山羊同步发情和超排后取卵时间的研究

间隔９～１４ｄ分２次进行ＰＧＦ＿（２α）处理，以调整母羊的性周期。处理后的同步率分别为４７．６４％和６５．８８％。用ＰＭＳＧ或ＦＳＨ对４１９只母羊进行超排，总有效率７５．８１％，有效羊平均每只获卵７．６４枚。超排母羊发情后２０～３０ｈ回收的卵母细胞，可用率８５．９３％。用于山羊细胞核移植中的受体卵母细胞，适宜的回收时间为超排母羊发情后（２７±１）ｈ。在进行山羊原代细胞核移植时，以８～１６细胞期、桑椹期至囊胚期的分裂球或内细胞团细胞作供核的胚胎，适宜的获取时间为超排母羊发情交配后９６～１４４ｈ。     

家兔早期胚胎体外培养和移植研究

用ＦＳＨ，ＰＭＳＧ，ＨＣＧ和ＩＣＩ－８０９９６对２０只家兔进行超数排卵，平均每只排卵１９．１枚，回收胚胎１３．５枚。超排卵数和卵子回收数ＦＳＨ分别为２６．３枚和２１．１５枚，ＰＭＳＧ为２２枚和１３．５。将正常的２５枚１细胞，７枚２细胞和３２枚４细胞期胚胎在ＴＣＭ－１９９培养液，５％ＣＯ２和 ３８．５℃环境中培养６０－７ ０ｈ，６３．１７％的胚胎可发育至囊胚移植至５只体兔后，产出仔兔１３只。     

山羊超数排卵和同期发情研究

用ＦＳＨ（以４种程序注射）配合ＬＨ和前列腺素对安哥拉山羊和奶山羊进行超排处理，结果表明：ＦＳＨ各给予方式的超排樟没有显著差异（Ｐ〉０．０５）；安哥拉山羊对超排的反应弱于奶山羊（Ｐ〈０．０５）；超排后回收的可用卵母细胞数显著高于可用胚胎数（Ｐ〈０．０１）。１５－甲基ＰＧＦ２α和氯前列烯醇对奶山羊的同期发情率基本一致；但二者从注以发情的间期具有显著差异＊（Ｐ〈０．０５）。注射前列腺素的时间显著影响诱导     

MPSG＋APMSG对山羊超排效果的研究

在山羊繁殖季节，对１７只关中奶山羊应用ＰＭＳＧ（对照组，ｎ＝９）或ＰＭＳＧ及其抗血清（ＡＰＭＳＧ）（试验组，ｎ＝８）进行了超排处理，并对超排前后血浆１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和孕酮（Ｐ４）变化进行了监测。结果表明，试验组山羊发情后１２ｈ给予ＡＰＭＳＧ，可以显著改善ＰＭＳＧ的超排效果。     

PMSG+APMSG对山羊超排效果的研究

在山羊繁殖季节,对１７只关中奶山羊应用ＰＭＳＧ（对照组,ｎ＝９）或ＰＭＳＧ及其抗血清（ＡＰＭＳＧ）（试验组,ｎ＝８）进行了超排处理,并对超排前后血浆１７β－雌二醇（１７β－Ｅ２）和孕酮（Ｐ４）变化进行了监测。结果表明,试验组山羊发情后１２ｈ给予ＡＰＭＳＧ,可以显著改善ＰＭＳＧ的超排效果。     

山羊超数排卵和同期发情研究

用ＦＳＨ（以４种程序注射）配合ＬＨ和前列腺素对安哥拉山羊和奶山羊进行超排处理。结果表明：ＦＳＨ各给予方式的超排效果间没有显著差异（Ｐ＞０．０５）；安哥拉山羊对超排的反应弱于奶山羊（Ｐ＜０．０５）；超排后回收的可用卵母细胞数显著高于可用胚胎数（Ｐ＜０．０１）。１５－甲基ＰＧＦ２α和氯前列烯醇对奶山羊的同期发情率基本一致；但二者从注射到发情的间期具有显著差异（Ｐ＜０．０５）。注射前列腺素的时间显著影响诱导发情效率，对奶山羊而言，在情期的８～１６ｄ内使用，效果确切     

山羊卵泡卵母细胞体外成熟的研究

研究了ＦＣＳ,１７β－Ｅ２,ＦＳＨ,ＬＨ对山羊卵泡卵母细胞成熟的作用,及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明,添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ,１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２,２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ和１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ有利于提高卵母细胞核成熟,并放出第一极体。而成熟培养２０,２４ｈ的卵母细胞成熟率显著高于培养１６ｈ（Ｐ＜０．０５）,核成熟后培养３～４ｈ有利于卵母细胞质成熟,对其后的受精、卵裂及胚胎的进一步发育有重大影响。且ＴＣＭ１９９＋质量分数为１０％～１５％的ＦＣＳ＋１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２＋１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ＋２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ是卵母细胞成熟的理想培养系统。     

牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究

研究了ＦＣＳ,１７β－Ｅ２,ＦＳＨ,ＬＨ对牛卵泡卵母细胞成熟的作用及培养时间对卵母细胞和细胞质成熟的影响。结果表明,添加体积分数为１０％－１５％的ＦＳＣ,１－２ｍｇ．Ｌ＾－１１７β－Ｅ２,２０－５０ｍｇ．Ｌ＾－１ＬＨ和１０ｍｇ．Ｌ＾－１ＦＳＨ有利于提高卵母细胞核成熟,放出第一极体。而成熟培养２０,２４ｈ的卵母细胞成熟率显著高于培养１６ｈ,核成熟后培养３－４ｈ有利于卵母细胞质成熟,对其后的受精,卵型     

牛卵泡卵母细胞体外成熟的研究

研究了ＦＣＳ,１７β－Ｅ２,ＦＳＨ,ＬＨ对牛卵泡卵母细胞成熟的作用及培养时间对卵母细胞核和细胞质成熟的影响。结果表明,添加体积分数为１０％～１５％的ＦＣＳ,１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２,２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ和１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ有利于提高卵母细胞核成熟,放出第一极体。而成熟培养２０,２４ｈ的卵母细胞成熟率显著高于培养１６ｈ（Ｐ＜０．０５）,核成熟后培养３～４ｈ有利于卵母细胞质成熟,对其后的受精、卵裂及胚胎的进一步发育有重大影响。且ＴＣＭ１９９＋质量分数１０％～１５％的ＦＣＳ＋１～２ｍｇ·Ｌ－１１７β－Ｅ２＋１０ｍｇ·Ｌ－１ＦＳＨ＋２０～５０ｍｇ·Ｌ－１ＬＨ是卵母细胞成熟的理想培养系统。     

初情期前枫泾小母猪超数排卵及其胚胎发育研究

２４头初情期前的枫泾小母猪以ＰＭＳＧ、ＨＣＧ进行超排处理,平均获得２３．４枚卵子,人工授精后２８￣５０ｈ超排的卵母细胞的受精率为９８．１％,受精卵发育至桑椹胚和囊胚的比例为８９．７％。采用外科手术将１８０枚受精卵移植至８头同期发情的枫泾母猪子宫,其中有５头妊娠,产仔４４头,胚胎移植妊娠率为６２．５％     

山羊小腔卵泡卵母细胞的体外受精试验

抽吸法采集２￣６ｍｍ山羊卵巢大腔卵泡卵母细胞后，以１．５ｍｍ间距纵横切割卵巢，回收（２ｍｍ小腔卵泡卵母细胞。随机测量其直径为１２９．８６±１８．８４μｍ。将２１８枚卵丘细胞层致密完整的卵母细胞分别培养于含颗粒细胞并用２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ缓冲的①ＴＣＭ１９９＋１％ＧＳ，②①＋ＦＳＨ，ＬＨ（１０μｇ／ｍＬ）＋１７β－Ｅ２（１μｇ／ｍＬ），③②＋ＩＴＳ（５μｇ／ｍＬ Ｉｎｓｕｌｉｎ，Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉ     

家兔胚胎细胞核移植的研究

兔超排后收集卵母细胞和１６细胞胚，以Ｍｃ－Ｇｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ和Ｗｉｌｌａｄｓｅｎ两种去（注）核方法，将１６细胞胚细胞核经电融合植入去核成熟卵母细胞内，经体外培养或中间受体培养，使移核胚发育．结果表明：（１）兔胚核移植中上述两种去（注）法的成功率无差异；（２）ｈｃＧ注射后１３～１５ｈ，６７．８％的卵母细胞保留有第一极体；（３）强度为０．６３ｋＶ／ｃｍ，持续１６０μｓ的一次电脉冲可使７０．８％的注核胚融合，同样的电脉冲刺激卵母细胞的活化率为６１．１％；（４）兔移核胚在中间受体内或体外均可发育，在中间受体内有２３．０％可以发育到桑椹胚或囊胚．     

山羊血浆生殖激素浓度与超排反应的关系

对１７只性周期正常的山羊于黄体期中期采用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）。方案超排，分析超排处理前后两种垂体促性腺激素（ＦＳＨ，ＬＨ）和两种卵巢性激素（Ｐ＿４，１７β－Ｅ＿２）在超排有反应组和无反应组及对照组间差异。结果表明：发情时１７β－Ｅ＿２浓度有反应组显著高于无反应组，且与排卵数和收集胚胎数呈显著正相关（Ｐ＜０．０５），血浆ＦＳＨ浓度发情前后有反应组亦显著高于无反应组，ＬＨ在无反应组中未发现明显峰值，Ｐ＿４浓度及变化在各组问无显著差异，超排辅以ＬＨ对超排效果影响不大。     

