GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究

旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。     

SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究

旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。     

主动免疫GnRH疫苗对公犬生殖功能的影响

为了探究促性腺激素释放激素(GnRH)疫苗对公犬生殖功能的影响,试验将GnRH基因克隆至原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行蛋白鉴定,将鉴定正确的GnRH蛋白纯化后制备成抗原。选取6只2～4月龄健康公犬随机分成2组,每组3只,其中免疫组每只犬免疫GnRH蛋白1 mg,共免疫3次,每次间隔4周,分别于免疫前和一免、二免、三免后14天采血,通过ELISA检测血清GnRH抗体及睾酮水平,并于最后一次采血结束后制备睾丸组织切片,观察睾丸组织形态。结果表明：3次免疫后免疫组GnRH抗体水平均显著高于对照组(P<0.05),睾酮水平均显著低于对照组(P<0.05),免疫组睾丸相对较小,曲精小管中生精细胞数量较少,管径较细。说明主动免疫GnRH疫苗抑制了公犬的性腺发育和生殖器官的成熟。     

GnRH二聚体和GnRH并列二聚体合成肽疫苗对大鼠的免疫去势效果

为了比较GnRH二聚体和GnRH并列二聚体单次和两次免疫对雄性大鼠的免疫去势效果。将上述两种GnRH疫苗,分组免疫SD大鼠,免疫后每两周检测大鼠血清中的GnRH抗体滴度和血清睾酮水平、睾丸重量和组织结构变化。结果显示,两次免疫试验组的抗体滴度显著高于单次免疫试验组的抗体滴度(P<0.05);GnRH二聚体抗原免疫效果优于GnRH并列二聚体抗原的免疫效果,且差异极显著(P<0.01)。免疫组大鼠血清睾酮水平及睾丸重量均极显著低于空白对照组(P<0.01)。免疫去势效果显著的大鼠只数统计显示,GnRH二聚体(5/6)和GnRH并列二聚体(4/6)两次免疫均多于单次免疫(4/6和3/6)。同时,组织学观察结果可见,免疫组大鼠睾丸组织结构萎缩,曲精小管管径变窄,内部精母细胞脱落,精子变少或者没有。表明GnRH二聚体疫苗与GnRH并列二聚体疫苗均能达到去势效果,前者优于后者,两次免疫优于一次免疫。     

GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响

旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血清中睾酮、雌二醇及雄烯酮含量,采用高效液相色谱检测脂肪中粪臭素、雄烯酮和血液中雄烯酮含量,荧光定量PCR检测肝中粪臭素代谢相关基因mRNA表达量,ELISA检测肝中粪臭素代谢相关蛋白表达。结果显示,GnRH主动免疫后,血清睾酮浓度显著下降(P0.05),睾丸严重萎缩。免疫组和手术组公猪血清中睾酮、雌二醇、雄烯酮浓度和脂肪中粪臭素、雄烯酮含量相似(P0.05),均显著低于对照组(P0.05)。免疫组公猪肝中CAR、COUP-TF1、CYP2E1、CYB5A、CYP2C49、GSTO2mRNA表达变化与手术组相似(P0.05),均显著高于对照组(P0.05);CYP2A19mRNA表达量手术组显著高于免疫组(P0.05),免疫组显著高于对照组(P0.05);而PXR、SULT1A1mRNA表达量在3组间无明显差异(P0.05)。免疫组公猪肝中CYP2A19、CYP2C49和GSTO2蛋白表达变化与手术组相似(P0.05),均显著高于对照组(P0.05);CYP2E1和CYB5A蛋白表达量在手术组最高,对照组最低,免疫组介于两组之间,与两组均有显著性差异(P0.05);而SULT1A1蛋白表达量在3组间无明显差异(P0.05)。综上表明,GnRH主动免疫降低公猪血清中睾酮、雌二醇和雄烯酮含量,上调肝CYP450s和GSTO2基因和蛋白表达,加速粪臭素在肝中的代谢,从而降低公猪膻味。     

