荸荠试管苗壮苗培育及小球茎再生研究

【目的】探讨荸荠试管苗壮苗方法和结球茎条件。【方法】以广西荸荠品种桂蹄1号试管苗为材料,分别进行不同蔗糖、PP333、温度等因素对荸荠试管苗壮苗及小球茎再生的影响。【结果】当6-BA偏低时（1.0mg/L）,在不同培养基中添加30.0～120.0g/L蔗糖,均可不同程度诱导荸荠试管苗形成小球茎,其中以30.0g/L蔗糖的效果最好;当蔗糖浓度过高时则抑制小球茎形成。当6-BA偏高时（2.5mg/L）,荸荠试管苗仅能诱导形成匍匐茎,而以添加80.0～100.0g/L蔗糖的效果较好。在添加NAA和IBA条件下,不同蔗糖量均能诱导荸荠试管苗长出匍匐茎,但添加30.0～60.0g/L蔗糖时可在匍匐茎顶端膨大形成小球茎,其中以30.0g/L蔗糖的诱导效果最好。在含有NAA和IBA的培养基中添加适宜的PP333（0.3～1.0mg/L）均能促进荸荠试管苗生根,并具有显著的壮苗效果,而对诱导荸荠试管结球茎数量影响不明显。在15～20℃条件下培养荸荠试管苗,添加蔗糖的培养基均未能诱导形成试管小球茎,而采用培养前20d温度28～30℃、培养后40d温度15～26℃条件,在培养基中添加生长素类或较低浓度6-BA时,含较低蔗糖量的培养基均能诱导较多的小球茎;当6-BA浓度较高时,仅能诱导荸荠试管苗长出匍匐茎。【结论】在MS＋NAA0.5mg/L＋IBA0.5mg/L＋蔗糖30.0g/L＋琼脂粉3.5g/L培养基中添加PP3330.3～1.0mg/L,均具有很好的壮苗效果。在适宜的温度条件下,添加适宜的6-BA或NAA和IBA或蔗糖（30.0g/L）均能诱导荸荠试管苗形成小球茎。     

PP333对唐菖蒲试管苗增殖和生根的影响

以唐菖蒲“超级玫瑰”(Rose supreme)的茎尖为试验材料,将MS 0.1 mg/L NAA 0.4 mg/L16-BA作为增殖培养基,1/2MS 1.5 mg/L IBA 0.01 mg/L NAA作为生根培养基,添加不同浓度PP333,结果表明:增殖培养基中添加1.0 mg/L PP333对唐菖蒲试管苗增殖生长有促进作用,减少超度含水态苗的发生;生根培养基中添加0.1 mg/L PP333对唐菖蒲试管苗生根壮苗有良好效应。     

青天葵组织培养球茎诱导的研究

【目的】研究蔗糖、大量元素和激素等浓度因素对青天葵(Nerviliae fordii)组培球茎诱导形成的影响。【方法】以青天葵球茎诱导形成的走茎,并切取生长端长度约为3 cm带节的茎段为试验材料。分别在以MS培养基为基本培养基,含不同蔗糖、KNO_3、NH_4NO_3、KH_2PO_4、6-BA、NAA和PP333浓度的培养基中培养,统计形成球茎的数量、直径和鲜重等指标。【结果】蔗糖浓度为40~50 g/L时球茎诱导效果较好;MS培养基中的大量元素,当KNO_3、NH_4NO_3、KH_2PO_4浓度分别为2800~2600、1650~1980和230~272 mg/L时诱导效果较好。在MS培养基中附加终浓度为0.5~2.5 mg/L NAA和0.4~0.6 mg/L PP333时,提高了青天葵组培球茎的形成速度且形成的球茎大小均匀;附加6-BA则不利于球茎诱导。【结论】筛选出的培养基和培养条件可有效提高青天葵球茎诱导效率。     