山羊血浆生殖激素浓度与超排反应的关系

对１７只性周期正常的山羊于黄体期中期采用ＦＳＨ－ＰＧＦ２α方案超排，分析超排处理前后两种垂体促性腺激素（ＦＳＨ，ＬＨ）和两种卵巢性激素（Ｐ４，１７β－Ｅ２）在超排有反应组和无反应组及对照组间差异。结果表明，发情时１７β－Ｅ２浓度有反应组显著高于无反应组，且与排卵数和惧胚胎数显著正相关，血浆ＦＳＨ浓度发情前后有反应组亦显著高于无反应组，ＬＨ在无反应组中未发现明显峰值，Ｐ４浓度及变化在各组间无显著差异     

宁夏肉用种羊胚胎移植试验

本试验于2000年9－11月，在宁夏肉用种羊场共超排处理萨福克、陶赛特和布尔山羊纯种母关16只，超排有效14只，超排有效率87．5％；获黄体数127个，回收卵107枚，回收率84．3％，可用胚85枚，平均6．1枚／只，鲜胚移植受体羊35只，冻胚移植受体羊3只，第一情期返情5只，不返情率86．8％。     

大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率技术设计研究

分３次试验。试验１：Ａ组，供试羊２１４只，对照和精液激素处理的情期产羔率分别为４０％和５７％；Ｂ组，供试羊３０８只，分成（１）对照，（２）精液处理＋混合精液。（３）精液处理＋个体精液，３种处理的情期产羔率分别为６１％、７５％和８０％。试验２；供试母羊１１７只，分成（１）对照，（２）ＨＣＧ（绒毛膜促性腺激素）处理母羊，（３）ＨＣＧ处理＋精液处理，（４）母羊排卵控制＋精液处理，４种处理的情期产羔率分别为６２．２８％，５５．６９％，６９．２４％和７１．１０％。试验３：供试羊５５６只，分成（１）对照，（２）ＬＲＨ－Ａ３（促排卵３号）肌注，（３）精液处理，（４）ＬＲＨ－Ａ３静注，（５）排印控制，５种处理的第一情期受胎率分别为５０．８％，６４．４％，７０．４％，７７．５％和８４．１５％；手术探查结果，排印控制处理后４８—５６ｈ母羊排卵同期率为９０％。试验证实，ＬＲＨ－Ａ３、催产素和ＨＣＧ处理冷冻精液及母羊可以作为大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率的技术设计用于养羊生产实践。     

奶牛胚胎一步冷冻保存的研究

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４０）；荧光染色阳性率为８７．５％（７／８）；体外培养发育率为７５％（６／８）；冻胚移植受体妊娠率为４３．５％（１０／２３）。     

体内外成熟与老化对小鼠卵激活刺激敏感性的影响

小鼠体外成熟卵母细胞组的乙醇激活率显著低于体内成熟卵母细胞组水平,在体外成熟过程中（培养液：ＴＣＭ－１９９＋ＦＣＳ（２０％）＋ｈＣＧ（２ＩＵ／ｍｌ））卵丘细胞的存在极显著地降低了成熟卵的乙醇激活率,卵激活率由５８．７％（裸卵）降为１３．８％（卵丘卵母细胞复合体）超排卵子随着卵龄的增加,卵子的乙醇激活率逐渐升高,而且体内卵的激活率高于体外老化同龄组的水平。     

奶牛鲜胚移植黄牛或奶牛技术应用

对１３头黑白花奶牛作超排处理，超排有效１１头，有效率８４．６％，头均获胚３．５枚，其中可用胚头均２．８枚。移植受体奶牛８头，妊娠４头，妊娠率５０％；移植受体黄牛１６头；妊娠８头，妊娠率５０％。卵巢和黄体发育好的供体牛在超排有效反应及超排后黄体数明显优于差的供体牛（Ｐ〈０．０１）。进口ＦＳＨ和国产ＦＳＨ的超排效果没有显著差异（Ｐ〉０．０５）。     

山羊胚胎克隆的研究

应用细胞核移植技术，把未分化或处于不同发育阶段的胚胎分裂球或细胞移入成熟的去核卵母细胞，并使之融合，成为Ｇ０代克隆卵。将Ｇ０代克隆卵移入同期发情的山羊输卵管中培养５ｄ，回收得到克隆胚，选择其中正常发育至８～１６细胞的克隆胚，将其胚胎细胞再移入成熟的去核卵母细胞，并进行电融合，构成Ｇ１代再克隆卵，１２９枚Ｇ０代克隆卵和１４３枚Ｇ１代再克隆卵移入同期发情的山羊输卵管，获得Ｇ０代克隆羊２只和Ｇ１代再克隆