.39、8.45 mg/g;UV法测得三批样品的平均含量分别为8.73、8.70、8.77 mg/g。UV法及HPLC法的精密度、重复性均较好,但UV法测得含量及回收率均偏高,测定准确度不如HPLC法,且UV法稳定性较差,故最终确定采用HPLC法测定蚊不叮霜中维生素B₁的含量。     

大孔树脂分离纯化蛹虫草中虫草素工艺研究

考查了7种大孔吸附树脂对蛹虫草中虫草素进行吸附纯化效果,以高效液相色谱(HPLC)法测定样液中虫草素含量,筛选出适宜的树脂AB-8,研究了pH值等因素对该树脂静态吸附的影响,以及洗脱剂甲醇体积分数对静态解吸效果的影响,同时还研究了虫草素的动态吸附与解吸曲线。结果表明,AB-8树脂对蛹虫草中虫草素有良好的吸附纯化性能。当上样液pH值为5.0、吸附温度20℃、吸附液质量浓度为0.15 mg.mL-1、上样液量为10倍树脂柱体积及吸附流速为1.8 BV.h-1时,吸附效果最好。洗脱工艺条件为2.5倍树脂柱体积的15%甲醇。     

AB-8树脂吸附分离EGCG和ECG的研究

通过静态试验研究了7种树脂对表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)的吸附和解吸性能。试验结果表明,所选用的树脂对ECG的吸附率大于对EGCG的吸附率,其中AB-8树脂对EGCG和ECG的吸附差异最大。在静态试验的基础上,选择AB-8树脂为柱填料,以茶多酚为原料,获得吸附分离EGCG和ECG的最佳工艺条件是:上样茶多酚浓度10 mg/ml,流速12ml/min,柱高35 cm。该条件下制品中EGCG含量为80%,ECG含量为3%。     

模板替代法制备三聚氰胺表面分子印迹聚合物及其在牛奶样品固相萃取中的应用

本文以2－氯－4,6－二氨－1,3,5－三嗪为虚拟模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,在纳米硅球表面合成了特异性吸附三聚氰胺的表面分子印迹聚合物(MIPs)。采用红外光谱、电镜等手段对印迹聚合物进行了表征;用静态吸附曲线和Scatchard方程评价了印迹聚合物对三聚氰胺的吸附性能。将合成的表面印迹聚合物作为填料制备分子印迹固相萃取(MIP-SPE)柱,优化了固相萃取条件,与液相色谱串联质谱联用建立了牛奶样品中三聚氰胺的MIP－SPE－HPLC/MS/MS分析方法。实验结果表明,以2－氯－4,6－二氨－1,3,5－三嗪为虚拟模板制备的MIPs能够特异性吸附三聚氰胺,其MIP－SPE柱可以富集净化牛奶样品中的三聚氰胺,添加回收率为80.9％～86.5％,相对标准偏差小于6.4％,定量限(10S/N)为0.023 mg/L。     

大孔树脂纯化红芸豆种皮花色苷

[目的]研究大孔树脂柱层析法纯化红芸豆种皮花色苷的条件并对纯化产物进行高效液相色谱(HPLC)分析。[方法]通过静态吸附和解吸试验比较了AB-8、D101、SP825、NKA-9、XAD-16和HPD100这6种不同类型大孔树脂对红芸豆种皮花色苷的吸附和洗脱性能,优化了AB-8树脂纯化红芸豆种皮花色苷的工艺,HPLC对比分析纯化产物与粗提物。[结果]AB-8大孔树脂对红芸豆种皮花色苷吸附和洗脱性能较好,最佳上样流速为3.0 BV/h。最佳洗脱条件为pH 1.0、100%乙醇作为洗脱液,洗脱流速为4.5 BV/h,得到的花色苷纯度达86.05%。HPLC检测结果表明纯化效果明显。[结论]AB-8大孔树脂可有效分离红芸豆种皮花色苷。     

锁阳中儿茶素的富集及含量测定

[目的]建立从锁阳中富集儿茶素的方法,并对儿茶素含量进行测定。[方法]用50%乙醇对锁阳进行超声提取,提取物经大孔吸附树脂对儿茶素进行富集,并对儿茶素富集部位进行含量测定。HPLC工作条件为：色谱柱C18（250.0mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈∶0.2%乙酸15∶85（V/V）;柱温为室温;流速1ml/min,检测波长280nm。[结果]锁阳中的儿茶素主要集中在35%乙醇洗脱部分;阴性对照品与样品分离良好,儿茶素的线性范围为0.005～0.040mg/ml（r=0.9999）,回收率为98%,RSD为0.658%。[结论]用大孔吸附树脂可从锁阳提取物中高效地分离纯化富集儿茶素;HPLC检测方法可行,测定误差小,结果较准确,重现性好。     

大孔吸附树脂分离纯化葎草总黄酮的工艺研究

目的研究大孔吸附树脂纯化葎草总黄酮的工艺.方法采用D101、HPD300、HPD400、AB-8大孔吸附树脂时葎草总黄酮进行吸附纯化.以总黄酮的收率、质量分数为考察指标综合评价.结果AB-8大孔吸附树脂具有最佳的吸附洗脱参数.其动态饱和吸附-洗脱量达42.3mg/g,5倍体积蒸馏水、6倍体积50%乙醇依次洗脱,总黄酮收率为90%,质量分数为85%.结论 AB-8大孔吸附树脂对总黄酮综合性能较好,适合于葎草总黄酮的分离纯化.     

丹皮,泽泻混和物对黄粉虫幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活...

以中药材丹皮、泽泻及其混和物为饲料对黄粉虫幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响进行了研究。结果表明：丹皮能显著抑制幼虫体内的蛋白酶活性,在处理５ｄ后,也抑制幼虫的乙酰胆碱酯酶活性;而丹皮泽泻饮片混和物与泽泻相比,幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性没有受到显著影响,但与面粉相比,在一定时间内幼虫的蛋白酶活性受到了影响,说明丹皮影响了幼虫对蛋白质的水解作用,随着时间的延长对幼虫的神经传导也有影响;而混