鄂西红豆离体培养及植株再生研究

【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为外植体,通过向培养基中添加不同质量浓度和配比的植物生长调节物质,筛选适宜的芽诱导培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基,并对诱导生根培养的试管苗进行炼苗移栽,观察其成活率。【结果】最适芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+维生素B10.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L,诱导率达85%;最适芽继代增殖培养基为WPM+6-BA 1.5 mg/L+KT 0.3 mg/L+TDZ 0.02 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L;无根苗壮苗培养基为WPM+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+IAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。当无根苗生长到4~5cm时形成完整植株并转接到生根培养基上诱导生根,最适生根培养基为1/2WPM+IBA 0.5mg/L+NAA 1.5mg/L+新型基因诱导生根剂0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。【结论】建立的鄂西红豆再生技术体系可获得75%~85%的正常萌芽,生根率达85%以上,瓶苗移栽成活率达90%。     

白芨试管球茎膨大培养基配方的筛选

【目的】筛选白芨试管球茎膨大培养基配方,为白芨的离体快繁和工业化生产提供参考依据。【方法】采用L9(34)正交试验和单因素完全随机试验设计方法,筛选适宜白芨试管球茎膨大的基本培养基、生长调节剂种类和浓度及蔗糖和活性炭浓度,确定白芨试管球茎膨大的最佳培养基配方。【结果】萘乙酸(NAA)和基本培养基对白芨试管球茎膨大的影响大于6-苄氨基嘌呤(6-BA),当NAA浓度为0.1 mg/L时,试管球茎膨大的各指标值均最大;6-BA对试管球茎膨大各指标值均无显著影响(P0.05);以1/2MS为基本培养基更有利于白芨试管球茎生根和膨大。蔗糖是影响白芨试管球茎膨大的重要因素,随蔗糖浓度增加,试管球茎逐渐膨大且根生长量及植株长势渐好,当蔗糖浓度为20.0～40.0 g/L时试管球茎增殖效果较佳。培养基中添加0.5 g/L活性炭的白芨试管球茎鲜重增殖率最高,为33.41%。相关性分析结果表明,试管球茎生根率与鲜重增殖率呈正相关,与高度增殖率呈显著正相关(P0.05);试管球茎萌芽率与鲜重增殖率、高度增殖率和直径增殖率均呈负相关,即生根对试管球茎膨大起促进作用,而芽分化对试管球茎膨大起抑制效应。【结论】1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖+0.5 g/L活性炭可作为白芨试管球茎膨大的最佳培养基配方加以推广应用。     

番木瓜实生苗茎段组培快繁条件的优化

【目的】探讨不同激素对番木瓜实生苗茎段分化的影响,为提高番木瓜繁育效率提供参考依据。【方法】番木瓜种子采用直接接种、无菌水处理18 h后接种等4种方式预处理获得最佳种子处理方式;再以获得的实生苗茎段为外植体进行芽诱导培养基、增殖壮苗培养基、生根培养基的优化筛选。【结果】经6-BA 1.0 mg/L与GA31.0 g/L等体积混合液浸泡18 h后接种的番木瓜种子发芽率高达93.3%,接种培养后污染率低至3.3%;适合番木瓜茎段芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖壮苗培养基为MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L,增殖系数最高达4.3,生根诱导培养基为MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L。【结论】MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L、MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L和MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L分别作为番木瓜实生苗茎段芽诱导、增殖壮苗和生根诱导培养基,可提高番木瓜实生苗茎段组培育苗效率。     

Study on Effect of PP333 on in vitro Rapid Propagation of Hydrangea macrophylla

以MS 6-BA2.0mg/L IBA0.5mg/L为增殖培养基,1/2MS IBA0.1mg/L为生根培养基,添加不同浓度的PP333,其结果表明:增殖培养基中添加0.1-0.5mg/LPP333对八仙花试管苗增殖和复壮均有效,而在生根培养基中添加0.05-0.5mg/LPP333有利于生根和移栽,其中以1/2MS IBA0.1mg/L PP3330.1mg/L培养基对八仙花试管苗生根和移栽有良好效应。     

