利用远缘杂交转育青花菜细胞质雄性不育系的研究

利用杂交授粉后子房离体培养的方法克服了甘蓝型油菜与青花菜杂种后代杂种胚的衰亡,并通过组织培养技术获得了杂交后代;授粉后15天的子房离体培养效果最好;1/2MS为最佳的子房离体培养基本培养基。     

甘蓝型油菜与花椰菜种间杂种子房离体培养研究初报

在甘蓝型油菜×花椰菜种间杂种子房离体培养克服远缘杂交不孕的研究中,观察到不同基本培养基、离体培养时杂种子房的发育天数对杂交结实率有明显的影响。结果表明杂交授粉后12d的杂种子房离体培养效果最好,获得15粒种子,其中11粒种子能萌发成苗;培养基试验表明,1/2MS无机 B5有机 IAA1.5mg/L 蔗糖50g/L的培养基效果最好,结籽率达23%,种子萌发率达100%。     

芥菜型油菜与白菜种间杂种的获得与鉴定

以芸薹属植物芥菜型油菜和白菜为研究对象,对其进行常规正反杂交后子房的离体培养,通过离体子房培养获得的杂种种子经MS培养基诱导成苗,获得了芥菜型油菜与白菜的杂种F1代植株,表现出杂种优势;通过细胞学的方法,鉴定了杂种F1幼蕾体的细胞染色体数为2n=28,为母本芥菜型油菜(2n=36)和父本白菜(2n=20)的单倍体染色体数之和;芥菜型油菜与白菜常规杂交后,经离体子房培养获得了“胚性芽”,确立了植物胚挽救的另一种形式。     

百合不同离体授粉方法的杂交结实研究

为克服百合(Lilium ssp.)杂交受精前障碍,以5个杂种系品种和1个野生种为试材,采用离体柱头授粉、高体切割花柱授粉和离体子房授粉方法进行离体授粉杂交.结果显示,对于近缘杂交,离体柱头授粉的子房膨大率和结实率分别为30%和15%,高体切割花柱授粉的为15%和5%,离体子房授粉的为25%和5%;不同杂种系间杂交组合3种授粉方法的子房膨大率和结实率分别为17%和13%、3%和3%、10%和3%.百合杂交组合类型对高体授粉杂交结实率有明显影响;近缘杂交或系内杂交组合的子房膨大率和结实率高于远缘杂交(系间杂交)组合.在3种离体授粉方法中以高体柱头授粉的效果最好,其余2种方法的效果基本相同.采用胚培救方法获得了部分杂交组合的幼苗,经ISSR分子标记鉴定了杂种的真实性,表明通过离体授粉方法可以获得百合远缘杂交的真实杂种.     

大葱和洋葱种间杂种的获得及其特性

【目的】构建大葱和洋葱的种间杂种。【方法】以章丘大葱和洋葱自交系06-38为材料,进行远缘杂交,对杂种子房进行培养;利用CAPS技术对所获得植株进行鉴定;利用花粉染色法、离体萌发法和自交对其进行育性鉴定。【结果】大葱和洋葱正反交,自然状态下胚败育。在未添加激素的MS培养基上进行大葱与洋葱种间正反交后的子房培养,均获得种间杂种F1,授粉后第7天为最佳培养时期;通过子房培养分别获得了大葱×洋葱、洋葱×大葱杂种植株26株和22株;经CAPS检测,杂交后代全部为真杂种。F1杂种植株具有明显的杂种优势,杂种雄性不育。【结论】利用子房培养技术,克服了大葱和洋葱远缘杂种在自然状态下胚败育的情况发生,获得了种间杂种F1;所获得的杂种植株表现出明显的杂种优势,且雄性不育。     

