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1.
高产王浆西蜂的DNA特异标记—W316bp片段的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
以11种随机引物(P1,P2,P3。P4,P5,P6,P7,P8,P9,,K,W)对不同产浆量的四品系西蜂(低产浆:喀尼阿兰蜂:高产浆:浙农大,平湖及萧山等意蜂)的基因组DNA进行RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)-PCR遗传分析,结果:从W引物在高产蜂王浆的浙农大,平湖,萧山等意蜂三品系的基因组DNA的扩增产物中找到了与高产浆优良性状相关的DNA特异标记--W316bp(bp,base pair,碱基对)片段。 相似文献
2.
中国犬吉氏巴贝斯虫ssrRNA的序列测定及其在PCR诊断上的应用 总被引:1,自引:1,他引:0
用特异引物BG-1和BG-2从南京株吉氏巴贝斯虫cDNA文库中克隆出ssrRNA序列,测定了该序列的核苷酸组成。通过基因库同源性查询表明,该序列与美洲株吉氏巴贝斯虫ssrRNA具有87%的同源性。本实验通过优化BG-1和BG-2引物对ssrRNA基因的扩增反应条件,建立了对吉氏巴斯虫的特异、敏感的诊断方法。该方法可广泛用于其他血液原虫的PCR诊断。 相似文献
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4.
RT-PCR检测和区分猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的基因组核苷酸序列,在S基因(纤突蛋白基因)5′端保守区设计了一对引物P3/P4,该对引物在TGEV扩增跨幅约为2.4kb;而PRCV由于在此区域存在一约0.6kb碱基缺失,扩增跨幅约为1.8kb。用引物P3/P4对TGEV Miller株、Purdue株和PRCV AR310株分别进行RT-PCR,根据RT-PCR扩增片段大小可以直接区分TGEV和PRCV。用引物P3/P4与引物P1/P2作Nested-PCR,提高了该RT-PCR的特异性和敏感性,建立的RT-PCR可为临床上诊断TGEV及调查我国是否存在PRCV感染提供可靠的鉴别手段。 相似文献
5.
鉴别牛早期胚胎性别PCR方法引物的设计与筛选 总被引:6,自引:2,他引:6
根据牛Y-染色体特异重复序列、睾丸特异蛋白基因以及性别决定基因序列设计合成5对公牛Y-染色体特异引物,依据牛骨胳肌α肌动蛋白前体基因和微卫星DNA序列设计合成4对牛DNA特异引物(内标引物)。单重PcR扩增牛基因组DNA,筛选出4对牛Y-染色体特异引物和1对牛DNA特异内标引物。将不同的Y-染色体特异引物与内标引物组合,多重PCR扩增牛基因组DNA、已知性别的牛成纤维细胞和克隆胚胎,筛选出2个可用于牛早期胚胎性别鉴别的PCR引物组合:B34/A12和B78/A12。 相似文献
6.
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8.
应用PCR快速鉴别番鸭和鹅细小病毒 总被引:12,自引:0,他引:12
根据已发表的番鸭和鹅细小病毒基因组全序列,设计并合成了1对通用引物(PC1/PC2)和1对MPV特异引物(PS1/PS2),以MPV-DNA,MPV尿囊液,MPV尿囊液和GPV尿囊液混合液,GPV-DNA,GPV尿囊液和GPV细胞培养物,DHV尿囊液和H2O为模板在同一条件下分别以2对引物进行扩增,PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示,在PC1/PC2系统中,除DHV尿囊液和H2O外,所有样品均出现长约480bp的特异核酸带,对MPV-DNA的敏感性为0.2pg,对GPV-DNA的敏感性为2pg;对MPV尿囊液的敏感性为100ELD50/2ul,PS1/PS2系统中,只有MPV-DNA,MPV尿囊液及MPV尿囊液和GPV尿囊液混合液出现预期约1100bp特异扩增产物,对MPV-DNA的敏感性为0.2ng,对MPV尿囊液的敏感性为1000ELD50/2ul,而GPV-DNA,GPV尿囊液,GPV细胞培养物,DHV尿囊液和和空白对照均未见到条带,分别以1ngMPV0DNA,1ngMPV--DNA,1ngGPV-DNA,MPV尿囊液,GPV尿囊液,DHV尿囊液和空白对照样品进行扩增,3次重复实验结果完全一致,表明该PCR检测技术可准确,快速鉴别番鸭和鹅细小病毒,为临床上准确,快速鉴别诊断番鸭和鹅细小病毒病奠定了基础。 相似文献
9.
对3个中国广东的鸽Ⅰ型副粘病毒分离株(P4,P5和P7)基因组RNA以反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)扩增了F基因75%的基因区域(343-1673nt),其中毒株P4和P7准确扩增出预期大小明亮的DNA片段,而P5扩增出片段很淡,用该RT-PCR产物作模板以相同引物再作PCR,结果可以扩增出大小与预期一致的明亮条带,此方法可以快速检测鸽Ⅰ型副粘病毒(PPMV-1)。 相似文献
10.
本实验建立了聚合酶链反应(PCR)方法检测鸡贫血因子(CAA)DNA,所用的一组20个碱基的引物与位于CAA复制型(RF)DNA基因组的485-504及1048-1067位置的序列互补,扩增产物为583bp,并通过在扩增的序列上只有一个HindⅢ位点而证实扩增的是CAA,用地高辛标记的25个碱基作为探针进行斑点杂交,表明扩增片段对CAA RF DNA是特异的。优化的PCR方法检测CAA不仅特异而且 相似文献