多效唑、矮壮素对彩色马蹄莲试管微型种球诱导的影响

【目的】利用植物生长调节物质对试管苗种球进行诱导,提高彩色马蹄莲种球繁育效率和组培苗移栽成活率,缩短育苗时间,减少病害发生,降低生产成本。【方法】挑选苗高3.0～7.0 cm、根茎直径0.3 cm以上的试管苗,接入添加不同用量蔗糖（2%～8%）、多效唑（1～8 mg/L）、矮壮素（2~16 mg/L）的培养基培养90 d后统计成球率,筛选适合彩色马蹄莲试管微型种球诱导的培养基。【结果】在改良MS培养基中,在相同多效唑和矮壮素用量条件下,随着蔗糖用量的增加,彩色马蹄莲成球率呈上升趋势;随着多效唑、矮壮素浓度的升高,成球率均呈先上升后下降的趋势,分别以添加4 mg/L多效唑、8 mg/L矮壮素的诱导效果最好,其中以多效唑4 mg/L与6％蔗糖的处理组合成球率最高,达100％,且平均直径与鲜重最高,形成的种球最大（3.2 cm）。多效唑与矮壮素对试管苗叶片、根的分化和伸长有明显的抑制作用。【结论】在改良MS+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L固体培养基中添加合适配比的蔗糖和PP333或多效唑,均可以成功诱导彩色马蹄莲组培苗在试管中结球,而多效唑对球茎的诱导形成作用明显优于矮壮素。     

杂交相思组织培养研究初报

【目的】筛选杂交相思组织培养不同培养阶段的培养基配方,为实现杂交相思工厂化育苗提供技术参考。【方法】用杂交相思嫩茎为外植体,探究生长调节剂6-BA、NAA、IBA对其诱导出芽、继代增殖和诱导生根的效果。【结果】在不添加6-BA的情况下,添加0.2mg/LNAA时芽诱导率为60.0%,当添加0.2mg/L的6-BA后,诱导率为42.0%。当NAA为0~0.5mg/L时,随着6-BA的增加,增殖系数随之增加,6-BA为0.8mg/L时,增殖系数为4.2;当6-BA为1.0mg/L以上时,继代苗的增殖系数为1.0。以改良MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下添加0.5、1.0mg/L的IBA生根诱导率分别为17.5%、24.0%;以改良1/2MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下,添加0.5mg/L的IBA生根率为91.7%,当添加IBA为1.0mg/L时,生根率降到50.0%;生根苗移栽基质以黄心土与河沙或蛭石混合较好,移栽成活率在85.0%以上。【结论】改良MS＋NAA0.2mg/L培养基是较适宜芽诱导的培养基;改良MS＋6-BA0.8mg/L＋NAA0.5mg/L培养基较利于继代苗的生长;改良1/2MS＋NAA1.0mg/L＋IBA0.5mg/L培养基较改良MS培养基有利于诱导生根。     

白桃成熟胚试管苗培养研究

以白桃成熟胚为试验材料,无菌萌发获取试管苗,并筛选出试管苗培养最合适的增殖及生根培养基。研究结果表明,白桃试管苗培养最适合的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,增殖系数为3.45。生根率最佳诱导培养基为1/4 MS+IBA 0.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根率为82.22%。生根数最佳诱导培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L,生根数为5.96。     