油菜与芸芥属间杂种离体子房和胚培养研究

为建立芸薹属与芸芥属间杂种离体子房和胚培养的技术体系,运用4个亲和性较强的组合进行离体子房和胚培养,结果表明：在子房培养中,以授粉后6～8d处理的子房生长量最大,成胚数和成苗数最多．所有不同浓度和组合的激素,包括无激素培养基处理均获得了湘油15号与芸芥的杂种胚,以1．0m/LNAA 0．5mg/L 6-BA组合效果最好,在胚培养中,生长素和细胞分裂素对离体胚的发育有明显的促进作用,而附加成分(干酪素)单独使用时效果不明显,与生长素一起使用效果较好．子房培养和胚培养均能获得一定数量的苗,但通过苗期真假杂种的鉴定,24株真杂种均由子房培养所获得．     

切花百合杂种胚抢救方法

以东方百合杂种系(O)、亚洲百合杂种系(A)、麝香百合杂种系(L)部分品种为试材,采用子房切片培养、带胎座胚珠培养、胚培养3种方法对系间杂种幼胚进行抢救,并对系内杂种胚离体培养的影响因素进行研究。结果表明,采用子房切片培养和带胎座胚珠培养可使OA,LA型部分杂种胚萌发,且带胎座胚珠培养优于子房切片培养,采用胚培养可使OA,LA,LO型部分杂种胚萌发,最终仅1株LO型杂种苗继续生长,其余杂种苗褐化死亡;OO型杂种胚适宜在胚龄50 d培养,AA,LL型杂种胚适宜在胚龄40 d培养,且0.01～0.1 mg/L NAA的添加对胚萌发是必要的,6-BA是否添加在不同杂交组合中存在差异。     

百合不同远缘杂交基因型对胚培救效果的影响

选择目标性状清楚的亲本配制远缘杂交组合类型(O×O,O×A,O×L,O×野生种,O×L A),对不亲合组合10~20 d的授粉子房进行了离体培养。不同种间及种系间杂交组合类型对百合幼胚的萌发及植株再生有一定的影响:O×O,O×A杂交类型的授粉子房幼胚萌发率最高,O×野生种的幼胚萌发率最低。子房切片培养是较适用的培养方法,但需在发现胚萌发初期使其与子房壁剥离,以避免影响萌发杂种的真实性;胚培养效果还与培养条件有一定的关系,MS NAA 1 mg/L 蔗糖6% 琼脂6%,pH5.5是最适用的培养基,较适的培养室温度20±2℃,光照10 h/d,光照强度1000~1500 lx(1只日光灯);培养瓶采用不透气膜封口。胚培养后代以瓶内结球的形式出瓶后,成活率达100%。     

甘蓝与甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系杂交F1代的获得与鉴定

以甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系为母本,甘蓝为父本对其进行种间有性杂交,通过子房培养克服杂交障碍,获得F1杂交后代.对F1植株进行形态学、细胞学、RAPD及SSR分子标记鉴定,结果表明：获得的F1植株为具有萝卜d染色体的真杂种.     

甘蓝与甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系杂交F1代的获得与鉴定

以甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系为母本,甘蓝为父本对其进行种间有性杂交,通过子房培养克服杂交障碍,获得F1杂交后代.对F1植株进行形态学、细胞学、RAPD及SSR分子标记鉴定,结果表明:获得的F1植株为具有萝卜d染色体的真杂种.     

Interspecific Hybridization of Brassica campestris x B.Oleracea Through Ovary Culture

