不同浓度鸡粪嫌气发酵液对万寿菊生长和代谢的影响

每天用不同浓度的鸡粪嫌气发酵液（ＡＤＣＭＥ）处理种在温室中的万寿菊植株。结果,用１．６８％～３．３６％ＡＤＣＭＥ处理的植株地上部鲜重最高,开花最多,但用０．５６％浓度处理的根鲜重最高。收获时取植株中部叶片和根作为样品进行生理生化分析,发现叶片和根中细胞膜相对透性和Ｐｉ含量,过氧化物酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性以及根中蛋白质、ｐＨ和多酚氧化酶活性在一定范围内随着ＡＤＣＭＥ处理浓度的提高而提高。地上部鲜重较高、开花较多的处理,植株叶片中的叶绿素、类胡萝卜素和Ｐｉ含量,根中的多酚氧化酶活性以及根、叶中过氧化物酶、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性也较高。出现盐中毒症状的处理,植株根中的细胞膜相对透性和过氧化酶活性以及叶片中的Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性显著高于其它处     

小麦花药中Mg^2＋—ATP酶的细胞化学定位及其热稳定性

以冬小麦农大９３（单核期花药）为实验材料,运用Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶电镜细胞化学定位方法对高温（４５±０．５）Ｃ处理（０～３０ｍｉｎ）后花药的Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶变化特点观察结果表明：单核期花药中不同部位的Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性表现为绒毡层细胞酶活性〉乌氏体和小孢子外壁及其内膜〉表皮、内壁和中层。高温处理绒毡层细胞、小孢子质膜和细胞器膜最易破碎,并伴随ＡＴＰ酶活性下降,其下降幅度明显高于其他部位。     

几种离子对豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶活性和最适PH值的影响

在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ８．０的１００ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，当离子浓度＜１５０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｋ＋和Ｎａ＋离子是豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶（ＡＳＡＬ）的激活剂，其最适浓度约为７５ｍｍｏｌ／Ｌ，可分别提高酶活性４０％和３５％。Ｍｇ２＋离子是ＡＳＡＬ的抑制剂，能拮抗Ｋ＋和Ｎａ＋离子的激活效应。ＨＰＯ二４离子可显著降低酶活性，抑制效应与ＨＰＯ二４离子浓度呈正相关。在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ６．６～８．０的１００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为７．４，而在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ７．４～８．６的Ｔｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为８．２。     

根霉植酸酶的分离纯化和酶学性质研究

根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｓｐ．）ＭＲ０２０菌株所产胞外植酸酶,经硫酸铵分级沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ离子交换层析,获得了２种植酸酶同工酶,其相对分子质量分别为３４０００和４００００,等电点分别为３．４８和３．８５。二者作用的最适温度均为５５℃,最适ｐＨ分别为２．６和４．６。Ｃａ＾２＋,Ｆｅ＾２＋和Ｍｇ＾２＋对酶有激活作用,Ｃｕ＾２＋和ＮＢＳ＾２对酶有抑     

草菇多酚氧化酶及过氧化物酶特性的研究

草菇多酚氧化酶（ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ）与过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）的最适ｐＨ分别为６０～６８、６７～７４,最适温度分别为３０～３２℃、２５～２８℃在最适条件下,前者的活性远高于后者,当ｐＨ８６及温度４３℃或４８℃处理１ｍｉｎ,二者活力显著降低;但是,先在３５～３８℃保温１ｈ再测定,发现二者的最适温度分别达４０～４１℃、５２～５３℃,升温至８０℃１０ｓ,过氧化物酶仍表现活性Ｏ２对多酚氧化酶活性影响极大,而对过氧化物酶活性影响较小金属离子Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋对二者均有强烈激活作用,Ｃａ２＋对二者的作用都很弱,Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋对前者作用明显强于后者二者的反应进程及酶浓度与反应速度的关系,表现出较大的差异     

LaCl3,PrCl3对菠菜光合放氧及叶绿体ATP酶活性影响的研究

用２ｍｍｏｌ／ＬＬａＣｌ３、ＰｒＣｌ３处理菠叶片，促进新，老叶片光合放氧速率，ＬａＣｌ３的作用较为明显。０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＬａＣｌ３对光激活的Ｃａ＾＋＋－ＡＴＰ酶活性有较明显的促进作用，ＰｒＣｌ３则对光激活的Ｃａ＾＋＋－ＡＴＰ酶和ＤＴＴ激活的Ｍｇ＋＋－ＡＴＰ酶同时具有较大促进作用。     