GnRH主动免疫与手术去势公猪的粪便Ca、P含量差异及机制研究

实验旨在探讨促性腺激素释放激素(GnRH)主动免疫与手术去势对公猪粪便Ca、P含量差异影响以及影响机制。选择30头10周龄、体重(27.62±2.18 kg)相近(大白×长白×杜洛克)公猪,随机分为对照组、免疫组和手术去势组,每组10头。其中,对照组不做任何处理,手术去势组公猪在出生1周内进行手术阉割,免疫组公猪于10周龄时耳后颈部肌肉注射2 mL 62.5μg GnRH肽当量去势疫苗,8周后加免。加免后饲喂8周屠宰所有公猪,进行血液生长相关激素浓度、小肠黏膜Ca、P转运载体基因表达及粪便Ca、P含量分析。结果显示:与对照组相比,公猪手术去势后十二指肠黏膜Ca转运载体瞬时受体阳离子通道亚家族V成员6(TRPV6)及质膜钙泵1(PMCA1)和P转运载体2B型磷酸钠协同转运蛋白(NPT2b)mRNA表达下调(P0.05),粪便中Ca、P含量增加(P0.05);而公猪GnRH主动免疫后上述Ca、P转运载体基因mRNA表达无显著变化,粪便Ca、P含量低于手术去势公猪(P0.05)。ELISA检测发现,GnRH免疫组公猪血清生长激素(GH)及胰岛素生长因子1(IGF1)浓度高于手术去势组公猪(P0.05),并且血清IGF1浓度与TRPV6、PMCA1及NPT2bmRNA表达呈正相关(P0.05)。结果表明,与外科去势相比,GnRH主动免疫不下调公猪肠道黏膜Ca、P离子转运载体基因表达,因而粪便Ca、P含量较低,这可能与其体内相对较高的GH-IGF1有关。     

家畜免疫去势研究进展

传统的手术去势技术正受到动物福利和规模化标准化畜牧生产需求的挑战,作为手术去势的优势替代方法,免疫去势能够很好地阻滞睾丸发育,控制性行为,避免手术带来的痛苦。免疫去势是采用免疫学方法破坏下丘脑-垂体-性腺轴的激素平衡,通过降低促性腺激素释放激素(GnRH)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)的水平,进而使性腺激素水平降低,最终抑制性腺功能,达到去势的目的。免疫去势分为激素免疫去势和基因免疫去势,其靶标经历了下丘脑-垂体-性腺轴自下而上的筛选,依次为睾酮、LH、FSH、GnRH、吻素-1(KISS-1),其中位于下丘脑-垂体-性腺轴上游的GnRH激素、GnRH和KISS-1基因3种靶标去势效果较好。免疫去势效果及机制的相关研究表明,免疫去势具有改善生产性能、安全和可逆的特点,但其可逆性机制还不清楚。去势导致肾上腺发挥代偿作用,但目前免疫去势的肾上腺代偿研究鲜见报道。文章首先介绍了几种靶标的免疫去势机制,其次对免疫去势的特点和应用进行了讨论,旨在为推动免疫去势技术在动物生产繁殖领域的应用提供理论依据。     

家畜免疫去势研究进展

传统的手术去势技术正受到动物福利和规模化标准化畜牧生产需求的挑战,作为手术去势的优势替代方法,免疫去势能够很好地阻滞睾丸发育,控制性行为,避免手术带来的痛苦。免疫去势是采用免疫学方法破坏下丘脑-垂体-性腺轴的激素平衡,通过降低促性腺激素释放激素（GnRH）、黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH）的水平,进而使性腺激素水平降低,最终抑制性腺功能,达到去势的目的。免疫去势分为激素免疫去势和基因免疫去势,其靶标经历了下丘脑-垂体-性腺轴自下而上的筛选,依次为睾酮、LH、FSH、GnRH、吻素-1（KISS-1）,其中位于下丘脑-垂体-性腺轴上游的GnRH激素、GnRH和KISS-1基因3种靶标去势效果较好。免疫去势效果及机制的相关研究表明,免疫去势具有改善生产性能、安全和可逆的特点,但其可逆性机制还不清楚。去势导致肾上腺发挥代偿作用,但目前免疫去势的肾上腺代偿研究鲜见报道。文章首先介绍了几种靶标的免疫去势机制,其次对免疫去势的特点和应用进行了讨论,旨在为推动免疫去势技术在动物生产繁殖领域的应用提供理论依据。     