Using three varieties of Brassica campestris, Hauarad (708), Maoshan-3 (714) and Youbai (715),as the maternal plants and one variety of Brassica oleracea Jingfeng-1 (6012) as paternal plants, crosses were made to produce interspecific hybrids through ovary culture techniques.The ovaries from the cross between B. campestris × B.oleracea (708 × 6012 and 714 × 6012) were cultured and ovary culture was more effective in terms of obtained seeds when ovaries were cultured in vitro at 9 d after pollination (DAP). While for the cross of 715 × 6012, it was better when ovaries in vitro cultured at 12 DAP. Among three cross combinations, the cross of 714 × 6012 showed the best response and 43 seeds per ovary were obtained. Among the media studied, the ovaries from the cross of 708 × 6012 cultured on MS media supplemented with 3.0 mg L-1 BA × 0.1 mg L-1 NAA showed better response, and its rate of seeds per ovary reached 44.0%.While the ovaries from the other two crosses (714 × 6012 and 715 × 6012) showed the best response when cultured on B5 media supplemented with 3.0 mg L-1 BA + 0.2 mg L-1 NAA, and the rates of seeds per ovary reached 72.0 and 60.0%, respectively. All seeds obtained from the three cross combinations were cultured on the MS media supplemented with 1.0 mg L-1 BA + 0.05 mg L-1 NAA,and the seeds from the cross of 715 × 6012 showed the best germination response and the percentage of germinations reached 66.7%. The regenerated plantlets were obtained from these seedlings after cultured on the MS media supplemented with 0.05 mg L-1 NAA. Cytological study showed that these regenerated plants were all true hybrids of B.campestris × B.oleracea.     

盐胁迫对芜菁种子萌发的影响

[目的]盐胁迫对芜菁种子萌发的影响,为芜菁栽培土壤选择及抗盐品种的选育提供理论依据.[方法]实验设置5个NaCl浓度梯度20、50、100、150和200 mmol/L和5个Na<,2>SO<,4>浓度梯度10、50、100、150和200mmol/L,对芜菁种子进行盐胁迫处理,测定其种子发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数等.[结果]在NaCl浓度低于150 mmoL/L时,芜菁种子的发芽率、发芽势、相对盐害率与对照差异不大,在浓度为200 mmol/L时受抑制较大,150 mmol/L NaCl溶液适合于芜菁种子耐盐性的选择;在Na<,2>SO<,4>浓度低于100 mmol/L时对芜菁种子萌发的抑制作用相对较小,当超过150 mmol/L时出现明显的抑制作用,种子的萌发、相对活力指数等指标均呈明显下降的趋势.[结论]盐胁迫对芜菁种子萌发有明显抑制效应,而且随着盐浓度的增加,发芽率、发芽势、相对活力指数逐渐降低、相对盐害率升高,芜菁种子在萌发期间具有一定的耐盐性.     

羧甲基壳聚糖促进次适温下小白菜种子的萌发

为了研究不同浓度羧甲基壳聚糖在次适温下对小白菜种子萌发的作用。采用0、0.05%、0.10%、0.20%和0.40%5个浓度羧甲基壳聚糖浸种处理小白菜种子,在次室温下(15±1)℃进行萌发试验,研究不同浓度羧甲基壳聚糖浸种对小白菜种子发芽特性的影响。羧甲基壳聚糖浸种处理可提高次室温下小白菜种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、芽长和根长。以0.10%羧甲基壳聚糖浸种处理的效果最好,与对照相比,种子发芽势和发芽率分别提高30.43%和18.42%,发芽指数、幼苗鲜重和活力指数分别提高47.58%、30%和91.86%,芽长和根长分别提高30.41%和15.04%,均达到显著或极显著水平。促进次适温下小白菜种子萌发的最佳羧甲基壳聚糖浸种浓度为0.10%。该研究为羧甲基壳聚糖在蔬菜生产上的应用提供了科学依据。     

菠萝杂交授粉及杂交种子的组培试验研究

对6个不同的菠萝品种进行了杂交授粉试验,结果发现不同的菠萝品种之间杂交授粉有较高的得籽率;同时还进行了杂交种子的组培试验,包括种子出芽、杂交苗的增殖、生根和移栽,结果显示最佳的出芽、增殖培养基为1/2MS 6-BA0.5 mg/L IBA1.0 mg/L,经30d增殖培养后,杂交苗的增殖倍数可达10以上;最适生根培养基为1/2MS NAA 0.5 mg/L,生根率为96%;杂交苗的移栽成活率大于90%。     

铁皮石斛人工杂交育种快繁技术

通过人工授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为材料进行组培快繁试验,结果表明：人工杂交育种结实率达83％。经种子萌发诱导培养、原球茎增殖培养和壮苗生根培养等试验的结果表明：种子萌发最佳培养基为1／2MS＋蛋白胨2g／L,发芽率达到95％;原球茎增殖最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋15...     