内毒素诱导的山羊红细胞膜和肝线粒体膜Ca~(2 )-ATP酶活性的改变及654-2的保护作用

通过静脉注射的方法研究了大肠杆菌内毒素（ＥＴ）对山羊红细胞膜和肝粒体膜损伤的膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的变化及６５４－２（山莨菪碱）的保护效应．结果表明,ＥＴ处理组（Ⅱ组）在１ｈ,３ｈ红细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性高于对照组（Ⅰ组）（ｐ＜００５）,５ｈ有下降趋势且持续到９ｈ．１２ｈ开始回升并低于Ⅰ组（ｐ＜００１,ｐ＜００５）．６５４－２处理组（Ⅲ组）,Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性除在９ｈ、１２ｈ与Ⅰ组,在３ｈ与Ⅱ组差异不显著（ｐ＞００５）外,均高于Ⅰ组和Ⅱ组（ｐ＜００１,ｐ＜００５）．在肝线粒体中,Ⅱ组Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性在５ｈ、１２ｈ均低于Ⅰ组和Ⅱ组（ｐ＜００５,ｐ＜００１）,Ⅲ组Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性均高于Ⅰ组,但１２ｈ与Ⅰ组差异不显著（ｐ＞００５）．结果提示,ＥＴ具有诱导膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性先激活后顿抑的效应,而６５４－２有明显保护膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的作用．     

猪肺炎霉形体细胞膜的制备方法

本文针对常规低渗破膜效率较差这一特点，从膜纯度，膜产量，膜毒力三方面入手进行了三种细胞裂解方法的比较研究。表明：超声法膜蛋白产量和膜ＡＴＰａｓｅ活性分别比低渗膜提高１０．１３％、２９．６％，但膜毒性降低；低渗超声膜相应指标分别比低渗膜提高１６．７９％，２．９８％，而且膜毒性也有所改观，对猪肺炎霉形体是一种比较理想的细胞裂解方法     

具有质膜ATP酶活力的大豆细胞壁碎片的制备

通过反复洗涤与低速离心，从大豆下胚轴得到的细胞壁碎片具有ＡＴＰ酶活力，酶活依赖于Ｍｇ＾２＋的存在，受Ｋ＾＋刺激和钒酸钠的强烈抑制，经加ＫＩ的悬浮液洗涤，碎片ＡＴＰ酶受叠氮化钠抑制很少，几乎不受硝酸盐抑制，表明所得的ＡＴＰ酶基本上膜ＡＴＰ酶，本方法简化了质膜的制备过程，在质膜及质膜ＡＴＰ酶的生理研究中有较高的应用价值。     

LaCl_3、PrCl_3对叶绿体光合磷酸化偶联因子活性影响的研究

用０．１５ｍｍｏｌ／ＬＬａＣ１３、ＰｒＣ１３对提取的菠菜叶绿体处理后，测定了Ｃａ＃一ＡＴＰ酶、Ｍｇ＃－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＬａＣ１３处理后的叶绿体Ｍｇ＃－ＡＴＰ酶、Ｃａ＃－ＡＴＰ酶活力均高于对照。其相对活力分别为１０５．３，１５１．４；ＰＣＩ１３处理后的叶绿体Ｃａ＃－ＡＴＰ酶、Ｍｇ＃－ＡＴＰ酶相对活力分别为１３２．３、１３５．０。说明，ＬａＣ１３对Ｃａ＃－ＡＴＰ酶活性具有较大的激活作用，而ＰｒＣ１３对于Ｃａ３＃、Ｍｇ＃－ＡＴＰ酶活性均具有较大的激活作用。２ｍｍｏｌ／ＬＬａＣ１３．ＰｒＣ１３处理的叶片（真空渗入法）照先２０分钟后，无机磷含量均明显低于对照。说明ＬａＣ１３、ＰｒＣ１３对于菠菜光合磷酸化具有明显的促进作用。这种作用是对ＣＦ１因子激活而产生。     

雾化对猪支原体肺炎活疫苗活力的影响

为研究经喷雾器雾化对活疫苗微生物学活性的影响,用变色单位(CCU)法分别对经过不同压力雾化前后的猪支原体肺炎活疫苗活力进行测定,结果表明,喷雾器在雾化过程中的切割力能显著降低疫苗的活力.喷雾器喷射压力越大,对疫苗活力下降的影响越大.     

鼓室碘附应用对豚鼠内耳Mg^2＋ATPase活性研究

在豚鼠鼓宝应用碘附以探讨外用消毒药物对内耳损伤的发病机理,实验表明:用药后能致血管纹、柯替氏器毛细胞Mg~(2+)ATPase活性下降。Mg~(2+)ATPase即镁泵,属糖蛋白,定位于线粒体及细胞膜上,反映细胞线粒体需能供能代谢情况。碘附对内耳毒性作用是I~+透入内耳卤化蛋白质,使Mg~(2+)ATPase失活,可引起听功能障碍。     