羊促性腺激素释放激素主动免疫去势的研究进展

促性腺激素释放激素(GnRH)是由下丘脑神经内分泌小细胞产生的十肽激素,主要通过下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)参与调控动物的生殖活动,也可直接作用于性腺或其他器官发挥重要功能。GnRH免疫去势作为当前一种动物友好的去势方法在生产中应用和推广。本文综述了GnRH的分子结构和生物学功能、GnRH主动免疫的应用、GnRH免疫在改善公羊生产性能和繁殖性能上的研究进展,为进一步研究GnRH主动免疫在公羊繁殖中的作用提供一定理论支撑,以提高羊养殖业的经济效益和社会效益。     

GnRH一次性主动免疫对公猪血清睾酮含量的影响

采用以促性腺激素释放激素(GnRH)并列体(GnRH-tandem)为基本结构的免疫去势苗对公猪进行一次性主动免疫。结果表明免疫组的公猪睾酮浓度极显著地低于完整组;睾丸长度极显著地小于完整组;屠宰体重明显高于完整组。因此,GnRH一次性免疫有望取代传统的外科阉割,在实际养猪生产中得到推广和应用。     

重组CRM197-4GnRH去势疫苗抗原分子的原核表达及免疫效果评价

通过大肠杆菌表达系统对CRM₁₉₇-4GnRH重组去势疫苗抗原进行表达,采用不同种类佐剂制备疫苗,研究其对大鼠的免疫去势作用,为获得1种免疫效果好、有效期长、生产成本低的促性腺激素释放激素(GnRH)免疫去势基因工程疫苗提供借鉴。采用白喉毒素无毒突变体(CRM₁₉₇)与4拷贝GnRH串联,将CRM₁₉₇-4GnRH基因与表达载体连接,并通过优化试验确定大肠杆菌的最优表达条件,用SDS-PAGE和Western blot鉴定目标蛋白的表达情况。将融合蛋白与不同佐剂乳化,制备成9种测试疫苗后分别免疫大鼠,测定血清中GnRH抗体滴度和睾酮浓度。结果显示,重组大肠杆菌的最优表达条件为诱导时间表达5 h,培养基为LB液体培养基,IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L;通过SDS-PAGE和Western blot试验,表明目标融合蛋白已成功表达;动物试验结果表明,重组疫苗水包油包水佐剂组、重组疫苗油包水佐剂组、GnRH+Th抗原(辅助型T细胞抗原)表位(G1抗原)油包水佐剂组测试疫苗免疫大鼠较其他组GnRH抗体滴度显著升高、睾酮浓...     

维生素A、维生素C和维生素E混合物对浙东白鹅繁殖机能的影响

研究了添加VA、VC和VE混合物(1.5 kg/t饲料)对浙东白鹅繁殖性能、血浆激素浓度和下丘脑-垂体-性腺轴基因mRNA水平的影响。结果显示:饲喂维生素混合物可显著提高浙东白鹅第1产蛋周期蛋重和受精率(P<0.05),但对第2产蛋周期产蛋量、蛋重、受精率和孵化率影响有限;饲喂维生素混合物可提高浙东白鹅第2产蛋周期内血浆FSH、P4、HCG和赖抱期、恢复期E2的浓度,降低LH浓度,改变浙东白鹅产蛋周期内FSH波动规律(P<0.05),降低下丘脑内PRLR、垂体内PRL和卵巢内PRLR基因的mRNA水平(P<0.05),提高卵巢内ESR2基因的mRNA水平(P<0.05),对下丘脑内GnRH、垂体内PRL和FSHβ、卵巢内PRL、ESR1和FSHR基因的mRNA水平影响不显著。因此,VA、VC和VE混合物可以通过影响繁殖期内部分血浆激素浓度变化,下调生殖轴PRLR mRNA水平以减弱PRL信号,从而改善浙东白鹅的繁殖性能。     

GnRH及其类似物在动物繁殖中的应用概述

促性腺激素释放激素(GnRH)是由下丘脑神经内分泌小细胞分泌的能促进腺垂体分泌促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)的生殖激素,其类似物较多,在动物繁殖生产实际中也有着广泛的应用。本文阐述了促性腺激素释放激素(GnRH)的化学特性、生理功能及作用特点,同时着重对近年来国内外关于GnRH及其类似物在猪、牛及羊繁殖上的应用研究进行了综述,为更好地应用这一激素提供参考。     