马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁研究

【目的】探索马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁技术,为实现工厂化生产脱毒种薯提供技术支撑。【方法】采用茎尖培养脱毒法,以马铃薯顶芽为外植体,按不同灭菌时间进行单因子(3%NaClO和0.1%HgCl2)和双因子(75%酒精和0.1%HgCl2)消毒处理,再剥取0.3~0.7 mm茎尖接种到分别添加了不同浓度GA3、6-BA及6-BA和NAA的诱导培养基上诱导成苗。将诱导出的苗进行单腋芽切段快繁,并接种到添加有6-BA和PP333的单因子及双因子组合MS培养基中进行无菌苗继代增殖。【结果】75%酒精+0.1%HgCl2双因子灭菌较单因子3%NaClO和0.1%HgCl2效果好,污染率降至21.67%;茎尖诱导培养中,GA3和6-BA均能诱导茎尖萌芽,诱导趋势均先增后减,而以1.5 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA配合,诱导率达53.67%;增殖壮苗阶段,0.1 mg/L PP333和2.5 mg/L 6-BA配合,增殖倍数达6.59倍,且苗长势好,茎粗壮、叶色正常。【结论】桂农薯1号外植体消毒最佳灭菌处理为:75%酒精2 min+0.1%HgCl211 min;最佳茎尖诱导配方为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;适合继代增殖壮苗培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L PP333。     

鸡冠花的组织培养及试管苗开花诱导

以鸡冠花顶芽为外植体,采用不同激素组合对试管鸡冠花的芽诱导以及花诱导进行试验研究.结果表明:培养基MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L诱导的芽数量最多,而且芽生长表现较好,为最适芽诱导培养基;改良MS + 6-BA 0.2 mg/L + NAA 0.01 mg/L + PP333 0.5 mg/L诱导的花大且都集中在主茎上,花型紧凑美观,为最适的试管苗开花培养基.在组培的基础上采用多效唑(PP333)调控花芽的形成,将为目前市场上试管苗开花的商品化研究提供数据资料.     

胜利百号甘薯脱毒种苗离体繁殖培养基优化

以甘薯品种胜利百号脱毒试管苗为材料,以不同浓度的MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-BA、NAA和蔗糖,通过正交试验筛选胜利百号脱毒试管苗离体培养的适宜增殖培养基,试验结果表明胜利百号甘薯试管苗的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L;通过单因子试验筛选适宜试管苗根诱导及生长的基本培养基和NAA浓度,结果表明适宜的胜利百号试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

植物生长调节剂及培养条件对大花序桉试管苗玻璃化的影响

【目的】探明植物生长调节剂与培养条件对大花序桉试管苗玻璃化的影响机制,为解决大花序桉组织培养过程中玻璃化现象严重的难题提供一定参考依据。【方法】采用单因素试验设计和正交试验设计,研究植物生长调节剂(6-BA、NAA和IBA)及培养条件(培养基添加剂与培养条件)对大花序桉试管苗玻璃化的影响。【结果】6-BA、蔗糖、光照时间、温度是引起大花序桉试管苗玻璃化现象的4个主要原因;低浓度6-BA(≤0.3mg/L),大花序桉玻璃化率低(≤3.5%);适当提高蔗糖浓度能有效控制大花序桉试管苗玻璃化;增加光照时间、降低培养温度对防治玻璃化有一定作用。【结论】大花序桉最佳培养条件:在改良MS培养基(附加0.3mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA、0.15mg/L IBA、30g/L蔗糖、6g/L卡拉胶)的基础上,培养温度20～25℃,每天接受10～12h强度为2 500～4 000lx全光谱光照条件下培养,能有效控制大花序桉试管苗玻璃化率,且增殖系数较高,有效试管苗生长较快。     

草莓试管内诱导匍匐茎和高温处理结合茎尖培养脱毒技术研究

【目的】获得可用于生产的无病毒草莓种苗。【方法】在试管内对深山草莓花瓣愈伤组织分化产生的优良变异新品种的试管苗进行匍匐茎诱导,并采取试管内高温处理结合茎尖培养对该品种进行脱毒研究,应用均匀设计法对各步骤主要影响因子进行优化筛选。【结果】该草莓新品种试管苗匍匐茎诱导的适宜培养基为:LS+6-BA1.00mg/L+GA31.90mg/L+KT1.00mg/L,其诱导率为99.5%以上;将含有匍匐茎的试管苗在试管内于56℃条件下培养85d后,切取1mm的茎尖在培养基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L中进行茎尖愈伤组织诱导,然后将茎尖愈伤组织转接到培养基MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.05mg/L中进行愈伤组织芽苗再分化培养,对再生芽苗进行病毒检测,脱毒率为100%。【结论】利用试管内高温处理结合茎尖脱毒的方法可以完全脱除草莓病毒,从而建立了草莓脱毒体系。     