沟眶象纤维素消化酶的分布及金属离子对其活性的影响

[目的]研究金属离子对沟眶象纤维素酶系活性和消化生理的影响。[方法]以酶学分析方法研究了沟眶象消化道纤维素消化酶的分布和Hg2+、Ca2+和K+、Fe2+等7种金属离子对沟眶象肠道纤维素酶活性的影响。[结果]94%Cx酶9、2%C1酶、95.1%-β1,4葡萄糖苷酶存在于沟眶象中肠。在试验浓度范围内(0.1~5.0 mmol/L),处理24 h后,6种金属离子对纤维素酶各组分酶活性具有不同程度的抑制作用,且随浓度的升高而增强,其中Hg2+、Cu2+、Zn2+和Mn2+抑制作用较强,Fe2+对纤维素酶活性有明显的激活作用;处理7 d后,7种金属离子表现较强的抑制作用,在低浓度下Fe2+可使C1酶、-β1,4葡萄糖苷酶活性微弱增强,高浓度表现为抑制作用。[结论]该研究为有效控制沟眶象提供科学依据。     

硝酸镧对人工接种vMDV雏鸡红细胞膜ATPase活性的影响

对1日龄雏鸡人工感染马立克氏病毒,观察不同剂量的硝酸镧对SPF雏鸡红细胞膜ATPase活性的影响。结果表明,硝酸镧对红细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase活性均有增强作用。表明硝酸镧可通过改变细胞膜上ATPase活性发挥抑制鸡MD肿瘤的作用。     

金属离子对4PCA饲料酶中木聚糖酶活性的影响

[目的]为酶制剂的稳定性研究及其在饲料工业中的应用提供依据。[方法]选取K+、Na+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Mn2+、Cu2+和Fe2+8种金属离子,浓度设计为1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L,研究金属离子对4PCA饲料复合酶中木聚糖酶活性的影响。[结果]浓度为1×10-4mol/L时,8种金属离子对木聚糖酶活性无明显影响。浓度为1×10-3mol/L时,Cu2+使木聚糖酶活增至125.8%,Mn2+使木聚糖酶活降至54.5%。浓度为1×10-2mol/L时,Zn2+使木聚糖酶活增至121.5%,Mn2+、Cu2+、Fe2+分别使木聚糖酶活降至40.6%、67.7%、88.9%。[结论]K+、Na+、Ca2+、Mg2+对木聚糖酶活性无特别影响,Zn2+有激活作用,Mn2+、Fe2+有抑制作用,Cu2+随着浓度的增加有先激活后抑制作用,3种离子的抑制作用由大到小依次为:Mn2+>Cu2+>Fe2+。     

猪支原体肺炎发生的品种敏感差异及分子基础

【目的】检测并验证猪支原体肺炎发生的品种敏感差异,筛选相关差异表达基因,探究猪支原体肺炎发生的分子遗传基础,为猪该病发生的分子机制研究提供依据。【方法】以对肺炎支原体易感的梅山猪、耐受的长白猪及二者杂交选育的苏钟猪为材料,设立试验组（15头/品种）和对照组（5头/品种）,试验组猪接种肺炎支原体 Js 强毒株,对照组猪注射等量生理盐水,所有猪隔离、无抗生素饲养,监测临床表现;处理后18、28 d测定日增重、抗体水平及肺部病变,28d试验结束时集中屠宰,评定肺部损伤,检测病原,确定肺炎支原体感染情况;选择肺炎支原体感染的梅山、长白、苏钟猪各2头,未感染猪各2头,构成芯片杂交试验猪群,应用Agilent猪表达谱基因芯片及品种内、品种间双重比较法,筛选差异表达基因,结合Gene Ontology（http://www. geneontology.org）及KEGG (http://www.genome.jp/kegg/)分析差异基因涉及的信号通路及调控网络。【结果】肺炎支原体处理后1-18d,试验组猪平均日增重显著低于对照猪 (0.01＜P＜0.05),尤以梅山猪较为典型;19-28d,体重出现负增长,平均日增重极显著低于对照猪(P＜0.01)。同时,病原处理后18d,长白猪和苏钟猪抗体水平变化不大,仍表现为阴性(s/p＜0.3),而梅山猪抗体水平则迅速上升至阳性水平(s/p ≥ 0.4),并显著高于长白、苏钟猪(均为0.01≤P＜0.05);处理后28d,梅山猪抗体水平高达（0.97±0.26）,极显著高于长白(0.15±0.10)、苏钟猪(0.46±0.20)(均为P＜0.01)。而试验组猪在病原接种后的18d,梅山猪有11头表现出明显的支原体肺炎临床症状,长白猪仅2头出现轻微咳嗽,苏钟猪则有5头出现咳嗽、精神萎靡等初期病状;处理后23d,试验组1头梅山猪死于肺炎支原体感染;处理后28d,试验组梅山猪全部表现出支原体肺炎症状,长白猪7头出现初期感染症状;苏钟猪5头症状典型,6头稍有咳嗽,其余无明显异常。猪肺炎支原体检测与上述结果大体一致。试验猪的肺部X-ray透射及病理剖检结果则表明：处理后18d,试验组15头梅山猪肺部均见云絮状阴影,其中6头为典型的肺炎感染影像特征;长白猪仅1头出现肺炎影像特征,4头现少量云絮状阴影;苏钟猪病变数量和程度介于长白、梅山猪之间。处理后28d,梅山猪全部表现为典型的肺炎感染影像特征,长白猪和苏钟猪则分别有7头、13头出现肺炎影像特征。肺部病理剖检评分显示,梅山猪极显著高于长白猪(P＜0.01),显著高于苏钟猪( 0.01≤P＜0.05)。表达谱芯片筛选结果表明,支原体肺炎患猪较健康对照猪表达上调基因49个,下调基因70个,涉及免疫反应、补体凝集、类固醇合成及代谢等18条信号调控通路。【结论】猪支原体肺炎的发生确实存在明显的品种间敏感差异,先天性免疫缺陷调控通路、Toll样受体信号通路及类固醇代谢通路在猪支原体肺炎感染炎症反应调控过程中发挥重要作用。     

枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质

对枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质进行了研究,结果表明:枯草芽孢杆菌凝乳酶作用的最适反应温度为55℃、最适pH值为5.0,在pH值为6.0时最稳定,在65℃保温60 min酶活基本丧失,Mn2+、Li+、Fe2+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+对该凝乳酶有促进作用,Mg2+、Ca2+促进作用较为明显,而Cu2+对该酶有明显的抑制作用;酶修饰剂中β-巯基乙醇对凝乳酶活力的影响较小,EDTA可抑制该凝乳酶的活力;蛋白酶抑制剂σ-phenantroline可以明显抑制酶活性,证实该酶为金属蛋白酶类。在与商品酶对比中发现枯草芽孢杆菌凝乳酶与商品酶的酶学性质相近。     

Cu2+、Cd2+、Hg2+对玉米幼苗生长和抗氧化酶活性的影响

【目的】研究必需元素Cu²⁺和非必需元素Cd²⁺、Hg²⁺对玉米幼苗生长及抗氧化酶活性的影响,探讨玉米抵抗重金属毒害的机理。【方法】用自来水(CK)及高(1 mmol/L)、中(0.5 mmol/L)、低(0.25 mmol/L) 3个浓度的重金属离子Cu²⁺、Cd²⁺、Hg²⁺溶液滴灌玉米幼苗,处理3 d后测定玉米幼苗根长和叶长、可溶性蛋白和叶绿素含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）的活性,并对根系和叶片中POD同工酶表达的变化进行电泳分析。【结果】与CK相比,3种重金属离子明显抑制玉米幼苗生长,提高根系和叶片中可溶性蛋白含量,对叶绿素含量的影响与其浓度有关。Cu²⁺对玉米根系中SOD活性无明显影响,Cd²⁺和Hg²⁺明显降低了根系中SOD活性。Cu²⁺使玉米幼苗根系中POD活性增强;低浓度Cd²⁺和Hg²⁺使玉米根系中POD活性增强,中、高浓度Cd²⁺和Hg²⁺则使玉米根系中POD活性减弱。重金属对根系中POD同工酶的影响表现为：Cu²⁺无明显影响,Cd²⁺减弱了Rb1和Rb2的表达,Hg²⁺则抑制了Rb1的表达,增强了Rb2的表达,且低浓度Hg²⁺诱导出了Rb3。重金属对叶片中POD同工酶的影响表现为：随着处理浓度的增大,Lb5表达增强,其中Cd²⁺的诱导效果最强;与CK 及Cu²⁺ 和Cd²⁺相比,Hg²⁺完全抑制了Lb6的表达。【结论】Cu²⁺、Cd²⁺、Hg²⁺对玉米生长及SOD和POD活性的影响,与重金属种类和浓度有关,并存在器官特异性。重金属中必需元素和非必需元素都会影响POD同工酶的表达,但作用机理不同。     

嗜热木聚糖酶酶学性质研究

[目的]研究嗜热木聚糖酶的酶学性质.[方法]考察了基因工程菌Rosetta(DE3)/pET28a-xynB64所产嗜热木聚糖酶反应的最适温度、最适pH,嗜热木聚糖酶的热稳定性、pH稳定性,以及不同金属离子对酶活力的影响.[结果]嗜热木聚糖酶的最适反应温度为110℃左右,最适pH为6.6,具有较广的pH稳定范围和非常好的热稳定性,高浓度的Mn2+、Mg2+、Ca2+对该酶有激活作用,Cu2+、Zn2+以及低浓度的Mn2+对该酶有抑制作用.[结论]研究可为嗜热木聚糖酶的广泛应用提供参考依据.