不同佐剂GnRH疫苗主动免疫对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响

为探讨铝胶佐剂与白油Span佐剂的GnRH疫苗对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响,12头初生公猪随机分为GnRH疫苗铝胶佐剂免疫组和GnRH疫苗白油Span佐剂免疫组(下简称铝胶组和白油组).9周龄初免,17周龄加强免疫,25周龄屠宰.游标卡尺测量猪阴囊直径和睾丸大小,石蜡切片观察睾丸组织发育,ELISA法和放射免疫分析(RIA)法分别检测GnRH抗体水平和血清睾酮水平.结果表明,铝胶组与白油组GnRH抗体效价差异不显著(P0.05).铝胶组血清睾酮水平于17,21周龄(P＜0.05)和25周龄(P＜0.01)显著地低于白油组,阴囊直径,睾丸直径、横径、周长及睾丸血量均显著地低于白油组(P＜0.05).铝胶组与白油组猪睾丸曲精小管均出现不同程度的空泡化,白油组零星分布少量精子,铝胶组无精子产生.这表明在公猪免疫去势的效果上,辅以铝胶佐剂的GnRH疫苗比辅以白油Span佐剂的GnRH疫苗好.     

GnRH类似肽主动免疫后公猪生长激素水平及体重的变化

10头公猪在 3月龄时用促性腺激素释放激素并列体二聚体 (GnRH TD)主动免疫 ,观测内源GnRH被免疫中和后所产生的生长激素(GH)和体重的变化。注射GnRH TD与卵清蛋白 (OVA)的偶联物 2次 ,结果发现免疫组公猪外周血清中生长激素水平高于阴、阳对照组 ,公猪的生长速度极显著高于阴性对照组 (P <0 0 1 ) ,表明GnRH TD主动免疫能增加猪的体重     

GnRH-A免疫对兔去势效果的实验研究

探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)对动物免疫去势的效果和作用机理.用自制的GnRH-A抗原乳剂在30只兔(EG-Ⅰ与EG-Ⅱ组)的颈背部皮下分2～3点注射1.0 mL(100 μg·mL-1)GnRH-A抗原,EG-Ⅱ组3周后加强免疫1次.测定睾丸长度和质量,体质量变化,GnRH抗体效价与血清睾酮浓度.制备的抗原无菌性、安全性和物理性状良好,EG-Ⅱ组睾丸长度与EG-Ⅰ组差异极显著(P<0.01);EG-Ⅱ组的抗体水平也明显高于EG-Ⅰ组;免疫注射后2个试验组与对照组的血清睾酮浓度差异逐渐增加,102 d时EG-Ⅱ组血清睾酮浓度极显著低于对照组(P<0.01),且第28天后EG-Ⅱ组显著低于EG-Ⅰ组(P<0.05);EG-Ⅱ组雄兔的体质量和平均日增质量均最大,显著高于EG-Ⅰ组和对照组(P<0.05).GnRH-A免疫家兔对睾丸发育、血清GnRH抗体效价和睾酮浓度具有显著的影响,加强免疫效果更理想.     

GnIH与INH表位多肽疫苗主动免疫对甘肃高山细毛羊生殖激素的影响

本试验通过合成促性腺激素类的抑制激素——抑制素(inhibit hormone,INH)与促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibiting hormone,GnIH)的INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗,主动免疫甘肃高山细毛羊并对促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体素(luteinizing hormone,LH)激素水平进行比较分析。试验选用15只处在非发情季节的3.5岁的甘肃高山细毛羊,注射INH表位多肽疫苗与GnIH表位多肽疫苗分别为表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组,对照组注射等量生理盐水。采血后进行免疫,每隔7 d免疫和采血,同时在发情后每隔15 min采集一次血液,分离血清,用ELISA试剂盒检测抗体水平及FSH和LH激素变化。结果表明,表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组在初次免疫后都产生了相应的抗体,且表位多肽疫苗B组较表位多肽疫苗A组产生的抗体浓度高,75 、90、105 min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了FSH的分泌水平(P<0.05)。在45~105 min时,表位多肽疫苗B组相对表位多肽疫苗A组显著促进了LH的分泌水平(P<0.05),且在90到105 min时表位多肽疫苗A组和表位多肽疫苗B组血清中FSH和LH的水平均显著高于对照组(P<0.05)。本试验结果表明,INH表位多肽疫苗和GnIH表位多肽疫苗主动免疫促进了甘肃高山细毛羊的FSH、LH的分泌,GnIH表位多肽疫苗在甘肃高山细毛羊上具有更好的免疫作用,本研究为该表位多肽疫苗在绵羊上的运用奠定了基础。     

