乙醇对不同菌种合成纤维素的影响及高产菌株对乙醇的敏感性和耐受性

为研究细菌纤维素(BC)的高效合成,并探讨影响高效合成稳定性的因素,笔者在Asai合成培养基中添加乙醇,分析其对8个不同菌种合成BC产量的影响,并选出高产菌种,以高产菌株为模型,研究其对乙醇促进性影响的敏感性和耐受性范围。结果表明:不同菌种合成BC对"乙醇影响"的效应不同,其中驹形杆菌属的5个菌种和茂物朝井杆菌(A.bogorensis)都表现出促进效果,以椰冻驹形杆菌(K.nataicola)和木驹形杆菌(K.xylinus)的促进作用最显著(P0.05),驹形杆菌属的1个未知种(K.sp.)影响不显著(P0.05),欧洲驹形杆菌(K.europaeus)则表现出抑制作用。筛选到1株"乙醇促进"响应敏感性高且耐受力好的菌株(K.nataicola)Y19,当添加0.5%乙醇时增产6.6倍,添加1%乙醇时产量达最大7.12 g·L-1,增产8.3倍,乙醇最适添加量为1.0%~1.5%。之后,随添加量增加产量增幅降低,直到乙醇添加量达5%时其BC产量才开始低于对照,显示受到抑制,产量降幅为44%。该菌株对"乙醇促进"的浓度响应范围较大,为0.5%~4%。本研究对椰子水自然放置预发酵后用于BC生产的大规模应用具有重要指导意义,筛选到的高效促进和抑制合成的这2种截然相反影响效应的菌株也为后续乙醇影响机制的深入研究奠定了良好基础。     

利用菌落PCR-DGGE快速鉴定盐渍土壤菌种多样性

利用菌落PCR方法,结合DGGE的检测方法,对所保存的87份盐生菌的培养物进行了多样性检测,初步研究显示至少有31株不同的菌种,表明新疆盐生环境存在较为丰富的菌种资源,同时表明菌落PCR结合DGGE技术为细菌鉴定和菌种保藏过程中重复菌株的去除提供了一种快速可靠的手段。     

纤维素降解细菌对玉米秸秆的降解效果

为了寻找高效纤维素降解菌,提高秸秆降解效果并缩短秸秆腐解时间,从腐烂秸秆及附近土壤中,筛选获得高效秸秆纤维素降解细菌,并研究其对秸秆纤维素的降解能力。利用羧甲基纤维素钠培养基分离纤维素降解菌,结合纤维素刚果红测定、滤纸条降解试验和秸秆失重法筛选到2株具有纤维素降解能力的细菌(CMC-red、CMC-I),经16S r DNA序列分析,初步鉴定菌株CMC-red为Massilia arvi菌属,菌株CMC-I为黄杆菌属(Flavobacterium banpakuense)。菌株CMC-red的降解能力强,10 d可将滤纸降解成糊状,10 d内对秸秆的降解率可达24. 14%。通过分析红外光谱和扫描电镜图可以得出,经纤维素降解菌降解的秸秆纤维素、半纤维素的吸收峰减弱,纤维素的结构变得疏松。筛选获得的2株细菌中,菌株CMC-red对秸秆具有显著的降解效果。     

采用16S rDNA片段鉴定鳗鲡病原菌的初步研究

初步探讨了采用16S rDNA片段鉴定鳗鲡病原菌的方法.根据已知细菌16S rDNA序列的高度保守区设计引物,利用PCR法扩增16株已鉴定的鳗鲡病原菌的16S rDNA片段,测序分析后,通过Gen-Bank数据库进行同源性检索,并构建相应的系统发育树.结果表明：16株鳗鲡病原菌均扩增到了400bp左右的基因片段,其中14株菌的16S rDNA片段序列与网上已发表的同属菌株的同源性为100%,其余2株为99%;8株病原菌被鉴定到种,分别属于嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,其余8株被鉴定到属,分别属于气单胞菌属、假单胞菌属和肠杆菌属;鉴定结果与生化鉴定结果在属的分类单元上符合程度高达82%.     