不同浓度NAA对紫皮石斛壮苗的影响

为了培育出健壮的紫皮石斛试管种苗,本试验以经过丛芽诱导培养的试管苗为材料,在MS培养基中添加0.4 mg/L 6-BA的情况下,设置不同浓度的NAA,以筛选出适宜壮苗的NAA浓度。结果表明,在MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 2.0 mg/L培养基条件下,即NAA浓度为2.0 mg/L时,紫皮石斛试管苗的壮苗效果最佳。     

马铃薯试管薯诱导因子研究

研究以马铃薯栽培品种郑薯2号和大西洋为材料,进行了试管薯诱导研究,结果显示:黑暗环境对试管薯形成是必要的;8%的蔗糖浓度适合诱导试管薯;在含8%蔗糖的MS培养基中添加6-BA 2 mg/L可提早结薯,且大小均匀;在含3%蔗糖的MS培养基中添加6-BA 4 mg/L诱导结薯的效果显著,但结薯期长且大小不均;在MS+6-BA 2.0 mg/L+8%蔗糖的培养基中添加50～100 mg/L的PP333后一定程度抑制试管薯形成.     

茶花凤仙瓶苗开花诱导机理研究

以茶花凤仙种子为外植体,获得无菌苗并进行增殖、壮苗培养和瓶内开花实验.结果表明:茶花凤仙的种子用1 g/L的氯化汞消毒9 min效果最好,成活率达到90％;采用正交试验设计方法筛选出无菌苗最佳增殖培养基配方为:MS+ 6-BA 0.6 mg/L+ NAA0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂10 g/L,增殖系数可达3.6;对茶花凤仙的壮苗情况来看,PP333的最佳质量浓度为0.75 mg/L,采用的壮苗培养基配方为:MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.3 mg/L+PP333 0.75 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂10 g/L;经过壮苗后的植株在MS(1/3 NH4NO3)+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.3 mg/L+ PP333 0.75 mg/L培养基上培养,开花率最好,达58％.采用组织培养方法获得无菌苗,并通过芽的增殖与壮苗培养,诱导其在瓶内开花,可为其优良品种的开发利用和快速繁殖提供技术支持.     

上饶早梨主栽品种离体快繁体系的建立

【目的】建立上饶早梨主栽品种六月雪和黄皮消的离体快繁技术体系,为上饶早梨试管苗的快速繁殖提供参考依据。【方法】对六月雪和黄皮消进行组织培养,筛选适宜的外植体、灭菌方式、培养基和移栽基质。【结果】六月雪和黄皮消理想的外植体为长7.0~8.0 cm的新生幼嫩带芽茎段,理想的灭菌方式为75%酒精消毒1.0 min+0.1%氯化汞消毒10~12 min,理想的腋芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,理想的不定芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L KT+0.2 mg/L NAA,繁殖系数为3.6~3.8,理想的不定芽生根培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+0.3 mg/L PP333+0.5 g/L AC(活性炭),理想的试管苗移栽基质为泥炭∶珍珠岩∶蛭石=4∶1∶1或腐殖土∶珍珠岩=5∶1,移栽后浇灌含0.5 mg/L PP333的MS基本培养液可显著提高试管苗成活率(P<0.05),驯化移栽成活率在90.0%以上。【结论】建立的六月雪和黄皮消离体快繁体系,可供上饶早梨组培苗工厂化生产参考利用。