达氟沙星人工抗原的合成与鉴定

采用碳二亚胺偶联法将达氟沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)载体蛋白偶联,制备达氟沙星人工抗原DFLX-BSA和DFLX-OVA,并用FeCl3显色反应、紫外扫描和酶联免疫吸附试验对制备的人工抗原进行鉴定.结果表明:DFLX与BSA和OVA的偶联比为14: 1和16: 1时可成功地制备达氟沙星人工抗原.     

克伦特罗小分子半抗原偶联比率的测定方法研究

利用重氮化两步法将盐酸克伦特罗(CL)分别偶联到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得了免疫抗原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。建立了用紫外分光光度法测定偶联比率的方法,测得它们的偶联比率分别为39∶1和24∶1。     

多西环素人工抗原的合成与鉴定

建立多西环素人工抗原(Doxycycline,DOX)的合成及鉴定方法。采用戊二醛偶联法将DOX分别与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原(DOX-BSA)和包被抗原(DOX-OVA)。经SDS-PAGE电泳法、紫外可见吸收光谱鉴定,证实人工抗原成功合成,偶联比分别为8.6∶1和3.8∶1。结果表明建立了一种新的DOX抗原合成方法,为进一步制备特异性DOX抗体和建立检测食品中DOX的酶联免疫方法奠定了基础。     

赭曲霉毒素A完全抗原的制备及鉴定

赭曲霉毒素A(OTA)是一种对人和动物具有广泛毒性的霉菌毒素,为建立OTA在食品和饲料中的快速检测方法,采用活性酯法(NHS)将OTA与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备了免疫原OTA-BSA和包被原OTA-OVA。紫外扫描和SDS-PAGE鉴定表明,OTA与BSA和OTA与OVA偶联成功,偶联物OTA-BSA和OTA-OVA的偶联比分别为7∶1和4.5∶1。用免疫原OTABSA免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体,用OTA-OVA包被ELISA板进行检测,小鼠血清中抗OTA的抗体效价最高可达1∶51 200。表明制备的免疫原OTA-BSA具有良好的免疫原性,为OTA单克隆抗体的制备奠定了基础。     

河豚毒素免疫抗原的制备及其表征体系的建立

为制备最适偶联率的河豚毒素(TTX)免疫抗原,并建立其表征体系,本研究采用非变性SDS-PAGE及紫外分光光度分析方法,探索TTX-甲醛-牛血清白蛋白(TTX-HCHO-BSA)免疫抗原合成体系中的偶联时间、偶联剂添加量及TTX与BSA质量比等反应条件对TTX免疫抗原偶联率的影响,并筛选出最佳的反应条件,即反应时间为72h、偶联剂添加量为12%、TTX与BSA质量比为1:5时TTX免疫抗原偶联率较大。同时,应用QuantityOne凝胶分析软件建立了BSA-TTX免疫抗原的偶联率计算方法,并探讨该免疫抗原的表征体系。     

苯乙醇胺A人工抗原的合成及鉴定

采用重氮化法将苯乙醇胺A分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原苯乙醇胺A(PEAA)-BSA和检测抗原PEAA-OVA。经紫外扫描法和SDS-PAGE鉴定表明偶联成功,偶联比分别为15∶1、17.4∶1。用PEAA-BSA免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA法检测抗体效价,采用竞争ELISA法检测IC50值,获得了效价4.1×105以上、IC50值为0.2μg/L的多抗血清,证明合成了具有免疫原性的人工免疫原。     

氨苄西林人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备

为了建立氨苄西林(AMP)残留检测的免疫分析方法,试验采用碳二亚胺(EDC)法将AMP与经活化的牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别进行偶联,合成人工抗原AMP-BSA和AMPOVA,通过紫外光谱扫描对人工抗原进行鉴定,将AMP-BSA免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗体效价。结果表明:AMP与载体蛋白BSA和OVA偶联成功,并成功制备了鼠源AMP多克隆抗体,效价高达1∶64 000。     

兔血清白蛋白及其耐热肠毒素偶联物的制备

耐热肠毒素(STa)是产肠毒素大肠杆菌(ETEC)引起仔猪黄白痢的关键毒力因子,但其本身在动物体内无免疫原性。本试验为制备基于STa的完全抗原,首先采用利凡诺沉淀法纯化兔血清白蛋白(RSA),以RSA为载体,以戊二醛为交联剂,采用两步交联法制备STa与RSA的共价偶联物,再经凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联效果,测定偶联物分子量及偶联比。电泳结果显示RSA及其STa偶联物制备获得成功,偶联物呈单一条带,分子量约为108.5 KDa,STa与RSA偶联比(摩尔比)为20.5∶1。本试验结果可为制备抗STa特异性抗体、研发STa检测试剂盒、筛选STa减毒突变体及发展仔猪黄白痢类毒素疫苗提供必需的实验材料。     

酸性红73人工抗原的合成与鉴定

为进一步制备酸性红73新型人工抗原,试验采用N,N-羰基二咪唑(CDI)法合成酸性红73的免疫原和包被原,经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定偶联成功,酸性红73与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OA)的偶联比分别为9∶1和5∶1。免疫后所得兔源多克隆抗体,采取双向琼脂扩散实验和方阵滴定法确定包被抗原和抗体的最适工作浓度分别为1∶4000、1∶8000。     

盐酸克伦特罗人工抗原及抗体的制备

为了制备盐酸克伦特罗(CL)人工抗原及抗体,试验采用重氮化法将盐酸克伦特罗与经过活化的牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别偶联,合成免疫抗原(CL-BSA)和检测抗原(CLOVA),经紫外光谱扫描对偶联物进行鉴定;用免疫抗原免疫BALB/c小鼠制备盐酸克伦特罗多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗体效价。结果表明:盐酸克伦特罗人工抗原合成成功,制备的鼠源多克隆抗体效价达1∶64 000,该抗体可用于下一步试验。     

犬"站立行走"训练技巧

站立行走是在犬具有一定的基础能力之后，为了培养犬的平衡协调性，提高犬的灵活性和服从性的训练科目，常用于表演，主要适应于中小型犬的训练。     

怎样训练犬"随行"科目

警犬"随行"科目是警犬服从训练中的一个重要内容,是判定犬服从性好坏的重要依据."随行"顾名思义,就是犬跟随训犬员(主人)并排行进,在行进过程中,要求犬注意力集中,跟随节奏明显,不超前,不落后,姿态优美,兴奋性高.那么如何达到随行训练的标准和要求呢?     

对犬行为容易出现的误判

<正>保证警犬经常处于正常的工作状态之中,是训犬员的一项最主要任务。这项工作任务涉及的内容很多,其中一项就是时时从细微处入眼,注意防止对犬的行为出现误判。动物都会有心理反应,不管是高级动物,还是低级动物。警犬也是一样,它也时时处处在表现着、散发着种种心理。作为训犬员,如果能够