高温分解纤维素的易变糖丝菌菌株筛选及其特性

从陈年堆积的畜粪堆中筛选出一个耐高温能高效分解纤维素等有机物的菌株。经鉴定，该菌株属于糖丝菌属易变糖丝菌种中具有分解纤维素能力的菌株，至少可耐80℃高温，在40～50℃下能够有效地分解纤维素，在20－30℃下分解纤维素能力较低。     

Pseudomonas sp.H8的分离和鉴定及其产絮凝剂成分分析

为挖掘产生物絮凝剂的菌株,利用生物絮凝剂对污水、淤泥进行环保处理。本研究经过菌种分离纯化和对高岭土悬浊液沉降效果分析,从低温污水处理生物膜中获得1株高效絮凝菌,命名为H8,该菌株在4℃条件下生长良好,其LB发酵液对高岭土的絮凝效率达到85.79%,针对H8菌株的一系列菌种鉴定,包括菌落形态、菌体形态、生理生化试验、Biolog菌种鉴定系统分析和细菌16SrDNA序列分析比对,与菌种Pseudomonas mandelii亲缘关系最近,确定H8菌株为假单胞菌属。采用乙醇沉淀法对H8菌株发酵液中的絮凝剂进行提取,再经过Sevage法除去絮凝剂中蛋白质,获得絮凝剂产率0.807g·L~(-1),与发酵液相比其絮凝率也提高到98%以上,定性定量分析结果确定H8絮凝剂的化学成分主要为多糖,占51%,还含有2.64%蛋白质、1.3%葡萄糖醛酸和少量氨基糖。     

一株拮抗病原真菌的固氮菌Paenibacillus spGD812

 【目的】筛选具有拮抗病原真菌功能的固氮菌,研究菌株的固氮酶活性、nifH、生理生化特征、菌株抗逆性与接种效果等,并对该菌株进行鉴定,为微生物肥料生产筛选菌种资源。【方法】采用无氮培养基富集、筛选固氮菌,用对峙法筛选拮抗菌;乙炔还原法测定固氮酶活性,PCR扩增16S rDNA和nifH;通过形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定菌种;采用温室盆栽小白菜试验接种效果。【结果】筛选到1株固氮菌GD812,该菌株固氮酶活性达到30.661 nmol C2H4/h•mg蛋白,同时具有拮抗麦类赤霉病菌（Gibberella zeae）和棉花黄萎病菌大丽轮枝菌（Verticillium dahliae）功能,抑菌率分别达到59.5%和49.3%;根据形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析结果,GD812被鉴定为类芽孢杆菌Paenibacillus sp.;该菌株的nifH基因长度300 bp,与Paenibacillus sp. Bs57 nifH基因序列相似性98%;GD812可以利用35种供试碳源中的20种,耐酸碱pH4—11,在4—50℃均可生长,盆栽试验接种比对照小白菜鲜重增加52%。【结论】固氮菌GD812被鉴定为类芽孢杆菌,该菌株利用碳源广泛,抗逆性强,具有较高的固氮酶活性和拮抗病原真菌能力,盆栽试验显示较好的接种效果,可望进一步研发成为优良的固氮微生物肥料生产菌种。     

松墨天牛幼虫肠道纤维素降解细菌的分离与鉴定

为揭示松墨天牛幼虫肠道木质纤维素降解细菌群落的结构和功能,采用羧甲基纤维素钠为唯一碳源,结合刚果红法筛选肠道纤维素降解细菌,共获得154株肠道纤维素降解细菌,分别隶属于变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门细菌的8个菌属、10个菌种.其中噬纤维细菌科细菌Siphonobacter aquaeclarae表现为最优势纤维素降解菌,占肠道纤维素降解细菌群落的31.8%,其次为沙雷氏菌Serratia marcescens,占20.1%,其它依次为芽孢杆菌(Bacillus),克雷伯氏杆菌(Klebsiella),鞘脂菌(Sphingobium),丛毛单孢菌(Comamonas)和黄色单胞菌(Lysobacter).     

低温降解纤维素的细菌的筛选及鉴定

通过对环境中低温微生物的提取、初筛、复筛和纤维素酶活力的测定,分离并确定对纤维素有明显降解作用的两株细菌菌株B9和B21,并对其进行鉴定,B9菌株为噬胞菌属(又名纤维粘菌属,Cytophage)细菌,B21菌株为纤维单胞菌属(Cellulomonas)细菌。     

银杏根际土壤中菌株的分离及纤维素降解菌的筛选

为了寻找高效的纤维素降解菌,结合运用纤维素刚果红水解圈测定和纤维素酶活力测定,从银杏根际腐殖土中分离纤维素降解菌。结果表明,从根际土壤中共分离到放线菌15种、细菌6种、真菌7种,放线菌为土壤中的优势菌;从分离的28种菌株中筛选出4株纤维素降解菌,初步鉴定出1株高产维素降解菌为青霉菌属,可用作进一步实际应用研究的试验菌株。