鹅不同繁殖时期GnRH和GnIH基因表达和激素浓度变化分析

旨在研究GnRH和GnIH基因和激素在鹅繁殖过程中的重要作用,本研究以产蛋性能差异显著的四川白鹅和溆浦鹅为试验材料,利用Real-time RCR方法检测产蛋前期、产蛋期和休产期两种鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中GnRH和GnIH mRNA的表达量;利用放射性免疫和酶联免疫吸附测定法测定血清中的GnRH和GnIH激素变化情况。结果表明:GnRH和GnIH基因在四川白鹅和溆浦鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中均有表达;产蛋前期和产蛋高峰期的下丘脑和卵巢组织中,四川白鹅的GnRH mRNA表达量显著(P0.05)或极显著(P0.01)高于溆浦鹅,在产蛋高峰期和休产期四川白鹅GnRH激素浓度也极显著(P0.01)或显著高于(P0.05)溆浦鹅,在高峰期和休产期四川白鹅GnRH血清浓度分别为51.13和51.10pg·mL-1,溆浦鹅分别为49.52和49.94pg·mL-1;GnIH在两种鹅的变化比较一致,仅在产蛋高峰期,四川白鹅下丘脑组织中GnIH mRNA表达水平极显著低于(P0.01)溆浦鹅,而两种鹅之间的GnIH激素在各个时期均无显著差异。这提示随着繁殖阶段的改变,在调控两种鹅产蛋性能的作用过程中GnRH可能较GnIH发挥着更为重要的作用,为进一步研究鹅繁殖分子机制奠定基础。     

东北林蛙(Rana dybowskii)越冬期的生殖激素动态研究

为了解东北林蛙在越冬期内生殖激素的动态,本研究自2013年11月至翌年3月每月从吉林市朝亮林蛙场采集雌、雄成体林蛙各10只,经处死后自心脏采集血液,分离血清,用酶联免疫法测定雄蛙血清中Gn—RH,FSH,LH和雄激素水平;测定雌蛙血清中GnRH,FSH,LH,孕酮和雌激素水平。结果表明:雌、雄林蛙血清GnRH水平在越冬期间均呈下降趋势,但雄蛙的GnRH呈现较大的波动性;血清FSH和LH水平呈现明显的上升趋势,且雌、雄蛙自1月至3月的变化剧烈;越冬期内,雌蛙血清中的孕酮水平呈明显上升趋势,而雌激素水平则呈波动性下降;越冬期雄蛙的血清雄激素水平波动明显,且1月份最高。本研究提供了林蛙在越冬期生殖激素水平发生着显著变化的依据,并揭示了生殖内分泌的基本动态规律,为林蛙养殖及生殖生理研究提供科学参考。     

抑制素主动免疫对大鼠生殖激素及卵巢发育的影响:Montanide和Freund’s佐剂效应比较

本研究采用新疆细毛羊抑制素成熟区序列重组融合蛋白(roINH)作为免疫原,以Montanide (MON)和Freund's (FA)作为佐剂,主动免疫SD大鼠,测定生殖激素及卵巢发育情况,评价佐剂效应.选用72只9～10周龄性成熟雌性SD大鼠,随机分为3组,分别皮下注射生理盐水(对照组)、roINH+ MON(MON组)和roINH+FA (FA组).各组大鼠每20 d免疫1次,连续免疫3次.结果,MON组产生的抗体滴度显著高于FA组(P＜0.05);与对照组相比,注射roINH+MON和roINH+FA均可极显著提高大鼠血清FSH平均含量(P＜0.01),显著提高P峰值(P＜0.05),而FSH及P平均含量及峰值在2个免疫组间无显著差异(P＞0.05);LH含量和峰值在2个试验组间无显著差异(P＞0.05); MON和FA组成熟卵泡数无显著差异(P＞0.05),但均显著高于对照组(P＜0.05);MON组脓包直径及炎症反应小于FA组.结果表明,应用roINH作为免疫原并配以MON或FA佐剂免疫大鼠均能取得较好的免疫效果,且MON佐剂炎症反应小于FA佐剂.