沉香虎头兰、大雪兰正反交及种子无菌萌发研究

 以沉香虎头兰（Cymbidium tracyanum）（黄色素花）与大雪兰（C. mastersii）为父、母本进行正反交，用杂交种子进行无菌萌发研究和种胚发育观察。结果表明：这两种杂交兰花的结实率为60～100%；大雪兰和沉香虎头兰（黄素）杂交种子在1/2MS＋6-BA 1.0～3.0 mg/L＋NAA 0.5～2.0 mg/L无菌条件下的萌发率约为70%；正反交对种子的萌发率没有明显影响；在沉香虎头兰×大雪兰、大雪兰×沉香虎头兰的种子萌发过程中，种胚的发育有两种方式：一是在胚还未转绿时就突破种皮，另一种是胚转绿后再突破种皮，形成原球茎。     

百合杂交种子无菌播种育苗技术研究

为了研究适合于种子无菌播种的培养基。以卷丹×红旗士的杂交种子为材料,采用MS添加NAA 0.01~0.02 mg/L和6-BA 1.0~1.5 mg/L的4种培养基,研究了百合杂交种子无菌播种技术。在4种培养基中,培养基MS+NAA 0.01 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的种子发芽率最高,为63.3%,小鳞茎的分化率也最高,为83.3%,子叶和真叶生长较健壮,生长速度最快。其余3种培养基的发芽率分别为27.0%、32.9%、40.0%。培养基MS+NAA 0.01 mg/L+6-BA 1.0 mg/L为百合杂交种子无菌播种育苗的最适培养基,且不需另外的生根培养基。因此,该技术简化了试验过程,提高了培养效率。     

白及种子液体悬浮培养原球茎的研究

[目的]研究白及种子在液体悬浮培养条件下萌发的最佳条件,为快速繁殖白及幼苗提供技术支撑。[方法]研究不同光照条件、不同培养基和不同激素及浓度对白及种子萌发的影响。[结果]黑暗有利于白及种子萌发,1/2 MS适宜作为白及种子萌发基本培养基。植物激素对白及种子无菌萌发有一定的促进作用,其中,添加1.0 mg/L NAA对白及萌发促进效果最明显。[结论]在黑暗条件下,以1/2 MS+1.0 mg/L NAA为萌发培养基,白及种子萌发率高,萌发整齐一致,且原球茎生长速度一致。     

蝴蝶兰快速繁殖技术的研究

[目的]对蝴蝶兰种子诱导原球茎和芽苗再生的条件进行研究。[方法]建立蝴蝶兰种子无菌播种高效萌发体系,以及原球茎诱导和芽苗再生的培养体系,对其各生长阶段的培养基以及所添加的激素组合及浓度进行选择。[结果]对种子萌发来说,选择授粉后120d未开裂的蝴蝶兰果荚内的种子播种为宜;最适培养基pH值为5．2～5．6。蝴蝶兰种子萌发最适宜的培养基为：花宝1号（300倍稀释）＋3mg／L6-BA4-0．1mg／LNAA＋20g／L蔗糖＋2g／L蛋白胨＋0．2％活性炭＋6g／L琼脂;在此条件下,蝴蝶兰的萌发率最高达65％。培养基中添加活性炭能有效防止蝴蝶兰芽苗的褐化现象．添加蛋白胨能促进蝴蝶兰种子萌发和幼苗的生长。[结论]该方法研究了蝴蝶兰种子诱导原球茎和芽苗再生的培养条件,为蝴蝶兰的种质栽培提供了理论依据。